芸香苷改善椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的研究

目的 从细胞水平探究芸香苷对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响及作用机制。方法 将大鼠椎间盘髓核细胞随机分为对照组、模型组[白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]、低剂量实验组(25μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、中剂量实验组(50μmol·L^-1芸香苷+10ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量实验组(100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量+SIRT1激动药组[100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β+1μmol·L^-1沉默信息调节因子1(SIRT1)激动药SRT1720]。用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验、蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测炎性因子的表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、高剂量+...     

依托咪酯对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

目的 探讨依托咪酯对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响。方法 将人CHON-001软骨细胞分为空白组(常规培养基培养)、模型组(用10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、高剂量实验组(用5μmol·L^-1依托咪酯+10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、抑制药组[用5μmol·L^-1无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt3a)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制药IWR-1-endo+10 ng·mL^-1 IL-1β培养]、抑制药+高剂量实验组(用10 ng·mL^-1 IL-1β+5μmol·L^-1依托咪酯+5μmol·L^-1 IWR-1-endo培养)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞的增殖情况,用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)染色法检测细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中促炎因子的含量;用蛋白质印迹法测定基质金属蛋白酶(...     

阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤的抑制作用及机制研究

目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2、4μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L^-1)作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L^-1)的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC₅₀值为(59.34±0.31)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L^-1)的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC₅₀值为(5.52±0.18)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(56.62±4.83)%、(61.35±1.79)%、(65.13±3.88)%。两药的联合指数(CI)<1,说明二者具有药物协同作用。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)作用24 h的细胞凋亡率分别为(15.65±0.75)%、(13.85±2.15)%、(23.60±1.30)%,阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24h的细胞凋亡率分别为(27.00±1.90)%、(33.20±2.30)%,各药物处理组与对照组[(6.10±0.90)%]比较,差异有统计学意义(χ²=16.251,P=0.006)。不同浓度(10、20、40μmol·L^-1)的阿帕替尼作用24 h后,G₀/G₁期细胞比例随浓度升高而升高[(49.27±0.45)%、(50.34±1.24)%、(59.16±1.23)%],S期细胞比例随浓度升高而降低[(42.81±2.22)%、(39.19±2.71)%、(34.08±1.01)%],各药物处理组与空白对照组[G₀/G₁期(39.26±0.65)%,S期(49.40±2.52)%]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)以及阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24 h后,PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、p-Akt和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平呈下降趋势,促凋亡蛋白Casepase-3和Bax的表达水平呈上升趋势,Akt蛋白的表达水平无明显变化,各药物处理组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2、Casepase-3及Bax蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿帕替尼可抑制外周T细胞淋巴瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,同时具有细胞周期阻滞作用,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活实现的。阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤细胞具有协同抑制作用。     

人参皂苷Rg3抑制肺癌细胞增殖和侵袭的作用及机制

目的 探讨人参皂苷Rg3通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路抑制肺癌细胞增殖与侵袭的机制。方法 体外培养人肺癌细胞(A549),分为对照组(正常培养),低剂量实验组(30μmol·L^-1人参皂苷Rg3),高剂量实验组(60μmol·L^-1人参皂苷Rg3)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)评估人参皂苷Rg3对肺癌细胞存活率的影响,用流式细胞术检测肺癌细胞经处理之后的凋亡率,用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测重要凋亡基因的表达,用Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力,同时检测细胞内的氧化应激状况,用蛋白质印迹法检测PI3K和Akt磷酸化的水平。结果 对照组和低、高剂量实验组细胞活力分别为(98.67±0.88)%、(82.67±2.40)%和(74.77±3.09)%,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA相对表达水平分别为0.96±0.04、0.87±0.02和0.71±0.01,caspase-3 mRNA相对表达水平分别为0.96±0.04、1.22±0.07和1.36±0.04,活性氧(...     

丹酚酸B对香烟烟雾提取物诱导的支气管上皮细胞凋亡的影响

目的 研究丹酚酸B对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的支气管上皮细胞凋亡的影响及机制。方法 将人支气管上皮细胞16HBE分成对照组、模型组(香烟烟雾提取物诱导)、实验低剂量组(烟雾诱导+11μmol·L^-1丹酚酸B处理)、实验中剂量组(烟雾诱导+22μmol·L^-1丹酚酸B处理)、实验高剂量组(烟雾诱导+44μmol·L^-1丹酚酸B处理)、实验高剂量+Compound C组(烟雾诱导+44μmol·L^-1丹酚酸B+AMPK信号通路抑制剂Compound C处理)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞增殖情况,以蛋白质印迹法检测磷酸化腺苷—磷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化转录因子4(ATF4)蛋白表达,用PI单染法检测细胞周期,用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,用分光光度法检测胱天蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果 对照组、模型组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+Compound C组的...     

香菇多糖对甲状腺癌细胞生物学行为的影响

目的 研究香菇多糖(LNT)通过调控磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对甲状腺癌细胞生物学行为的影响。方法 将甲状腺癌TPC-1细胞分为空白组(常规培养)和低、中、高剂量实验组(20、40、60μmol·L^-1 LNT);另用不同剂量PI3K抑制剂LY294002(0、5 mg·L^-1)处理甲状腺癌TPC-1细胞，根据浓度分为对照组和LY294002组。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力，以Transwell实验检测细胞迁移及侵袭情况，以流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期，以蛋白质印迹法检测PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。结果 香菇多糖可呈时间及浓度依赖性抑制甲状腺癌TPC-1细胞增殖率(P<0.05)。空白组和低、中、高剂量实验组细胞迁移数分别为(127.67±8.09)、(98.00±5.76)、(77.67±6.25)、(38.33±5.13)个；细胞侵袭数分别为(144.50±12.50)、(109.67±6.02)、(83.00±8.07)、(50....     

槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响

目的 研究槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响和机制。方法 分离婴幼儿血管瘤内皮细胞,分成对照组、实验低剂量组(80μmol·L^-1槲皮素)、实验中剂量组(160μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量组(320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+pcDNA组(转染阴性对照载体,320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+高迁移率蛋白1(HMGB1)组(转染HMGB1过表达载体,320μmol·L^-1槲皮素处理)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析细胞增殖情况,用流式细胞术分析细胞凋亡情况,用蛋白质印迹法检测HMGB1、剪切的胱天蛋白酶3(C-caspase-3)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。结果 对照组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+pcDNA组、实验高剂量+HMGB1组细胞中HMGB1蛋白表达水平分别为0.89±0.09,0.76±0.08,0.63±0.06,0.55±0.05,0.56...     

姜黄素抗抑郁作用的研究

目的 研究姜黄素在西罗莫司介导后的抗抑郁作用。方法 在细胞实验中,实验分为空白组、模型组、阳性对照组(1μmol·L^-1氟西汀)、对照组(1μmol·L^-1姜黄素)、实验组(0.1 nmol·L^-1西罗莫司)、联合组(0.1 nmol·L^-1西罗莫司+1μmol·L^-1姜黄素)。除空白组外,其余各组用皮质酮建立SH-SY5Y细胞损伤模型,用CCK-8法检测细胞存活率,用荧光显微镜观察细胞突触变化。在动物实验中,将40只雄性ICR小鼠随机分为空白组、对照A组(50 mg·kg^-1姜黄素)、对照B组(150 nmol·L^-1西罗莫司)、实验组(150 nmol·L^-1西罗莫司+50 mg·kg^-1姜黄素)。各组均给予小鼠急性应激造模,并考察行为学指标变化。结果 模型组、对照组和联合组的细胞存活率分别为(32.38±5.45)%,(61.67±4.53)%和(39.40±12.33)%,突触长度分...     

原儿茶酸抑制结核分枝杆菌Rv1654诱导肺泡巨噬细胞凋亡的机制研究

目的 探讨原儿茶酸对结核分枝杆菌Rv1654诱导肺泡巨噬细胞凋亡影响和机制。方法 肺泡巨噬细胞NR8383分成对照组、模型组(结核分枝杆菌Rv1654诱导)、实验低剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,20μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验中剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,40μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验高剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,80μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验高剂量+Vector组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,转染阴性对照载体,80μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验高剂量+TLR2组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,转染TLR2过表达载体,80μmol·L^-1原儿茶酸处理)。用蛋白质印迹(Western blot)法检测Toll样受体2(TLR2)蛋白的表达水平,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用JC-1法检测线粒体膜电位。结果 对照组、模型组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+Vector组、实验高剂量+TLR2组肺...     

唑来膦酸对高糖诱导的成骨细胞分化、凋亡和氧化应激的影响

目的 探讨唑来膦酸对高糖诱导的成骨细胞分化、凋亡和氧化应激的影响。方法 将人成骨细胞hFOB 1.19分为对照组、高糖组(5.5 mol·L^-1葡萄糖)、低剂量实验组(5.5 mol·L^-1葡萄糖+1×10^-11 mol·L^-1唑来膦酸)、中剂量实验组(5.5 mol·L^-1葡萄糖+1×10^-10 mol·L^-1唑来膦酸)、高剂量实验组(5.5 mol·L^-1葡萄糖+1×10^-9 mol·L^-1唑来膦酸)。通过细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组细胞增殖活性,用碱性磷酸酶（ALP）染色检测ALP活性,用Alizarin red S染色检测钙结节形成情况;用蛋白质印迹（Western Blot）法检测唑来膦酸对高糖诱导的hFOB 1.19细胞分化以及p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路相关蛋白表达的影响;用流式细胞术检测唑来膦酸对高糖诱导的hFOB 1.19...     

恩替卡韦通过微小RNA-199a-5p抑制乙型肝炎病毒复制的机制研究

目的 研究恩替卡韦(ETV)通过微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)抑制乙型肝炎病毒复制的机制。方法 将HepG2.2.15细胞标记为空白对照组;根据恩替卡韦浓度的不同将细胞分为低剂量实验组(10μmol·L^-1 ETV)、中剂量实验组(20μmol·L^-1 ETV)、高剂量实验组(30μmol·L^-1 ETV);miR-199a-5p, anti-miR-199a-5p、anti-miR-con、miR-con转染至HepG2.2.15细胞,分别标记为miR-199a-5p组、anti-miR-199a-5p组、anti-miR-con组、miR-con组,转染后anti-miR-199a-5p组、anti-miR-con组继续用30μmol·L^-1的ETV进行培养,分别标记为ETV+anti-miR-199a-5p组、ETV+anti-miR-con组。蛋白质印迹法检测各组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应法检测H...     

蛇床子素对急性胰腺炎模型大鼠的治疗作用

目的 探究蛇床子素对急性胰腺炎(AP)大鼠的治疗作用及在该过程中对磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调节机制。方法 将SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组(50μg·kg^-1雨蛙素+10 mg·kg^-1 LPS)、阳性对照组(2 mg·kg^-1地塞米松)、低剂量实验组(20 mg·kg^-1蛇床子素)、高剂量实验组(40 mg·kg^-1蛇床子素)、高剂量+740Y-P组(40 mg·kg^-1蛇床子素+2 mg·kg^-1 PI3K激活剂740Y-P),每组15只。末次给药结束24 h后,用全自动生化分析仪检测大鼠血清中淀粉酶和脂肪酶活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平以及胰腺组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠胰腺组织的病理变化并进行病理损伤评分,用蛋白质印迹法检测...     

槲皮素介导铁死亡途径对高渗刺激诱导的干眼细胞模型的保护作用

目的 探讨槲皮素对高渗透压诱导的人角膜上皮细胞HCE-2损伤的影响及其作用机制。方法 将HCE-2细胞随机分为对照组(正常渗透压)、模型组(高渗透压)、低剂量实验组(高渗透压+31.25μg·mL^-1槲皮素)、中剂量实验组(高渗透压+62.50μg·mL^-1槲皮素)、高剂量实验组(高渗透压+125.00μg·mL^-1槲皮素)、Erastin组(高渗透压+125.00μg·mL^-1槲皮素+30.00μmol·L^-1铁死亡诱导剂Erastin)。用细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,用C11-BODIPY 581/591探针染色检测活性氧(ROS)水平,用试剂盒法测定细胞谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,用实时荧光定量聚合酶链反应实验和蛋白质印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、二氢乳酸脱氢酶(DHODH)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、Erastin组细胞存活率分别为(100.00±3.97)%、(50.05±5.83)%、...     

萝卜硫素通过调控OGG1基因抑制动脉粥样硬化相关巨噬细胞脂质积聚的研究

目的 探讨萝卜硫素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞脂质积聚的影响和作用机制。方法 将细胞分为对照组、ox-LDL组(100μg·mL^-1 ox-LDL)、萝卜硫素低剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+5μmol·L^-1萝卜硫素)、萝卜硫素高剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素)、si-OGG1组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素+转染si-OGG1)。以蛋白质印迹法检测各组细胞蛋白表达水平,以酶联免疫吸附测定法检测各组细胞炎性因子及8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平,以氧化酶法检测细胞内胆固醇水平,以探针法检测活性氧(ROS)水平,以流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 对照组、ox-LDL组、萝卜硫素低剂量组、萝卜硫素高剂量组、si-OGG1组的8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)蛋白相对表达水平分别为0.80±0.03、0.26±0....     

淫羊藿苷调控mTOR/Akt/CREB通路对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响

目的 探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路的影响。方法 将小鼠足细胞MPC5分为5组：正常对照组(5.5 mmol·L^-1葡萄糖)、高糖组(30 mmol·L^-1葡萄糖)、淫羊藿苷组(30 mmol·L^-1葡萄糖+5μmol·L^-1淫羊藿苷)、GDC-0349组(30 mmol·L^-1葡萄糖+50μmol·L^-1 GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349组(30 mmol·L^-1葡萄糖+5μmol·L^-1淫羊藿苷+50μmol·L^-1 GDC-0349)。培养48 h后，噻唑蓝法检测MPC5细胞活力；吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况；流式细胞术检测MPC5细胞凋亡；蛋白印迹法检测MPC5细胞自噬[微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin-1...     

基于PI3K/Akt/Beclin-1信号通路探析积雪草苷对OGD/R诱导损伤H9C2心肌细胞的影响

观察积雪草苷(asiaticoside,Ass)对氧糖剥夺/再复(oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)损伤的H9C2心肌细胞的增殖、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B (Akt)/Bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)信号通路的干预作用,探讨其对H9C2心肌细胞的影响。选用H9C2心肌细胞作为研究对象,采用细胞增殖与活性检测试剂盒(CCK-8)法检测H9C2细胞活性。将H9C2细胞分成对照组、OGD/R组、Ass低浓度组(10μmol·L^-1)、Ass高浓度组(80μmol·L^-1)和Ass高浓度+氯喹组(80μmol·L^-1+50μmol·L^-1)。对照组于正常条件下培养,其余各组在处理后进行氧糖剥夺4 h/再复2 h。酶联免疫吸附法检测细胞上清液中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine ki...     

基于细胞代谢组学的柴胡皂苷b2对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的 研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法 (1)将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100～800μmol·L^-1孵育24 h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100μmol·L^-1孵育24 h)组,MTT法检测细胞存活率。(2)将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),模型组(CORT 400μmol·L^-1孵育24 h)和模型+SSb2组(SSb2 1.5625,3.125,6.25,12.5和25μmol·L^-1预处理3 h,去上清,然后加入CORT 400μmol·L^-1及对应浓度SSb2共孵育24 h)。MTT法检测细胞存活率,微板法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率。(3)将细胞分为细胞对照组、模型组和模型+SSb2 12.5μmol·L^-1组,采用AnnexinV-FITC/PI流式...     

鱼腥草总黄酮调控PI3K/Akt信号通路诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究

目的：探讨鱼腥草总黄酮调控磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路对人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的诱导作用。方法：取对数期MCF-7细胞,随机分为4组（5个复孔）,低、中、高剂量组分别用3,6,9 g·L^-1鱼腥草总黄酮处理,对照组用磷酸盐缓冲液（PBS）处理。干预48 h后进行细胞形态学观察;对比干预12,24,48 h时的细胞凋亡率;对比干预48 h时PI3K、Akt、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和PI3K、Akt、磷酸化Akt（pAkt）、Bcl-2、Bax蛋白相对表达量。结果：Hoechst 33258染色结果显示,干预后3剂量组部分细胞体积缩小、染色质浓缩,出现凋亡小体,且中剂量组凋亡现象最为明显;细胞凋亡率、Bax mRNA和蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最高、高剂量组其次、低剂量组其稍低、对照组最低,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;细胞凋亡率组内比较,对照组随时间的延长变化不显著（P>0.05）,3剂量组均随时间的延长显著增加（P<0.05）;PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最低、高剂量组其次、低剂量组稍高、对照组最高,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;Akt mRNA和蛋白相对表达量组间比较差异均不显著（P>0.05）。结论：鱼腥草总黄酮可促进人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡,其中浓度为6 g·L^-1时促凋亡作用最强,推测是通过下调PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白表达,上调Bax mRNA和蛋白的表达,与PI3K/Akt信号通路有关。     

麦角甾苷对急性肝衰竭小鼠肝功能和肝细胞自噬、凋亡的影响

目的 研究麦角甾苷对急性肝衰竭小鼠肝功能和肝细胞自噬及凋亡的影响。方法 将32只小鼠随机分为对照组、模型组、麦角甾苷低剂量组(20 mg·kg^-1)和麦角甾苷高剂量组(40 mg·kg^-1),每组8只小鼠。对照组小鼠腹腔注射生理盐水200μL;模型组小鼠腹腔注射D-氨基半乳糖盐酸盐(D-GalN)700 mg·kg^-1和脂多糖(LPS) 10 mg·kg^-1诱导急性肝功能衰竭(ALF)小鼠模型;麦角甾苷低剂量组和麦角甾苷高剂量组小鼠在D-GalN/LPS给药前2 h,分别通过腹腔注射20和40 mg·kg^-1麦角甾苷。培养NCTC1469细胞,随机分为对照组、模型组、麦角甾苷低剂量实验组和麦角甾苷高剂量实验组。对照组细胞使用正常培养基培养;模型组细胞使用正常培养基培养2 h后加入40 mmol·L^-1的D-GalN处理12 h;麦角甾苷低浓度实验组和麦角甾苷高浓度实验组分别以50,100 mol·L^-1麦角甾苷干预培养2 h,再加入4...     

咖啡酸苯乙酯衍生物PEC01抗小鼠G422神经胶质瘤药效学作用及其机制

本研究旨在初步探索PEC01抑制小鼠G422神经胶质瘤的活性及其作用机制。采用MTT法、流式细胞术(FCM)、细胞划痕实验和Transwell细胞穿膜实验分别检测PEC01对G422细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。采用皮下移植的小鼠G422胶质瘤模型评价PEC01的体内药效学。动物福利和实验过程均遵循中国医学科学院北京协和医学院药物研究所动物伦理委员会的规定。Western blot检测PEC01作用2、96 h的G422细胞及30.0 mg·kg-1PEC01给药后的小鼠G422肿瘤组织中EGFR、Src及下游MAPK/ERK、PI3K/Akt/mTOR通路蛋白水平。结果显示,PEC01以时间和剂量依赖性方式明显抑制体外G422细胞增殖, 96 h作用时的IC₅₀为(9.02±0.36)μmol·L^-1; PEC01(10.0和20.0μmol·L^-1)作用96 h后,可明显诱导G422细胞发生早期和晚期凋亡; PEC01 [(0.625～5.0)μmol·L^-1]在12～48 h剂量依赖地显著抑...