骨泥的制备及其诱导成骨实验研究

目的研制一种可随意塑型、填充不规则骨缺损的骨植入材料并观察其成骨效果。方法以羧甲基纤维素钠(CMCNa)为粘合剂复合脱矿骨粉制备骨泥,并将骨泥植入大鼠股肌袋内,通过大体观察,X线片,碱性磷酸酶(ALP)测定,组织学观察及成骨面积测定,研究该植入物在肌袋内的成骨效果。结果CMCNa植入体内4周完全被降解吸收,无毒性反应。与骨粉粘合性好,可随意塑型,对骨缺损填充完全。动物实验大体观察,伤口无红肿及脓性渗出,愈合良好,无死亡。X线片显示骨泥不离散。全脱矿骨泥植入体内后2周,ALP均值高于表面脱矿骨泥组。表明全脱矿骨泥植入后可形成软骨和骨组织,成骨良好。结论CMCNa复合全脱矿骨粉制备的骨泥具有诱导成骨活性,可随意塑型,使用方便,可为临床提供一种填充不规则骨缺损的骨植入材料。     

珊瑚/胶原/重组人骨形成蛋白-2复合人工骨的异位骨诱导(英文)

目的：评价珊瑚／胶原／重组人骨形成蛋白－２ （ｒｈＢＭＰ－２）复合人工骨的骨诱导活性。　方法：将珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ－２ 植入大鼠背部肌肉内,以珊瑚／胶原或珊瑚／ｒｈＢＭＰ－２ 植入作对照。术后１ 周和４周取材,通过组织学和计算机图像分析评价其异位诱导成骨情况。　结果：珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ－２ 植入后１ 周,在局部诱导软骨形成;４ 周,形成含骨髓的板层骨;诱导成骨的量有明显的ｒｈＢＭＰ－２ 剂量依赖性（Ｐ＜ ０．００１）。珊瑚／胶原或珊瑚／ｒｈＢＭＰ－２ 植入区无骨或软骨形成。　结论：珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ－２ 复合人工骨具有良好的异位骨诱导活性,是一种较理想的骨移植替代材料     

rhBMP-2珊瑚复合人工骨诱导骨形成的动物实验研究

[目的]研究rhBMP-2珊瑚复合人工骨在兔体内诱导异位成骨的活性.[方法]将大肠杆菌表达的重组人骨成形蛋白-2(rhBMP-2)与珊瑚复合,制成rhBMP-2珊瑚复合人工骨,将其植入兔股部肌肉,各10例,以单纯珊瑚植入作对照,通过大体和组织学测量等方法,观察新骨形成的特点和珊瑚降解的过程.[结果]组织学显示在植入5周后rhBMP-2珊瑚复合人工骨在植入部位可见散在的编织骨形成,新生骨融合生长,成为含骨髓的板层骨,珊瑚体积明显减少;而对照组未见软骨和骨组织的形成.[结论]rhBMP-2珊瑚复合人工骨具有良好的异位诱导成骨能力.     

骨髓间质干细胞诱导成骨细胞成骨能力的实验研究

目的:研究人骨髓间质干细胞(BMSCs)诱导成骨细胞的成骨能力,为组织工程化骨应用于临床提供理论依据.方法:制备人BMSCs与犬脱细胞-脱钙骨的复合物,将复合物回植于裸鼠皮下作为实验组,同时植入空白材料作为对照组,分别于植入4、8、12周取材,进行大体观察和组织切片HE染色观察,分析其体内成骨能力.结果:大体观察:随着植入时间延长,实验组体积变化不明显,12周时材料与背部皮肤粘连;对照组体积略缩小,材料基本降解.组织切片HE染色观察见对照组无新骨形成,有纤维包裹,实验组8、12周时有新骨小梁形成,周围有较多小血管形成.结论:人BMSCs诱导的成骨细胞具有良好的体内成骨能力,脱细胞-脱钙骨松质-人BMSCs-成骨细胞是较理想的组织工程化骨.     

rhBMP_2不同动物异位诱导成骨及其小鼠体内诱导成骨的剂量依赖性

目的对大肠杆菌表达的hBMP2在小鼠体内进行剂量依赖性研究,并观察其在大鼠和家兔体内异位诱导成骨情况,为临床应用提供参考。方法大鼠、家兔股部肌袋植入rhBMP21.5和3.0mg,植入后1、2、4周取材观察成骨情况;小鼠股部肌袋植入100~1000μg的rhBMP2,植入后1、2、3周取材,行组织学检查,成骨量分析,碱性磷酸酶和钙含量测定。结果大鼠植入1.5mgrhBMP2植入2周、家兔3.0mgrhBMP2植入4周表现为高效成骨活性。rhBMP2小鼠体内诱导成骨实验表现为成骨量,碱性磷酸酶活性和钙含量显著的剂量依赖性。结论原核表达的hBMP在小鼠、大鼠和家兔体内有高效的诱导成骨活性,小鼠体内实验rhBMP2表现为明显的剂量依赖性。     

大鼠骨形成蛋白2活性多肽/PLGA-[ASP-PEG]复合物植入异位成骨观察

目的:采用动物实验的方法评价自行研制的三嵌段材料PLGA-[ASP-PEG]与化学合成的骨形成蛋白2(BMP2)活性多肽复合物植入大鼠体内异位诱导成骨的能力.方法:成年雄性SD大鼠36只,背部消毒,切开皮肤,分离两侧肌间隙,按实验分为4组,按设计分别植入测试材料.A组:BMP2活性多肽/PLGA-[ASP-PEG]复合物组;B组:BMP2活性多肽/PLGA复合物组;C组:单纯PLGA-[ASP-PEG]组;D组:单纯PLGA组.将上述材料用环氧乙烷处理后植入大鼠背部肌肉中,分别于1周,4周,8周,12周和16周处死,进行植入物大体和组织学观察,并利用CT三维成像观察植入物成骨情况,应用荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)及骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达.结果:组织学观察:A组在8周出现新骨形成;B组在12周出现新骨;C组和D组16周未见新骨形成.CT三维成像:16周时,A、B和C组均见新骨形成,骨块大小A＞B＞C组,D组未见新骨.实时定量PCR:各组均有Col-Ⅰ mRNA和OPN mRNA的表达,A组:Col-Ⅰ的Ct值为(21.67±3.21),OPN的Ct值为(21.72±5.11),与其他3组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:三嵌段材料PLGA-[ASP-PEG]及PLGA具有较轻的组织学反应,生物相容性好;BMP2活性多肽能明显诱导成骨;BMP2活性多肽/PLGA-[ASP-PEG]复合物具有较强的异位诱导成骨能力.     

双膦酸盐对骨形成蛋白诱导骨的作用

目的：研究双膦酸盐对骨形成蛋白（BMP）诱导骨的作用。方法：42只大白鼠背部植入BMP,诱导出异位骨后,将大白鼠分成实验组和对照组。实验组在BMP植入后第3～7周,每周腹腔注射双膦酸盐（YM175）3次, 剂量1 μg·kg^-1·d ^-1。对照组按同样的方式给予等量的生理盐水。在BMP植入第3、4、7和10周,将BMP诱导骨取出,采用显微放射照片（CMR）和HE染色方法观察双膦酸盐对骨形成蛋白诱导骨的作用。结果：BMP诱导骨3周时（即双膦酸盐未投药前）,在BMP植入体周边形成编织骨,大量破骨细胞出现在新生骨组织表面。在4周时,实验组和对照组新生骨组织均向BMP植入体内生长。在10周时,对照组骨细胞变小,实验组可观察到有规律地排列的板层状骨的特征。结论：双膦酸盐对骨形成蛋白诱导骨破骨骨吸收有明显的抑制作用。     

异体脱钙骨基质骨粒骨水泥骨形态发生蛋白复合材料的成骨诱导活性

目的：探讨异体脱钙骨基质（ＤＢＭ）骨粒、骨水泥（ＢＣ）及重组人骨形态发生蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）复合骨制损修复材料成骨诱导活性。方法：小鼠股部股袋内植入复合材料,不同时间分别取材ＨＥ染色观察复合骨制损修复材料的异位诱导成骨活笥;检测不同复合质量比的复合材料的聚合温度。结果：第７日时材料外周即形成间充质组织包膜,并沿材料不规则裂隙向植入材料内部长入间充质组织。第１４日间充质组织继续大量长入且逐渐深     

羟基磷灰石/脱矿骨复合物增高牙槽嵴的实验研究

【目的】观察羟基磷灰石 (HA) /脱矿骨复合物骨膜下植入增高牙槽嵴的成骨反应。【方法】在犬下颌体部及下颌磨牙区无牙颌牙槽骨顶部 ,骨膜下植入羟基磷灰石 /脱矿骨复合物为实验组 ,并设单独羟基磷灰石植入为对照组。经 3周、6周、12周和 2 4周后处死动物 ,取材作大体观察、组织学观察和扫描电镜观察。【结果】实验组术后 3周即见类骨质产生 ,材料和基骨界面开始结合 ;术后 6周材料和基骨大部分结合 ;12～ 2 4周新骨增多 ,相互连接 ,充满羟基磷灰石间隙并与之结合。对照组术后 3周未见新骨形成 ;术后 6周材料与基骨始见结合 ;术后 12～ 2 4周只见新骨从界面少许形成。【结论】骨膜下植入羟基磷灰石 /脱矿骨复合材料较之单纯的羟基磷灰石植入可见较快的新骨形成 ,材料和基骨界面较早结合 ,较多的新骨形成充满羟基磷灰石间隙     

胚胎骨骨诱导活性的实验研究

制备人胎骨全脱钙与部分脱钙骨基质明胶（简称ＢＭＧ），并分别做成颗粒（直径０．５～１ｃｍ）和粉末（直径＜２５０μｍ），同时制备少许未脱钙的胎骨颗粒，植入大鼠双侧后肢的股肌陷窝内，猪骨ＢＭＧ作为对照。通过组织学切片来比较各组植入物的诱导成骨活性。结果显示：（１）胎骨ＢＭＧ成骨过程早且量多，免疫排斥反应低；（２）未脱钙的胚胎骨无诱导成骨活性；（３）猪骨ＢＭＧ有一定的成骨能力，但时间较晚，量少，早期有明显的免疫反应；（４）全脱钙和部分脱钙胎骨的诱导成骨活性接近（Ｐ＞０．０５）；（５）粉末脱钙胎骨ＢＭＧ的诱导成骨活性降低；（６）酒精消毒ＢＭＧ效果可行     

The correlation between immune rejection and osteoinduction of allogeneic bone grafting

Ｂｏｎｅａｌｏｇｒａｆｔｓａｒｅｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ,ａｎｄｔｈｅｉｍｍｕｎｅｒｅｊｅｃｔｉｏｎｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎａｎｄｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｔｈｅｇｒａｆｔｓ．１Ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｂｙｄｅｍ...     

珍珠层/聚乳酸重组人工骨修复动物骨干缺损的实验研究

目的 探讨珍珠层/聚乳酸重组人工骨(NPCB)在体内的生物相容性、降解情况及成骨特点,评价其性能,为进一步的应用提供实验依据。方法 将NPCB随机植入成年新西兰白兔1.5 cm的桡骨缺损内,并设立不植入任何材料的空白对照,观察NPCB植入后动物的局部反应,检测动物术后1周、4周的血钙值,并与术前1天比较;于术后6、8、12、16周取材,作X线、骨矿含量、大体标本及组织形态学观察,分析不同时期组织反应、骨缺损修复及材料降解情况。结果 NPCB植入后无明显的局部不良反应,术后1周、4周血钙值与术前1天相比无明显差异。植入NPCB的骨缺损内骨矿含量在6~12周时升高幅度明显高于空白对照组,但12周后植入NPCB的骨缺损内骨矿含量出现下降。X线检查、大体标本及组织形态学观察显示NPCB的成骨方式主要是骨传导成骨,至术后16周时骨缺损基本修复,NPCB与宿主骨结合紧密,而空白对照骨缺损断端仅有少量骨修复,形成骨不连。NPCB植入后即开始其降解过程,12周以后材料周围出现较多吞噬有材料颗粒的巨噬细胞和多核巨细胞,16周时仍有部分材料未降解吸收。结论 NPCB具备良好的生物相容性和骨传导能力,可以在体内逐渐发生生物降解。     

Diaphyseal defect repair with nacre/polylactic acid composite artificial bone in rabbits]

OBJECTIVE: To evaluate the biocompatibility, degradation and bone formation activity of a new bone substitute for bone grafting, nacre/polylactic acid composite artificial bone (NPCB). METHODS: Radial bone defects 1.5 cm in length were induced in 32 New Zealand rabbits and immediately filled with NPCB or nothing. The animals' local and whole body responses to the implants were observed after the operation, and the serum calcium levels were detected 1 week and 4 weeks postoperatively. Tissue response, new bone formation in the defects and degradation of the implants were evaluated by X-ray, and examination of the bone mineral content (BMC) in the defects and histomorphological analysis were performed after the rabbits were sacrificed. RESULTS: All the rabbits survived the operation and the incisions healed smoothly. No significant difference was noted in the serum calcium level between 1 day before operation, 1 week and 4 weeks postoperation. BMC in the defects of the rabbits with NPCB grafts increased more rapidly than that in the control group 6-12 weeks after the operation and began to decrease after 12 weeks. Gross, X-ray and histological observations revealed that NPCB possessed osteoconductive activity and new bone ingrowth in the implants was found during the whole experiment. At 16 weeks, the defects grafts were almost completely repaired with NPCB while the defects in the control group remained nonunion. Biodegradation of the implants was observed early at 6 weeks, with numerous macrophage and multinuclear giant cells containing phagocytosed NPCB particles around the implants at 12 weeks, but NPCB remnants were still visible at 16 weeks. CONCLUSION: As a bone substitute, NPCB possesses good biocompatibility, biodegradability and osteoconductive activity.     

XDBM生物相容性以及促进大鼠桡骨缺损修复

目的探讨异种脱钙骨基质（Xenogeneic Demineralized Bone Matrix,XDBM）的体内、外生物相容性以及促进骨缺损修复愈合,为临床应用提供实验依据。方法新生sD颅盖骨成骨细胞培养。取人及大鼠松质骨制备人（异种）及大鼠（同种）脱钙骨基质;观察成骨细胞在XDBM表面的黏附、增殖;行一侧大鼠骶棘肌肌袋内植入异种脱钙骨基质（实验组）,对侧植入同种脱钙骨基质（对照组）。分别于术后2,4,8周取材。另取8周龄大鼠造桡骨中段5mm节段性骨缺损模型。分为异种脱钙骨组（实验组）及同种脱钙骨组（对照组）。分别于2、4、8、12周处死动物并取材。大体、组织学观察及CD34免疫组化染色计数微血管密度。结果成骨细胞在XDBM贴壁生长、增殖、分泌骨基质;XDBM植入肌袋内各时间点均未见炎症、坏死及排斥。桡骨缺损区域微血管密度增加,新骨形成最终缺损区被新骨代替。结论XDBM具有良好的生物相容性、可降解性及良好骨传导及骨诱导作用。当植入大鼠桡骨缺损后具有促进骨再生的能力,有望成为理想的骨组织工程支架材料。     

去蛋白牛脱钙骨基质及其血小板复合物移植的组织学观察

将牛股骨干皮质骨及人和兔血小板制成复合物移植于兔体内，通过X线及组织学观察植骨的成骨效应和宿主免疫反应，评价此种材料及血小板复合物临床应用的可能性、结果显示去蛋白牛脱钙骨基质免疫反应大，降解速度缓慢，无骨传导及诱导作用；去蛋白牛脱钙骨基质能刺激成纤维细胞增殖分化，转化为骨组织．复合同种异体或异种血小板，不能促进成骨，可加重免疫反应．     

环孢素A对脱钙骨基质植入物钙离子的影响

目的　探讨环孢素A对脱钙骨基质植入物钙离子的影响。方法　用 40只新西兰大白兔 ,分 4组 ,每只植入 6块脱钙骨制备物 (同种或异种脱钙骨 )。然后 ,分别肌注含环孢素A的实验液或对照液。记录植入物钙离子含量。结果　第 4周时 ,同种脱钙骨实验组植入物的钙含量较对照组增加了 3 4% ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。异种脱钙骨实验组植入物的钙含量较对照组增加了 3倍 ,有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　环孢素A能使同种脱钙骨植入物钙含量的峰值提前 1周出现 ,能增加异种脱钙骨植入物的钙含量。     

重组人骨形成蛋白-2和珊瑚复合移植的动物实验研究

目的 :评价重组人骨形成蛋白 - 2 ( rh BMP- 2 ) /珊瑚复合人工骨的骨诱导活性和骨修复能力。　 方法 :rh BMP- 2和珊瑚以一定的方式复合后 ,植入小鼠股部肌袋和兔颅骨标准大小缺损 ,以单纯珊瑚植入作对照。术后不同时间取材 ,通过组织学方法检测其骨诱导活性和骨修复能力。　结果 :复合人工骨植入小鼠肌袋 1周诱导软骨形成 ;3周形成编织骨 ;6周形成含骨髓的板层骨 ,同时珊瑚被部分降解吸收 ;复合人工骨植入兔颅骨缺损后 ,以引导成骨和诱导成骨双重机理完成骨修复过程。术后 12周 ,植入物完全被成熟的骨组织取代 ,其骨修复效果明显优于单纯的珊瑚。　 结论 :此复合人工骨具有骨传导和骨诱导活性 ,骨修复能力较强 ,是一种比较理想的新型生物性植骨材料     

冷冻干燥60钴灭菌表面脱钙异体骨修复种植周骨缺损的临床应用

目的 :探讨种植周骨缺损修复的骨移植治疗新途径 ,提高种植义齿的成功率。方法 :冷冻干燥60 钴灭菌表面脱钙异体骨 ,修复 8例种植区骨缺损患者 ,观察种植体动度、GI及X线改变等临床指标。结果 :随访 6～ 2 4月 ,8例植骨手术均获成功 ,无一例种植体周围炎发生 ,种植体初期稳定性良好 ,第 1年种植体周牙槽嵴顶吸收 1～ 2mm。结论 :冷冻干燥60 钴灭菌表面脱钙异体骨 ,既有一定的力学支持能力 ,又有骨诱导作用 ,且可塑性强 ,适用于修复不同形态的种植区骨缺损 ,并能室温保藏 ,携带方便 ,易于临床应用。     

实验性骨质疏松对种植体骨愈合影响的骨计量学研究

目的:研究骨质疏松时种植体周围骨愈合的变化。方法:选用32周龄雌性SD大鼠随机分成对照组和实验组;实验组行双侧卵巢切除术,而对照组接受假手术。术后12周于大鼠胫骨处植入纯钛螺纹状种植体,并于种植术后4周及12周分两批处死大鼠;标本制作带种植体的不脱钙切片,行组织学观察及骨计量学测量。结果:实验组结合骨板宽度、骨小梁直径、松质骨区种植体-骨接触率及松质骨区骨量比对照组明显降低,差异有显著性。结论:实验性骨质疏松可阻碍种植体与骨组织的结合,使种植体周围骨小梁减少,结合骨板及骨小梁变得菲薄,从而会降低骨组织对种植体的支持。