N6-甲基腺苷(m6A)RNA修饰在生殖系统疾病中作用的研究进展

N6-甲基腺苷(m6A)RNA修饰是发生在RNA腺嘌呤第6位N原子上的一种转录后的甲基化修饰,调控mRNA的结构、稳定性、剪接、输出、转译和衰变等,进而广泛影响各种生物的生命过程.本文总结了在生殖系统疾病及乳腺癌发生发展过程中各种m6A甲基化酶的作用及机制,旨在为生殖系统疾病及乳腺癌早期诊断、治疗及预后判断提供新的依据...     

m6A 修饰在免疫系统中的研究进展

N6-甲基腺嘌呤 (N6-methyladenosine, m6A) 修饰是 RNA 分子的转录后变化, m6A 最早是上世纪70 年代在细胞 mRNA 上发现的, 但直到全基因组 m6A 定位方法发展后才被广泛研究。 近年来 m6A 在调节mRNA 中的作用及其在各种细胞类型中的功能及其重要性已经得到了证实, m6A 调控多种生理过程中基因表达的机制研究也越来越多。 此综述总结了最近一些关于 m6A 修饰在免疫反应中的作用的研究进展, 讨论了 m6A 修饰在调节先天和适应性免疫反应以及免疫系统发育中的功能。     

FTO介导RNA的m6A修饰与发育的研究进展

人类脂肪和肥胖相关蛋白FTO作为第一个被确证的N⁶-甲基腺苷(m6A)去甲基化酶,证明了RNA修饰存在可逆性,同时也揭开了m6A修饰的研究序幕。越来越多的学者试着从m6A修饰角度探讨基因表达调控的具体机制。m6A修饰功能需要甲基化酶、去甲基化酶、结合蛋白的共同参与完成。FTO可催化mRNA上m6A修饰的去甲基化,且在人体组织中广泛表达并参与调控多种生物学过程。本文综述去甲基化酶FTO及其介导的m6A/RNA修饰与体脂发育、胚胎发育、大脑发育、神经发育的关系,以期能够深入了解FTO的功能以及作用机制。     

RNA m6A修饰参与乙型和丙型肝炎病毒复制及相关肝癌发生机制研究进展

RNA甲基化修饰是近几年表观遗传学研究的热点之一,N6-甲基腺苷(m6A)修饰是哺乳动物中RNA甲基化的最主要类型。最新研究发现RNA m6A甲基化修饰在肝炎病毒复制及相关肝癌发生发展中发挥重要作用。本文将对该方面最新研究进展进行综述,这将有利于为相关疾病的研究提供一定的理论依据和新的研究思路。     

RNA m6A修饰在膀胱癌中的作用

近年来,RNA表观修饰引起了全球学者的重视.在所有已知的RNA修饰中,N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是主要的RNA修饰.作为一种动态且可逆的修饰,m6A被"作家蛋白"(RNA甲基转移酶)催化,被"橡皮擦蛋白"(去甲基酶)去除,并与"阅读蛋白"(m6A结合蛋白)相互作用,从而影响RNA...     

m6A修饰在鳞状细胞癌中的作用研究进展

近年来,RNA表观转录组学已成为生命科学领域研究的热点.作为真核细胞中最丰富的表观转录组修饰,N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是一种动态且可逆的过程[1].研究表明,m6A可以通过调节RNA剪接、稳定性、定位、翻译和衰变,参与神经发育、免疫调节和细胞分化等各种生理行为.m6A修饰的失调...     

m6A修饰调控酶及其结合蛋白在细胞自噬中作用的研究进展

<正>自噬可消除细胞内错误折叠或聚集的蛋白质、清除受损的细胞器以及降解不必要的细胞成分,对于维持细胞功能和新陈代谢十分重要^[1]。自噬水平的异常在癌症、心血管、呼吸系统和神经退行性病变等疾病的发病机制中起到重要作用^[2]。在过去几十年,对自噬的研究主要集中在自噬的调控机制及自噬基因的生物学功能^[3-4]。     

N6-甲基腺苷甲基转移酶样3调控骨代谢及其相关疾病的作用

背景：作为最普遍RNA修饰类型之一,N6-甲基腺苷甲基化已成为通过干扰RNA剪接、翻译、核输出和衰变来调节各种疾病的亮点。然而,甲基转移酶样3介导的N6-甲基腺苷甲基化表观遗传学修饰对骨代谢的研究尚未得到总结。目的：总结骨代谢中N6-甲基腺苷核心的甲基转移酶样3的潜在分子机制及其调节成骨分化、破骨分化、软骨凋亡、细胞外基质退变、骨代谢相关疾病等方面的最新进展和未来展望,为骨代谢相关疾病的病理机制研究提供新的见解,并随之对疾病的早期诊断、临床治疗、预后判断等提供理论参考。方法：以中文关键词“N6-甲基腺嘌呤,甲基转移酶样3,成骨细胞,破骨细胞,软骨细胞,间充质干细胞,骨代谢,骨质疏松症,骨关节炎,骨科疾病,治疗”等检索CNKI数据库,以英文关键词“m⁶A,METTL3,osteoblast,osteoclasts,chondrocyte,mesenchymalstem cells,bone metabolism,osteoporosis,osteoarthritis,orthopedic disease,therapy”等检索PubMed数据库,全网检索自建库至20...     

m6A修饰与阿尔茨海默病的研究进展

<正>N⁶-腺苷甲基化(N⁶-adenosine methylation,m⁶A)是将S-腺苷甲硫氨酸提供的甲基添加到腺苷N⁶位点的表观遗传修饰,在20世纪70年代被鉴定出来,占成人大脑中全部信使RNA(messenger mRNA)碱基甲基化的80%以上^[1],还可发生在微小RNA、长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)、环状RNA(circular RNA,circRNA)、转运RNA(transfer RNA,tRNA)和核糖体RNA中^[2]。     

链脲佐菌素对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响

目的 探讨链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法 20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精子计数法检测小鼠精子数量,HE染色检测精子存活率及睾丸形态,称量睾丸、附睾的重量;Real-time PCR和Western blotting检测各组小鼠睾丸中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著增高,体重降低（P<0.01）;睾丸及附睾重量显著下降（P<0.01）、精子数量显著下降（P<0.05）;睾丸形态结构破坏,生精小管萎缩,管腔直径变小,各级生精细胞排列紊乱,管腔内精子数量减少;睾丸m6A甲基化酶METTL3、FTO、YTHDF3 mRNA表达降低（P<0.05）;METTL3、FTO蛋白质表达显著降低（P<0.05）。结论 STZ诱导的糖尿病小鼠出现生精障碍,其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶METTL3以及FTO的表达异常有关。     

MATR3促进m6A甲基化修饰的环状RNA BRIP1形成与核浆重分布在慢性脑缺血神经元铁死亡中的机制

目的 研究RNA结合蛋白MATR3及环状RNA(circRNA)BRIP1在慢性脑缺血（CCI）神经元的表达以及OGD诱导的人神经元细胞铁死亡的影响及其相关机制。方法 应用Western blot方法检测MATR3在正常神经元和OGD诱导的HNs中的表达;应用Real-time PCR方法检测circBRIP1在正常神经元和OGD诱导的HNs中的表达;应用RNA免疫沉淀实验验证MATR3与circBRIP1的结合作用;应用MeRIP实验验证METTL3与circBRIP1的结合作用;应用CCK8法、脂质过氧化物试剂盒测定方法、C11-BODIPY染色、流式细胞仪方法、谷胱甘肽试剂盒测定方法以及铁测定试剂盒测定方法检测沉默MATR3及circBRIP1对OGD诱导的神经元铁死亡的影响;应用RNA IP实验检测circBRIP1与FSP1的结合作用;应用Western blot方法检测沉默circBRIP1对FSP1蛋白表达水平的影响。结果 MATR3和circBRIP3在OGD诱导的HNs中高表达,外源性敲减其表达量能抑制神经元的铁死亡。MATR3能够结合并促进circBRIP3的形成。...     

激素性股骨头坏死中m6A相关基因差异性的鉴定

背景：已知m6A参与了多种疾病的发生与发展,研究推测其也参与了激素性股骨头坏死的病理改变,但m6A甲基化修饰在激素性股骨头坏死中的研究比较匮乏。目的：通过生物信息学的方法寻找m6A相关基因在激素性股骨头坏死中的差异性表达,并预测与其相关的miRNA,以进一步阐明m6A甲基化在激素性股骨头坏死中所发挥的作用和机制。方法：从GSE123568基因表达谱中分析激素性股骨头坏死与对照组差异基因的表达,通过R语言‘limma’包进行差异基因鉴定,并对差异基因进行功能富集分析。用R语言的‘ggstatsplot’包对相关基因进行差异性分析。通过GSE74089数据集对差异基因进行交叉验证。构建mRNA-miRNA调控网络。采用共表达分析对共表达模块进行聚类并对模块基因进行富集分析。采用ssGSEA方法对激素性股骨头坏死与对照组之间免疫细胞浸润的差异进行量化分析。结果与结论：(1)通过相关性分析发现13个m6A相关基因,进行PPI网络识别和受试者操作特征曲线进一步分析发现YTHDF2有望成为早期生物标志物的核心差异基因;(2)富集分析发现差异基因主要参与炎症反应和免疫应答,并与破骨细胞关系密切;(3...     

m6A RNA甲基化修饰在颅脑损伤模型大鼠坏死性凋亡中的作用

背景:哺乳动物中枢神经系统损伤依赖N6-甲基腺苷(m⁶A)的调节,并与坏死性凋亡密切相关。目前在大鼠创伤性颅脑损伤中,m⁶A RNA甲基化修饰与创伤性颅脑损伤坏死性凋亡的关系尚未被研究。目的:探讨m⁶A RNA甲基化修饰与创伤性颅脑损伤大鼠坏死性凋亡的关系,为颅脑损伤坏死性凋亡的发生发展及预后的分子机制提供实验依据。方法:选取SPF级SD雄性大鼠30只,随机分为假手术组、创伤性颅脑损伤组和NSC118218(STAT1抑制剂)组,各10只。后2组通过改良Feeney法建立颅脑损伤模型,假手术组仅暴露脑硬膜,不进行颅脑打击。颅脑损伤6 h后检测各组大鼠大脑皮质炎症因子肿瘤坏死因子ɑ、白细胞介素6、白细胞介素1β、白细胞介素10和高迁移率族蛋白B1表达水平以及脑含水量,检测YTH结构域家族蛋白2、总m⁶A RNA甲基化修饰水平、STAT1和JAK1的表达水平。结果与结论:(1)创伤性颅脑损伤组和NSC118218组炎症因子水平和脑含水量明显高于假手术组,m⁶A RNA甲基化修饰比例...     

新型m6A阅读器IGF2BP1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的本研究拟分析新型m6A阅读器-胰岛素样生长因子2(IGF2)mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达水平、临床意义及对人非小细胞肺癌细胞增殖水平的影响。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载NSCLC相关数据集,分析肿瘤组织与正常组织之间IGF2BP1表达的差异;利用Kaplan-Meier曲线进行患者生存分析;MTT方法检测细胞增殖水平。结果IGF2BP1蛋白主要表达于肿瘤细胞的胞浆和细胞膜。TCGA分析发现与癌旁组织比较,IGF2BP1在NSCLC组织中的表达明显增加(P<0.05);Kaplan-Meier分析发现,IGF2BP1表达与非小细胞肺癌患者OS时间相关,IGF2BP1高表达的非小细胞肺癌患者,OS时间明显缩短(P<0.05)。转染IGF2BP1 siRNA至非小细胞肺癌细胞后发现,与阴性质粒转染组比较:转染siRNA-IGF2BP1的非小细胞肺癌细胞,IGF2BP1表达明显降低;IGF2BP1表达下调后细胞增殖水平减慢。结论IGF2BP1是一个新的NSCLC生物标记物,可作为潜在的治疗新靶点。     

mRNA m6A甲基化修饰对干细胞生物学特性的影响

背景：干细胞具有自我更新和多能定向分化潜能,是机体维持生理功能所必须的,并在多种疾病发生发展以及疾病治疗与器官移植等方面具有重要意义。近年研究发现m6A甲基化修饰可调控干细胞生物学特性在多种疾病中发挥重要作用。目的：文章主要就m6A甲基化修饰对干细胞的自我更新、定向分化以及其免疫学特性等生物学过程的最新研究进展进行综述。方法：以“stem cells,m6A,RNA methylation,biological characteristics,self-renewal,proliferation,differentiation,immunization”为英文检索词,以“干细胞、m6A、甲基化、生物学特性、自我更新、增殖、分化、免疫”为中文检索词,检索Pub Med、Web of Science以及中国知网数据库1955-2022年的相关文献,最后纳入88篇文献进行综述。结果与结论：m6A作为真核生物m RNA中丰度最高的表观遗传学修饰,也是当前表观遗传学研究的热点,由甲基转移酶、去甲基化酶和甲基阅读蛋白组成,已成为一种重要的转录组标记。m6A甲基化修饰调控干细胞生物学特性方面得出以下...     

血管性痴呆模型大鼠大脑皮质N6-甲基腺苷甲基化修饰水平的变化

目的:研究N6-甲基腺苷甲基化(m6A)修饰参与血管性痴呆(VD)的机制。方法:36只SD雄性大鼠按照随机原则分为假手术组(sham)和血管性痴呆模型组(BCCAO),BCCAO大鼠结扎双颈总动脉,sham组大鼠不结扎双侧颈总动脉。免疫组织化学染色、real time RT-PCR和Western Blot检测大鼠大脑皮质YTH结构域蛋白1(YTHDF1)、YTH结构域蛋白2(YTHDF2)、YTH结构域蛋白3(YTHDF3)、去甲基化酶ALKB同源蛋白3(ALKBH3)、去甲基化酶ALKB5同源蛋白5(ALKBH5)和甲基转移酶样蛋白3(METTL3)的表达变化。结果:与sham组相比,免疫组织化学染色结果显示：BCCAO大鼠大脑皮质中YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3、ALKBH3和ALKBH5阳性表达增加,METTL3阳性表达减少;RT-qPCR结果显示：BCCAO大鼠大脑皮质中YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3、ALKBH3和ALKBH5 mRNA表达上升,METTL3 mRNA表达下降;Western Blot结果显示：BCCAO大鼠大脑皮质中YTHDF1、YTH...     

RNA m6A去甲基化酶ALKBH5基因敲除对老年小鼠小脑形态和功能的影响

目的观察RNA m6A去甲基化酶ALKBH5基因敲除之后对老年小鼠小脑形态和功能的影响, 探究ALKBH5在小脑退行性病变中的作用。方法免疫印迹实验检测不同年龄C57BL/6野生型小鼠(包括2月龄、6月龄、12月龄、18月龄)小脑中ALKBH5的蛋白水平。通过免疫组织化学实验检测中年(12月龄)及老年(18月龄)野生型小鼠和ALKBH5基因敲除(ALKBH5-/-)小鼠中NeuN、Calbindin-D28K、MAP2、胶质纤维酸性蛋白等蛋白的表达情况。平衡木实验和步态实验检测小鼠平衡能力以及运动协调能力。结果 ALKBH5蛋白在小脑中的表达水平随着小鼠生理性衰老的进行而逐渐升高。在中年小鼠中, 野生型和ALKBH5-/-小鼠的体重、脑重以及小脑的形态大小没有明显差别, 同时颗粒神经元、浦肯野细胞及神经元树突的形态和数量均未见明显改变。在老年小鼠中, 相较于野生型小鼠, ALKBH5-/-小鼠的体重、全脑重和小脑重分别下降15%、10%和21%(P<0.05)。ALKBH5在浦肯野细胞中的表达高于其他类型的神经细胞, 与之对应在老年ALKBH5-/-小鼠中浦肯野神经元的数量下降4...     

锌指蛋白185(ZNF185)在小鼠睾丸精子细胞、间质细胞和支持细胞中的表达和定位北大核心CSCD

目的研究锌指蛋白185(ZNF185)在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中的表达变化。方法应用免疫荧光组织化学染色法检测ZNF185在精子、间质、支持细胞和睾丸组织中的定位;实时定量PCR和Western blot法分别检测三种细胞中ZNF185 mRNA和蛋白表达水平的差异。结果免疫荧光细胞分析显示ZNF185在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中均表达,主要分布于间质和支持细胞胞质、精子细胞头部和尾部;实时定量PCR和Western blot结果显示,支持细胞ZNF185 mRNA和蛋白表达水平显著低于间质和精子细胞。结论 ZNF185分布于小鼠睾丸不同细胞,表达量存在差异。