雄激素受体与活化T抑制细胞在慢性再生障碍性贫血中的变化

目的通过检测慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓单个核细胞(MNC)雄激素受体(AR)以及骨髓中活化T抑制细胞水平,探讨雄激素受体在CAA免疫病理机制中的作用。方法①免疫细胞化学SP法检测CAA骨髓MNC胞浆和胞核内AR的阳性表达水平;②流式细胞术检测CAA骨髓中T细胞亚群(CD3 CD4 细胞、CD3 CD8 细胞)和活化T抑制细胞(CD8 CD25 细胞、CD8 HLA-DR 细胞)的含量。结果①CAA患者骨髓MNC胞浆和胞核内AR阳性水平(38.18±4.47)显著低于对照组(52.44±6.71)(个/200个MNC);不同性别间AR的含量未见显著差异。②CAA患者骨髓中的CD3 CD8 细胞、CD8 HLA-DR 细胞含量分别为(28.66±3.75)%和(24.43±4.16)%,均显著高于对照组;而二组中骨髓内的CD3 CD4 细胞、CD8 CD25 细胞均未见显著差异。③CAA患者骨髓中的AR阳性水平与骨髓中的CD3 CD8 细胞呈负相关,r=-0.553,P<0.01;而与CD8 HLA-DR 、CD3 CD4 、CD8 CD25 细胞含量未见明显的直线相关关系。结论CAA患者AR的表达减少,从而使雄激素刺激骨髓造血的作用减弱。患者AR的表达与CD3 CD8 细胞含量呈明显负相关,表明雄激素受体的异常可能在一定程度上参与了慢性再生障碍性贫血发病机制中的细胞免疫异常。     

人良性前列腺增生症血清睾酮及前列腺雄激素受体研究

为探讨人良性前列腺增生症(BPH)与雄激素及其受体的关系,本文收集良性增生前列腺标本22例,正常前列腺标本6例,测定了前列腺组织中胞核及胞浆中雄激素受体(AR)含量,还测定了20名BPH患者血清中睾酮(T)水平。结果显示在两组前列腺组织中,胞浆和胞核AR含量差异无显著意义。血清T与BPH切除前列腺重量呈正相关(P<0.05)。说明BPH的发生和维持与血清T水平有关,而与前列腺中AR含量无明显关系。     

睾酮对血管平滑肌细胞中雄激素受体蛋白表达调控的研究

目的观察睾酮对雄性大鼠血管平滑肌细胞中雄激素受体(AR)蛋白表达的调控作用,并对其调控水平作初步探讨。方法贴块法培养雄性SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,分别用细胞裂解和高盐提取法制备细胞质和细胞核抽提物,Western印迹法检测提取物中AR水平。结果不同浓度(0～4μmol／L)睾酮与静止的血管平滑肌细胞作用24h呈剂量依赖性地增加胞质和胞核内AR蛋白含量,生理水平(40nmol／L)睾酮与细胞作用10min引起胞质内AR蛋白水平的快速下调,继而呈时间依赖性(1～48h)地增加胞质和胞核内AR蛋白表达;预先给以转录抑制剂更生霉素和翻译抑制剂cycloheximide则能使上调的胞质内AR蛋白分别降至单纯睾酮刺激组水平的46％和12％;雄激素拮抗剂氟他胺也能够部分抑制(50％)睾酮对细胞内AR蛋白水平的上调作用。结论血管平滑肌细胞中存在睾酮对AR蛋白表达的自身上调作用,其中伴随着受体的核转位;调控过程既有转录机制、也有转录后机制的参与,并且需要功能性AR的介导。     

23例鼻咽癌雌、孕激素和雄激素受体检测的初步研究

目的 探讨雌孕激素受体和雄激素受体与鼻咽癌的关系。方法 对23例鼻咽癌蜡块标本用免疫组化SP法进行测定，DAB显色，在光镜下计算阳性细胞数。结果 ER阳性率为65．2％(15／23)，PR阳性率为26．1％(6／23)，AR阳性率为56．5％(13／23)。鼻咽癌ER阳性中组织胞核含量高于胞浆11例，胞浆含量高于胞核仅4例；PR阳性中组织胞核含量高于胞浆和胞浆含量高于胞核相同，都是3例；鼻咽癌AB阳性中组织胞核含量高于胞浆10例，胞浆含量高于胞核仅3例。结论 ER鼻咽癌具在高表达性，定位于鼻咽癌组织中的细胞核；ER、PR的阳性情况与年龄、性别无关。     

再生障碍性贫血患儿骨髓单个核细胞c-kit受体的表达

目的:观察再生障碍性贫血(AA)患儿骨髓单个核细胞(BMMNC)c-kit受体的表达。方法:采用SABC免疫细胞化学方法对58例AA患儿(慢性再生障碍性贫血(CAA)38例,重型再生障碍性贫血(SAA)20例)和29例正常儿童BMMNC上c-kit受体蛋白(CD117)进行检测,结果观察采用计算机病理图像分析系统进行分析处理,测定阳性细胞内产物平均光密度值(A值),对表达产物进行半定量分析;采用逆转录-聚合酶链反应方法(RT-PCR)对AA患儿和正常儿童BMMNC中c-kitmRNA进行检测,紫外照相并扫描后,进行半定量分析。结果:CAA组、SAA组和正常对照组CD117阳性细胞表达值(A值)分别为0.52±8.81、0.46±2.18、0.58±7.94,CAA组、SAA组与正常对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05);CAA、SAA组与正常对照组c-kitmRNA的半定量表达值分别为0.85±0.10、0.79±0.09、0.86±0.12。CAA、SAA组与正常对照组比较差异亦无统计学意义(P均>0.05)。结论:AA患儿造血衰竭并非c-kit受体蛋白及mRNA低表达所致。     

雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌雄激素受体表达水平的变化

目的:从雄激素受体表达水平变化的角度,探讨雄激素依赖性前列腺癌向雄激素非依赖性前列腺癌转化的可能机理。方法:体外培养雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP细胞)和雄激素非依赖性前列腺癌细胞株(PC-3细胞),应用流式细胞术测定两种细胞株在生理盐水和二氢睾酮(DHT)作用下雄激素受体(AR)的表达水平。结果:两种细胞株均有AR表达,两种条件下AR的表达水平分别为:LNCaP细胞生理盐水处理组85.99±4.97,DHT处理组93.74±3.63;PC-3细胞生理盐水处理组8.52±1.57,DHT处理组9.52±1.75,两种条件下LNCaP细胞的AR表达水平均高于相应条件下PC-3细胞的AR表达水平,两者有显著性差异(P<0.05)。DHT作用下LNCaP细胞的AR表达水平显著高于生理盐水作用下LNCaP细胞的AR表达水平(P<0.05);DHT作用下PC-3细胞的AR表达水平与生理盐水作用下PC-3细胞的AR表达水平无显著性差异(P>0.05)。结论:雄激素依赖性前列腺癌细胞过表达AR,并且二氢睾酮能促进其表达AR;雄激素非依赖性前列腺癌细胞AR表达较少,二氢睾酮对其AR表达无明显作用,雄激素依赖性前列腺癌向雄激素非依赖性前列腺癌转化可能与前列腺癌雄激素受体表达水平下降有关。     

多发性骨髓瘤患者APE1蛋白表达的临床意义

目的　检测多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者脱嘌呤 脱嘧啶核酸内切酶(apurinic apyrimidinicendonu clease,APE1)基因表达,探讨其临床意义。方法　采用免疫细胞化学、Westernblot分析在MM细胞系KM3、32例MM患者 和10例正常自愿者骨髓标本中检测APE1蛋白表达及定位,并且通过图像分析系统计算其积分光密度值。结果　在阳性 对照的MM细胞系KM3中胞核、胞核 胞浆、胞浆均有APE1表达,其中尤以胞核明显。APE1胞浆阳性分度在正常对照组、 初治组、复发或难治组间依次增高(P<0.01,0.05)。结论　APE1蛋白表达强度与MM疗效有关,APE1基因表达增强可能 是MM患者预后不良的指标之一。     

儿童急性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞中Wnt/β-catenin基因表达水平的研究

目的:检测急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿骨髓单个核细胞中β-连环蛋白(β-catenin)基因表达水平,探讨Wnt/β-catenin与儿童ALL之间的关系。方法:选取徐州市儿童医院诊治的ALL初发患儿35例作为ALL组。选取同期诊治的非恶性血液病患儿30例作为对照组。采用RT-PCR法检测两组患者骨髓单个核细胞中β-catenin mRNA的表达水平,采用Western Blot法检测单个核细胞中蛋白的表达水平。结果:ALL组患儿骨髓单个核细胞中β-catenin mRNA及蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与非恶性血液病患儿相比较,ALL患儿骨髓单个核细胞中β-catenin基因表达水平明显升高,β-catenin过表达致Wnt/β-catenin信号通路过度激活可能为ALL发生、发展中的重要环节。     

乳房外Paget病三种激素受体表达的研究

目的研究雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)以及孕酮受体(PR)在乳房外Paget病(EMPD)中的表达,探讨性激素对EMPD的影响.方法用免疫组化方法定性检测AR、ER及PR在21例EMPD组织标本中的表达.结果21例EMPD中16例AR表达阳性,阳性率高达75%,所有病例均未检测到ER、PR. 结论雄激素对EMPD的发生、发展起重要作用;无法手术而AR表达阳性的EMPD患者中可试用抗雄激素治疗.     

前列腺组织雄激素受体的测定方法

建立雄激素受体测定的放射配基结合分析法测得人前列腺组织中胞浆胞核雄激素受体均可被约5x10~(-9)mol/L的双氢睾酮饱和,其最大结合客量(B(-max))及平衡解离常数(Kd)分别为:胞浆129.4x10(-15)mol/mg,0.88x10(-9)mol/L;胞核176.2x10~(-15)mol/mg,3.2x10~(-9)mol/L。人前列腺癌胞浆、胞核雄激素受体均高于正常前列腺(n=3)及前列腺肥大者(n=32)。用融裱法放射自显影证实雄激素受体主要分布在前列腺组织的腺区,尤其是在腺上皮细胞核内。     

雄激素受体及相关通道在激素非依赖性前列腺癌中的研究进展

前列腺癌（PCA）是男性泌尿生殖系统的常见肿瘤,其发病率不但在欧美国家高居首位,而且在中国的发病率也呈显著上升趋势。早期,激素依赖性前列腺癌（HDPC）可以通过内分泌治疗达到缩小瘤体、降低血前列腺特异性抗原（PSA）的目的,但在治疗12—18个月后,80％前列腺癌患者逐渐演化为激素非依赖性前列腺癌（AIPC）,导致患者最终死于激枣不敏感细胞的广泛转移。     

内源性雄激素及雄激素受体水平与老年男性冠心病的相关性

目的 探讨内源性雄激素及雄激素受体(AR)水平与老年男性冠心病的相关性.方法 选择冠状动脉造影证实的老年男性冠心病患者237例,对照组59例.所有患者均检测血清中7种内源性性激素水平,包括游离睾酮(FT)、总睾酮(TT)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡雌激素(FSH)、性激素结合球蛋白(SHBG)及脱氢表雄酮(DHEA),并用流式细胞术检测外周血淋巴细胞AR水平.结果 冠心病组FT水平低于对照组[(24.1±22.2)×10-9mmol/L比(34.1±31.8)× 10-9mmol/L,P=0.06],其余激素水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).两组AR阳性率也差异无统计学意义(56.3%±24.0%比57.1%±20.8%,P＞0.05).Logistic回归分析显示FT降低冠心病发病风险(OR=0.98,95%CI0.973～0.997,P=0.0049).FT与AR阳性率之间呈正相关,而年龄与FT和AR阳性率呈负相关.结论 内源性雄激素水平减低在老年男性人群的冠心病发病中有独立作用.FT和AR水平下降,可能与老年男性冠状动脉粥样硬化加速进展有关.

Abstract：

Objective To investigate the correlation of endogenous androgen and androgen receptor (AR) level with coronary artery diseases (CAD) in elderly males and elucidate the potential mechanism of gender difference in the prevalence of CAD. Methods A total of 296 male patients from different centers were divided into the CAD group ( n = 237 ) and the control group ( n = 59 ) according to the results of coronary angiography. Their mean ages were 68.6 ± 6. 8 and 66. 2 ± 6. 5 years old respectively. The serum levels of FT (free testosterone), TT (total testosterone), E2 (estradiol), LH (luteinizing hormone), FSH ( follicle-stimulating hormone ), SHBG ( sex hormone-binding globulin ) and DHEA (dehydroepiandrosterone) were measured in all participants. And the androgen receptors of peripheral lymphocytes were assessed by flow cytometry. Results The serum level of FT was lower in the CAD group than that in the control group[(24. 1 ±22. 2) × 10-9 mmol/L vs( 34. 1 ±31.8) × 10-9 mmol/l, P =0. 06]. But two groups showed no statistic differences in the levels of TT, E2 , LH, FSH, SHBG, DHEA and lymphocyte AR (56. 3% ± 24. 00 vs 57.1% ± 20. 8% ). As demonstrated by the logistic regression analysis, the level of FT was negatively correlated with the CAD risk ( OR = 0. 98, P = 0. 0049 ) and positively correlated with the peripheral lymphocyte AR level. However age was negatively correlated with the levels of FT and AR. Conclusion The deficiency of endogenous androgen contributes to a high prevalence of CAD in elderly males. The age-related decreases of FT and AR impair the physiological functions of androgen so as to accelerate the progression of coronary atherosclerosis.     

Study of Androgen and Androgen Receptor in Relation to Insulin Resistance in Polycystic Ovary Syndrome

Polycystic ovary syndrome (PCOS) is the mostcommon endocrinopathies of premonopausal womenwith the incidence rate being5 % to2 1 % [1,2 ] .Thedisorder is characterized by anovulation,hyperandro-genism,hyperinsulinism and obesity.Many studiessuggested that insulin resistance play an importantrole in the pathogenesisof PCOS,butthere wasveryfew investigations about androgen and androgen re-ceptor in relation to insulin resistance.The purposeof this study was to investigate the role of serum an…     

老年男性动脉粥样硬化与雄激素水平的研究

目的:观察动脉粥样硬化(AS)时雄激素水平的变化,分析两者之间的关系.方法:彩色多普勒超声检查双侧颈动脉和双侧下肢动脉,明显动脉硬化伴多发粥样斑块甚至全程粥样斑块形成者为病例组,提示血管未见明显异常、血流通畅者为对照组.放射免疫法测定总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、雌二醇(E2),比色法测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG),双抗体夹心ELISA法测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平.比较两组各因子水平的差异,组内分析FT与各因子的相关性.结果:病例组FT显著低于对照组,P<0.01,而TT、E2两组无明显差异,并且与FT无相关性.对照组HDL-C显著比病例组高,P<0.01,病例组TC、TG显著比对照组高,P<0.05,而LDL-C无显著差异.对照组HDL-C、LDL-C与FT分别呈正相关和负相关,病例组TC和TG均与FT呈负相关.病例组VEGF较对照组明显高,P<0.05,且VEGF与两组FT均呈负相关.病例组TNF-α、IL-6均比对照组高,P<0.05,并且与FT负相关,对照组sICAM-1水平明显低于病例组,P<0.01.结论:正常水平雄激素(主要是FT)对老年男性AS有保护作用,低FT水平同时伴有脂质代谢絮乱和炎症反应等危险因素,低FT水平很可能也是老年男性AS的一个独立危险因素.     

雄激素受体在不同激素依赖特性的前列腺癌细胞株中的表达及活性

目的:探讨雄激素受体(AR)在前列腺癌激素依赖特性转变过程中的可能作用.方法:分别应用Western Blot和RT-PCR法检测四种前列腺癌细胞株(LNCaP,C4,C4-2及C4-2B)的AR蛋白表达差异和转录活性差异状况,并初步分析其在前列腺癌雄激素依赖特性转化过程中所发挥的作用.结果:AR在雄激素依赖的低转移性细胞株LNCaP中的蛋白表达量和转录活性最低,同时AR在雄激素非依赖的高转移性细胞株C4,C4-2及C4-2B细胞株中的蛋白表达、转录活性却逐渐增高.结论:AR在雄激素依赖特性和转移潜能不同的前列腺癌细胞株之间确实存在着有意义的差异表达,而这种表达差异可能在影响前列腺癌激素依赖特性转变过程中发挥重要作用.     

核转出蛋白对前列腺癌雄激素受体稳定性的调节

目的：探讨位于雄激素受体(androgen receptor, AR)配体结合域中具有出核转运信号肽的核转出蛋白(nuclear export signal of androgen receptor, NESAR)对前列腺癌雄激素受体蛋白表达和稳定性调节的机制。方法：绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)融合蛋白表达载体pEGFP-AR(1-918aa),pEGFP-NESAR(743-817aa),pEGFP-NAR (1-665aa)和pEGFP-NAR-NESAR,及NESAR的赖氨酸突变体（赖氨酸K突变为精氨酸R）pEGFP-NESAR K776R,pEGFP-NESAR K807R和pEGFP-NESAR K776R/K807R,瞬时转染前列腺癌细胞PC3后,采用荧光显微镜、蛋白质免疫印迹和免疫沉淀,检测NESAR对雄激素受体稳定性的调节。结果：在荧光显微镜下,含NESAR的融合蛋白呈胞浆定位,荧光信号强度比不含NESAR的融合蛋白明显减弱,且含NESAR的融合蛋白表达水平显著低于不含NESAR的融合蛋白表达水平。在蛋白合成抑制剂放线菌酮处理下,GFP-NESAR和GFP-NAR-NESAR的半衰期小于6 h,而对照GFP和GFP-NAR的表达相对更稳定,半衰期大于24 h。融合蛋白GFP-NESAR在蛋白酶体抑制剂MG132的处理下,其蛋白表达显著增加,并呈现剂量依赖性,而MG132对GFP蛋白稳定性没有显著影响;在蛋白合成被抑制的情况下,MG132同样显著抑制了GFP-NESAR融合蛋白的降解,且蛋白表达呈剂量依赖性的增加。GFP免疫沉淀的结果显示,GFP-NESAR融合蛋白的泛素化水平明显高于GFP对照。赖氨酸位点K776和K807突变的NESAR的泛素化水平显著降低,且蛋白稳定性提高,赖氨酸位点K776和K807是介导NESAR发生泛素化的关键氨基酸残基。结论：核转出蛋白NESAR具有降解不稳定性,作为多聚泛素化修饰的识别信号,介导了其融合蛋白在前列腺癌细胞中通过泛素-蛋白酶体途径的降解。本研究为AR蛋白水平和/或活性的调控开辟一种新的研究思路,有助于对AR降解分子机制的了解和在前列腺癌产生去势抗性的过程中对AR靶向的密切调控。     

雄激素不敏感综合征临床与遗传学分析

目的：分析雄激素不敏感综合征(androgen insensitivity syndrome,AIS)的临床特征与遗传学特点。方法：收集2015年至2020年重庆医科大学附属儿童医院就诊的10例AIS患者临床资料,提取患儿及父母外周血DNA,对患儿DNA样本进行内分泌疾病相关基因高通量测序,并进行家系DNA样本Sanger测序验证。结果：10例患者均检测到雄激素受体(androgen receptor,AR)基因变异,其中5个变异以前未报道过,分别是c.401dupA(p.P135Afs23)、1 350 bp缺失突变、c.2505C>G(p.Y835X)、c.1747T>C(p.F583L)和c.610G>T(p.E204X),其中c.610G>T(p.E204X)为嵌合体突变。结论：本研究中5例未报道变异均可能致病,提示基因检测有助于AIS的确诊,有利于AIS患者的临床决策和遗传咨询。     

Mutations in the androgen receptor gene of seven Chinese patients with complete androgen insensitivity syndromes

Androgenplaysanimportantroleinthenormaldevelopmentofmalephenotypeandtheregulationofvirilization.Theseactionsofandrogenaremediatedbytheintracellularandrogenreceptor(AR)containingN--terminal,DNAuandsteroidbindingdomains.MutationsintheARgenecancausevariousdegreesofandrogenInsensitivitysyndromes(AlS)inpatientswith46,XYkaryotype.ThephenotypeofpatientswithAlSrangesfromcompletefemaleexternalgenitalia(completeAlS,CAIS)overgenitalambiguity(partialAlS,PAlS)totheinfertilewithnormalmaleornearlys…