丹参对肝脏保存再灌注中肝窦内皮细胞损伤的影响

我们采用离体大鼠肝脏保存再灌注模型 ,观察肝脏保存再灌注中肝窦内皮细胞结构和功能的改变 ,并探讨丹参的保护作用。一、材料与方法1.肝脏保存液及灌注液成分 :ＢｅｌｚｅｒＵＷ保存液购自美国Ｄｕｐｏｎｔ ｐｈａｒｍａ公司。自制ＫＨ平衡灌注液 :含氯化钠 118ｍｍｏｌ/Ｌ、氯化钾 4.74ｍｍｏｌ/Ｌ、氯化钙 1.2 4ｍｍｏｌ/Ｌ、硫酸镁1.18ｍｍｏｌ/Ｌ、硫酸钾 1.19ｍｍｏｌ/Ｌ、碳酸氢钠 2 4.9ｍｍｏｌ/Ｌ、葡萄糖 5ｍｍｏｌ/Ｌ ,加蒸馏水至 10 0 0ｍｌ,ｐＨ调为 7.4。2 .动物模型及分组 :健康Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 5 4只 ,体重 2 0 0～ 2 …     

脑内微透析研究麻醉下鼠海马去甲肾上腺素释放的模型

为研究全麻药物对大鼠脑海马组织去甲肾上腺素 (ＮＡ)释放的影响 ,我们建立了一种比较经济、方便可行的脑微透析方法。材料与方法实验设备　微透析探头 :膜长3ｍｍ ,内径 40 0ｍｍ ,外径 5 0 0ｍｍ ,允许透过的最大分子量界限值为 2 0 0 0 0道尔(ＣＭＡ/10 )。微量灌流泵 (ＣＭＡ/10 0 )、冷冻式样品收集器 (ＣＭＡ/170 )、温度控制器 (ＣＭＡ/15 0 )等均为瑞士ＣａｒｎｅｇｉｅＭｅｄｉｃｉｎｅ公司产品 ;脑立体定位仪 (ＳＴＡ 40 0 0 )为美国ＢＡＳ生产 ;灌流液为自制的人工脑脊液 (含ＮａＣｌ 147ｍｍｏｌ/Ｌ、ＫＣｌ4ｍｍｏｌ/Ｌ、Ｃａ…     

HTK器官保存液及其研究近况

器官保存液的改进和发展 ,大大提高了器官移植的成功率。近年来 ,ＨＴＫ液逐渐受到人们的重视 ,临床上该液已被用于心脏、肾脏、肝脏、胰腺等脏器的保存[1] 。本文将就ＨＴＫ液的进展综述如下。一、ＨＴＫ液的组成成分及特点1.组成成分见表 1[2 ] 。表 1　ＨＴＫ液组成成份成　份含量 (ｍｍｏｌ/Ｌ)ＮａＣｌ 15ＫＣｌ 9ＭｇＣｌ2 4甘露醇 30组氨酸 180组氨酸盐酸 18色氨酸 2α 酮戊二酸钾盐 1注 :渗透压 310ｍＯｓｍ ,ｐＨ7.3　　 2 .组成特点 :(1)含钾量低 ,故ＨＴＫ液易于进入受体循环系统 ,且可反复或持续性原位灌洗无任何负作用及危险性…     

辅酶Ⅰ对L02肝细胞缺血-再灌注损伤的保护作用

我们采用双标法 (ＡｎｎｅｘｉｎⅤ /ＰＩ法 )流式细胞术观察缺氧 复氧致Ｌ0 2肝细胞凋亡效应及抗氧化剂辅酶Ⅰ (ＮＡＤＨ)的保护作用和对ｂａｘ、ｂｃｌ ｘｌ等家族蛋白及ｐ53蛋白表达的影响 ,探讨ＮＡＤＨ对缺血再灌注致肝细胞凋亡时细胞保护作用的可能机制。一、材料与方法1 .细胞培养及实验分组 :正常人肝细胞株Ｌ0 2 (中国医学科学院上海细胞所 )在含 1 0 %胎牛血清的ＲＰＭＩ 1 640培养基培养。模拟缺氧 (血 )液即用高纯度的氮气 (95 %Ｎ2 +5 %ＣＯ2 )饱和ＫＨＨ平衡盐溶液[1 ] ,测血气ＰＯ2 ≤ 4ｋＰａ(1ｋＰａ=7.5ｍｍＨｇ)。;模拟…     

非核素标记检测端粒酶活性的研究

Ｋｉｍ[1]于1994年借助ＰＣＲ技术建立了灵敏的端粒酶检测方法———端粒重复片段扩增(ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｒｅｐｅａｔａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌ,ＴＲＡＰ)。我们对Ｋｉｍ的方法加以改进,建立了简便、非同位素的银染检测法,检测了脑瘤、肠癌、食管癌中端粒酶的活性。一、材料与方法1.总蛋白提取:手术后取下的活组织,液氮保存。(1)100ｍｌ提取液中含10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓＨＣｌ(ｐＨ7.5);1ｍｍｏｌ/ＬＭｇＣｌ2;1ｍｍｏｌ/ＬＥＧＴＡ,0.5ｍｍｏｌ/Ｌβ巯基乙醇;0.5%ＣＨＡＰＳ,体积分数为10%的甘油。(2)组织中提取总蛋…     

低温保存下异搏定对人肝细胞保护作用的实验研究

我们应用钙离子通道阻滞剂异搏定 (ＶＰ)保存成人分离培养的肝脏细胞 ,研究异搏定的保护作用机制 ,明确异搏定的具体作用途径。一、材料和方法1.成人肝脏细胞的分离和培养 :临床行同种异体肾移植时联合切取肝脏 ,以 4℃ＵＷ液 (ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓ ｃｏｎｓｉｎＳｏｌｕｔｉｏｎ)保存 1ｈ。切取肝叶组织 ,剪碎 ,加入胶原酶消化。取出细胞悬液过滤 ,滤液离心弃上清 ,加入ＵＷ液保存。台盼蓝染色 ,计数细胞存活率。2 .细胞内钙的测定 :(1)将肝细胞悬液分为 2组 ,每组又分为 4个小组(ｎ =5 ) ,第 1组分别为含 0ｍｍｏｌ/ＬＣａＣｌ…     

继发性阴囊坏疽2例报告

继发性阴囊坏疽极少见 ,我院 2 0 0 0年 3月收治2例 ,报告如下。1　病例报告例 1,64岁 ,有糖尿病史。入院前 1周因痔疮发作外敷中药 (膏剂 ,药名不详 ) ,3ｄ后出现阴囊肿痛。入院查体 :阴茎、阴囊高度肿胀 ,阴茎皮肤发亮、紫黑色 ,右侧阴囊前侧大面积皮肤呈黑色 ,有较多具特殊臭味浆液性液体渗出。实验室检查 :ＷＢＣ 15 .5× 10 9/Ｌ ;ＧＲＡ 84 .6% ;Ｈｂ 10 8ｇ/Ｌ ;ＡＬＴ 5 4Ｕ/Ｌ ;γ ＧＴ 77Ｕ/Ｌ ;ＴＰ 63ｇ/Ｌ ;Ａ1ｂ 32 ｇ/Ｌ ;ＢＵＮ 2 1ｍｍｏｌ/Ｌ ;ＣＯ2 ＣＰ 19ｍｍｏｌ/Ｌ ;Ｃｒ 4 13μｍｏｌ/Ｌ ;Ｇｌｕ 35 .6ｍｍｏｌ/Ｌ…     

含钾利多卡因臂丛神经阻滞的临床效果观察

钾可以明显提高局麻药的麻醉效果[1～3],但国内尚未发现含Ｋ+局麻药临床臂丛阻滞的报道。我们试用含Ｋ+利多卡因临床臂丛阻滞,效果报道如下。资料与方法配药方法　用2%利多卡因15ｍｌ,分别加1%氯化钾089ｍｌ(即89ｍｇ)和178ｍｌ(即178ｍｇ),再加注射用水稀释成30ｍｌ,经计算分别为含Ｋ+4ｍｍｏｌ/Ｌ和8ｍｍｏｌ/Ｌ的1%利多卡因,经实验室ＣＩＢＡＣＯＲＮＩＮＧ860仪实测基本相符。临床观察病人90例,年龄17～54岁,体重42～72ｋｇ,ＡＳＡⅠ级,病种为手或前臂外伤。随机分三组,各30例:Ⅰ组为对照组,1%利多卡因;Ⅱ组为含Ｋ+4ｍｍｏｌ/Ｌ的1%利多…     

介绍酸中毒补碱量的一种简便计算方法

在临床工作中 ,代谢性酸中毒极为常见。计算公式亦有多种 ,周月庆[1] 、宫德夫[2 ] 分别介绍了以ｍＥｑ/Ｌ和容积 %为单位的简便补碱方法。自从我国规定应用法定计量单位ｍｍｏｌ/Ｌ以来 ,我们总结出一种成年人使用的更简便的补碱量计算方法 ,现介绍如下。根据公式 :所需〔ＨＣＯ3 -〕的量 (ｍｍｏｌ) =〔ＨＣＯ3 -正常值(ｍｍｏｌ/Ｌ) -ＨＣＯ3 -测得值 (ｍｍｏｌ/Ｌ)〕×体重 (ｋｇ)× 0 4[3 ]……①因临床常用 5 % (ｍ/ｖ)碳酸氢钠注射液 ,而 5 % (ｍ/ｖ)碳酸氢钠注射液每 2 0ｍｌ(碳酸氢钠 1ｇ)约含ＨＣＯ3 -12ｍｍｏｌ。由公式①可演…     

胰肾联合移植一例的麻醉处理

患者男 ,43岁 ,糖尿病史 2 2年 ,长期联合口服降糖药及肌注胰岛素治疗。2个月前出现肾功能衰竭尿毒症并行血液透析治疗至术前 2 4ｈ。ＢＰ2 3/12ｋＰａ,ＨＲ95次 /分 ,ＲＲ2 2次 /分 ;ＥＣＧ、Ｘ线摄胸片示正常 ,血肌酐 92 4 0 μｍｏｌ/Ｌ ,血尿素氮 2 2 4ｍｍｏｌ/Ｌ ,血钾 5 11ｍｍｏｌ/Ｌ ,血钠 143 3ｍｍｏｌ/Ｌ ,血氯 10 5ｍｍｏｌ/Ｌ ,血糖6 99ｍｍｏｌ/Ｌ。患者血型为Ｏ型。ＰＲＡ(群体反应抗体 ) :ＨＬＡＩ抗体 (- ) ,ＨＬＡⅡ抗体 :弱阳性。诊断 :(1)糖尿病Ⅰ型 ;(2 )慢性肾功能衰竭终末期尿毒症。入室后监测ＥＣＧ、ＢＰ、Ｓ…     

小儿烫伤并发十二指肠穿孔一例

患儿男 ,2岁。因热液烫伤 5 0ｈ入院 ,院外未行补液。查体 :体温不升 ,脉搏 :15 6次 /ｍｉｎ ,呼吸 :2 8次 /ｍｉｎ。面色苍白 ,四肢冷 ,口干 ,尿量 7ｍｌ/ｈ ,反应差。创面分布于面、颈、胸及双上肢。血Ｎａ :12 3ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｋ :45 7ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃｌ-:92ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｈｂ :12 6 ｇ/Ｌ。诊断 :(1) 18%ＴＢＳＡⅡ度烫伤 (2 )低血容量性休克。立即补液抗休克 ,抗感染 ,预防性使用甲氰咪胍 0 .2 ｇ静脉滴注 2次 /ｄ ,休克得以纠正。入院第 3天 ,呕吐淡红色血性胃内容物约 10 0ｍｌ,黑便及暗红色血便 4次 ,共约 5 0 0 ｇ ,并出现腹胀但腹…     

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恶性肿瘤伴癌综合征的表现多样 ,作者将收治的 3例有特殊伴癌综合征表现的恶性肿瘤病人的诊治情况并结合文献复习报告如下。1　病例报告　　例 1 女 ,31岁。右上腹腹痛、腹胀、乏力 15ｄ ,于 1992年 3月 2 5日以“急性胆囊炎”入院。病人 10年前曾患肝炎。其父死于肝癌。体检 :肌张力减退 ,腱反射减弱 ,未及肝脾 ,右上腹压痛 ,Ｍｕｒｐｈｙ征阴性。 3月 2 8日Ｂ超示慢性胆囊炎。实验室检查 :ＷＢＣ 7 2× 10 9/Ｌ ,Ｎ 0 80。肝功能正常 ,ＨＢｓＡｇ阴性。血Ｋ2 2ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｎａ 138ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃｌ10 3ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃａ 2 5ｍｍｏ…     

重组粒细胞集落刺激因子治疗肝移植术后白细胞减少症一例

患者男性 ,2 4岁 ,因肝硬化失代偿期合并上消化道大出血于 1997年 3月接受同种异体原位肝脏移植术。术前白细胞计数正常。术后应用免疫抑制剂为 :他克莫司 (ＦＫ5 0 6 ) 0 .15ｍｇ·ｋｇ-1·ｄ-1,甲泼尼龙 (ＭＰ)按肝移植常规静脉给药 ,第 6ｄ改为口服泼尼松 30ｍｇ/ｄ。第 5周停用ＦＫ5 0 6 ,改为环孢素Ａ(ＣｓＡ) ,ＣｓＡ的全血浓度维持在 2 0 0～2 5 0 μｇ/Ｌ。血常规白细胞计数在 (3 .8～6 .2 )× 10 9/Ｌ。术后 2 4周白细胞总数开始下降至 (ｌ.4～ 2 .8)× 10 9/Ｌ ,并出现上呼吸道感染。给予日本中外制药株式会社生产的基因重组人粒…     

乳猪肝细胞旋转培养的意义

我们采用普通培养箱对乳猪肝细胞进行旋转培养 ,旨在探讨保持肝细胞良好功能和体外大规模培养的简便方法 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.材料 :本地杂种小猪 4头 ,雌雄不限 ,猪龄 10～ 15ｄ ,体重 2 .5～ 2 .9ｋｇ。2 .肝细胞分离 :采用改良的原位两步胶原酶灌注法。3 .旋转培养 :分离的肝细胞用含体积分数为 10 %的新生小牛血清、2 0 0μｇ/Ｌ氢化可的松 ,2 0 0 μｇ/Ｌ肝细胞生长因子、10 μｇ/Ｌ表皮生长因子、10 μｇ/Ｌ神经生长因子、10 0 μｇ/Ｌ胰岛素、2 0 0μｇ/Ｌ先锋必、10万Ｕ /Ｌ青霉素和 10 0μｇ/Ｌ链霉素的ＲＰＭＩ 1…     

尿毒症并发格林-巴利综合征四例

我们医院自 1992年至 1996年收治尿毒症并发格林一巴利综合征 4例 ,现报道如下。例 1、男 ,44岁 ,2年前被诊为慢性肾小球肾炎 ,慢性肾功能不全。因恶心、呕吐 ,少尿 ,发热一周而入本院。查体 :Ｔ38℃ ,眼睑水肿 ,余无异常发现。实验室检查 :尿蛋白 ,红细胞± ;血ＷＢＣ14 0× 10 9/Ｌ ,ＲＢＣ 2 98× 10 12 /Ｌ ,Ｎ 0 78,Ｌ0 2 0 ,Ｈｂ 10 0ｇ/Ｌ ;ＨＣＯ-3 2 0ｍｍｏｌ/Ｌ ,ＢＵＮ2 6 8ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃｒ 5 6 0 μｍｏｌ/Ｌ肾脏Ｂ超示左右肾分别为 11 1ｃｍ× 5 2ｃｍ ,10 1ｃｍ× 4 6ｃｍ ,肾实质回声增强 ,与集合系统分界不清。入…     

FAM联合化疗和α-干扰素联用抑制肝癌生长的研究

我们利用人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型 ,研究α 干扰素与ＦＡＭ 5 氟脲嘧啶 (5 Ｆｕ) +丝列霉素 (ＭＭＣ) +阿霉素(ＡＤＭ) ,联合化疗方案应用对肝癌生长的影响。一、材料与方法1 .实验材料 :人肝细胞癌Ｈ91 0 1瘤株由厦门大学抗癌研究中心提供。ＢＡＬＣ/Ｃ裸小鼠 5～ 6周龄 ,雌性 ,体重1 8～ 2 0 ｇ ,由厦门大学抗癌研究中心提供 ,饲养于ＳＰＦ级无菌饲养室。脱氧核苷末端转移酶介导的缺口末端标记法(ＴＵＮＥＬ法 )原位细胞凋亡检测试剂盒采用德国宝灵曼公司的ＩｎＳｉｔｕＣｅｌｌＤｅ ｔｅｃｔｉｏｎＫｉｐ,ＡＰ试剂盒。2 .人肝细胞癌裸鼠…     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸及抗KDR抗体对人肝癌细胞系HHCC的生长抑制作用

本研究采用ＶＥＧＦ反义寡核苷酸 (ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ,ＯＤＮ)抑制ＶＥＧＦ分泌及抗ＫＤＲ抗体封闭ＫＤＲ的方法 ,观察它们对体外培养的肝癌细胞系ＨＨＣＣ细胞生长情况的影响 ,以探讨ＶＥＧＦ及其受体在肝细胞癌中的作用。材料与方法1.细胞株 :人肝癌细胞株ＨＨＣＣ由第四军医大学病理学教研室 86 3课题组保存并提供 ,培养于含 10 0ｍｌ/Ｌ胎牛血清的ＲＰＭＩ 16 40培养液中。2 .寡核苷酸及抗体 :ＯＤＮ由上海生工合成 ,ＰＡＧＥ电泳纯化。反义ＯＤＮ为针对ＶＥＧＦ第 3外显子单链区第 37 5 5共 19个碱基设计而成 ,…     

硬皮病致肾病综合征1例

病　例患者 ,女性 ,6 3岁 ,因低热、全身浮肿、四肢关节疼痛伴进行性活动障碍 4个月 ,在当地治疗无效转来我院。入院后体检 :Ｔ 3 7.4℃ ,全身高度浮肿 ,面无表情、皱纹消失 ,胸腹部皮肤硬且厚 ,有色素沉着 ,四肢肿胀关节活动受限呈铅管样变。实验室检查 :Ｈｂ 6 3 ｇ/Ｌ ,ＷＢＣ 4.8× 1 0 9/Ｌ ,尿常规ＰＲＯ(+++)、定量 5 0 0～80 0ｍｇ/ｄｌ,ＷＢＣ 6～ 8个 /ＨＰ ,ＲＢＣ 3～ 5个 /ＨＰ ,2 4ｈ尿蛋白定量 8～ 1 5 ｇ/Ｌ ,血ＴＰ3 6 .6 ｇ/Ｌ ,ＡＬＢ 1 2 .6 ｇ/Ｌ ,ＧＬＢ 2 3 .9ｇ/Ｌ ,肝、肾功能正常 ,胸片示 :两侧胸腔积液。ＥＫＧ…     

果糖在微囊化肝细胞制作过程中的细胞保护作用

目的 为了减少肝细胞在微囊化过程中的缺氧损伤,研究在缺氧状态下果糖对肝细胞的保护作用。方法 将ＳＤ大鼠分为三组;Ａ组,细胞分离的灌流液和消化液中均加果糖２０ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｂ,Ｃ两组不加果糖;细胞分离及微囊化后,检测细胞的活率,微囊化肝细胞体外培养,Ｃ组培养液中加果糖１０ｍｍｏｌ／Ｌ,Ａ,Ｂ两组不加。     

Bartter综合征合并巨细胞病毒感染1例报告

病　　例患儿 ,男性 ,8个月 ,主因咳嗽 5ｄ ,发热 3ｄ入院。查体 :体重 4 .6ｋｇ ,身长 6 4ｃｍ ,血压 :80 / 5 0ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ =0 .133ｋＰａ)。营养差 ,发育落后 ,皮肤弹性欠佳 ,眼窝凹陷 ,皮下脂肪薄。前囟平软 ,1.5ｃｍ× 1.5ｃｍ ,头大 ,前额突出 ,大眼睛 ,面部略呈三角形。眼球活动自如 ,耳廓无畸形。心肺未见异常。腹软 ,肝肋下 1ｃｍ ,质软边锐 ,脾未触及 ,四肢活动自如。追问病史 ,母孕期羊水多 ,患儿平素多饮 ,无力。否认有遗传病家族史。患儿入院后第 1次查血电解质Ｎａ+12 9.4ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｋ+ 2 .2 2ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃｌ-77…