建立ELISA夹心法检测霍乱毒素抗体的研究

用霍乱毒素Ｂ亚单位直接标记过氧化物酶，通过ＥＬＩＳＡ夹心法检测抗ＣＴ。该法与间接法通过测定已知ＣＴ抗体的滴度进行比较时，间接法比夹心法高０．０５ＯＤ值。检查正常人血清时，夹心法比间接法阳性率及滴度低。取ＣＴ阳性血清各３２份，经三次重复实验结果完全一致，说明重复性较好。     

纳米基因防龋疫苗的构建及其免疫大鼠的实验研究

目的:制备pcDNA3.1(+)gbpB壳聚糖纳米基因防龋疫苗,并检测其经鼻免疫大鼠的效果。方法:制备两种pcDNA3.1(+)gbpB壳聚糖纳米颗粒载体系统,经鼻粘膜免疫SD大鼠,用ELISA法检测血清中针对葡聚糖结合蛋白B的特异IgG抗体滴度及唾液中针对葡聚糖结合蛋白B的特异SIgA抗体滴度。与阳性对照组霍乱毒素pcDNA3.1(+)gbpB及未免疫组、空白壳聚糖纳米颗粒组作比较。结果:该载体系统经鼻免疫SD大鼠所产生的血清及唾液中针对GbpB的IgG和SIgA抗体滴度远大于未免疫组和空白壳聚糖纳米颗粒组,而与阳性对照组霍乱毒素pcDNA3.1(+)gbpB组抗体滴度相当。且维持的抗体滴度更稳定和持久。结论:成功构建了以葡聚糖结合蛋白B基因为免疫原的纳米基因防龋疫苗,并获得较好的免疫效果。     

ELISA间接法检测人轮状病毒血清抗体的研究

本文对ELISA间接法检测人轮状病毒(RV)血清抗体的方法学进行了探讨.结果表明,RV抗原能直接包被酶标反应板,与经免疫血清间接包被者无甚差异;RV抗原经EDTA、硫氰酸钾或盐酸胍预作用后再行包被,可提高抗原的包被效果.以ELISA间接法和间接双抗体夹心法同时检测34份血清标本,两者检出率无差异(P>0.05);进一步检测11份阳性血清的抗体效价,两法GMT分别为755.1和822.1,也无差异(P>0.05).进行ELISA间接法阻断试验,阻断率达95.6%;重复性试验表明变异系数在3.7～8.7%之间.因此,ELISA间接法敏感性高、特异性强和重复性好,可代替ELISA间接双抗体夹心法以检测RV血清抗体.     

间接法ELISA检测流行性出血热抗体

用间接法ELISA检测流行性出血热IgG抗体。54份EHF病人血清全部阳性,32份正常人、19份发热病人和18份误诊为EHF病人的血清全部阴性,与IFA检测结果相同。检测EHF病人系列血清,发病3d就可检出抗EHF IgG,抗体滴度随病程升高,表明间接法ELISA可用于EHF临床诊断。将间接法ELISA与IFA、RPHI和HI平行检测30份EHF病人血清,抗体几何平均滴度(GMT)分别为1:43 211、1:413、1:253和1:143,有高度相关性,且ELISA比RPHI和HI更能检测出早期抗体。检测疫区人群血清4134份,间接法ELISA检出490份阳性,而IFA仅检出470份。结果表明间接法ELISA有较好的敏感度和特异度,尤其适用于血清流行病学研究。     

免疫荧光法检测非典型肺炎患者血清抗冠状病毒抗体

目的：检测非典型肺炎患者血清中抗冠状病毒抗体及其滴度变化，协助临床确诊非典型肺炎。方法：间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病毒抗体。结果：3例临床诊断非典型肺炎患者血清内有特异性抗冠状病毒抗体，且恢复期抗体滴度比急性期的滴度增高4倍以上。结论：用具有高度特异性的免疫荧光技术对怀疑感染非典型肺炎的患者进行血清学检测，可协助临床确定诊断。     

反向间接夹心ELISA法检测柯萨奇B组病毒的方法

建立反向间接夹心ＥＬＩＳＡ法，检测可疑为柯萨奇Ｂ组病毒性心肌炎患者血清中病毒特异性ＩｇＭ抗体，在对临床诊断为病毒性心肌炎的患者中，柯萨奇病毒ＩｇＭ抗体阳性率为２７％，结果说明该法在早期诊断病毒性心肌炎方面具有一定的价值。     

反向间接夹心ELISA法检测柯萨奇B组病毒的方法

建立反向间接夹心ＥＬＩＳＡ法，检测可疑为柯萨奇Ｂ组病毒性心肌炎患者血清中病毒特异性ＩｇＭ抗体，在对临床诊断为病毒性心肌炎的患者中，柯萨奇病毒ＩｇＭ抗体阳性率为２７％，结果说明该法在早期诊断病毒性心肌炎方面具有一定的价值。     

免疫酶法测定食管癌病人血清中抗念珠菌抗体水平及其类型

作者等报道以间接免疫酶法检测血清抗念珠菌抗体滴度和加以分类,该法操作较简便,特异性、重复性好,灵敏度略低于免疫荧光法,但具不需荧光显微镜的优点,念珠菌感染病人血清中存在着IgA、IgG及IgM等抗念珠菌抗体,其中以IgG的特异性较高。以免疫酶法检测北京地区正常人40例结果表明,抗念珠菌抗体滴度无一例≥1:80;而于食管癌高发区林     

血清学方法检测SARS病毒抗体的比较

目的：比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对SARS患者特异性抗体的检出情况。方法：采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、发热非SARS患者、不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果：双抗原夹心法的阳性检出率为73．6％，而间接法的阳性检出率为57．5％，前者对SARS患者各时期特异性抗体的阳性检出率高于间接法，特别是住院第1周的阳性检出率为30％，而间接法对住院第1周的阳性检出率为0％。结论：双抗原夹心法检测SARS患者特异性抗体优于间接法。     

血清学方法检测SARS病毒抗体的效果比较

目的比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对严重急性呼吸综合征(SARS)患者特异性抗体的检出情况。方法采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、肺炎患者、肺结核患者、SARS密切接触医务人员和不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果双抗原夹心法的阳性检出率为64．4％。间接法的阳性检出率为57．5％。双抗原夹心法检测92例健康人有4例阳性，38例SARS密切接触医务人员有2例阳性，而间接法检测健康人和SARS密切接触医务人员均为阴性。结论两种方法检测抗SARS病毒特异性抗体具有较高的一致性。间接法检测SARS特异性抗体的特异性好于双抗原夹心法。     

非SARS患儿体内SARS冠状病毒抗体的检测分析

目的 探讨非急性重症呼吸综合征(SARS)患儿体内是否存有SARS冠状病毒相关抗体。方法采用国家药品生物制品检定所正式检定通过的2种SARS抗体诊断试剂(间接免疫荧光检测试剂和双抗原夹心ELISA试剂)，对广州地区l060例非SARS患儿血清样本进行检测。结果 1060例非SARS患儿血清样本，间接免疫荧光法检测IgM、IgG均为阴性。双抗原夹心ELISA法检测也仅有2例出现弱阳性。结论 非SAILS患儿体内并未存在SAILS病毒相关抗体。     

390例狂犬疫苗免疫后血清学效果观察

采用间接免疫荧光抗体法检测３９０例被动物咬伤患者作普通狂犬疫苗与浓缩狂犬疫苗法射后各１９５例血清抗体滴度，结果说明，浓缩狂犬疫苗抗体滴度皆≥１６０，显著优于普通疫苗抗体滴度（〈１：２０者占２０．５２％）。     

补体溶菌试验检测血清杀弧菌抗体

目的：评估血清杀霍乱弧菌抗体的检测对霍乱和流行病学调查的价值。方法：对３０例霍乱病人和３０例正常人的血清，采用补体溶菌试验检测血清中抗体滴度的变化。结果：试验组几何平均滴度１：８９，对照组几乎平均滴度１：２．４，差异有非常显著的意义（ｔ＝１１．２，Ｐ〈０．００１）。结论：该试验敏感，特异，操作简单，结果易判断，有一定的实用性。     

免疫荧光试验与反向被动血凝抑制试验测定乙型脑炎抗体对比分析

目的：比较两种乙型脑炎实验室诊断方法。方法：用间接免疫荧光法和反向被动血凝抑制试验检测疑似乙型脑炎患者的血清标本。用SPSS统计软件分析两者的特异性和敏感性。结果：50份临床疑似乙型脑炎患者的血清两种方法检测结果，IgG抗体检出率均为86％。无统计学意义。IgG抗体几何平均滴度RPHI法略高于IFA，但无统计学意义。IgM抗体阳性率IFA为78％；RPHI为76％。RPHI法的几何平均滴度为31，6。IFA的几何平均滴度为30，3，几何平均滴度无统计学意义。两种方法的相关性检测．相关系数分别为0．835和0，696。结论：IFA和RPHI法用于检测乙型脑炎抗体阳性检出率和几何平均滴度差异均无统计学意义。由于RPHI法无需特殊仪器设备。操作简便易行。IFA法除需要一台较好的荧光显微镜外，其操作简便，适于病人的早期诊断。     

非SARS患儿体内SARS冠状病毒抗体的检测分析

目的探讨非急性重症呼吸综合征(SARS)患儿体内是否存有SARS冠状病毒相关抗体。方法采用国家药品生物制品检定所正式检定通过的2种SARS抗体诊断试剂(间接免疫荧光检测试剂和双抗原夹心ELISA试剂),对广州地区1 060例非SARS患儿血清样本进行检测。结果1 060例非SARS患儿血清样本,间接免疫荧光法检测IgM、IgG均为阴性。双抗原夹心ELISA法检测也仅有2例出现弱阳性。结论非SARS患儿体内并未存在SARS病毒相关抗体。     

双抗体间接夹心ELISA法检测血清MUC1蛋白方法的建立及其在肺癌诊断中的应用

目的:建立双抗体间接夹心酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒,检测血清黏蛋
白1（MUC1）水平,探讨其在肺癌诊断中的应用,阐明血清MUC1蛋白检测的临床应用
价值。方法:在前期制备的MUC1蛋白和兔抗人MUC1多克隆抗体的基础上,建立以鼠抗人MUC1
单克隆抗体为包被抗体,兔抗人MUC1多克隆抗体为检测抗体的双抗体间接夹心ELISA方法,
并通过对MUC1蛋白标准品的检测,绘制出标准曲线。临床上收集48例肺癌患者、7例肺良性
疾病患者和20例健康人的血清,应用本研究建立的ELISA方法检测各组标本血清MUC1蛋白表
达水平,绘制ROC曲线,确定最佳cut-off值,得出双抗体间接夹心ELISA方法检测肺癌的敏
感度、特异度及约登指数。同时与临床应用的CA15-3试剂盒检测结果进行比较。结果:应用双抗体间接夹心ELISA法确定血清MUC1的临界值为1.98 μg?L-1,检测
肺癌的敏感度为62.5%,特异度为100%,约登指数为0.625　0。CA15-3试剂盒检测肺癌的敏感度
为18.75%,特异度为100%,约登指数为0.187 5。结论:建立的双抗体间接夹心ELISA
试剂盒检测肺癌有更高的敏感度和特异度,优于临床常用的CA15-3试剂盒。     

McAb-ELISA间接夹心法检测家鼠型HFRS疫区人和动物血清中特异性抗体

用McAb-ELISA间接夹心注和IFAT或酶标SPA染色法平行检测山西地区(家鼠型HFRS疫区)的人及动物血清中HFRS病毒特异性IgM和/或IgG抗体。结果ELISA检测174份HFRS患者血清的阳性率及抗体滴度均明显高于IFAT。检测295份无明确HFRS病史的健康人血清,ELISA的阳性率也高于IFAT。检测215份鼠类血清、102份兔血清及108份猪血清,ELISA的阳性检出率与IFAT或酶标SPA染色法基本相同。用阻断试验等证明本ELISA检出的抗体确为HFRS病毒特异性抗体。     

390例狂犬疫苗免疫后血清学效果观察

采用间接免疫荧光抗体法检测390例被动物咬伤患者作普通狂犬疫苗与浓缩狂犬疫苗注射后各195例血清抗体滴度，结果说明，浓缩狂犬疫苗抗体滴度皆≥160，显著优于普通疫苗抗体液度（＜1∶20者占20.52％）．     

测定HFRS患者血清中特异性抗体方法初探

作者建立了检测HFRS患者血清特异抗体的捕获ELISA和阻断ELISA,并与间接酶染色和间接免疫荧光抗体技术进行了比较。四种方法的阳性检出率相同。血清的几何平均滴度,捕获ELISA比IFAT高32倍;阻断ELISA、酶染色及IFAT无显著差异。但应用不同抗原,ELISA检测血清滴度亦有不同。     

鼻咽癌患者血清肿瘤坏死因子的初步探讨

采用双抗夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测鼻咽癌患者（ＮＰＣ）６２例及正常对照组３０例的血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）水平。同时用免疫酶法测定ＮＰＣ患者血清ＥＢＶＣＡ－ＩｇＡ抗体几何平均滴度。结果发现ＮＰＣ患者血清ＴＮＦ水平明显降低;愈近晚期,下降愈显著;且与ＥＢＶＣＡ－ＩｇＡ滴度呈负相关。分析表明：鼻咽癌的发生发展可能与机体的抗肿瘤免疫功能降低有关。测定血清ＴＮＦ水平,对鼻咽癌的辅助诊断和预后估计有参考意义。