脂多糖信号受体CD14和 TLR4在人炎症根尖周组织中的表达

目的 研究慢性根尖周炎患者根尖周组织中脂多糖(LPS)信号受体CD14和TLR4的表达和分布,探讨CD14和TLR4在炎性根尖周组织中可能的作用.方法 收集需做根尖外科手术的12例慢性根尖周炎患者和10例外科手术拔出的无牙髓炎和根尖周病变的阻生齿的根尖周组织,术中取炎症和正常根尖周组织后常规切片,采用免疫组织化学方法检测CD14和TLR4的表达和分布.结果 CD14和TLR4在炎症根尖周组织中呈强阳性表达,主要分布于单核细胞、巨噬细胞等炎症细胞;而在正常根尖周组织中未见明显CD14和TLR4阳性细胞.结论 炎症根尖周组织中CD14和TLR4的阳性表达,提示LPS可能通过CD14和 TLR4信号受体在根尖周炎症组织中发挥作用.     

脂多糖信号受体CD14、TLR4在人牙髓组织和牙髓成纤维细胞中的表达

目的研究人牙髓组织和牙髓成纤维细胞中脂多糖（LPS）信号受体CD14、TLR4的表达特点,探讨牙髓炎症组织中LPS的信号转导途径.方法采用免疫组化染色法观察健康和炎症牙髓组织中CD14、TLR4的表达情况;应用直接免疫荧光标记法,采用流式细胞术检测体外培养人牙髓成纤维细胞在LPS刺激前后的CD14、TLR4阳性细胞率和细胞表面平均荧光强度.结果正常牙髓组织中未见CD14、TLR4阳性细胞;炎症牙髓组织中可见大量CD14、TLR4阳性细胞,CD14、TLR4阳性细胞率差异无统计学意义（P＞0.05）.牙髓成纤维细胞经LPS刺激后,TLR4平均荧光表达强度和TLR4阳性细胞率均显著增高（P＜0.05）,而CD14在LPS刺激前、后均无表达.结论炎症牙髓组织中CD14、TLR4的阳性表达,提示LPS可能通过CD14、TLR4信号受体在牙髓炎症组织中发挥作用,而牙髓成纤维细胞在LPS刺激后仅表达TLR4,表明LPS可能通过TLR4对牙髓成纤维细胞发挥作用.     

CD14、TLR4在大鼠尖周炎症组织中的表达

目的:探讨CD14、TLR4在尖周组织中的分布和表达,为阐明CD14、TLR4在LPS引起的炎症反应中的作用机制提供实验依据.方法:分别将Pe、Pg菌液封入大鼠髓腔建立大鼠尖周炎症模型,并以髓腔自然开放和开髓后无菌坏死作为对照.免疫组织化学染色观察CD14、TLR4在尖周组织的分布情况.结果:4组的尖周炎症组织中均可见大量CD14、TLR4表达阳性细胞,以单核巨噬细胞为主.结论:LPS信号受体CD14和TLR4 可能参与大鼠LPS介导的尖周炎症反应.     

Toll样受体4在大鼠实验性牙髓炎和根尖周炎中的表达

目的:建立大鼠实验性牙髓炎及根尖周炎模型,了解TLR4在大鼠牙髓和根尖周组织的表达情况。方法:采用单纯髓腔开放法建立大鼠实验性牙髓炎及根尖周炎模型,进行组织学及X线片观察。免疫组化检测TLR4在牙髓炎中的表达,RT-PCR检测TLR4在根尖周炎中的表达。结果:组织学及X线观察证实成功复制大鼠牙髓炎及根尖周炎模型,免疫组化结果表明大鼠正常牙髓组织成牙本质细胞层TLR4阳性表达,牙髓内部血管内皮细胞亦见表达,牙髓成纤维细胞未见表达。炎症牙髓组织TLR4表达较正常组增强。RT-PCR检测发现正常和炎症根尖周组织均有TLR4mRNA表达,炎症组表达较正常组增强。结论:TLR4在牙髓组织和根尖周组织均有表达并参与了牙髓根尖周炎症的发生和发展。     

Toll样受体与根尖周炎症

Toll样受体是新近发现的序列高度保守的先天性免疫系统中的细胞跨膜受体,它可以转导脂多糖信号。革兰阴性菌的脂多糖是根尖周炎发病机制的主要因素,在根尖周炎的发生和发展中起关键作用。本文就Toll样受体的研究概况及其与根尖周炎症的关系作一综述。     

CD14、TLR4在人炎症牙髓组织中的表达

目的 探讨CD14、TLR4在人牙髓组织中的表达,为阐明CD14、TLB4在LPS引起的炎症反应中的作用机制提供实验依据.方法 通过免疫组织化学染色和流式细胞术观察正常、深龋和牙髓炎牙髓组织中CD14、TLB4表达情况.结果 免疫组化染色观察正常组牙髓组织中未见CD14、TLR4阳性表达细胞;深龋组中可见CD14、TLB4表达阳性细胞,多为中性粒细胞阳性染色;慢性牙髓炎组可见大量CD14、TLR4表达阳性细胞,多为单核细胞、淋巴细胞阳性染色.流式细胞术检测到CD14、TLB4阳性细胞率随牙髓组织炎症的加重而增大;深龋组和牙髓炎组中TLB4的平均荧光强度比CD14高.结论 在牙髓炎症发展过程中,CD14、TLB4阳性细胞表达率随牙髓组织炎症的加重而增大,与炎症程度呈正相关.同时检测到在深龋组和牙髓炎组中TLR4的平均荧光强度比CD14高,可以推测LPS主要通过TLR4进行信号转导.     

人正常及炎症牙髓中炎症信号受体TLR4表达的研究

目的:研究人正常及炎症牙髓组织中炎症信号受体TLR4的表达特点,探讨其在牙髓和根尖周组织炎症中的可能作用。方法:采用激光共聚焦扫描显微镜和免疫荧光技术,检测正常及炎症牙髓TLR4的表达情况。结果:正常牙髓组织中未发现TLR4免疫阳性细胞,炎症牙髓组织病灶处TLR4表达强阳性。正常组平均荧光强度为28.80±2.57,炎症组为258.12±24.51(P<0.001)。结论:与正常牙髓组织相比,炎症牙髓组织TLR4表达显著增强,提示其可能参与牙髓组织炎症过程。     

大鼠根尖周炎中降钙素基因相关肽阳性神经纤维的变化

目的：观察降钙素基因相关肽阳性(CGRP—IR)神经纤维在大鼠根尖周炎中的变化，为进一步研究CGRP在根尖周炎中的作用提供形态学依据。方法：在大鼠磨牙制备近髓窝洞，封入新鲜龋坏组织，建立大鼠根尖周炎模型。免疫组织化学技术观察正常根尖周膜和炎症14、21d根尖周组织CGRP-IR神经纤维的变化。结果：根尖周炎时，大鼠磨牙根尖周膜CGRP—IR神经纤维增多、增粗、染色加重，并围绕在坏死组织周围。结论：根尖周炎时，根尖周膜内CGRP增多，并佗于炎症的前沿区，CGRP可能参与了根火周组织炎症及修复过程。     

雌激素缺乏对大鼠根尖周炎病变区TLR4表达的影响

目的:探究雌激素缺乏对大鼠根尖周炎病变区TLR4表达的影响。方法:30只大鼠随机分为两组:OVX组、SHAM组,暴露下颌第一磨牙髓腔,分别于开髓后 0、7、14、21 d处死大鼠。HE染色、酶组织化学染色、免疫组织化学法观测根尖周组织骨吸收范围,破骨细胞数及TLR4的表达。结果:与SHAM组相比,OVX组根尖周炎病变区骨吸收范围增大、破骨细胞数升高、TLR4的表达增强。结论:雌激素缺乏可增强大鼠根尖周炎病变区TLR4的表达。     

p38MAPK在大鼠实验性根尖病变中的作用研究

目的：观察大鼠根尖周病变过程中P-p38,RANKL和破骨细胞的表达及变化,探讨p38MAPK信号通路在根尖周炎症性骨吸收中的作用。方法：将24只SD大鼠开髓,分别于术后7,14,21,28d取下颌骨,制备组织切片,用免疫组织化学的方法测定P-p38和RANKL在大鼠根尖周炎中的表达,酶组织化学方法检测抗酒石酸酸性磷酸酶,观察破骨细胞。结果：在正常根尖周组织中偶见P-p38、RANKL阳性细胞和破骨细胞;术后7d根尖周有炎症细胞浸润,可见P-p38、RANKL阳性细胞和破骨细胞数量增多;术后14d,P-p38、RANKL阳性细胞和破骨细胞数量上升至最高值;术后21~28d,P-p38、RANKL阳性细胞和破骨细胞数量下降。从7d组到28d组,破骨细胞数量的变化与P-p38和RANKL阳性细胞数的变化呈现一致的趋势。结论：p38MAPK信号通路可能通过参与RANKL介导的信号转导途径,介导破骨细胞分化,参与根尖炎骨吸收的病理过程。     

Expression of CD14, CD16 and CD45RA on monocytes from periodontitis patients

BACKGROUND AND OBJECTIVE: Peripheral blood monocytes are a heterogeneous population, with phenotypes that change on activation or differentiation. Most of the monocytes express lipopolysaccharide (LPS) receptor, CD14 intensely, and do not express Fc gamma receptor III, CD16 (CD14++CD16- monocytes). But monocytes expressing CD16 with reduced CD14 (CD14+CD16+ monocytes) increase in inflammatory diseases as well as sepsis and bacteremia in hemodialysis patients. CD45RA is expressed on activated monocytes, and is regarded as an activation marker of peripheral blood monocytes. The purpose of this study was to determine the phenotypic and functional alteration of monocytes in periodontitis patients. METHODS: Peripheral blood was collected from 33 aggressive periodontitis patients (22 females, 11 males), 55 chronic periodontitis patients (35 females, 20 males) and 30 healthy subjects (16 females, 14 males), and the expression of CD14, CD16 and CD45RA on monocytes was determined using flow cytometry. The production of interleukin-6 (IL-6) by CD16+ and CD16- monocytes stimulated with LPS from Escherichia coli and Actinobacillus actinomycetemcomitans was also examined using flow cytometry. RESULTS: The percentage of CD14+CD16+ monocytes was significantly increased in chronic periodontitis patients. Percentage of monocytes expressing CD45RA was significantly increased in aggressive periodontitis patients compared to healthy subjects. CD16+ and CD16- monocytes produced IL-6 in response to LPS from E. coli and A. actinomycetemcomitans, and the percentage of IL-6 producing cells was higher in CD16+ monocytes than CD16- monocytes, suggesting that CD14+CD16+ monocytes represent a hyper-reactive phenotype. CONCLUSIONS: The present study demonstrated that CD14+CD16+ monocytes and CD45RA+ monocytes were increased in chronic and aggressive periodontitis, respectively. These findings suggest that alteration of monocytes in periodontitis patients could be evaluated by monitoring the surface expression of CD14, CD16 and CD45RA on monocytes.     

快速进展性牙周炎牙龈组织中单核/巨噬细胞浸润与Mcp-1表达

目的 研究快速进展性牙周炎牙龈组织中的单核／巨噬细胞浸润与单核细胞趋化蛋白１（ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ－１,ＭＣＰ－１）表达有无异常变化。方法 采用免疫组织化学ＳＰ染色法,取１４例快速进展性牙周炎、６例慢性牙周炎和６例健康牙龈组织,分别用抗ＣＤ１４、ＣＤ６８单克隆抗体检测牙龈组织中的单核／巨噬细胞,用ＭＣＰ－１多克隆抗测于龈组织中ＭＣＰ－１的表达。结果 快速     

Toll样受体4在牙髓根尖周疾病及牙周病中的作用

牙髓根尖周疾病及牙周病是以革兰阴性厌氧菌感染为主的混合感染,脂多糖(LPS)是所有革兰阴性厌氧菌细胞膜的组成成分,是主要的毒力因子.Toll样受体4作为重要的脂多糖结合受体,由于其独特的生物学特性,近年来成为研究热点.本文从Toll样受体4的结构特点、表达分布、致病机制、临床意义等方面作一综述.     

紫花前胡素通过降低OPN表达抑制根尖周炎进程

目的:探讨紫花前胡素对根尖周炎的影响及机制。方法:构建大鼠牙齿根尖周炎用药模型,分为正常对照组、模型观察组和加药处理组,用药处理的大鼠于第1周开始每天腹腔注射紫花前胡素溶液20 mg/kg或等量生理盐水,至第3周末处死。X线及HE染色观察病灶变化;免疫组化检测OPN表达情况。培养并用内毒素及紫花前胡素处理小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,CCK-8法检测细胞增殖水平,ELISA法检测IL-6的表达,Western blot检测OPN的变化。结果:生理盐水处理组的大鼠根尖病灶面积明显大于紫花前胡素处理组,且紫花前胡素组大鼠组织中的OPN的表达降低。经内毒素处理的RAW264.7细胞增殖水平及IL-6和OPN的表达水平升高,而紫花前胡素抑制细胞增殖能力以及IL-6和OPN的表达。结论:紫花前胡素可以抑制OPN的表达,干预根尖周炎的炎症反应。     

Gene expression analysis of resident macrophages in lipopolysaccharide-stimulated rat molar pulps

Introduction

In normal dental pulp, a considerable number of resident macrophages are distributed. This study was designed to analyze the expression levels of genes associated with differentiation and function of resident macrophages in rat molar pulps stimulated with lipopolysaccharide (LPS).

Methods

Mandibular first molars of 7-week-old male Wistar rats were used. After transcardiac perfusion with a culture medium to preserve tissue integrity, pulpotomy and LPS application were carried out on the experimental teeth, and then dissected mandibles were subjected to whole-tooth culture for 3 days. Normal teeth and pulpotomized teeth without LPS served as controls. The specimens were then immunostained for ED1 (CD68, a general macrophage marker) and ED2 (CD163, a resident macrophage marker). Real-time polymerase chain reaction for Toll-like receptor 4 (TLR4), CD14, chemokine receptors (CCR2 and CX3CR1), and colony-stimulating factor-1 (CSF1) mRNAs was carried out after laser capture microdissection of ED1+ and ED2+ cells.

Results

LPS-treated pulps showed significant increases in (1) density of ED1+ and ED2+ cells beneath the amputation site and (2) expression levels of TLR4, CD14, CSF1, and CX3CR1 mRNAs, as compared with non-LPS-treated groups. CCR2 mRNA showed no significant difference between each group.

Conclusions

LPS treatment of cultured rat molars caused the accumulation of resident macrophages and enhanced the expression of TLR4, CD14, CSF1, and CX3CR1 mRNAs in these cells. Up-regulation of these molecules might be involved in the differentiation and subsequent migration of resident macrophages of the pulp.