普鲁卡因在肝缺血再灌注损伤中的作用

目的肝缺血/再灌流损伤的程度直接影响到肝脏手术的预后,因而寻找一种能减轻肝缺血/再灌流损伤的方法。方法肝门阻断45min,通过对大鼠在活体显微镜下不同时间点肝血窦血流速度及血管管径变化的观察及肝组织的病理切片检查,观察普鲁卡因对大鼠肝脏血管支配神经的控制。结果肝门结扎前用2％普鲁卡因封闭,白细胞的浸润程度明显减轻,血流速度得到改善。结论普鲁卡因对控制改善肝缺血/再灌流损伤起积极作用。     

氧自由基在肝缺血再灌注损伤中的作用及川芎嗪的影响

目的：探讨氧自由基在肝缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）中的作用及川芎嗪的防护作用。方法：应用ＨＩＲＩ家兔及肝癌手术患者,观察超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）,黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）、谷丙转氨酶（ＡＬＴ）活性、丙二醛（ＭＤＡ）含量、肝细胞形态学变化及川芎嗪对上述指标的影响。结果：ＨＩＲＩ时ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ活性显著下降（Ｐ〈０．０５和Ｐ〈０．０１）,ＸＯ、ＡＬＴ活性及ＭＤＡ含是     

葛根素对肝缺血再灌注损伤的保护作用

近年来 ,有关葛根素改善心脑循环和免疫调节作用的临床研究较多。但葛根素对肝缺血再灌注损伤 (ｈｅｐａｔｉｃｉｓｃｈｅｍｉ ａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ ,ＨＩＲＩ)的保护作用的研究 ,国内外未见报道。本研究测定家兔肝缺血前 ,缺血 4 5ｍｉｎ ,再灌 4 5ｍｉｎ的血清及肝组织中乳酸脱氢酶 (ＬＤＨ)活性的变化 ,并观察了葛根素对其影响 ,从而了解葛根素对ＨＩＲＩ的保护作用 ,为ＨＩＲＩ的防治提供理论依据。1　材料和方法1 1　材料 :葛根素注射液 ,陕西安康济仁制药公司产品 ,批号0 10 914 ;全自动生化分析仪 ,日本日立 70 6 …     

肝脏缺血再灌注损伤与肝微循环变化

肝脏缺血再灌注见于许多临床疾病和手术过程中。肝缺血再灌注时,肝脏组织细胞发生一系列代谢、结构和功能的损伤,甚至导致肝功能衰竭,是影响疾病预后、手术成败和病人存活的主要因素之一。因此研究肝缺血再灌注损伤和防治具有重要的临床意义。目前有关常温肝缺血再灌注损伤与肝微循环变化的关系有待研究,本实验对此进行初步观察,为防治肝缺血再灌注损伤提供理论依据。１　材料与方法１．１　动物模型与分组健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠,雌雄兼用,体重２００～２５０ｇ。禁食１２ｈ后,腹腔注射３％戊巴比妥钠３００ｍｇ／ｋｇ（体重）施行麻…     

缺血预适应在大鼠肢体缺血再灌注后胃粘膜损伤中的作用

目的:观察肢体缺血再灌注(LIR)对胃粘膜的损伤,探讨肢体缺血再灌注对胃粘膜损伤的作用及其部分机制,以及短暂多次肢体缺血在胃粘膜损伤发生中的作用。方法:按Rosenthal方法复制大鼠LIR模型,观察并测定肢体缺血4h再灌注4h后以及应用缺血预适应干预对胃粘膜损伤的影响:取各组胃粘膜制作切片于光学显微镜和电子显微镜下进行观察,测定各组胃粘膜损伤指数、胃粘膜血流量(GMBF)、胃结合粘液量、胃粘液中磷脂、氨基己糖的含量、血浆和胃组织一氧化氮含量以及胃粘膜一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:光学显微镜和电子显微镜观察结果显示大鼠LIR后胃粘膜损伤严重,IPC组各类细胞损伤较LIR组轻;LIR后GMBF及胃结合粘液量、胃粘液中磷脂、氨基己糖的含量均低于对照组,虽然IPC组大部分指标与对照组有差异,但与LIR组对比GMBF及胃结合粘液量、胃粘液中磷脂、氨基己糖的含量均较高于LIR组;LIR组血浆与胃粘膜组织NO含量及NOS活性显著高于对照组,而IPC组血浆与胃粘膜组织NO含量和胃粘膜的NOS活性又显著高于LIR组。结论:肢体缺血再灌注可导致胃粘膜损伤;缺血预适应可减轻肢体缺血再灌注后的胃粘膜损伤。     

萝卜硫素减轻心脏移植模型大鼠缺血/再灌注损伤

目的 研究萝卜硫素在大鼠心脏移植缺血/再灌注损伤(I/RI)中的作用及PI3K/AKT/GSK-3β通路是否参与其中的作用.方法 构建大鼠同种异体活体心脏移植模型为对照组,尾静注射萝卜硫素为萝卜磁素处理组(2.5 mg/kg).比较大鼠的存活率、血清心肌酶、心肌细胞凋亡水平及心肌线粒体的肿胀程度;Western blo...     

缺血预处理通过抑制白三烯C4生成减轻大鼠肝缺血再灌注损伤

 目的：研究缺血预处理（IP）减轻大鼠肝脏缺血再灌注（I/R）损伤是否涉及前炎症因子白三烯C4(LTC4)。方法：健康成年雄性SD大鼠随机分为3组(每组6只)。I/R组： 采用大鼠部分（70%左右）肝脏缺血60 min再灌注5 h模型,缺血前15 min开始至复灌5 h经颈外静脉输注生理盐水（3 mL·kg-1·min-1）;假手术组：只麻醉开腹,不阻断肝脏血流;IP组：在I/R前先阻断肝左、中叶血流10 min,然后开放血流10 min,余步骤同I/R模型组。应用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）检查肝组织LTC4含量,同时生化检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性和肝组织谷胱甘肽（GSH）含量,以及HE染色法检查肝组织学损伤。结果：肝脏IP处理完全逆转了再灌注5 h所致肝组织LTC4含量增加（P<0.05）;同时增加肝组织GSH含量,明显降低血清ALT和AST活性（P<0.05）,并减轻肝脏组织结构损伤。结论：IP处理减少肝脏I/R期间LTC4堆积,同时伴随血清肝酶释放减少和肝组织结构损伤降低,以及保护肝组织氧化还原状态,表明IP的有利影响可能涉及其在肝脏I/R损伤期间抑制LTC4生成。     

大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

目的： 研究阻断门脉和肝动脉所造成的肝缺血再灌注（I/R）模型中肝细胞凋亡的发生率、空间分布规律及与凋亡发生相关的因素。方法：将60只SPF级SD大鼠分为正常对照组（18只）、假手术组（18只）、I/R组（24只，缺血20 min，再灌注22 h）。在实验终点时取各组大鼠的肝组织行HE染色、TUNEL法检测细胞凋亡、检测MDA含量及SOD活性；取血液检测TBIL、AST、ALT、ETX、TNF-α、IFN-γ、IL-4。结果：所有大鼠均检测到了凋亡的肝细胞，但只在I/R组有6只大鼠（6/24，25%）出现肝细胞坏死；I/R组大鼠的肝细胞凋亡较正常对照组、假手术组显著增加（P＜0.05）；正常对照组和假手术组的凋亡在肝内呈散在分布，各区的凋亡指数（AI）相近；I/R组包膜下区的肝细胞AI较中央静脉区、汇管区明显增高（P＜0.05），细胞坏死区AI显著高于其它区（P＜0.05）；相关检测指标中ALT、AST、TNF-α、SOD/MDA与肝脏AI显著相关（P＜0.05）。结论：肝脏I/R损伤中，存在凋亡与坏死2种细胞死亡方式，凋亡与坏死可在同一病灶中同时存在；肝包膜下区、坏死区AI较其它区域显著增加；肝脏总的AI与血液中ALT、AST、TNF-α水平及肝组织的SOD/MDA有相关性。     

二氧化硫对大鼠缺血再灌注心脏的损伤作用

目的观察二氧化硫(SO2)在心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法大鼠心脏分为:I/R组,SO2组及天冬氨酸异羟肟酸(HDX)组。采用Langendorff离体心脏灌注模型。MacLab数据采集系统监测离体心脏功能。结果SO2组心功能恢复率明显低于I/R组(P<0.05,P<0.01);HDX组显著高于I/R组(P<0.05,P<0.01)。SO2组冠脉流液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷氨酸-草酰乙酸转移酶(GOT)活性、肌红蛋白(Mb)含量及心肌丙二醛(MDA)、共轭双烯键(CD)含量及GOT活性显著高于I/R组(P<0.05,P<0.01);HDX组冠脉流液中上述指标明显低于I/R组(P<0.05,P<0.01)。SO2组心肌还原型谷胱甘肽(GSH)含量明显低于I/R组(P<0.05);HDX组心肌GSH含量显著高于I/R组(P<0.01)。结论SO2参与了大鼠心肌缺血再灌注损伤。增加心肌脂质过氧化及降低心肌还原型谷胱甘肽含量可能与SO2心肌损伤有关。     

氯胺酮减轻大鼠脊髓缺血/再灌注损伤

目的 探讨氯胺酮对大鼠脊髓缺血/再灌注(SCII)损伤及ERK1/2信号通路的影响。方法 将大鼠随机分为假手术组(S组)、SCII组(Zivin法建立模型)、低和高剂量氯胺酮组(分别每天给予50和100 mg/kg氯胺酮,连续14 d);评估大鼠后肢运动情况,检测脊髓组织炎性因子、氧化应激指标;并采用Nissl染色法检测脊髓神经元数量;TUNEL法检测凋亡率;Western blot检测蛋白表达情况。结果 与S组相比,SCII组术后Tarlov评分降低,并随时间呈梯度性升高;且脊髓组织正常神经细胞数减少,凋亡率升高;IL-1β、TNF-α、IL-6、VCAM-1水平及丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)水平均升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-过氧化物酶(GPX)明显降低(P<0.05),p-ERK1/2表达及p-ERK/ERK1/2比值均升高(P<0.05);与SCII组相比,氯胺酮组上述指标的变化均减轻(P<0.05),且低剂量组更明显。结论 低剂量氯胺酮可减轻SCII程度,ERK1/2信号通路可能参与该过程。     

氯胺酮减轻大鼠脊髓缺血/再灌注损伤

目的 探讨氯胺酮对大鼠脊髓缺血/再灌注(SCII)损伤及ERK1/2信号通路的影响。方法 将大鼠随机分为假手术组(S组)、SCII组(Zivin法建立模型)、低和高剂量氯胺酮组(分别每天给予50和100 mg/kg氯胺酮,连续14 d);评估大鼠后肢运动情况,检测脊髓组织炎性因子、氧化应激指标;并采用Nissl染色法检测脊髓神经元数量;TUNEL法检测凋亡率;Western blot检测蛋白表达情况。结果 与S组相比,SCII组术后Tarlov评分降低,并随时间呈梯度性升高;且脊髓组织正常神经细胞数减少,凋亡率升高;IL-1β、TNF-α、IL-6、VCAM-1水平及丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)水平均升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-过氧化物酶(GPX)明显降低(P<0.05),p-ERK1/2表达及p-ERK/ERK1/2比值均升高(P<0.05);与SCII组相比,氯胺酮组上述指标的变化均减轻(P<0.05),且低剂量组更明显。结论 低剂量氯胺酮可减轻SCII程度,ERK1/2信号通路可能参与该过程。     

肝酶和透明质酸变化作为供肝缺血/再灌注损伤的敏感指标研究

为了探讨肝移植术中,患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酸脱氢酶(GLD)和透明质酸(hyaluronic acid, HA)的变化规律及此变化与供肝缺血保存/再灌注损伤的关系,对20例行原位肝移植术的病人进行手术期ALT、AST、GLD、HA的连续监测,即从门静脉阻断至术毕每半小时一次连续测定ALT、AST、GLD、HA的浓度.其中8例供肝植入前常规进行组织病理学检查提示供肝植入前病理有轻度器官保存性损伤.血清HA在门静脉阻断后呈明显的上升,无肝期结束前达最高峰(945±455μg/L),当供肝血流开放后,立即逐步下降;受体血清肝酶(ALT、AST、GLD)浓度在无肝期结束前都无明显的变化,直至供肝植入血流开放后出现明显上升.血清HA的水平与肝酶的水平呈负相关.肝移植术中,在供肝植入后,患者血清肝酶的上升反映了供肝细胞的缺血/再灌注损伤程度,而HA下降的变化反映了供肝窦状内皮细胞冷缺血/再灌注损伤的程度.     

硫化氢对大鼠缺血/再灌注心肌损伤的保护作用及机制

目的探讨硫化氢(H2S)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)的保护作用及其相关机制。方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和H2S处理组,每组10只。通过结扎冠状动脉左前降支40min再灌注2h建立MIRI模型;H2S处理组分别于缺血前、再灌注前腹腔注射14μmol/kg的硫氢化钠(Na HS)。再灌注24h后,从腹主动脉中取血、分离血清,剥离心脏,HE染色观察心肌病理学改变。通过试剂盒测定血清磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平及心肌匀浆液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,ELISA检测心肌组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western blot分析心肌细胞质内Keap 1表达及核因子E2相关因子2(Nrf2)、核因子κB p65(NF-κB p65)表达。结果 H2S明显减轻心肌组织病理形态学损伤。模型组血清CK-MB、LDH、cTnI水平、心肌MDA活性、细胞核Nrf2、NF-κB p65表达水平及心肌IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量较对照组增加,而心肌SOD、GSH-Px、CAT活性及细胞质Keap 1表达水平较对照组降低。与模型组比较,经H2S处理后,血清CK-MB、LDH、cTnI水平、心肌MDA活性、细胞质Keap 1表达水平、心肌IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量及细胞核NF-κB p65水平下降;心肌SOD、GSH-Px、CAT活性及细胞核Nrf2水平升高。结论外源性H2S对MIRI大鼠产生良好的保护作用,其机制可能与增强抗氧化能力及减少炎症因子的释放有关。     

锌对肝缺血再灌注损伤的对抗作用及其机制研究

目的:观察外源性锌对缺血再灌注肝脏(HIR)的防护作用并探讨其机制,包括对粘附分子表达的影响。方法:复制大鼠HIRI模型,灌胃给锌,观察实验动物肝组织形态、血清转氨酶活性、血清丙二醛(MDA)含量及粘附分子表达的改变。结果:在肝脏缺血30min,再灌注90min时,大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性增高,肝细胞结构受损,血清MDA含量升高,肝组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)两种粘附分子表达增强;锌+缺血再灌注组大鼠血清GPT、GOT活性及血清MDA含量均明显低于缺血再灌注组,肝组织粘附分子表达亦较弱,肝细胞的结构基本正常。结论:外源给锌可以明显减轻肝脏缺血再灌注损伤,抗脂质过氧化和抑制粘附分子表达是其作用的重要机制。     

刺五加在心肌细胞缺血再灌注损伤中的保护作用

目的：研究刺五加注射液对缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion,I/R)心肌细胞的保护作用。方法：体外培养心肌细胞并计数;721可见光分光光度计测量培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量;激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子荧光染色。结果：中药刺五加注射液各剂量组与I/R组相比,细胞存活率升高,LDH、MDA水平降低,SOD水平升高,荧光像素值及阳性染色面积降低,有统计学意义。结论：中药刺五加注射液对缺血再灌注损伤心肌细胞有保护作用,可能与其保护细胞膜、清除氧自由基和减少钙离子内流等机制有关,其最佳浓度为40%。     

线粒体在缺血再灌注细胞损伤中的作用

缺血时线粒体氧化磷酸化不能有效进行 ,ATP生成减少而水解增多 ,细胞因能量不足发生功能障碍。随着缺血时间延长 ,线粒体结构和功能受损 ,ATP耗竭 ,细胞功能进一步损害 ,甚至发生细胞凋亡。再灌注时线粒体产生大量氧自由基 ,同时线粒体钙转运紊乱 ,发生永久性通透性转换 ,胞浆钙浓度急剧升高 ,导致细胞坏死。     

姜黄素通过干预细胞自噬减轻大鼠缺血/再灌注肺损伤

目的:探讨姜黄素(CUR)在大鼠缺血/再灌注(I/R)肺损伤中的作用及其与细胞自噬的关系。方法:构建大鼠I/R肺损伤模型,40只大鼠随机分假手术组(sham组)、I/R组、溶剂组(DMSO组)、CUR组和CUR+雷帕霉素(Rap)组(CUR-Rap组);根据分组于大鼠术前分别腹腔注射生理盐水、DMSO、CUR和CUR+Rap,造模结束后取肺组织测算湿/干重比(W/D)、总肺含水量(TLW)、肺泡损伤率(IAR),检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,光镜和电镜分别观察肺组织形态及细胞超微结构,Western blot实验检测自噬相关蛋白的表达情况以提示自噬水平。结果:与sham组相比,其余各组肺组织的W/D、TLW、IAR和MDA含量均升高,SOD活性降低,自噬相关蛋白表达结果提示自噬水平上升(P<0.05),肺组织损伤加重且细胞超微结构破坏加重。与DMSO组相比,CUR组肺组织的W/D、TLW、IAR和MDA含量均下降,SOD活性增强,自噬水平下降(P<0.05),肺组织和细胞超微结构损伤较轻。与CUR组相比,CUR-Rap组肺的W/D、TL...     

血红素氧合酶-1在大鼠供肝中的表达及其对供肝缺血再灌注损伤的防护作用

目的探讨血红素氧合酶-1（HO—1）在大鼠同种异体移植肝脏中的表达及其对供肝缺血再灌注损伤的防护作用。方法96只WiS1ar大鼠随机分为正常对照组（c组）、生理盐水预处理组（S1组）、钴原卟啉预处理组（S2组）和锌原卟啉预处理组（S3组）。C组6只，各预处理组分别为30只。各预处理组随机取出24只分为供受体，供体于预处理后24h行原位肝移植，分别于门静脉复流后1h和3h各取6只取血及肝组织；余6只仅行预处理，于供体预处理后24h取血及肝组织，分别检测血清ALT、AST、TNF—α水平、肝组织形态学变化及HO—1蛋白表达水平。结果①血清转氨酶水平：与C组相比，供肝预处理后24h，各组血清转氨酶水平无显著性差异（P〉0．05），门静脉复流后各时间点，S2组血清转氨酶水平均低于S1组和S组（P〈0．05），S1组低于S组（P〈0．05）；②HO—1表达水平：C组基本无表达；预处理后24h，S组肝脏HO—1mRNA及其蛋白即有较高表达，S1组和S3组只有极少量表达；门静脉复流后各时间点，S2组均高于S1组和S组（P〈0．05），S1组高于％组（P〈0．05）；③肝脏形态学变化：与C组相比，移植肝门静脉复流后3h，＆组肝脏损伤轻于S1组和S3组，S1组轻于S组。结论HO—1在同种异体肝移植大鼠肝脏中的过表达可显著改善移植后的肝脏功能，减轻供肝的缺血再灌注损伤。     

一氧化氮途径在大鼠肝移植缺血再灌注损伤中的作用

本实验应用三袖套法大鼠原位肝移植模型,探讨一氧化氮途径在大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤中对移植肝的功能作用及可能机制。加强一氧化氮途径能显著延长受体的存活率,改善肝功能及抑制肿瘤坏死因子（Ｔｈ卜ａ）的合成与表达;而抑制ＮＯ合成则能明显降低术后受体存活率、加剧肝功能恶化,上调ＴＮＦ－ａ及Ⅰ型细胞间粘附分子（ＩＣＡＭ－１）的表达。提示：ＮＯ途径很可能是肝移植缺血再灌注损伤的关键因素。