人发角蛋白人工腱肌肉植入的组织相容性观察

背景：人发角蛋白人工腱(human hair keratin artificial tendon，HHKAT)材料是国内研制的新型生物可降解材料。目的：研究HHKAT材料在体内的降解及其对周围组织的影响。设计：完全随机双盲实验对照研究。地点和对象：在解放军昆明总医院动物实验基地，选用日本大耳白兔(普通级)12只，体质量(2．5&;#177;0．5)kg，雄性，标准饲料单笼喂养。干预：将12只兔随机分组，在脊旁肌埋藏处理30min和处理15min的人发角蛋白人工腱试件，用正常人发作对照。分别在2，6，12，24周取材。主要观察指标：对不同时期的材料进行大体及组织学观察。结果：实验中发现不同程度处理的HHKAT其降解速度不同，其中降解最快的处理30min组在24周时已完全吸收，而处理15min组在24周时只有部分降解，对照组未见降解。HHKAT及人发在肌肉组织内无明显的炎症排斥反应，随着HHKAT材料的降解吸收，其周围的组织反应逐渐降低。结论：研究表明人发角蛋白人工腱材料在体内能够被降解吸收，可根据不同的需要调节其降解速度，具有良好的生物相容性。     

人发角蛋白人工腱及其组分的生物力学特性

背景人发角蛋白人工腱植入肌腱缺损部位后,可被机体降解吸收,同时诱导机体形成新的自体腱.测定人发角蛋白人工腱及其组分的主要生物力学指标,以便根据人体不同功能部位需要选用合适的型号,使其具有人体进行功能活动所需要的拉应力.目的测定人发角蛋白人工腱及其各组分材料的主要生物力学指标.设计以人发角蛋白人工腱为观察对象,观察性研究.单位一所军医大学的生物化学与分子生物学教研室、全军医学生物力学重点实验室,组织学与胚胎学教研室和佛山市康兴医学科技有限公司.材料实验于2001-10在解放军第一军医大学全军医学生物力学重点实验室进行测定.人发角蛋白人工腱产品原料采自无地方流行性疾病、无环境污染的偏远山区,无染发、无烫发的健康女性黑发.人发经不同程度的生物力学处理获得3种在体内吸收速度递增的组分,Z,B和F.Z,B,F 3种组分以一定的比例混合编结成各种型号规格的人发角蛋白人工腱.组分有3种型号规格,分别为Z3.0-20,B3.0-20,F3.0-20.人发角蛋白人工腱有6种型号规格ZBF1.0-20,ZBF1.5-20,ZBF3.0-20,ZBF6.0-20,ZBF9.0-20,ZBF12.0-20.方法将人发角蛋白人工腱或其组分材料的两端固定于MTS 858生物力学试验机上,进行断裂拉力和拉应力指标的测定.主要观察指标各种规格型号的人发角蛋白人工腱及其组分材料的断裂拉力和拉应力.结果Z3.0-20,B3.0-20,F3.0-20组断裂拉力分别为(211.8±12.1,178.8±8.2,151.3±6.7)N,拉应力分别为(71.3±3.9,59.9±2.7,50.3±2.3)MPa,ZBF1.0-20,ZBF1.5-20,ZBF3.0-20,ZBF6.0-20,ZBF9.0-20,ZBF12.0-20各组断裂拉力分别为(75.0±3.0,107.8±4.2,194.1±5.3,375.9±12.7,508.2±21.3,670.8±25.4)N,拉应力分别为(75.0±3.0,72.0±2.8,65.1±1.8,62.9±2.2,56.3±2.4,55.8±1.5)MPa.结论人发角蛋白人工腱的断裂拉力随横截面积增大而增大,拉应力随横截面积增大而略有减少.随着对人发处理程度的加剧,在体内被降解吸收的速度加快,相应组分的断裂拉力、拉应力减小.     

人发角蛋白人工腱诱导自生腱形成过程胶原Ⅰ型mRNA的表达

背景大量的动物实验和临床应用已经证实,人发角蛋白(human hair keratin,HHK)人工腱能诱导机体形成自生腱,自生腱形成的过程实质上主要是胶原Ⅰ型的合成、分泌和组装的过程.目的探讨胶原Ⅰ型mRNA在人发角蛋白人工腱诱导自生腱组织形成过程中的表达.设计以实验动物为观察对象,完全随机对照实验.单位南方医科大学组织学与胚胎学教研室和生物化学与分子生物学教研室.材料实验于2003-05/2004-09在解放军第一军医大学实验动物中心完成.实验动物中心提供实验用新西兰大白兔33只,体质量2.0～2.5 kg,雌雄不限.随机分成实验3,6,9,12,16,20周组,阴性对照9,20周组和正常对照组,其中实验3,6周组和正常对照组每组3只,其余每组4只.由生物化学与分子生物学教研室提供的人发角蛋白人工腱为经一系列生物化学处理的人发,按降解速度不同可分为快速(F)、中速(B)和慢速(Z)3个不同降解组分.人发角蛋白人工腱是由快速,中速和慢速这3种组分按433的比例混合编制而成.方法①实验组行双侧跟腱手术,切断跟腱长1 0～2.0 cm,两断端与人发角蛋白人工腱缝合,缝合腱膜,皮肤一期缝合.②阴性对照组为离断兔肌腱1.0～2.0 cm,断裂肌腱不进行连接,而缝合腱膜和皮肤.③正常对照组为正常兔肌腱.实验组分别于第3,6,9,12,16,20周取材,阴性对照组分别于第9,20周取材.通过反转录聚合酶链反应技术测量各时期胶原Ⅰ型mRNA表达.主要观察指标正常肌腱与人发角蛋白人工腱各个时期诱导形成的自生腱中胶原Ⅰ型mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)mRNA表达的比值.结果33只大鼠全部进入结果分析.①正常肌腱组织中Ⅰ型胶原mR-NA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达的比值为0.96±0.02.②阴性对照组9,20周组取材发现,两断端肌腱未连接,并且向两侧回缩.③实验组人发角蛋白人工腱植入后诱导形成的自生腱中Ⅰ型胶原mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达在第3周的已经出现,第3～6周为急骤上升,第6周到达高峰,第9～20周表达量呈稳定状态.实验组第6周表达量明显高于正常对照组(F=6.254,P＜0.05),实验组其余各周表达量也明显高于正常对照组(F=1.258～1.987,P＞0.05).结论人发角蛋白人工腱植入后,自生腱的形成主要是腱细胞增殖活化,合成并分泌胶原Ⅰ型蛋白,完成肌腱的修复.     

人发角蛋白人工腱材料对人胚腱细胞的影响

目的:研究在体外条件下人发角蛋白人工腱材料(HHKAT)对人胚腱细胞(HETC)的生物学作用。方法:将浸提液分为3组(100%,50%,10%),阳性对照用6.4g/L苯酚,阴性对照用F12培养液。在体外培养的HETC中加入不同浓度的HHKAT浸出液(100%,50%,10%),培养1,3,5,7d,通过倒置显微镜、MTT比色法、LDH滤出法、细胞微量蛋白测定等方法,了解HHKAT浸提液对人胚腱细胞形态、代谢、细胞膜、增殖的影响。结果:不同浓度的HHKAT浸出液对HETC的形态、代谢、细胞膜、细胞增殖均无不良影响。各浓度组HHKAT浸提液的细胞毒性级均在1级以下,符合ISO对生物材料的要求。结论:HHKAT是一种具有良好生物相容性的医用生物材料。     

人发角蛋白人工腱材料对人胚腱细胞的影响

目的：研究在体外条件下人发角蛋白人工腱材料(HHKAT)对人胚腱细胞(HETC)的生物学作用。方法：将浸提液分为3组(100％，50％，10％)，阳性对照用6．4g／L苯酚，阴性对照用F12培养液。在体外培养的HETC中加入不同浓度的HHKAT浸出液(100％，50％，10％)，培养1，3，5，7d，通过倒置显微镜、MTT比色法、LDH滤出法、细胞微量蛋白测定等方法，了解HHKAT浸提液对人胚腱细胞形态、代谢、细胞膜、增殖的影响。结果：不同浓度的HHKAT浸出液对HETC的形态、代谢、细胞膜、细胞增殖均无不良影响。各浓度组HHKAT浸提液的细胞毒性级均在1级以下，符合ISO对生物材料的要求。结论：HHKAT是一种具有良好生物相容性的医用生物材料。     

人发角蛋白人工腱诱导自生腱形成过程胶原Ⅰ型mRNA的表达

背景：大量的动物实验和临床应用已经证实，人发角蛋白(human hair keratin，HHK)人工腱能诱导机体形成自生腱，自生腱形成的过程实质上主要是胶原Ⅰ型的合成、分泌和组装的过程。目的：探讨胶原Ⅰ型mRNA在人发角蛋白人工腱诱导自生腱组织形成过程中的表达。设计：以实验动物为观察对象，完全随机对照实验。单位：南方医科大学组织学与胚胎学教研室和生物化学与分子生物学教研室。材料：实验于2003-05／2004-09在解放军第一军医大学实验动物中心完成。实验动物中心提供实验用新西兰大白兔33只，体质量2.0～2．5kg,雌雄不限。随机分成实验3，6，9，12，16，20周组，阴性对照9，20周组和正常对照组，其中实验3，6周组和正常对照组每组3只，其余每组4只。由生物化学与分子生物学教研室提供的人发角蛋白人工腱为经-系列生物化学处理的人发，按降解速度不同可分为快速(F)、中速(B)和慢速(Z)3个不同降解组分。人发角蛋白人工腱是由快速，中速和慢速这3种组分按4：3：3的比例混合编制而成。方法：①实验组行双侧跟腱手术，切断跟腱长1．0～2．0cm，两断端与人发角蛋白人工腱缝合，缝合腱膜，皮肤一期缝合。②阴性对照组为离断兔肌腱1．0～2．0cm，断裂肌腱不进行连接，而缝合腱膜和皮肤。③正常对照组为正常兔肌腱。实验组分别于第3，6，9，12，16，20周取材．阴性对照组分别于第9，20周取材。通过反转录聚合酶链反应技术测量各时期胶原Ⅰ型mRNA表达。主要观察指标：正常肌腱与人发角蛋白人工腱各个时期诱导形成的自生腱中胶原Ⅰ型mRNA／甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)mRNA表达的比值。结果：33只大鼠全部进人结果分析。①正常肌腱组织中Ⅰ型胶原mRNA／甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达的比值为0．96&;#177;0．02。②阴性对照组9，20周组取材发现，两断端肌腱未连接，并且向两侧回缩。③实验组人发角蛋白人工腱植入后诱导形成的自生腱中Ⅰ型胶原mRNA／甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达在第3周的已经出现，第3～6周为急骤上升，第6周到达高峰，第9～20周表达量呈稳定状态。实验组第6周表达量明显高于正常对照组(F=6．254，P&;lt;0．05)．实验组其余各周表达量也明显高于正常对照组(F=1．258～1．987．P&;gt;0．05)。结论：人发角蛋白人工腱植入后，自生腱的形成主要是腱细胞增殖活化，合成并分泌胶原Ⅰ型蛋白，完成肌腱的修复。     

人发角蛋白人工腱及其组分的生物力学特性

背景：人发角蛋白人工腱植入肌腱缺损部位后，可被机体降解吸收，同时诱导机体形成新的自体腱。测定人发角蛋白人工腱及其组分的主要生物力学指标，以便根据人体不同功能部位需要选用合适的型号，使其具有人体进行功能活动所需要的拉应力。目的：测定人发角蛋白人工腱及其各组分材料的主要生物力学指标。设计：以人发角蛋白人工腱为观察对象，观察性研究。单位：一所军医大学的生物化学与分子生物学教研室．全军医学生物力学重点实验室，组织学与胚胎学教研室和佛山市康兴医学科技有限公司。材料：实验于2001—10在解放军第一军医大学全军医学生物力学重点实验室进行测定。人发角蛋白人工腱产品原料采自无地方流行性疾病、无环境污染的偏远山区，无染发、无烫发的健康女性黑发。人发经不同程度的生物力学处理获得3种在体内吸收速度递增的组分，Z，B和F。Z，B，F3种组分以一定的比例混合编结成各种型号规格的人发角蛋白人工腱。组分有3种型号规格，分别为Z3．0．20，B3．0-20，F3．0-20。人发角蛋白人工腱有6种型号规格：ZBF1．0-20，ZBF1．5-20，ZBF3．0-20，ZBF6．0-20，ZBF9．0-20，ZBF12．0-20。方法：将人发角蛋白人工腱或其组分材料的两端固定于MTS858生物力学试验机上，进行断裂拉力和拉应力指标的测定。主要观察指标：各种规格型号的人发角蛋白人工腱及其组分材料的断裂拉力和拉应力。结果：Z3．0-20，B3．0-20，F3．0-20组断裂拉力分别为(211．8&;#177;12．1，178．8&;#177;8．2，151．3&;#177;6．7)N，拉应力分别为(71．3&;#177;3．9，59．9&;#177;2．7，50．3&;#177;2．3)MPa，ZBF1．0-20，ZBF1．5-20，ZBF3．0-20，ZBF6．0-20，ZBD9．0-20，ZBF12．0—20各组断裂拉力分别为(75．0&;#177;3．0，107．8&;#177;4．2，194．1&;#177;5．3，375．9&;#177;12．7，508．2&;#177;21．3，670．8&;#177;25．4)N，拉应力分另U为(75．0&;#177;3．0，72．0&;#177;2．8，65．1&;#177;1．8，62．9&;#177;2．2，56．3&;#177;2．4，55．8&;#177;1．5)MPa．结论：人发角蛋白人工腱的断裂拉力随横截面积增大而增大，拉应力随横截面积增大而略有减少。随着对人发处理程度的加剧，在体内被降解吸收的速度加快，相应组分的断裂拉力．拉应力减小。     

人发角蛋白非神经移植材料的解剖学特点及组织相容性

背景:人发角蛋白非神经移植材料是一种生物性制晶,经特殊的牛物化学方法处理后具有抗原性小、可被吸收和可刺激神经纤维生长等优点,预计其效果较其他非神经移植材料佳.目的:观察人发角蛋白非神经移植材料的解剖学特点和组织相容性,及其对周围神经缺损的修复效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-11/2008-06在青岛大学医学院附属医院动物中心实验室完成.材料:人发角蛋白非神经移植材料是以经特殊控制性生物化学方法处理后的人发为基质,外包一层生物膜构成的复合体,经特殊的生物化学方法处理后具有抗原性小,可被吸收和可刺激神经纤维生长等优点.方法:Wistar大鼠18只随机分成3组,将其坐骨神经切取10 mm,分别用人发角蛋白非神经移植材料、大白鼠自体骨骼肌和未经特殊处理的人发连接神经两断端.主要观察指标:术后8,12,24周进行组织形念及解削学观察.结果:术后第8周非神经移植材料组坐骨神经两断端之间出现白色新生组织;第12周白色新生组织出现于移植材料腔隙;第24周移植材料腔隙被充满,人发被初步降解,光镜下可见人发周围有大量呈无序排列的再生神经纤维,透射电镜下可见人发周围许旺细胞增殖并形成髓鞘.肌肉组和普通人发组未出现上述变化.结论:人发角蛋白非神经移植材料的组织相容性好,并可诱导神经纤维再生.     

人发角蛋白复合聚乳酸棒的力学强度及体内降解

背景：生物可降解内固定材料已应用于临床，但目前仅用于非承重骨的内固定。研究一种具有较高的初始力学强度和早期降解速度缓慢，并能用于承重骨内固定的器材是临床所需要的。目的：对自行研究的人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒进行初始机械力学强度测试和动物体内降解观察。设计：重复测量设计。单位：南方医科大学珠江医院骨科中心，南方医科大学人体解剖学教研室。材料：实验于2002-09／2003-10在南方医科大学完成。选择54只成年SD大鼠。方法：①利用MTS-858 Mini Bionix型生物力学测试机分别对20根人发角蛋白复合聚乳酸棒的剪切强度、弯曲强度和弯曲模量进行测试，了解人发角蛋白复合聚乳酸骨科内固定棒的初始机械力学性能。②108个人发角蛋白复合聚乳酸试件随机植入54只SD大鼠双侧脊旁皮下组织中，分别于术后1，2，4，8，12，16，20，24，28周取出（每个时间点6只大鼠），测量重量损失，了解人发角蛋白复合聚乳酸在SD大鼠体内的降解情况。主要观察指标：①人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒的力学强度。②人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒动物体内降解情况。结果：54只大鼠均进入结果分析。①人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒具有良好的初始机械力学强度，其剪切强度为241MPa，弯曲强度为358MPa，弯曲模量为13GPa。②人发角蛋白复合聚乳酸在SD大鼠体内可以良好的降解，早期降解较慢，而晚期障解较快。结论：人发角蛋白复合聚乳酸骨科内固定棒具有良好的初始力学强度，且在体内可以良好的降解。     

人发角蛋白复合聚乳酸棒的力学强度及体内降解

背景:生物可降解内固定材料已应用于临床,但目前仅用于非承重骨的内固定。研究一种具有较高的初始力学强度和早期降解速度缓慢,并能用于承重骨内固定的器材是临床所需要的。目的:对自行研究的人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒进行初始机械力学强度测试和动物体内降解观察。设计:重复测量设计。单位:南方医科大学珠江医院骨科中心,南方医科大学人体解剖学教研室。材料:实验于2002-09/2003-10在南方医科大学完成。选择54只成年SD大鼠。方法:①利用MTS-858MiniBionix型生物力学测试机分别对20根人发角蛋白复合聚乳酸棒的剪切强度、弯曲强度和弯曲模量进行测试,了解人发角蛋白复合聚乳酸骨科内固定棒的初始机械力学性能。②108个人发角蛋白复合聚乳酸试件随机植入54只SD大鼠双侧脊旁皮下组织中,分别于术后1,2,4,8,12,16,20,24,28周取出(每个时间点6只大鼠),测量重量损失,了解人发角蛋白复合聚乳酸在SD大鼠体内的降解情况。主要观察指标:①人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒的力学强度。②人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒动物体内降解情况。结果:54只大鼠均进入结果分析。①人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒具有良好的初始机械力学强度,其剪切强度为241MPa,弯曲强度为358MPa,弯曲模量为13GPa。②人发角蛋白复合聚乳酸在SD大鼠体内可以良好的降解,早期降解较慢,而晚期降解较快。结论:人发角蛋白复合聚乳酸骨科内固定棒具有良好的初始力学强度,且在体内可以良好的降解。     

不同窒息时间对心搏骤停家兔心肺复苏后多器官功能障碍发生的影响

目的 探讨不同窒息时间对心搏骤停家兔心肺复苏(CPR)后多器官功能障碍形成的影响,为后续研究建立一种CPR后多器官功能障碍综合征(CPR-MODS)的动物模型提供可行性依据.方法 采用窒息法致家兔心搏骤停,将30只家兔按随机数字表法分成窒息7 min组和窒息8 min组,每组15只.在CPR自主循环恢复(ROSC)后,观察两组家兔ROSC率、不同时间点死亡率和全身炎症反应综合征(SIRS)发生率;同时检测两组家兔复苏前及ROSC后12、24、48 h血清肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙氨酸转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、血糖(Glu)水平及动脉血氧分压(PaO2);并计算CPR-MODS的发生率.结果 窒息7 min组CPR时间(s)明显短于窒息8 min组(147.60±22.09比193.08±23.07,P<0.01).窒息7 min组和窒息8 min组ROSC率分别为100.00%和86.67%,差异无统计学意义;两组家兔ROSC后存活24 h以上MODS发生率均为100.00%.窒息7 min组ROSC后6 h死亡率明显低于窒息8 min组(6.67%比46.67%,P<0.05);至48 h时窒息8 min组动物全部死亡.两组家兔ROSC后SIRS发生率均为100.00%.与窒息前比较,两组家兔ROSC后12 h即有TNF-a(ng/L)、CK-MB(U/L)明显升高(TNF-a:窒息7 min组100.71±20.43比49.13±8.64,窒息8 min组118.09±21.90比48.48±6.70;CK-MB:窒息7 min组786.88±211.84比468.20±149.45,窒息8 min组894.88±248.80比462.11±115.15,均P<0.05);ROSC后24 h ALT(U/L)、Glu(mmol/L)明显升高(ALT:窒息7 min组174.25±36.28比50.27±9.37,窒息8 min组205.50±10.61比51.13±10.37;Glu:窒息7 min组11.21±1.14比5.59±1.10,窒息8 min组11.55±0.35比6.41±1.23,均P<0.05);Cr(μmol/L)在窒息8 min组于ROSC 12 h即明显升高(98.83±16.70比65.93±13.81),窒息7 min组于ROSC 24 h明显升高(144.25±41.64比67.71±16.47,均P<0.05);两组PaO2均于ROSC 12 h明显升高,于24 h明显下降.结论 选择窒息7 min更适合建立家兔心搏骤停模型,为后续进一步建立CPR-MODS模型提供了可能性和可行性.

Abstract：

Objective To explore the effects of different asphyxia time on the reproduction of multiply organ dysfunction syndrome in rabbit after cardiopulmonary resuscitation (CPR-MODS) for cardiac arrest,in order to provide a method to reproduce an animal model of CPR-MODS for further research of cardiopulmonary resuscitation (CPR).Methods The rabbit cardiac arrest was caused by asphyxia as a result of clamping the trachea.Thirty rabbits were divided into 7-minute asphyxia group and 8-minute asphyxia group by means of random number table with 15 rabbits in each group.The rate of resumption of spontaneous circulation(ROSC),the mortality at different time points and the occurrence incidence of systemic inflammatory response syndrome (SIRS) of two groups were observed after CPR and the ROSC.The levels of serum tumor necrosis factor-a (TNF-a),myocardial MB-isoenzyme of creatine kinase (CK-MB),alanine aminotransferase (ALT),creatinine (Cr),glucose (Glu) and arterial partial pressure of oxygen (PaO2) before resuscitation and 12,24 and 48 hours after ROSC were measured simultaneously in the two groups.The incidence of CPR-MODS was calculated.Results The CPR time (seconds) in 7-minute asphyxia group was significantly shorter than that in 8-minute asphyxia group(147.60±22.09 vs.193.08±23.07,P<0.01).The ROSC rate of 7-minute asphyxia group and 8-minute asphyxia group was 100.00% and 86.67%,respectively,and there was no significant difference.The incidence of MODS in the rabbits surviving more than 24 hours after ROSC was 1 00% in both groups.The mortality at 6 hours after ROSC in 7-minute asphyxia group was remarkably lower than that of 8-minute asphyxia group(6.67% vs.46.67%,P<0.05).All the rabbits in 8-minute asphyxia group died at 48 hours.The incidence of SIRS after ROSC was 100% in both groups.Compared with that before asphyxiation,the 1evel of serum TNF-a(ng/L)as well as CK-MB(U/L) increased significantly at 12 hours after ROSC in both groups(TNF-a in 7-minute asphyxia group:100.71±20.43 vs.49.13±8.64,in 8-minute asphyxia group:118.09±21.90 vs.48.48±6.70;CK-MB in 7-minute asphyxia group:786.88±211.84 vs.468.20±149.45,in 8-minute asphyxia group:894.88±248.80 vs.462.11±115.15,all P<0.05).There was a significant elevation of ALT (U/L) and Glu (mmol/L) at 24 hours after ROSC (ALT in 7-minute asphyxia group:174.25±36.28 vs.50.27±9.37,in 8-minute asphyxia group:205.50±10.61 vs.51.13±10.37;Glu in 7-minute asphyxia group:11.21±1.14 vs.5.59±1.10,in 8-minute asphyxia group:11.55±0.35 vs.6.41±1.23,all P<0.05).Cr(μmol/L) was significantly higher at 12 hours after ROSC in 8-minute asphyxia group(98.83±16.70 vs.65.93±13.81),while it was elevated at 24 hours in 7-minute asphyxia group (144.25±41.64 vs.67.71±16.47,both P<0.05).PaO2 in both groups was significantly higher at 12 hours after ROSC and significantly decreased at 24 hours.Conclusion The model of cardiac arrest caused by 7 minutes asphyxia provided more possibility and feasibility for the subsequent study of reproducing CPR-MODS model.     

兔短暂性局灶脑缺血MRI动态演变和病理组织学改变

目的：研究兔短暂局灶脑缺血后MRI缺血改变的时程,并且评价其组织病理学改变。为短暂性脑缺血发作患者的临床诊断和治疗提供依据。方法：30只新西兰白兔分为7min和30min短暂大脑中动脉阻塞模型和假手术组,各组10只。在阻塞前、阻塞中和再灌注后0.5h、2h、6h、12h、24h、48h、72h对实验动物MRI检查,在MRI检查后于72h时间点进行组织病理学评价。结果：在假手术组无MRI异常。在7min和30min组,在阻塞时的DWI高信号于再灌注后消失。此后,在7min组,DWI和T2WI保持正常,而在30min组,于6～12h观察点出现继发的DWI高信号和T2WI异常。组织学检查显示在2组均有神经元坏死,但是坏死神经元数目在30min组显著高于7min组（P<0.001）。结论：于再灌注后DWI信号异常的短暂或持久消失依赖于缺血持续时间。DWI信号异常的短暂消失动物有广泛的神经元坏死;然而,DWI信号异常持久消失并不表明缺血损伤的脑组织完全恢复。这些结果有助于解释在有些脑缺血后DWI正常的患者神经功能缺失的表现,以及有些经历过短暂性脑缺血发作的患者表现认知功能改变。     

微波加热制作股骨头坏死模型:最适宜的温度和时间筛选

背景:目前股骨头坏死模型还不能很好地模拟临床股骨头坏死情况,利用微波灭活提供了一种新的方法,但是其具体的标准尚未确定.目的:探讨微波灭活制作股骨头坏死模型的适宜温度和时间.方法:将48只大白兔按数字随机法分为4组,将微波天线插入兔股骨头,4组分别以不同的时间(10,20 min)和温度(50,55,60℃)进行股骨头微波灭活,灭活后即刻、1,2,4,8和12周,观察兔行为、利用X射线、MRI检测股骨头影像,并观察股骨头切片的组织坏死及修复情况.结果与结论:50℃ 10 min条件微波灭活1周后,部分兔股骨头骨髓组织凝固变性,8周时坏死骨小梁及骨髓组织完全吸收.55℃10 min微波灭活1周后,兔股骨头骨髓组织凝固,2周时股骨头出现T1相信号减低、T2相信号增高区,4周时坏死与修复同时进行,12周时骨修复停止,骨坏死继续,股骨头开始塌陷.50℃ 20 min和60℃ 10 min微波灭活8周后,所有兔股骨头塌陷变形.由此认为,采用55℃ 10 min微波灭活股骨头是制作兔股骨头坏死模型的适宜温度和时间,其股骨头变化符合临床病理变化过程.     

纳米双相陶瓷人工骨的成骨及降解

背景：烧结后的纳米羟基磷灰石结晶度很高,在体内很难降解;纳米β-磷酸三钙的降解速度太快,不利于体内生物组织在材料上附着,不利于引导成骨.目的：观察纳米羟基磷灰石/纳米β-磷酸三钙双相陶瓷人工骨的成骨及降解性能.方法：将36只青紫蓝兔随机分为实验组、对照组及空白组,制作左侧挠骨缺损模型,实验组与对照组分别植入纳米羟基磷灰石/纳米β-磷酸三钙双相陶瓷人工骨、纳米羟基磷灰石人工骨,空白组不植入任何材料.术后4,8,12周观察成骨和材料降解情况.结果与结论：①术后12周时 X 射线：实验组可见材料基本降解,连续性骨痂通过骨缺损部位.对照组材料未见明显降解,骨缺损处有骨痂修复.空白组骨缺损未见修复.②术后12周时组织学观察：实验组材料孔隙内以骨细胞和成骨细胞为主,有少量软骨细胞,出现散乱的骨松质,材料完全降解.对照组材料孔隙内以骨细胞为主,有少量成骨细胞和软骨细胞,材料未见明显降解.空白组可见纤维结缔组织及胶原纤维.③术后12周时扫描电镜观察：实验组材料降解,骨缺损部位被新生骨松质取代.对照组材料未见降解,骨缺损部位大都被新生骨松质取代.空白组无明显骨重建.表明纳米羟基磷灰石/纳米β-磷酸三钙双相陶瓷人工骨具有良好成骨能力及降解性能.     

磷酸钙骨水泥结合自体带血运骨膜修复节段性骨缺损

背景:磷酸钙骨水泥是一种新型骨替代材料,但具有降解慢、力学性能差等缺点。目的:探讨磷酸钙骨水泥结合自体带血运骨膜修复节段性骨缺损的可行性。方法:将72只新西兰大白兔随机数字法均分为4组:保留/不保留骨膜的不用磷酸钙骨水泥修复组、保留/不保留骨膜的磷酸钙骨水泥修复组。修复后4,12,24周取标本进行大体、放射学、组织学及生物力学测试。结果与结论:不用磷酸钙骨水泥修复组:不保留骨膜12周时才开始出现骨痂,24周时骨端硬化,髓腔闭合;保留骨膜后4周时出现少量的骨痂,12周时骨痂增多,24周时形成新生骨。磷酸钙骨水泥修复组:不保留骨膜时4周材料与骨端分界明显,12周时分解模糊,24周时材料与骨端形成骨性连接;保留骨膜4周材料未见降解,12周时材料有降解,24周时材料吸收更多,髓腔再通。24周时磷酸钙骨水泥修复组行三点弯曲生物力学测试,不保留骨膜组最大负荷低于保留骨膜组(P<0.05)。说明磷酸钙骨水泥较好促进骨的生长,自体带血运骨膜的存在有利于磷酸钙的吸收,促进骨的形成。     

羟基磷灰石/外消旋聚乳酸复合材料生物活性和生物相容性的体内实验

背景：外消旋聚乳酸在体内最主要的降解机制是水解,其与羟基磷灰石复合后,复合材料的生物降解率及失重率是否会有所改善。 目的：观察羟基磷灰石/外消旋聚乳酸复合材料体内植入兔股骨缺损后随时间延长界面及结构的变化。 设计：随机分组对照观察。 单位：武汉理工大学生物材料与工程研究中心。 材料：选用40只健康成年日本大耳白兔,体质量2.0～2.5kg,雌雄各半,由湖北省动物实验中心提供[合格证号：SCXK（鄂）2003-0005]。 方法：实验于2005-06/2006-03在湖北生物材料工程技术研究中心完成。①随机摸球法将大耳白兔分成2组：羟基磷灰石/外消旋聚乳酸组和外消旋聚乳酸对照组,每组20只。各组实验兔麻醉后,于兔左前肢股骨髁部分别将羟基磷灰石/外消旋聚乳酸及外消旋聚乳酸圆柱体植入骨腔洞内,圆柱体可略高于骨质表面。用骨膜覆盖样本材料,复位皮肤及骨膜组织瓣。②实验评估：两组实验兔于造模后3,6,12及24周将植入材料及周围骨组织完整取出,使用扫描电子显微镜进行观察各材料内植入后随时间延长界面及结构的变化。主要观察指标：两组材料内植入后随时间延长界面及结构的变化。 结果：纳入实验兔40只均进入结果分析。材料植入体内后,羟基磷灰石颗粒从材料表面脱落,成纤维细胞向组织内长入,并伴有少量新生骨痂的形成,显示羟基磷灰石/外消旋聚乳酸复合材料具有一定的成骨性和骨连接性。在植入24周时界面观察显示,材料被组织分隔包裹,新生骨组织长入材料,骨愈合情况良好,显示羟基磷灰石/外消旋聚乳酸材料具有良好的生物相容性。对于可生物降解的外消旋聚乳酸聚合物,体内水解是最主要的降解机制,其降解速率由于与羟基磷灰石材料的复合而减小。羟基磷灰石/外消旋聚乳酸复合材料具有成骨和骨连接能力。 结论：羟基磷灰石/外消旋聚乳酸复合材料具有成骨性和骨连接性;由于复合材料降解速率减小而相应改善了其生物相容性;羟基磷灰石/外消旋聚乳酸复合材料适合临床应用于可吸收内固定材料。     

中小强度运动对反复心理应激大鼠血清皮质酮、白细胞介素2和血浆T淋巴细胞亚群的影响

背景日益增多的研究证实,适度的运动训练能够有效的应对机体心理生理应激,提高机体免疫功能.目的观察运动锻炼对心理神经免疫的影响.设计随机对照观察.单位江苏淮阴师范学院和扬州大学体育学院.材料实验于2002-09/11在扬州大学体育学院运动生化实验室完成,将54只SD雄性大鼠随机分为安静对照组、心理应激组、应激+30 min运动组,应激+60min运动组、30min运动组、60min运动组,电击组(除30 min运动组和应激+30 min运动组每组7只以外,其余每组8只).方法安静对照组平时不运动也不应激;电击组平时不运动,采用电击作为应激组的刺激源;心理应激组应激大鼠不受电击,而是旁观电击组大鼠遭受电击的过程,通过视觉、听觉等产生心理应激.每次应激持续30 min,隔天1次连续2周;30 min运动组前1周每天适应训练10 min,然后每天无负重游泳1次,30 min/次,共8周;60 min运动组前1周每天适应训练30 min,然后每天无负重游泳1次,60min/次,共8周;30 min运动组+应激组运动方式与30 min运动组相同,应激方式与心理应激组相同;60 min运动组+应激组运动方式与60 min运动组相同,应激方式与心理应激组相同.采用放射免疫法检测血清中皮质酮和白细胞介素2含量,采用酶标法测T细胞亚群数目.主要观察指标①中小强度运动训练对应激大鼠血清皮质酮、血清白细胞介素2的影响.②中小强度运动训练对应激大鼠T细胞亚群CD3+,CD4+及CD8+的影响.结果①中小强度运动训练对应激大鼠血清皮质酮、血清白细胞介素2的影响应激组大鼠血清白细胞介素2水平显著低于对照组,血清皮质酮含量显著高于对照组,30 min和60 min运动组血清白细胞介素2水平显著高于对照组,血清皮质酮含量显著低于对照组.与应激组相比,应激+30 min训练组和应激+60 min训练组的白细胞介素2显著高于应激组,皮质酮含量显著低于心理应激组.②中小强度运动训练对应激大鼠T细胞亚群CD3+,CD4+及CD8+的影响与对照组相比,30min和60min运动组T细胞亚群数目都显著高于对照组.与应激组相比,应激+60 min运动组的CD3+,CD4+水平显著高于应激组;应激+30 min运动组CD4+/CD8+水平没有显著差异,但并不低于应激组.结论反复的心理应激引起大鼠较强的心理反应并使大鼠免疫功能产生抑制,中小强度运动对在心理应激下的大鼠免疫功能有较好的保护作用,且中等强度运动更能提高大鼠抗应激能力,其可能机制在于中小强度运动使得大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴产生较好的适应性,改变了应激激素在体内的分泌,从而维持了机体免疫功能的稳定.     

兔心肌缺血再灌注损伤中内皮细胞功能变化与参麦复方的干预效应

背景:一氧化氮和内皮素是近年心肌缺血再灌注损伤研究的热点。中药在保护心肌缺血再灌注损伤中有其独特的作用。目的:观察兔心肌缺血再灌注损伤中内皮功能改变及参麦注射液的干预作用。设计:随机对照动物实验。单位:中国医科大学附属第一医院。材料:实验于2002-09/2003-01在中国医科大学实验动物部、基础医学院生化教研室、第二电镜室完成。健康雌性日本大耳白兔21只,体质量1.5～2.5kg;参麦注射液由雅安三九药业有限公司提供(010110)。方法:①分组:实验动物随机分3组,每组7只。假手术对照组:只穿线不结扎冠状动脉。心肌缺血再灌注模型组和心肌缺血再灌注 参麦注射液治疗组:冠状动脉左室支结扎40min后放开40min建立心肌缺血再灌注模型。②给药:心肌缺血再灌注模型组耳缘静脉注射生理盐水20mL(于左室支结扎前10min注射1/3量,再灌注时注射2/3量)。心肌缺血再灌注 参麦注射液治疗组,耳缘静脉注射参麦注射液(按1.5mL/kg,用生理盐水稀释至20mL),给药时间同心肌缺血再灌注模型组。③观察指标:于结扎前、缺血40min、再灌注40min取静脉血4mL,其中2mL分离血清采用硝酸还原酶法检测一氧化氮代谢产物含量;另2mL采用放免法检测血浆内皮素含量。于实验结束后,取心肌组织检测一氧化氮代谢产物、内皮素,采用黄嘌呤氧化酶法检测总超氧化物歧化酶活性,采用硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛含量。透射电镜观察心肌超微结构。主要观察指标:①结扎前、缺血40min、再灌注40min血清一氧化氮、血浆内皮素的含量。②心肌组织一氧化氮代谢产物、内皮素、丙二醛的含量和总超氧化物歧化酶活性。③心肌超微结构。结果:21只日本大耳白兔均进入结果分析。①血清一氧化氮代谢产物含量:缺血40min、再灌注40min心肌缺血再灌注模型组明显低于假手术对照组(P<0.01),心肌缺血再灌注 参麦注射液治疗组显著高于心肌缺血再灌注模型组(P<0.01)。②血浆内皮素含量:缺血40min、再灌注40min心肌缺血再灌注模型组显著高于假手术对照组(P<0.01),心肌缺血再灌注 参麦注射液治疗组明显低于心肌缺血再灌注模型组(P<0.01)。③缺血40min、再灌注40min一氧化氮代谢产物含量与内皮素含量呈显著负相关(P<0.05,P<0.01)。④心肌组织一氧化氮代谢产物含量、总超氧化物歧化酶活性:再灌注40min后心肌缺血再灌注模型组明显低于假手术对照组(P<0.01),心肌缺血再灌注 参麦注射液治疗组显著高于心肌缺血再灌注模型组(P<0.01)。⑤内皮素,丙二醛含量:心肌缺血再灌注模型组显著高于假手术对照组(P<0.01),心肌缺血再灌注 参麦注射液治疗组明显低于心肌缺血再灌注模型组(P<0.01)。⑥一氧化氮代谢产物含量与总超氧化物歧化酶活性呈显著正相关(P<0.05),与丙二醛含量呈显著负相关(P<0.05),内皮素含量与总超氧化物歧化酶活性呈显著负相关(P<0.05),与丙二醛含量呈显著正相关(P<0.05)。结论:心肌缺血再灌注导致血管内皮功能紊乱;参麦注射液能够改善缺血再灌注时的内皮功能,减轻心肌缺血再灌注损伤。     

Thirty minutes of positioning reduces the development of shoulder external rotation contracture after stroke: a randomized controlled trial

OBJECTIVE: To determine the efficacy of positioning the affected shoulder in flexion and external rotation to prevent contracture shortly after stroke. DESIGN: Prospective, parallel-group, randomized controlled trial. SETTING: Four metropolitan mixed rehabilitation units. PARTICIPANTS: A volunteer sample of 36 subjects (minus 5 dropouts), whose mean age was 68 years and had had their first stroke within the past 20 days. INTERVENTIONS: The experimental group received two 30-minute sessions a day, 5 days a week, for 4 weeks, during which the affected upper limb was placed in maximum comfortable external rotation and 90 degrees of flexion. Both the experimental and control groups received up to 10 minutes of shoulder exercises and standard upper-limb care. MAIN OUTCOME MEASURES: Contracture was measured as the maximum passive shoulder external rotation and flexion of the affected side as compared with the intact side. Measures were taken at 2 and 6 weeks after stroke by an assessor blinded to group allocation. RESULTS: The 30-minute program of positioning the shoulder in maximum external rotation significantly reduced the development of contractures in the experimental group, compared with the control group ( P =.03). The 30-minute program of positioning the shoulder in 90 degrees of flexion did not prevent contractures in the experimental group as compared with the control group ( P =.88). CONCLUSIONS: At least 30 minutes a day of positioning the affected shoulder in external rotation should be started as soon as possible for stroke patients who have little activity in the upper arm.