三色荧光标记抗体在急性白血病免疫分型中的应用

目的：探讨多参数分析流式细胞术白血病免疫分型的方法。方法：用自行设计的七组三色荧光标记抗体组合，共含15种抗体，对200例急性白血病患者骨髓或外周血进行流式细胞术免疫分型。结果：应用本组抗体组合可对T-急性淋巴细胞白血病、B-急性淋巴细胞白血病和急性粒细胞白血病-M1-M7患者作出免疫学诊断，并可诊断形态学难以辨认的及一般免疫分型法较难诊断的单核细胞白血病。结论：三色荧光标记抗体组合可用较少的抗体，特异地对急性白血病各亚型进行多参数免疫表型分析，提高了免疫分型的准确性。     

形态学、免疫学、细胞遗传学联合检测诊断急性白血病的临床意义

为探讨形态学、免疫学、细胞遗传学联合检测对急性白血病(AL)诊断、治疗、预后判断等方面的临床意义，对初诊为AL的39例患者分别进行了骨髓细胞形态学、免疫学及染色体检测。并按照FAB标准进行形态学(组织化学染色)分型；采用间接免疫荧光法标记活细胞膜表面分化抗原(CD)进行免疫学分型；采用24小时培养法制备染色体标本，G带显示法进行染色体检查。结果：39例患者经形态学检查确诊为AL，其中急性淋巴细胞白血病(ALL)8例，急性非淋巴细胞白血病(ANLL)29例，2例难以分型；免疫学诊断为ALL8例(其中2例伴髓系抗原表达)，ANLL29例(其中4例伴淋巴细胞抗原表达)，2例形态学难以分型者，诊断为急性杂合性白血病。免疫学与形态学分型符合率94．9％(37／39)。39例中染色体核型异常18例。本研究结果还显示，经临床治疗后染色体复杂畸形者缓解率低，正常核型及某些染色体核型[如t(15；17)]者缓解率较高。认为形态学、免疫学、细胞遗传学联合检测可提高AL诊断的准确性，有助于制定治疗方案及判断预后。     

白血病免疫表型分析

目的：应用流式细胞术研究白血病免疫表型的特点.方法：采用单克隆抗体直接免疫荧光标记法，对209例白血病患者进行免疫表型分析.结果：CD13、CD33是急性髓细胞白血病特异和敏感的指标，CD2、CD7是T-淋巴细胞白血病（T-ALL）特异和敏感的指标，CD19、CD10是B-ALL特异和敏感的指标.结论：运用流式细胞术对白血病进行免疫分型可以极大提高诊断的准确性，指导临床治疗和判断预后。     

小儿急性白血病形态学、免疫学及细胞遗传学分型的临床意义

近年来,我们对 35例初治急性白血病(AL)患儿进行了形态学、免疫学及细胞遗传学检查,现报告如下. 资料与方法:本组初治小儿AL35例,男25例,女10例;年龄6个月至17岁.取其初发病时的骨髓进行形态学分型(按FAB标准)、免疫学分型(用流式细胞仪间接或直接免疫荧光法检测HLA-DR、CD2、CD3、CD7、CD10、 CD19、CD22、CD13、CD33、CD14、CD61和CD41单克隆抗体反应,T细胞系阳性细胞＞30%为阳性反应,其余以阳性细胞＞20%为阳性反应)及细胞遗传学分型(将新鲜细胞培养24小时后,收集有丝分裂中期细胞,用RHG显带技术按照国际细胞遗传学命名协会方法进行核型分析).     

91例急性白血病FCM免疫分型分析

目的：研究急性白血病免疫分型及临床意义。方法：采用流式细胞术检测91例急性白血病患者免疫分型情况。结果：①80％以上急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者主要表达CD13、CD33。②按免疫表型的特征可将急性白血病分为3类：系列专一性表达；交叉表达；“裸细胞”型。ANLL中，以系列专一性比例最高，交叉表达在ALL中占有一定比例，“裸细胞”型在ANLL和ALL中比例均最少。交叉表达的病例中，CD7^ ANLL患者CR率低于系列专一性表达者。结论：AL免疫分型可出现系列专一性表达；交叉表达；“裸细胞”型3种类型，CD7^ ANLL交叉表达的患者完全缓解率低于系列专一性表达者。     

微分化型急性髓系白血病5例临床分析

目的：探讨流式细胞免疫分型在微分化型急性髓系白血病（AML-M0）诊断中的作用。方法：分析5例AML-M0患者的临床资料,观察其骨髓细胞形态学和细胞化学染色的特征以及与流式细胞仪骨髓细胞免疫分型的符合程度。结果：5例患者骨髓细胞学均报告原始及幼稚淋巴细胞增多,POX染色阴性,PAS染色部分阳性,流式细胞免疫分型髓系标志CD13、CD33、CD117至少1项阳性,而淋巴系统及巨核细胞系统抗原阴性。结论：骨髓细胞形态学、细胞化学染色结合骨髓细胞免疫表型和细胞遗传学检查是诊断AML-M0的主要依据,其中原始细胞的免疫分型对诊断AML-M0是非常必要的。     

小儿急性白血病形态学、免疫学及细胞遗学分型的临床意义

近年来，我们对３５例初治急性白血病（ＡＬ）患儿进行了形态学、免疫学及细胞遗传学检查，现报告如下。　　　　资料与方法：本组初治小儿ＡＬ３５例，男２５例．女１０例；年龄６个月至１７岁。取其初发病时的骨髓进行形态学分型（按ＦＡＢ标准）、免疫学分型（用流式细胞仪间接或直接免疫荧光法检测ＨＬＡ－ＤＲ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ７、ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１３、ＣＤ３３、ＣＤ１４、ＣＤ６１和　ＣＤ４１单克隆抗体反应．Ｔ细胞系阳性细胞＞３０％为阳性反应，其余以阳性细胞＞２０％为阳性反应）及细胞遗传学分型…     

c-kit受体与其他髓系膜抗原标志物对急性非淋巴细胞白血病诊断价值的比较

近年来，有报道称c-kit受体(c-kitR，CD117)可作为髓系免疫学标记物，用于急性白血病(AL)的分型诊断，对急性非淋巴细胞白血病(ANLL)的诊断以及ANLL与急性淋巴细胞白血病(ALL)的鉴别诊断有重要参考价值。本研究运用流式细胞术(FCM)检测CD117在AL中的表达，探讨其对ANLL的诊断意义；并根据灵敏度和特异度的概念将CD117与CD13、CD14、CD33等髓系膜抗原标志物对ANLL的诊断价值进行了比较研究。     

急性非淋巴细胞白血病MIC分型及其与预后的关系

目的：探讨急性非淋巴细胞白血病（ANNL）MIC分型及其与预后关系。方法：43例ANLL患者进行形态学分型,采用流式细胞术检测白血病细胞免疫类型,骨髓短期培养,G显带技术分析染色体核型,分析比较MIC结果及其与预后的关系。结果：ANLL患者髓系系列CD13、CD33和MPO的表达最为常见,阳性率分别为100．00％、95．38％和53．49％;干／祖细胞CD38、HLA—DR和CD34的阳性率分别为83．72％、74．42％、74．42％,各系列单抗在FAB各亚型原始细胞的表达水平不同,其中CD34和CD7分别在急性混合细胞白血病（HAL）和M5高表达;细胞遗传学检查染色体异常率为53．49％,其中复杂异常的患者CR率明显低于其他组。2例FAB分型为Mo的患者免疫分型为HA1,3例M5和2例M4为伴淋巴系抗原表达的ANLL。结论：形态学结合免疫分型和细胞遗传学检查可以准确地了解白血病细胞的生物学性质,指导临床治疗和判断预后,尤其对于形态学特征不明显的HAL等患者更有价值。     

12例经流式细胞仪确诊的急性混合型白血病分析

目的:对比经流式细胞仪(FCM)确诊的急性混合型白血病(MAL)与经骨髓细胞形态学组化染色发现具有急性混合型白血病特性的急性白血病(AL)患者的符合率。方法:选取12例MAL患者,经FCM确诊,对比其相应的骨髓细胞学组化染色FAB分型结果,并计算经形态学和免疫组化发现MAL特性的AL患者占经FCM确诊MAL患者的百分率。结果:经FCM确诊的MAL患者,其中急性双表型白血病8例,急性双克隆型白血病3例,发现急性细胞系转变型1例。此12例AL患者经骨髓细胞学组化染色确诊7例为急性淋巴细胞白血病(ALL),3例为急性髓系白血病(AML),另2例经细胞形态学未确诊的AL患者中,1例多次细胞形态学显示呈骨髓坏死,但最终FCM技术也确诊为MAL。结论:经骨髓细胞形态学及组化染色发现具有MAL表现的AL患者仅占经FCM确诊的MAL患者的17%,误诊率极高。应重视流式细胞仪免疫分型在MAL诊断中的应用。     

116例急性髓系白血病免疫表型特点分析

目的探讨免疫表型检测对急性髓系白血病(AML)的诊断、治疗、预后的临床意义。方法回顾性分析已经确诊的116例AML患者的免疫表型结果。免疫表型检测采用流式细胞术对AML患者的骨髓样本进行多种抗原的检测。结果 116例AML白血病患者主要表达CD33(91.4%)、CD13(94%)、CD117(69%)、HLA-DR(70.7%)、CD34(71.6%),M3较少表达CD34及HLA-DR。淋系抗原在AML患者中也有阳性表达,其中CD56、CD7、CD19阳性率最高,分别为17.2%、15.5%、9.5%。伴有CD56、CD7阳性的AML患者CR率低于CD56、CD7阴性的AML患者。结论白血病免疫表型检测对AML分型诊断、预后判断有重要的指导意义。     

急性白血病患者骨髓MVD与血清 VEGF水平的研究

目的：探讨急性白血病(AL)骨髓血管新生的状态及意义。方法：应用改良的GMA塑料包埋骨髓病理切片进行免疫组化染色检测AL患者治疗前后骨髓微血管密度(MVD)，应用ELISA方法检测AL患者治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)的浓度。结果：AL患者治疗前骨髓MVD明显增加，化疗缓解后骨髓MVD降至正常水平，复发者骨髓MVD再次升高至化疗前水平；AL患者治疗前血清VEGF水平比正常对照明显升高，化疗缓解的患者VEGF水平仍然较高。结论：骨髓血管新生在AL发生过程中有着重要的作用，血清VEGF水平能够在一定程度上解释白血病骨髓血管新生现象。     

慢性淋巴细胞白血病的临床免疫表型分析

目的评价慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)患者骨髓或外周血白血病细胞的免疫表型在B-CLL诊断、治疗和预后中的应用价值。方法收集26例B-CLL患者外周血或骨髓标本,应用多参数流式细胞术进行免疫表型测定。结果 26例B-CLL患者外周血淋巴细胞比例明显增加,典型的B-CLL高表达CD19、CD20、HLA-DR、cCD79a、CD5、CD23,而CD3、CD4、CD8、CD2各项指标均极度减低。结论测定B-CLL患者外周血或骨髓白血病细胞的免疫表型对于B-CLL的诊断及预后评价有重要意义。     

流式细胞仪双标法分析白血病相关复合物及预后价值

应用流式细胞仪免疫荧光双标法检测 1 8例急性白血病 ( AL ) ,对照 1 1例骨髓单个核细胞( MNC)或外周血干细胞移植术 ( PBSCT)时采集的外周血干细胞 ( PBSCS)的白血病相关复合物表达情况〔其中急性髓细胞白血病 ( AML)以 CD3 4/CD56复合物为标志 ,急性淋巴细胞白血病 ( ALL)及急性未分化细胞白血病 ( AUL )以 CD3 4/CD56,CD19/CD3 4,CD19/CD3 3 ,CD19/CD56复合物为标志探讨这些白血病相关复合物对 AL的预后价值。1　病例和方法1 .1 　 病例来源1 8例 AL患者包括 AML 1 5例 ( M2 8例 ,M3 7例 ) ,ALL- L2 2例 ,AUL1例…     

免疫组织化学法与酶联免疫法对胰岛细胞抗体检测的比较

目的 比较免疫组织化学法与酶联免疫吸附法(ELISA)测定胰岛细胞抗体(ICA)的阳性率。方法 对同一批200份血清标本，在北京、上海两地三个三甲医院内分泌实验室分别采用免疫组织化学技术POPA法、ABC法及ELISA法检测ICA。结果 免疫组织化学POPA法与ABC法检测ICA的阳性率和阴性率基本一致，而用ELISA法检测的阳性率低，假阳性率、假阴性率高。结论 与ELISA法相比，用免疫组织化学法测定ICA的准确性高，重复性好，宜推广应用于临床。     

急性髓系白血病骨髓单个核细胞CD11a的表达及临床意义

目的:探讨淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)的α链CD11a在急性髓系白血病(AML)的表达情况及临床意义。方法:采用免疫酶标ABC法检测25例初治AML患者和8例血液系统非恶性肿瘤患者为对照的骨髓单个核细胞CD11a的表达,并追踪观察AML患者的疗效。结果:CD11a在AML患者骨髓单个核细胞的表达率(37.02±13.30)%,明显低于对照组(87.13±5.38)%(P<0.05)。化疗后未缓解组AML患者发病时骨髓单个核细胞CD11a的表达率(47.09±10.55)较完全缓解组(29.11±9.36)%高(P<0.05)。结论:CD11a在AML患者骨髓单个核细胞表达异常,可能与白血病细胞逃脱机体免疫监控及从造血微环境释出有关。检测AML患者骨髓单个核细胞CD11a的表达水平对AML的预后判断有一定意义。     

10例慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的：探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）的免疫分型。方法：应用流式细胞仪对10例CLL患者外周血进行淋巴细胞表面抗原检测。结果：10例CLL患者CD19抗原阳性表达率为100%。其中1例患者CD5、CD19、CD20、HLA-DR、CD3、CD13均阳性,且CD34表达率大于10%;另有1例为CD5、CD19、CD20、HLA-DR阳性且伴CD7阳性。CD5、CD19、CD20、HLA-DR同时阳性的患者为50%。结论：CLL以B细胞慢淋为主,免疫分型对慢淋的诊断及鉴别诊断具有重要意义,其免疫分型可存在伴系表达。     

15例急性混合细胞白血病的临床与实验研究

目的：研究急性混合细胞白血病(MAL)的临床特征、实验室指标、治疗及预后。方法：对15例MAL骨髓标本分别进行光镜细胞形态学及相关细胞化学染色观察，以确定其FAB类型，应用流式细胞仪做免疫分型检测一系列相关单抗，同时采用G显带技术进行核型分析；应用PCR基因扩增方法检测TCRδ／lgH CDRⅢ2基因重排；运用急性粒细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)或兼顾二者的治疗方案。结果：MAL患者的临床表现与AML及ALL患者的差异无显著性意义，形态学上MAL表现为AML的多为M2a、M1、M4，表现为ALL的多为ALL-L2；免疫分型显示MAL患者中以三系共表达者多见。另外，CDll7、HLA-DR在MAL中呈高表达。提示MAL的白血病细胞可能起源于早期造血细胞；核型分析可见异常染色体出现，但无特异性；基因重排显示部分患者TCRδ／lgH CDRⅢ2为阳性；患者对治疗反应差，生存期相对较短。结论：MAL具有独特的临床、实验室检查指标及预后。     

流式细胞术白血病免疫表型分析的临床应用

白血病分型对选择治疗方案、判断预后都具有重要作用。应用流式细胞术(FCM)和单克隆抗体对白血病进行免疫分型的方法具有比其他免疫学方法更快速、准确、重复性好的特点。为进一步提高白血病的诊治水平，本文采用FCM检测了60例恶性血液病患者细胞免疫表型，并对各型白血病细胞抗原表达的特点和意义进行了总结和分析。     

急性白血病免疫分型中系列相关抗体的敏感性和特异性研究

目的：确定急性白血病免疫分型中系列相关抗体的敏感性和特异性。方法：应用St Jude研究医院的急性白血病免疫分型方案对63例急性白血病患者进行了流式细胞术分型。结果：B系列急性淋巴细胞白血病(B-ALL)敏感性最高的单克隆抗体(抗体)是CD19[100％(22／22)]，而特异性最高的是CD79a[96．7％(29／30)]。CD79a敏感性(95．0％)和特异性均很高，在所有B细胞系列相关抗体中确定系列来源的准确性最高[96％(48／50)]。在T-ALL，敏感性最高的抗体是CD7[100％(14／14)]和CyCD3[100％(12／12)]，特异性最高的是CD5[(100％(45／45)]和CyCD3[97．7％(42／43)]；CD7、CyCD3和CD5在BALL均无假阳性；在AML的假阳性分别是[12％(3／25)]、[4．3％(1／23)]和0／24；但CD5的敏感性仅E85．7％(12／14)]；CD3的敏感性[61．5％(8／13)]和特异性[88．6％(39／44)]均明显低于上述抗体。综合来看，CyCD3敏感性和特异性均很高，在所有T细胞系列相关抗体中确定系列来源的准确性最高[98．2％(54／55)]。在AML，MPO的敏感性和特异性最高[100％(23／23)]和[92．9％(26／28)]，而CD13和CD33的敏感性仅在61．5％和76．9％，特异性仅为68．8％和75．0％。结论：St Jude急性白血病免疫分型方案的高敏感性和高特异性抗体在本组B-ALL和T-ALL病例得以重复；但在AML仅有MPO表现出高敏感性和高特异性；CD13和CD33未能得到高敏感性。