EDTA的pH值和修复时间对CD138染色方法的效果比较

目的 通过采用不同PH值的EDTA和不同修复时间对CD138抗原进行修复处理.探讨EDTA的PH值和修复时间对CD138染色效果的影响.方法 所选组织为湘雅医院手术和活检淋巴瘤组织10例,常规脱水、石蜡包埋,每例切片3张,分成A、B、C三组,分别采用不同的处理方法对实验组织进行CD138免疫组化染色结果 A组呈阴性染色,B组呈弱阳性,C组呈阳性染色.结论 用IMEDTAPH9.0,高火处理15-20 min,可以使淋巴组织内CD138抗原充分暴露,在免疫组化染色过程中易被检测到,而且无背景着色.     

抗原修复对乳腺癌组织中雌激素受体与孕激素受体和C-erbB-2蛋白表达的影响

目的:探讨使乳腺癌组织雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和C-erbB-2蛋白在免疫组化中获得最佳效果的抗原修复条件。方法:对100例乳腺浸润性导管癌石蜡标本分别采用高压抗原修复和微波抗原修复法在不同的修复液、不同的时间检测ER、PR和C-erbB-2蛋白的表达,比较和观察它们各自的最优修复条件。结果:高压修复时,ER和PR最适的条件是采用pH值8.0的EDTA修复液煮沸喷气后持续5min,其染色的背景清晰,无非特异性着色。微波修复ER和PR最适的条件是采用pH值8.0的EDTA修复液15min,其染色的背景不清,有非特异性着色。而在高压和微波修复时C-erbB-2蛋白阳性表达率和表达强度的时间最适的条件是分别采用pH值6.0的枸橼酸盐修复液(CA)5min和10min。结论:高压抗原修复法在乳腺癌组织ER、PR和C-erbB-2蛋白阳性表达率、表达强度、背景和非特异性着色等方面均优于微波修复。高压抗原修复法是一种理想有效的抗原修复法,值得推广应用。     

微波法与高温高压法抗原修复的探讨

目的:探讨微波法与高温高压法对抗原修复的效果.方法:分别应用微波辐射法、高压锅直接煮沸法进行抗原修复,行免疫组化染色并比较其应用效果.结果:微波修复背景较清晰,阳性细胞表达在应该出现的标本切片中可以见到但表达不明显.使用高压锅修复,这样修复的效果是背景干净清晰而且阳性信号强.结论:高温高压法较微波法切片背景干净,显色对比鲜明,结构清晰,定位准确,易于观察,方法稳定,结果可靠,可提高病理诊断的准确性.     

两种抗原修复法在免疫组织化学中应用的比较

目的探讨微波法与高温高压法对抗原修复的效果。方法分别应用微波辐射法、高压锅直接煮沸法进行抗原修复，行免疫组化染色并比较其应用效果。结果微波修复背景较清晰，阳性细胞表达在应该出现的标本切片中可以见到但阳性强度弱。使用高压锅修复，这样修复的效果是背景干净清晰而且阳性信号强。结论高温高压法较微波法切片背景干净，显色对比鲜明，结构清晰，定位准确，易于观察，方法稳定，结果可靠，可提高病理诊断的准确性。     

防止牙-牙周组织切片脱片技术的改进

目的探讨一种可有效防止牙-牙周组织切片脱片的方法。方法改进组采用APES涂胶玻片,在抗原修复前在组织切片上覆盖同等大小纱布和空载玻片,回形针固定。对照组使用普通玻片,烤片过夜,常规脱蜡水化。比较改进组和对照组各40张切片在煮沸法、酶抗原修复后脱片率,并用PCNA检验其染色效果。结果改进组脱片率较对照组明显降低(P<0.01)。煮沸法抗原修复后PCNA染色有核染阳性细胞散在存在于组织中,背景清晰,效果满意。胰酶修复法两组均未出现阳性表达。结论该改进的方法能有效防止牙-牙周组织脱片并不影响染色效果,值得推广应用。     

Technological improvement on the prevention of dento-periodontal tissue section from separating from slices

目的 探讨一种可有效防止牙-牙周组织切片脱片的方法.方法 改进组采用APES涂胶玻片,在抗原修复前在组织切片上覆盖同等大小纱布和空载玻片,回形针固定.对照组使用普通玻片,烤片过夜,常规脱蜡水化.比较改进组和对照组各40张切片在煮沸法、酶抗原修复后脱片率,并用PCNA检验其染色效果.结果 改进组脱片率较对照组明显降低(P＜0.01).煮沸法抗原修复后PCNA染色有核染阳性细胞散在存在于组织中,背景清晰,效果满意.胰酶修复法两组均未出现阳性表达.结论 该改进的方法能有效防止牙-牙周组织脱片并不影响染色效果,值得推广应用.     

三种不同抗原修复法对二种免疫组化染色法的影响

目的 :采用高温加热和微波加热及酶消化进行组织抗原修复的免疫组织化学技术 ,比较三种抗原修复方法暴露抗原之间的区别 ,以及与用sABC三步法、Envision二步法等二种免疫方法搭配使用结果的区别 ,寻求最佳的免疫组化方法。方法 :微波修复组 ,高压加热组和酶消化组 ,各组分别用sABC、Envision试剂盒 ,检测ER、PR、C-erBb - 2、CK、LCA染色结果。结果 :三种抗原修复方法有明显差异 ,高压加热最佳 ;微波加热其次 ;酶消化最不稳定。结论 :高压加热组织抗原修复方法经济 ,操作简单 ,适合大量标本使用 ;试剂盒sABC阳性度最高 ,Envision次之 ,但背景清晰。     

两种LsAB染色标记方法及其抗原修复方法的比较

目的 比较两种标记生物素链亲和素法(LsAB),并探讨抗原修复的最佳方法。方法 采用碱性磷酸酶(AP)LsAB法和辣根过氧化物酶(HRP)LsAB法染色肺癌合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织石蜡切片中类胰蛋白酶(tryptase)的抗肥大细胞类胰蛋白酶抗体(AA1,小鼠抗人),并比较染色效果;用高压、胰蛋白酶和微波三种方法进行抗原修复,比较修复效果。结果 AP-LsAB法染色比HRP-LsAB法背景清晰、颜色对比鲜明;高压修复效果优于胰蛋白酶和微波修复。结论 在肺组织免疫组化染色中推荐使用AP-LsAB法,并采用高压修复抗原。     

微波修复温度、时间对乳腺癌雌激素受体表达的影响

微波抗原修复已成为免疫组化染色中常用的一种抗原修复方法,我们用不同微波修复温度、时间观察对乳腺癌雌激素受体(ER)阳性检出率的影响,报告如下. 　　1.材料与方法 　　1.1 标本我院手术切除标本,病理诊断为乳腺癌的组织蜡块32例.每例选有代表性蜡块一个,4μm连续切片. 　　1.2 试剂 ER单克隆抗体,S-P试剂盒,柠檬酸缓冲液,DAB显色剂.试剂均购自福州迈新生物技术开发公司. 　　1.3 方法每例取两张切片分A、B两组.两组均常规脱蜡至水化,两组分别置于柠檬酸缓冲液中(PH值:6.0).A组:微波修复温度95℃,持续时间15分钟.B组:微波修复温度100℃,持续时间10分钟.A、B两组均室温自然冷却后,按常规S-P法免疫组化染色,DAB显色,苏木素复染,中性树胶封片. 　　1.4 统计学处理卡方检验.……     

微波修复与否对eNOS免疫组化结果的影响

以往人们常用微波进行抗原修复后再进行免疫组织化学反应,[1,2]。本实验采用免去微波修复抗原步骤,直接进行eNOS免疫组化反应,实验结果后者优于或等同于前者。1材料和方法1)选用成年雄性SD大鼠4只,乙醚麻醉后打开腹腔,经胰腺管缓慢逆行注射5%牛磺胆酸钠溶液(0.1 mL/kg),3 h后摘取胰腺浸泡于4%甲醛溶液中24 h;2)常规制成5μm厚石蜡切片,裱于多聚赖氨酸载玻片上,65℃蜡箱烤干2 h备用;3)4例胰腺组织蜡片各选2张分为微波修复与非微波修复组;4)将所选蜡片常规脱蜡,浸于3%过氧化氢液室温20 min后蒸馏水洗。非微波修复组切片放于蒸馏水中待用。…     

CK-pan免疫组织化学染色联合弹力纤维染色时不同孵育方法对染色结果的影响

目的探讨CK-pan免疫组织化学染色联合弹力纤维染色时不同孵育方法对染色质量、染色时间及试剂成本的影响。方法选取温州医科大学附属台州医院2018年1至3月诊断为肺癌胸膜侵犯并符合质控要求的30例患者的病变组织蜡块30个，所有蜡块均连续3滋m切片3张，各取1张归入A、B、C组。全部切片先行CK-pan免疫组织化学染色至DAB显色，再滴加Elastin染液进行弹力纤维染色，3组切片根据不同方法孵育：A组室温过夜孵育（约18h）；B组60℃烤箱孵育30min；C组覆盖罗氏液体封盖膜微波高档孵育60s。比较3组切片双重染色后Elastin染液干涸情况、双重染色评分和染色总时间。结果所有切片肺组织肿瘤细胞呈棕色，准确定位于细胞质，背景清晰。A组所有切片Elastin染液均完全干涸；B组中29张切片Elastin染液未干涸，仅稍有挥发，1张切片Elastin染液小部分干涸；C组中28张切片Elastin染液均匀覆盖，未见挥发，2张切片Elastin染液大部分干涸。A组30张切片均较难分化，整个背景非特异着色明显；B组29张切片容易分化，背景干净，1张切片稍难分化，局部轻微背景着色；C组28张切片，易分化，背景干净，2张切片较难分化，出现较大范围背景着色。A组双重染色评分（9.15±0.17）分，B组（9.39±0.13）分，C组（9.27±0.17）分，3组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。A组染色总时间（21.5h）＞B组染色总时间（4h）＞C组染色总时间（3.5h）。结论Elastin染液60℃烤箱孵育对于提高双重染色的染色质量、缩短染色时间及节约试剂成本均有积极意义，值得推广。     

微波高压抗原修复在ER、PR免疫组化染色中的应用

目的选择能显示最佳的ER、PR染色效果高温抗原修复法。方法分别采用微波抗原修复和微波高压抗原修复两种抗原修复法对100例乳腺癌切片抗原修复，比较二者对ER、PR免疫组化检测效果的影响。结果经微波高压抗原修复，乳腺癌ER、PR染色阳性者分别为54％、49％，显著高于经微波抗原修复的染色效果42％、39％，且不易脱片。结论乳腺癌：ER、PR免疫组化染色采用微波高压抗原修复后，染色阳性率明显优于经微波抗原修复者，值得推广应用。     

Cyclin E在人脑胶质瘤中表达检测方法的探讨

目的探讨细胞周期蛋白E（CyclinE）在人脑胶质瘤石蜡切片的最佳实验表达方法。方法应用高压锅法和微波法抗原修复方法,并选择乙二胺四乙酸（EDTA,pH9.0）及柠檬酸（pH6.0）修复液,分四组进行不同修复方法、不同pH值抗原修复染色效果的比较。结果柠檬酸＋微波组阴性25例,阳性33例,阳性率56.8%;柠檬酸＋高压锅组阴性20例,阳性38例,阳性率65.5%;EDTA＋微波组阴性19例,阳性39例,阳性率67.2%;EDTA＋高压锅组阴性12例,阳性46例,阳性率79.3%。四组比较差异有统计学意义（〈0.05）。结论EDTA＋高压锅组作为人脑胶质瘤石蜡切片CyclinE的表达方法结果最为理想。     

微波加热修复和盐酸水解修复方法对大鼠脑组织免疫组化染色结果的影响

目的比较微波加热修复法和盐酸水解修复法在大鼠脑组织免疫组化中的染色效果。方法通过使用不同的抗原修复方法,比较大鼠凋亡脑组织Bcl-2免疫组化标记的阳性表达率及阳性表达差异。结果①微波加热修复组和盐酸水解修复组Bcl-2阳性表达率分别与不修复组作比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而微波加热修复组和盐酸水解修复组的Bcl-2阳性表达率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;②微波加热修复组和盐酸水解修复组的Bcl-2阳性表达差异比较具有统计学意义（P〈0.05）。结论与盐酸水解修复法相比,微波加热修复法可作为一种相对更有效的方法应用于大鼠脑组织石蜡切片的免疫组化实验。     

ER、PR免疫组化染色抗原修复方法探讨

目的 探讨检测ER、PR的最佳抗原修复方法.方法 微波抗原修复和高压加热抗原修复法在不同pH值的缓冲液中对40例乳腺癌组织进行抗原修复,检测ER、PR受体,显微镜观察结果.结果 高压加热高pH值缓冲液抗原修复法在乳腺癌组织ER、PR受体检测中阳性定位准确,着色强度增强,降低免疫组化背景着色.结论 用高压加热高pH值缓冲液进行ER、PR抗原修复免疫组化染色效果最佳.     

煮沸法在石蜡切片抗原修复中应用的探讨

目前组织学与病理学切片由常规采用的１０ %福尔马林固定 ,石蜡包埋组织制成。此种切片的苏木精———伊红染色（ＨＥ染色）提供了清晰的 ,可供诊断的组织、细胞图像。随着免疫组织化学技术的出现和逐渐推广 ,发现这种切片的组织中许多抗原物质被掩盖 ,影响对该病变一些抗原表达的观察。为此 ,人们相继采取各种酶、微波和高压处理等方法修复抗原 ,均使各种抗原得到不同程度的修复 ,抗原表达的阳性率提高。但上述诸方法也显示出各自不同的缺点 ,例如 :易脱片、操作复杂或是费用较高等。笔者在观察甲状腺乳头状癌和滤泡癌病变组织中ＣＤ４４（…     

不同的抗原修复方法对肾活检标本石蜡切片免疫荧光染色的影响

目的：探讨了不同的抗原修复方法对肾活检标本石蜡切片免疫荧光染色的影响。方法选取该院30例肾活检标本作为研究对象,随机分成对照组与研究组,对照组采用冰冻切片方法,研究组采用石蜡切片方法,其中分成应用无抗原修复组、胰酶抗原修复组、高压加热抗原修复组,均进行免疫荧光染色。分析和对比研究组与对照组标本的免疫荧光染色结果。结果研究组中的胰酶抗原修复组与对照组的免疫荧光染色结果基本相同（P＜0.05）;研究组中高压加热抗原修复组的假阴性明显高于对照组（P＜0.05）,研究组中无抗原修复组的染色效果比对照组较差（P＜0.05）;两组所观察的有效肾小球数均≥3个,两组数据差异无统计学意义（P＞0.05）。结论冰冻切片的免疫荧光染色标本无肾小球的时候,可以采用胰酶抗原修复作为补救措施。     

高压蒸锅水浴法行组织抗原修复的改进

目的：探讨高压蒸锅水浴法行组织抗原修复的改进。方法：常觇切片,脱蜡至水,柠檬酸盐缓冲液高压锅加阀加热喷气后2分钟,立即流水冷却,开盖再加热10分钟,取出后PBS冲洗,余下按免疫组化步骤选择不同的抗体进行染色。结果：与以往的高压蒸锅法相比染色定位的准确度、均匀度、清晰度有所增强,一般不产牛非特异性着色,明最节省了实验时间和避免外界环境温度对染色结果的影响。结论：较以往的高雎蒸锅抗原修复方法相比,该方法更简单易行,染色效果稳定,并明显节省时间和避免外界环境温度影响的优点。     

微波抗原修复后检测肺癌组织中P53蛋白的免疫组化表达

微波抗原修复后检测肺癌组织中Ｐ５３蛋白的免疫组化表达武彦刘志芳１张世新２（病理解剖学教研室，１．第一附属医院皮肝科，２．内科）近年来，免疫组化技术已成为病理研究和临床病理诊断的重要方法学之一。常规免疫组化技术一般采用胰蛋白酶消化来恢复石蜡切片上被遮盖...     

免疫组化技术的改进实践

免疫组化作为病理科实验室的常规工作以及科研工作的常用技术 ,早已在许多实验室中开展 ,但常常存在背景着色深 ,阳性表达模糊的问题 ,对此 ,我们进行了对照实验及改进。1　微波抗原修复时间对组织阳性表达的影响1 991年有学者报道 :经福尔马林固定的组织中被封闭的抗原决定簇 ,将切片置于高温水溶液中 ,可以恢复组织的抗原性 ,增强免疫组化染色效果 ;文献报道 ,微波加热至微沸 (98℃～ 1 0 0℃ )持续8～ 1 0分钟 ,取出高温冷却 1 0分钟。在实际工作中 ,我们发现微波处理时间不同 ,对免疫组化反应有影响 ,为此 ,我们进行了对照实验 :髓母细…