间充质干细胞外泌体治疗肺部疾病的研究进展

间充质干细胞来源的外泌体(MSC-EXOs)携带着脂质、蛋白、核酸等信号物质,在细胞间通讯、免疫调节、血管再生中发挥着重大作用。MSC-EXOs在肺动脉高压、肺纤维化等肺部疾病中通过调控不同的信号通路、减少细胞炎性反应、调节免疫细胞功能、改善线粒体功能、促进血管生成、减轻肺血管重构等途径改善肺组织的功能,治疗肺部疾病,从而为今后难治性肺部疾病的治疗提供新思路。     

间充质干细胞外泌体在眼部疾病中的研究进展

眼部疾病病因复杂且种类多种多样,主要包括眼眶、角膜、虹膜、视神经、视网膜等疾病,如果不及时治疗或处理不当会导致视力模糊,严重的会导致失明.手术和药物治疗存在一定的局限性.近几年,由于间充质干细胞(MSC)具有免疫调节和促进血管生成等特性,在许多眼部疾病的细胞疗法中被广泛探索.随着无细胞疗法的兴起,间充质干细胞外泌体(M...     

间充质干细胞在衰老相关疾病应用中的研究进展

衰老相关疾病严重影响老年人的身体健康,间充质干细胞(MSCs)在衰老相关疾病中的作用和机制研究受到越来越多的关注,国内外研究者也开展了多项相关的临床试验研究。本文对MSCs及其来源外泌体(exosome)在衰老相关的典型疾病如骨质疏松、帕金森病、2型糖尿病、动脉粥样硬化、慢性阻塞性肺病和肿瘤中的作用机制和临床试验进行综述,希望为MSCs在衰老相关疾病中的研究提供一定的理论依据和参考。     

脂肪间充质干细胞外泌体对心肌梗死中心肌细胞的保护作用

目的：探讨脂肪间充质干细胞（ ADSCs）外泌体对心肌梗死中心肌细胞的保护作用。方法：从SD大鼠中分离、培养ADSCs并提取外泌体,用透射电镜和免疫印迹方法进行鉴定;建立体外无血清无氧培养的心肌梗死细胞模型,在外泌体处理后用TUNEL和CCK8法分别检测H9C2细胞的凋亡和增殖变化。结果：ADSCs的外泌体直径为30~120 nm,呈圆形或椭圆形,表达CD9、CD63、CD81等外泌体标记蛋白。在外泌体处理48 h 后,H9C2细胞的凋亡明显减少,增殖明显增多。结论：ADSCs外泌体在心肌梗死中可保护心肌细胞,并减少其凋亡,可作为治疗心肌梗死的新方法。     

间充质干细胞源性外泌体的检测方法

文题释义：外泌体：早期由多泡体通过膜内陷包裹内容物形成并在多泡体与细胞膜融合过程中被释放到胞外,是一类粒径为30-120 nm,内含来源细胞中部分蛋白质、核酸、脂质等成分的蝶形膜性囊泡。外泌体能分泌及转运多种生物活性成分并参与一系列生理病理过程。间充质干细胞源性外泌体：由间充质干细胞旁分泌所得,具有来源细胞的特性。间充质干细胞源性外泌体能促进受损区域细胞自我修复与组织再生,恢复组织内稳态,加速创面修复。不仅如此,间充质干细胞源性外泌体在血管损伤修复、急性肺损伤、缺血性脑卒中、骨关节炎、心肌梗死等各个系统疾病中都具有重要作用。背景：间充质干细胞源性外泌体因其众多优点被应用于多种疾病的诊断与治疗,因此精确有效以及低成本检测出间充质干细胞源性外泌体对将来疾病的诊断和治疗至关重要。目的：对间充质干细胞源性外泌体检测方法以及最新进展做一介绍。方法：检索万方、百度学术、维普、CNKI、PubMed、Web ofScience、Sinomed、Embase、Cochrane、Web of Knowledge等数据库1997年6月至2019年6月期间关于间充质干细胞源性外泌体检测方法的文献,检索词分别为“间充质干细胞”“外泌体”“检测方法”和“mesenchymalstem cells”“exosomes”“detection methods”。排除重复与相关性弱的文献,将检索到的文献进行整理,共纳入60篇文献来进行分析。结果与结论：①总结了间充质干细胞的定义、生物学特性及其旁分泌作用;②总结了间充质干细胞源性外泌体的定义、生物学特性及其在临床治疗中较好的应用前景,例如调节机体免疫功能、促进受损组织再生等;③总结了目前对间充质干细胞源性外泌体常用的检测方法以及最新研究进展;④上述研究为临床应用间充质干细胞源性外泌体治疗疾病及在组织损伤修复中发挥作用提供实验基础。ORCID:0000-0003-3297-2587(杨沁馨)中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

间充质干细胞及其外泌体在脊髓损伤中的研究进展

脊髓损伤(SCI)往往给患者带来巨大的心理、经济负担。随着研究的深入,人们对SCI的病理生理机制逐步有了清晰的认识。细胞移植治疗给SCI患者带来了新的希望,诸多研究表明间充质干细胞(MSCs)移植能够对SCI的各个病理生理过程产生一定积极的作用。但SCI极其复杂的病理生理机制加之MSCs移植本身也存在一定局限性,使得MSCs移植疗法陷入了瓶颈。近年来,针对外泌体的研究兴起为MSCs治疗SCI提供了新的思路,从过去的"细胞移植疗法"中诞生出了"无细胞疗法"。     

不同来源间充质干细胞外泌体治疗骨关节炎疗效的比较

背景:在过去的数十年中,间充质干细胞作为组织工程种子细胞,在骨关节炎治疗中展现出了强大的疗效,在国内已开展了多项临床注册试验。研究表明,间充质干细胞主要依靠旁分泌效应释放外泌体等载体在体内发挥治疗作用。目的:比较骨髓间充质干细胞来源外泌体和脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨关节炎的效果。方法:采用超速离心法提取骨髓间充质干细胞来源外泌体和脐带间充质干细胞来源外泌体,采用透射电镜、Nanosight和Western blot鉴定两种外泌体;采用白细胞介素1β与软骨细胞共培养体外模拟骨关节炎环境,通过CCK-8、Western blot、qPCR评估两种外泌体对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡和细胞外基质分泌的影响;建立Ⅱ型胶原酶诱导的大鼠骨关节炎模型,通过大体和组织学染色评估体内注射两种外泌体治疗骨关节炎的疗效,ELISA检测关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平。结果与结论:(1)两种外泌体在透射电镜下均为典型的圆形或杯状,粒径在105-120 nm之间,均表达CD63、CD81和TSG1010特征性蛋白;(2)脐带间充质干细胞来源外泌体的产量和纯度均高于骨髓间充质干细胞来源外泌体;(3)...     

骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的研究进展

心肌梗死时心肌细胞受到不可逆的损伤,细胞大量坏死,梗死区不能通过残余心肌细胞的增生进行修复,成纤维细胞逐渐代替坏死的心肌细胞并在梗死区形成疤痕组织,导致心脏局部收缩功能下降,梗死心肌重构,最终引起心功能不全,极大地影响患者的生活质量。心肌细胞不可逆性的死亡和纤维     

骨髓间充质干细胞治疗大鼠急性心肌梗死

目的:比较经不同途径移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠急性心肌梗死(AMI)的疗效,探求更为适合的移植途径。方法:采集大鼠BMSCs,并进行培养及鉴定。以5-氮胞苷(5-aza)10μmol/L,诱导BMSCs为心肌样细胞并鉴定。建立大鼠急性心肌梗死模型并鉴定。对照组不予处理,静脉移植组和心外膜移植组分别经尾静脉和心外膜移植心肌样细胞悬液200μl(心肌样细胞5×10~6),联合移植组同时经尾静脉和心外膜分别移植心肌样细胞悬液各200μl。4周后观察SD大鼠心肌组织形态及蛋白表达情况。结果:静脉移植组、心外膜移植组、联合移植组的心肌梗死区域均可见有DAPI标记阳性的移植细胞,其中联合移植组较静脉移植组、心外膜移植组数量明显增多;H-E染色可见后三组较对照组梗死区域心肌细胞排列整齐,细胞核较完整,联合移植组梗死改善程度明显;后三组较对照组血管紧张素转换酶2(ACE2)表达水平升高,联合移植组较静脉移植组、心外膜移植组升高水平更显著。结论:经静脉、心外膜和两者联合移植诱导后的BMSCs均能促进梗死部位的组织修复,抑制心室重构,其中联合移植途径治疗效果更明显。     

间充质干细胞治疗肺损伤的作用机制及研究进展

文题释义： 急性肺损伤：是各种直接和间接致伤因素导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤,出现弥漫性肺间质及肺泡水肿,导致急性低氧性呼吸功能不全。以肺容积减少、肺顺应性降低、通气/血流比例失调为病理生理特征,其发展至严重阶段(氧合指数<200)被称为急性呼吸窘迫综合征。 外泌体：是细胞外泌囊泡中体积较小的一种,包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150 nm),所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,间充质干细胞分泌的外泌体是近来研究的热点,其可以直接或者激活细胞内的信号通路进而发挥保护损伤细胞的作用。 背景：间充质干细胞疗法作为一种新兴的治疗方案,在治疗肺损伤方面具有很大的前景优势。 目的：综述间充质干细胞治疗肺损伤的作用和保护机制,以期为临床治疗肺损伤提供理论依据。 方法：检索万方、CNKI、PubMed、Web of Science等数据库2001年5月至2019年5月期间关于间充质干细胞应用于肺损伤的文献,检索词分别为“间充质干细胞,肺损伤,肺”和“mesenchymal stem cells,lung injury,pulmonary injury”。排除陈旧以及重复的观点,将检索到的文献进行整理,共纳入53篇文献来进行分析。 结果与结论：①梳理了间充质干细胞的定义、生物学特性及治疗肺损伤的机制,发现其可通过自身作用以及产生多种细胞因子和外泌体来治疗肺损伤;②总结了间充质干细胞治疗肺损伤的相关信号通路,例如PI3K/AKT信号通路、Wnt信号通路、NF-κB信号通路;③总结发现间充质干细胞与其他药物联合应用可以增强治疗肺损伤的效果,例如与促红细胞生成素、皮质类固醇联合应用等;④上述研究为临床上应用间充质干细胞治疗肺损伤提供了理论依据。 ORCID: 0000-0002-4555-9102(梁贵友) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

胎盘间充质干细胞来源人工外泌体的一种制备方法

目的探讨一种利用小鼠胎盘间充质干细胞(mPMSCs)制备人工外泌体的方法。方法采用胶原酶消化法从小鼠胎盘组织中分离培养mPMSCs,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,鉴定其多向分化潜能;利用机械挤压法使mPMSCs依次通过孔径为10、5、1μm的径迹蚀刻膜,经离心纯化后得到人工外泌体;采用超速离心法分离mPMSCs来源的外泌体,并采用透射电镜对比观察形态结构、纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)检测粒径和浓度、蛋白免疫印迹法检测表面标志物。结果通过胶原酶消化法分离培养的小鼠mPMSCs,形态呈长梭型,较为均一,细胞表面高表达CD29、CD44、CD105,不表达CD45、CD34,具有成骨、成脂细胞诱导分化潜能;通过机械挤压法制备得到的人工外泌体在电镜下形态呈圆球形囊泡状,与mPMSCs来源外泌体形态类似;人工外泌体平均粒径为(130.7±5.7)nm,浓度为(5.01±1.08)×10~(11) particles/mL,mPMSCs来源外泌体粒径为(146.7±4.9)nm,浓度为(4.34±0.97)×10~9 particles/mL;蛋白免疫印迹法检测得到人工外泌体和mPMSCs来源外泌体表面均表达抗原CD63、CD81和Tsg101。结论通过机械挤压法可较高效获得人工外泌体,该人工外泌体与通过超速离心法提取得到的mPMSCs来源外泌体具有相似的生物学特性,这为后期将其作为药物载体奠定了一定的研究基础。     

间充质干细胞外泌体在炎症性肠病治疗中的研究进展

炎症性肠病(IBD)是一种非特异性的慢性肠道炎性疾病,其病因未明且发病率逐年上升,传统疗法效果有限。间充质干细胞来源的外泌体(MSC-Exo)是一种纳米级别的细胞外囊泡,其发挥的功能与间充质干细胞(MSC)相当,无致瘤性且安全性高,代表了一种新型无细胞疗法。研究表明MSC-Exo可通过发挥抗炎、抗氧化应激、修复肠黏膜屏障、免疫调节等作用来改善IBD,但其应用于临床还面临诸如缺乏标准化的生产技术、缺少特异性的IBD诊断分子以及如何抗肠道纤维化等难题。     

间充质干细胞外泌体在神经系统疾病中的应用

外泌体是真核细胞分泌的纳米级脂质双分子层小囊泡,含有母源细胞相似的生物活性物质,是细胞间物质传递和信息交流的载体;近些年间充质干细胞(MSCs)在神经系统疾病的治疗中取得了显著成绩,外泌体的提出为其作用机制的研究提供了一个全新的角度.本文就MSCs外泌体的结构与功能以及在神经系统疾病中的应用作一综述.     

褪黑素预处理的骨髓间充质干细胞外泌体促进骨髓间充质干细胞成骨

背景:骨质疏松是一种以骨量减少、骨微结构改变为主要特征的全身性代谢疾病,现有的药物治疗效果有限且不良反应明显,而骨髓间充质干细胞来源外泌体因其非免疫原性等优势,有望成为治疗骨质疏松的新方法.目的:探讨褪黑素预处理骨髓间充质干细胞后提取的外泌体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及作用机制,分析其作为无细胞方式促进成骨治疗骨...     

人羊膜间充质干细胞来源外泌体的提取与鉴定

目的探索人羊膜间充质干细胞来源外泌体(hAMSC-Exos)的分离、纯化与鉴定方法,为外泌体的生物学功能研究奠定基础。方法由废弃的羊膜提取间充质干细胞;采取改良超速离心法分离、纯化培养液上清中的hAMSC-Exos;透射电镜观察、纳米粒子跟踪分析技术(NTA)、Western blot和流式细胞术用于hAMSC-Exos的鉴定外泌体。结果成功用改良超速离心法分离出hAMSC-Exos,透射电镜(TEM)下观察呈中间凹陷的茶杯样结构;NTA结果显示样品直径符合外泌体直径大小;Western blot和流式细胞术证实外泌体表面特异性蛋白CD9、CD63、CD81表达阳性。结论建立了hAMSC-Exos的提取纯化及鉴定方法,为它后续的研究提供依据。     

低氧预处理脐带间充质干细胞来源的外泌体对内皮细胞功能的影响

目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)后,其释放的外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和小管形成的影响。方法:分离、培养并鉴定hUCMSCs和HUVECs。采用超速离心法提取hUCMSCs释放的外泌体,透射电镜观察外泌体的形态,纳米颗粒跟踪分析技术检测外泌体的粒径和浓度,Western blot检测外泌体表面特异性标志蛋白。将hUCMSCs分为常氧组和低氧预处理组,用CCK-8法检测细胞活力。将HUVECs分为对照组、常氧外泌体组和低氧外泌体组,用EdU法检测细胞增殖能力,细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移能力,小管形成实验检测细胞小管形成能力。结果:与常氧组相比,低氧预处理增强hUCMSCs活力,促进其外泌体释放。与常氧外泌体组相比,低氧预处理hUCMSCs释放的外泌体增强HUVECs的增殖、迁移和小管形成能力。结论:低氧预处理hUCMSCs分泌的外泌体增强HUVECs增殖、迁移和小管形成能力。     

胎儿脐血间充质干细胞治疗大鼠急性心肌梗死

背景：胎儿脐血间充质干细胞对病变心肌有修复和再生能力,胎儿脐血间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的一种新途径。 目的：探讨胎儿脐血间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的效果。 方法：选取32只大鼠结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死动物模型,随机等分为移植组和梗死组,从胎儿脐血中分离培养脐血间充质干细胞,制备脐血间充质干细胞悬液,对移植组大鼠进行脐血间充质干细胞移植。 结果与结论：胎儿脐血间充质干细胞在体外可以被成功分离培养;与梗死组相比,移植组大鼠心肌梗死边缘区的微血管密度、左室收缩末压、左室内压最大上升和下降速率显著增加(P < 0.05),左室舒张末压显著下降(P < 0.05),心电图情况稍有好转。表明胎儿脐血间充质干细胞治疗心肌梗死大鼠可以促进心肌血管再生,改善心脏功能。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

低氧预处理间充质干细胞来源外泌体的应用进展

<正>间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）是一种具有自我更新和分化特性的多能细胞,分布于人体许多部位,包括骨髓、脂肪组织、牙髓、脐带和胎盘等。干细胞疗法已经在许多临床前研究中得到了很好的证明,但其植入率低、植入副作用多的弱点促使人们寻找改进方法。外泌体是目前干细胞领域较热门的方向之一。外泌体是直径30～150 nm的生物纳米囊泡,     

间充质干细胞及其外泌体在肝再生领域的应用

背景:已有许多研究表明了间充质干细胞在疾病治疗和再生医学领域具有广阔的应用前景,另外,除了间充质干细胞本身,来源于间充质干细胞的外泌体也成为研究者关注的热点,有望成为新的疾病诊疗方法。目的:综述间充质干细胞及其外泌体在肝再生领域中的应用、挑战及前景,深入了解其发挥作用的治疗机制。方法:以"mesenchymal stem cells,MSCs,exosomes,liver,regenerate""间充质干细胞,外泌体,肝,再生"为检索词,检索PubMed数据库、万方数据库、CNKI数据库中发表的相关文献,通过筛选整理,排除与研究内容无关的文献、重复性研究和过早发表的文献,最终保留85篇文献进行综述。结果与结论:通过对现有的研究总结了间充质干细胞及其外泌体能够发挥肝脏保护作用并延缓疾病进展,具体机制包括减少肝细胞凋亡、调节自噬、改善炎症反应、改善氧化应激、抑制纤维化、促进血管生成等,可作为肝损伤相关疾病治疗研究的新方向。