冰冻复型电镜技术对豚鼠钩端螺旋体病肺弥漫性出血肺微血管的研究

冰冻复型电镜技术用于钩端螺旋体病肺弥漫性出血动物模型的肺微血管研究是一种新尝试。本文结果表明,肺微血管始终无结构上的破损和断裂,却以内皮细胞膜镶嵌蛋白的数量和分布异常、内皮细胞出现大量细胞孔道和内皮连接开启为特征,并与肺弥漫性出血的发展密切相关,结果揭示漏出性出血(Dia-pedesis)与肺微血管内皮细胞的细胞膜超微病变存在着内在联系。     

电镜Ag-NOR染色技术

核仁组成区嗜银蛋白(Ag-NOR)染色原来是细胞生物学研究中的一项技术,但最近国外不少肿瘤病理学家已把Ag-NOR用于恶性肿瘤的鉴别诊断及分型、分级。目前,此项技术主要用于光镜水平,电镜Ag-NOR染色技术报道十分少见。我们参考国外Ploton等的方法,首次在国内开展电镜Ag-NOR色技术,并在实际应用中进行了一些改进,现介绍如下:     

电镜取材的固定技术

电镜技术已广泛应用于医学及生物中，从而使电镜技术也越来越显得非常重要。现在很多人为了科研及疑难病例诊断使用子电镜技术，但对电镜技术了解甚少，并且不知道对电镜标本如何取材及固定，甚至有人干脆让我们自己去取，从而浪费时间。为了减少不必要的麻烦，通过几年来...     

弹性纤维的电镜染色技术

弹性纤维(elastic fiber)在许多疾病中常发生异常改变。由于其在普通透射电镜下主要表现为低电子密度透亮物质,故观察不够满意。许多学者曾试用多种方法增加其电子密度,但目前被公认和推广的是 Kajika-wa 提出的电镜染色法。我们对此法作了一些改进,获得满意的结果,现介绍如下:材料和方法采用肺组织的新鲜标本。标本离体后,尽快用锐利刀片将肺组织切成0.5～1mm~3的小块,置4%戊二醛固定液     

冰冻切片制作技术的改进

冰冻切片是利用低温使组织迅速冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法.具有快速、方便的特点,因其不经过脱水和透明步骤,组织没有收缩,易保持生活的原有形态,尤其在免疫组织化学染色中,能较好的保存细胞抗原的免疫性,所以是保存脂肪组织、神经组织特别是酶的活性十分理想的切片方法,因此它在现代免疫荧光诊断和免疫组织化学中也很重要.但由于制片过程中,许多因素影响切片的质量,并进一步影响实验的观察和分析.现将在冰冻切片技术过程中的几点体会总结如下.     

冰冻切片制作技术的探讨

冰冻切片技术借助低温使手术中的新鲜标本快速冷冻,达到一定的硬度后进行切片.从而来解决手术标本的诊断问题,决定手术的范围及手术的方法.但由于多种因素影响冰冻切片的质量,从而影响病理诊断的准确性.可见,快速制作一张优质的冰冻切片是非常重要的.经过多年实践,从标本取材、速冻、切片、固定、染色到封片等步骤着手,摸索出一些提高冰冻切片质量的可行方法.     

手术中的冰冻切片技术

手术中冰冻切片病理诊断对决定手术方案起着关键的作用,而冰冻切片的质量对做出准确的病理诊断极为重要。我科用恒温冷冻切片机做冰冻切片1万余例,现将不同组织的冰冻切片方法体会总结如下。     

豚鼠内耳冰冻切片技术

内耳深埋于颞骨岩部,其内部和周围空隙间充满淋巴液。因此,进行内耳切片首先要克服坚硬的迷路骨性障碍和选用合适的包埋剂替代淋巴液来支持膜迷路,以免切片时破坏内耳的结构。我们在常规冰冻切片技术的基础上,应用豚鼠全内耳膜迷路分离取材术,从颞骨中将膜迷路取出,或将整个颞骨浸入盐酸溶液中脱钙的方法,来克服骨性障碍;采用低温下可以凝固的明胶溶液作为膜迷路的支持包埋剂,进行内耳冰冻切片。经4年多实践,我们认为此法具有比火棉胶制片法切片较薄、制片周期短、可以任意选择内耳终器切片角度、内耳结构保持完好等     

肾小球诊断样品由光镜的冰冻切片补做电镜制样的方法

现代肾脏病学已普遍将光镜、电镜诊断作为肾小球疾病诊断的常规 ,尤其电镜检查配合临床以明确诊断十分重要。然而 ,有时因为各种原因在电镜制备的肾组织穿刺 (肾穿 )标本中找不到肾小球 ,但临床又非常需要电镜的观察结果。目前普遍采用光镜常规石蜡包埋的肾小球组织经脱蜡后改做电镜制样进行补救 ,但标本因固定和脱蜡等因素 ,效果并不太理想。我们通过摸索和比较几种补救措施 ,现介绍一种用冰冻切片的肾小球经光镜检测后再进行电镜制样的方法。1　材料和方法标本取自临床肾穿活体组织。先取一块干净纱布 ,用0 .9%生理盐水浸湿 ,穿刺的肾脏样…     

改良的免疫电镜胶体金技术

过碘酸结合乙二胺四乙酸(ＥＤＴＡ)代替双氧水(Ｈ2Ｏ2)和氚核(Ｔｒｉｔｏｎ)Ｘ-100应用于免疫电镜超薄切片的处理,改善了免疫胶体金标记的条件,提高了免疫胶体金标记技术的敏感性和特异性。利用改良的方法对人肺癌细胞内谷胱甘肽硫转移酶胎盘型(ＧＳＴｐｉ)和小鼠子宫内膜细胞内碱性成纤维细胞生长因子(ｂＦＧＦ)、层粘连蛋白(ＬＮ)和纤维粘连蛋白(ＦＮ)分别进行免疫金标记观察,结果良好。1　材料与方法11　材料　人肺癌组织由外科手术切除提供。小鼠阳性模型组织由本室提供。兔抗人ＧＳＴｐｉ抗体,兔抗小鼠ＬＮ抗体、兔抗小鼠ＦＮ抗体和羊…     

神经组织冰冻连续切片技术的改进

本文介绍了我们实践中摸索和改进的两机(冰冻机与滑行切片机)联合切片法及其与温度、电压、组织块的大小等因素的相互关系。该方法具有设备简单、操作方便、经济实用、速度快,工效高、能保持切片的连续性与完整性,以及对组织结构保存良好等优点,特别适于大块组织的连续切片及大量切片时应用。     

微小组织冰冻制片技术的改进

<正> 随着纤维内镜检查及各种内镜针吸等检查广泛开展,微小组织逐渐增多,目前多有用石蜡切片法、HE染色在光镜下观察并做出病理诊断。按照上述常规切片法和染色法,需时间较长,不能急时诊断。为满足病理快速和科研需要,提高微小组织冰冻切片的质量和染色速度,我们采用琼脂包埋微小组织进行冻切片,分别进行组织化学、免疫荧光染色、免疫酶染色和快速染色法弥补了微小组织冰冻制片之不足,现介绍如下。     

新鲜组织冰冻切片技术改进

新鲜组织冰冻切片技术改进杨坤李静波孔凡贵北满特钢职工医院病理科（１６１０４１）新鲜组织冰冻切片的制备以往采用“先冻后切”法，即首先以最低温度快速冷冻组织，至变白变硬进行切削，而后再使组织升温至适宜温度进行切片。这样不仅延长了冰冻时间，而且往往因过度冷...     

毛囊定位冰冻切片技术探讨

目的　探索毛囊完整纵剖面定位冰冻切片技术。方法　根据毛发生长方向观察判断毛囊生长纵剖面 ,选择适当的切片温度 ,匀速切片。结果　能成功地制作完整的皮肤及毛囊纵剖面冰冻切片。结论本方法操作简便 ,要求条件低 ,易于掌握 ,值得推广应用。     

酶标记免疫电镜技术的应用

酶标记免疫电镜技术(E-IEM)是在标记抗体技术和组织化学的基础上发展起来的一项先进的免疫化学测定技术,但对这一方法的介绍和研究在我区尚属空白。本文对 E-IEM 技术应用于动物病毒抗原和肿瘤抗原的定位进行探讨,并对制样条件的选择作了改进。1 材料和方法动物病毒选用猪瘟病毒和口蹄疫病毒,(均由内蒙古畜牧科学院兽医研究所提供)用 IB-RS-2系猪肾传代细胞按常规方法培养,肿瘤组织,选     

电镜常规样品制备技术的改进

常规透射电镜制样(超薄切片术)是电镜术中最繁重而又重要的工作,是电镜细胞化学等特殊制样技术的基础,制样效果将直接影响超微结构研究结果的可靠性和重复性。因此,我室近年来更注意在现有条件下改进和提高常规技术,现总结如下。 1.前固定