角质形成细胞和成纤维细胞对白癜风发病和治疗的影响

黑素细胞在白癜风发病及治疗中是最关键的一环，但表皮、真皮间的沟通联系对皮损及非皮损皮肤的功能均具有重要影响，其中角质形成细胞、成纤维细胞及细胞外基质等非黑素细胞起了重要作用，并影响白癜风的发病。本文从细胞因子、氧化应激等角度总结了角质形成细胞、成纤维细胞对白癜风发病的影响及在临床治疗中的作用机制。     

成纤维细胞生长因子受体在人正常皮肤和伤口处的免疫定位

成纤维细胞生长因子(FGF)是一个有22个成员的细胞因子家族，与细胞表面受体结合调节细胞生长、增殖、分化和基质合成并参与炎症反应，其作用与细胞分化及生化状态和理化环境有关。目前发现有4种成纤维细胞生长因子受体(FGFR)，作者采用免疫组化技术检测了4种受体在正常皮肤和伤口处的表达。结果：①正常皮肤中FGFR的表达：FGFR-1表达于表皮各层、皮肤附属器、竖毛肌、血管和真皮成纤维细胞；FGFR-2在表皮、毛囊、皮脂腺、小汗腺、血管和成纤维细胞有表达，而且在基底层呈强阳性；FGFR-3在基底层的上部和毛囊内层呈强阳性；FGFR-4主要见于血管平滑肌、竖毛肌和小汗腺；②头皮生长期毛囊FGFR的表达：FGFR-1在毛发基质细胞、内外根鞘和毛乳头细胞强表达；FGFR-2的表达定位与FGFR-1相似，并且在毛囊根部基质细胞呈强阳性而角化区较弱；FGFR-3在毛球至峡部的内毛根鞘内段强表达，也见于外毛根鞘峡部和已分化的皮脂腺细胞及皮脂腺导管；FGFR-4仅见于毛囊周结缔组织鞘；③伤口处FGFR的表达：新生表皮基底层细胞FGFR-1和3呈强表达，而FGFR-2和4的表达较弱；基底层上部的细胞FG．FR-3强表达，而FGFR-1和2表达弱；肉芽和瘢痕组织中成纤维细胞／肌纤维母细胞表面FGFR-1和3的表达较强，而2和4呈弱阳性，而浸润单核细胞表面FGFR-1和3表达较强。讨论：正常表皮中4种FGFR表达的变化，提示在角质形成细胞分化过程中4种受体的表达发生着改变。研究表明，表皮细胞特异性表达FGFR-3亚型Ⅲb，而间质细胞同时表达FGFR-3的两个亚型Ⅲb和Ⅲc。其中Ⅲb与aFGF和FGF-9结合，而Ⅲc与aFGF和FGF-4高亲和力结合，与bFGF结合力弱而不与FGF-5结合。bFGF位于表皮基底层而aFGF则主要存在于棘层。aFGF和FGFR-3在基底层上部的正在分化的角质形成细胞中共表达，提示aFGF可能通过自分泌作用参与角质形成细胞的分化过程。Finch等发现基质细胞表达对人角质形成细胞有强促分裂作用的角质形成细胞生长因子，并发现其受体表达于正常人表皮基底层及银屑病表皮基底层和基底层上方的角质形成细胞。本研究发现，基底层中FGFR-2的表达，可能是角质形成细胞生长因子受体在表皮基底层和外毛根鞘的定位。Gonzalez等发现FGFR-1及其mRNA主要表达于表皮生发层，由此推测bFGF可能通过FGFR-1对基底细胞有促分裂作用，而aFGF则促进棘细胞的有丝分裂。动物实验表明：FGF和FGFR的表达与毛发的生长周期和发育有关。作者发现4种FGFR在正常人皮肤生长期毛囊的表达模式不同，特别在毛球根部毛母质细胞中FGFR-2的表达呈强阳性，结合动物实验结果，本研究提示真皮乳头FGF-2活化毛母质细胞表达FGFR-2并刺激毛母质细胞增生和毛发生长；毛囊内FGFR-1的表达，提示FGFR-1可能在角质形成细胞向毛发分化的终末过程中起一定的作用。FGFR-3在生长期毛囊中内外毛根鞘和皮脂腺的终末分化细胞中表达而在毛基质细胞内不表达，这可能是由于分化类型的差异，角质形成细胞表达不同的FGFR。     

紫外线介导的细胞间相互作用影响黑素合成研究进展

皮肤是人体最大的器官,由表皮、真皮及皮下组织构成.表皮黑素细胞是合成黑素的场所,其黑素合成过程受到外环境(紫外线等)及内环境(表真皮细胞分泌的细胞因子、化学递质、分泌型蛋白质等)的共同影响.本文将对紫外线介导的角质形成细胞、成纤维细胞、肥大细胞、内皮细胞对黑色素合成过程的影响进行综述.     

角质形成细胞无血清培养基条件下构建组织工程皮肤

目的 探讨在角质形成细胞无血清培养基条件下,用人成纤维细胞、角质形成细胞和黑素细胞接种于人去表皮真皮构建组织工程皮肤.方法 胰酶和胶原酶消化处理健康小儿包皮,获得表皮和真皮细胞悬液.分别将角质形成细胞、黑素细胞传至第3代,成纤维细胞传至第5代,调整细胞密度为2.5×105/ml.制备人去表皮真皮(含部分基底膜成分),先将成纤维细胞悬液种于6孔板板底,24 h后将人去表皮真皮放入6孔板,角质形成细胞、黑素细胞悬液接种于人去表皮真皮表面(成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞比例为1∶4∶1.实验组用角质形成细胞无血清培养基培养,对照组用含10％ FBS的DMEM、K-SFM、M254,3种培养液比例为1∶1∶1的混合培养基培养,人去表皮真皮作为空白对照.液下培养3d后,空气液面培养相结合的方式进行培养,每3天换液1次,2周后取培养的组织工程皮肤分别行HE染色,Melan-A、S-100、HMB45、CKpan、P63、K5、K6、K14、Ki67、Vimentin、Collagen Ⅳ、Laminin免疫组化染色及PAS染色并取正常皮肤做阳性对照.结果 经过14d的气液培养,实验组出现完整的新生表皮结构,CKpan、P63、K5、K6、K14、Ki67、Melan-A、S-100、HMB45、Collagen Ⅳ、Laminin免疫组化染色阳性;对照组出现完整的新生表皮结构,可见角质层,CKpan、P63、K5/6、K14、Ki67、Laminin免疫组化染色阳性.结论 角质形成细胞、黑素细胞及成纤维细胞与人去表皮真皮在角质形成细胞无血清培养基条件下,体外可构建组织工程皮肤.     

皮肤科学基础

UVA1对人体皮肤成纤维细胞的影响及临床应用（综述）;308nm准分子激光对豚鼠皮肤黑素细胞的影响；马拉色菌对角质形成细胞分泌黑素合成相关细胞因子的影响；表皮生长因子受体反义寡核苷酸对紫外线诱导的表皮角质形成细胞c—jun活性的影响；人毛囊体外分离及培养技术的改进.     

在Ⅳ型皮肤的皮肤类似物中成纤维细胞对角质形成细胞起增殖作用而对黑素细胞的生长和色素沉着起抑制作用

利用去表皮的真皮和成纤维细胞基质构建了皮肤类似物模型，并且利用该模型观察了成纤维细胞分泌的可溶性因子对黑素细胞增殖和黑素合成的影响。方法：①从新鲜环切的成人包皮(Ⅳ型皮肤)分离表皮角质形成细胞、黑素细胞和真皮成纤维细胞，分别培养至第二代；②用去表皮的真皮作底物构建     

银屑病成纤维细胞培育上清对角质形成细胞增殖的影响

目的 探讨银屑病成纤维细胞对角质形成细胞增殖的作用。方法 原代培养银屑病成纤维细胞、正常人成纤维细胞，无血清培养的角质形成细胞，四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测银屑病成纤维细胞、正常人成纤维细胞培养上清对角质形成细胞增殖的影响。结果 银屑病成纤维细胞培养上清培养的角质形成细胞的增殖活性高于正常人成纤维细胞培养上清组和无血清培养的角质形成细胞。结论 银屑病成纤维细胞可能通过释放某些可溶性细胞因子促进角质形成细胞的增殖，维持银屑病皮损表皮的过度增殖状态。     

人源性组织工程皮肤白念珠菌感染模型的构建

【摘要】 目的 利用人皮肤来源的细胞体外构建含色素组织工程皮肤白念珠菌感染模型。方法　利用人皮肤原代培养成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞,成纤维细胞与胶原孵育3 d后得到组织工程真皮,在其表面接种角质形成细胞和黑素细胞培养12 d,获得组织工程皮肤,再在其表面滴加1个麦氏浓度的白念珠菌悬液5 μl,分别在6、12、24、48和72 h进行HE染色和PAS染色观察。结果　利用成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞及胶原构建的组织工程皮肤结构良好,表皮分化层次分明。HE染色和PAS染色显示,感染白念珠菌后,随着时间的延长,白念珠菌对表皮结构的破坏逐渐加重,菌丝由浅表向真皮逐渐侵入。感染至72 h,表皮结构完全破坏,真皮内充满大量菌丝。结论　利用人皮肤来源的细胞,培养出的含色素组织工程皮肤层次结构分明;初步建立了人皮肤来源的组织工程皮肤念珠菌感染模型。 【关键词】 组织工程; 皮肤,人工; 念珠菌,白色; 模型,生物学     

苦参碱对P物质诱导角质形成细胞和真皮成纤维细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的研究苦参碱对P物质诱导皮肤表皮角质形成细胞系HaCaT细胞和真皮成纤维细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法采用MTT法考察苦参碱对两种皮肤细胞生存性的影响;ELISA方法测定P物质诱导两种皮肤细胞分泌MCP-1的时效关系与量效关系。以P物质刺激HaCaT细胞和真皮成纤维细胞,加入不同剂量的苦参碱共孵育24h,测定苦参碱对MCP-1表达的影响。结果以10-8mol/LP物质刺激HaCaT细胞和真皮成纤维细胞24h可以显著增加两种皮肤细胞MCP-1的分泌量,不同浓度的苦参碱均可以抑制皮肤细胞MCP-1的分泌。结论苦参碱可能通过抑制趋化因子MCP-1的表达而发挥抗皮肤炎症作用。     

PM2.5对皮肤角质形成细胞的影响

近年来我国空气中PM2.5污染严重，皮肤是人体抵御环境污染物的重要屏障，容易受到PM2.5的损害。角质形成细胞是皮肤表皮层的主要组成细胞，在皮肤天然免疫反应中发挥着关键作用。PM2.5作用于角质形成细胞，可引发多种生物学效应。本文综述了PM2.5对皮肤角质形成细胞增殖活性、细胞凋亡、细胞自噬、芳香烃受体激活、氧化应激、炎性反应及皮肤屏障相关成分表达改变等方面的影响，为进一步从机制上阐述PM2.5对人体皮肤的损害提供参考。     

使用体外重建皮肤模型研究真皮成纤维细胞对皮肤色素沉着的重要调节作用：皮肤光老化的影响

已有大量研究强调了人类角质形成细胞在皮肤色素沉着中所起的作用。例如，角质形成细胞通过释放大量的促色素沉着旁分泌生长因子，如αMSH、内皮素1（ET?1）、干细胞因子（SCF）和多种细胞因子，参与紫外线（UV）急性照射诱导的黑素合成（晒黑）。然而，越来越多的证据显示，真皮内成分在皮肤色素沉着调控中的作用不容忽视。20世纪90年代中期，证实细胞外基质（ECM）可调节黑素细胞的增殖、凋亡抑制和黑素生成活性。有报道证实，真皮成纤维细胞可通过分泌可溶性因子对色素沉着起调控作用。另外，对于构成性肤色，研究发现在掌跖，由成纤维细胞产生的Dikkopf?1（DKK?1）对黑素细胞的生长、活性以及对黑素小体转移均有抑制作用，且认为是这两处身体部位颜色较浅的原因。反之，深肤色皮肤内成纤维细胞分泌的神经调节蛋白1（NGR?1）的促色素沉着效应提示，该特定信号分子在决定高度色素沉着的皮肤类型中发挥作用。此外，在各种先天性色素沉着过度障碍中，如系统性硬皮病、皮肤纤维瘤、多发性神经纤维瘤的咖啡牛奶斑和泛发性进行性色素异常症，已知真皮黑素生成生长因子数量增加；这些因子包括SCF、肝细胞生长因子（HGF）或角质形成细胞生长因子（KGF）。表皮与细胞间质之间紧密的互动也可能在黑素细胞内稳态中发挥作用。最近已证实，层粘连蛋白332可通过调节L酪氨酸摄取来促进黑素生成。生长因子/细胞因子调节环也存在于真皮细胞和表皮细胞之间，并参与色素沉着的调控。     

皮肤衰老和细胞衰老

皮肤衰老是机体衰老的重要外在表现之一,已引起老年学和皮肤科学的重视。体外的皮肤细胞衰老可部分反映机体皮肤老化状况同时角质形成细胞在皮肤衰老中的作用也逐渐引起人们的重视,因为表皮角质形成细胞在皮肤衰老过程中的重要作用如同真皮成纤维细胞一样日益受到关注,加速有关皮肤衰老的研究可为阐明皮肤衰老机制、为老年皮肤病学的发展提供科学依据,进一步指导临床用药和皮肤疾病的防治。     

紫外线对皮肤角质形成细胞和成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的影响

目的:研究中波紫外线辐射对体外培养的表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞产生基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和MMP-3的直接和间接影响,研究绿茶中的主要活性成分表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对此影响的保护作用。方法:体外培养角质形成细胞株HaCaT和真皮成纤维细胞,中波紫外线辐射、不同浓度IL-6刺激及EGCG处理后,ELISA方法测定上清液中Pro-MMP-1和MMP-3蛋白含量,半定量RT-PCR方法测细胞中mRNA含量。结果:UVB30mJ/cm2辐射后角质形成细胞分泌的pro-MMP-1和MMP-3并未增加(P>0.05),真皮成纤维细胞合成和分泌MMP-1和MMP-3mRNA含量和蛋白水平均显著增加(P<0.05),IL-6(8、16、24pg/mL)可显著增加成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3(P<0.05)。EGCG(0.15、0.3mM)能够显著抑制紫外线诱导成纤维细胞产生MMP含量的增加(P<0.05),但IL-6刺激成纤维细胞所产生的MMP-1和MMP-3的增加不受EGCG的影响(P>0.05)。结论:中波紫外线辐射并不能直接导致角质形成细胞分泌MMP-1和MMP-3增加,但紫外线辐射后角质形成细胞分泌的IL-6可促进成纤维细胞产生MMP。EGCG对IL-6刺激成纤维细胞产生MMP增加没有影响,但它可以显著抑制紫外线辐射直接导致的成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的增加,对防治皮肤光老化可能有一定作用。     

糖皮质激素受体-α、核因子-KB、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在慢性皮炎中的表达

目的：探讨糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）-α、核因子（NF）-kB、肿瘤坏死因子（TNF）-α和白介素（IL）-1β在慢性皮炎中的表达及其意义。方法：采用SP免疫组化染色技术检测慢性皮炎与正常对照皮肤中GR—α、NF—kB、TNF—α及IL-1β的表达及其分布。结果：GR—α在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达的分布情况一致，GR—α不但在表皮呈弥漫性表达，还可表达于汗腺及汗管、真皮成纤维细胞、微血管内皮细胞及其周围的一些细胞成分。然而，与正常对照皮肤相比，GR—α在慢性皮炎皮损角质形成细胞及真皮血管内皮细胞的表达明显减弱。NF—kB在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达主要分布在表皮角质形成细胞中，在正常对照组皮肤中均为胞质表达，而在慢性皮炎组中为胞质表达和（或）胞核均有表达。TNF—α及IL-1β在慢性皮炎与正常对照皮肤角质形成细胞胞质中的表达无明显差异，为弱阳性反应。结论：慢性皮炎皮损区角质形成细胞中GR—α的表达下调有可能会影响皮损局部的抗炎机制。     

皮肤光老化机制研究进展

光老化指皮肤由于反复光暴露引起的提前老化,其发生机制涉及细胞内信号转导通路、细胞表面细胞因子和表皮生长因子受体的活化,活性氧族是激发细胞信号转导过程中的重要介质,其结果导致基质金属蛋白酶合成增加,从而使真皮纤维结缔组织过度降解和弹性纤维变性,同时真皮胶原的合成亦减少,角质形成细胞、成纤维细胞及炎症浸润细胞等多种细胞参与光老化过程.     

皮肤光老化机制研究进展

光老化指皮肤由于反复光暴露引起的提前老化,其发生机制涉及细胞内信号转导通路、细胞表面细胞因子和表皮生长因子受体的活化,活性氧族是激发细胞信号转导过程中的重要介质,其结果导致基质金属蛋白酶合成增加,从而使真皮纤维结缔组织过度降解和弹性纤维变性,同时真皮胶原的合成亦减少,角质形成细胞、成纤维细胞及炎症浸润细胞等多种细胞参与光老化过程.     

表皮通透的屏障功能及其调节

保护机体、防止过多的水分丢失是皮肤的主要功能之一,角质层角质形成细胞及其细胞间脂类的组分对此功能起决定作用。角质形成细胞间的复层板层膜是皮肤屏障功能的主要结构。表皮通透的屏障功能影响皮肤的水分丢失量,且对表皮及真皮的生物活性(如角质形成细胞的增生、皮肤的炎症等)均有调节作用。诸多因素如脂类、性别、年龄、酸碱度、离子及精神等均可以作用于表皮通透的屏障功能。因此,深入地了解表皮通透的屏障功能及其影响因素有助于皮肤病的防治。     

体外重建皮肤与正常人皮肤基本特征的对比研究

目的 用正常人的皮肤角质形成细胞和黑素细胞在体外重建皮肤,为将来用于临床、生物及药理学研究奠定基础.方法 从正常儿童的包皮分离、培养角质形成细胞、黑素细胞和成纤维细胞.用成纤维细胞和I型鼠尾胶原制备真皮类似物.将角质形成细胞和黑素细胞接种到真皮类似物表面进行培养,制备表皮类似物.将重建的皮肤类似物和正常人皮肤进行对比研究.结果 皮肤类似物的组织形态包括基底层、基底上层、角质层与正常人皮肤相似.与基底膜形成有关的标志,在皮肤类似物和正常人皮肤中的表达是相似的.角蛋白10、泛角蛋白在皮肤类似物和正常人皮肤中的表达也是相似的.结论 组织形态和所检测的各种标志的表达显示,该皮肤类似物与正常人皮肤相似.     

N-乙酰氨基葡萄糖对成人皮肤成纤维细胞透明质酸合成的影响

透明质酸(hyaluronic acid.HA)是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰葡糖胺(N-acetylglucosamine,NAG)构成的线性多糖,是细胞外基质的主要成分之一,通过和其他基质分子的相互作用,维持细胞外基质的稳定性和弹性,还通过吸收大量水分而在表皮和真皮中充当缓冲剂的角色.皮肤老化时与胶原纤维和弹性纤维共同形成黏弹性网的细胞外基质和HA进行性减少,导致皮肤机械特质的丧失[1],因此增加HA的含量可有延缓皮肤老化的作用.皮肤中HA主要由皮肤角质形成细胞和成纤维细胞产生,增加皮肤成纤维细胞HA的合成,应能增加皮肤中HA的含量.有研究显示NAG能增加人类腹膜间皮细胞和成纤维细胞的HA合成[1],我们研究NAG是否也增加成人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDF)HA的合成,以探讨用于抗皮肤老化的可能性.     

糖皮质激素受体-α、核因子-κB、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在慢性皮炎中的表达

目的:探讨糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)-α、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β在慢性皮炎中的表达及其意义。方法:采用SP免疫组化染色技术检测慢性皮炎与正常对照皮肤中GR-α、NF-κB、TNF-α及IL-1β的表达及其分布。结果:GR-α在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达的分布情况一致,GR-α不但在表皮呈弥漫性表达,还可表达于汗腺及汗管、真皮成纤维细胞、微血管内皮细胞及其周围的一些细胞成分。然而,与正常对照皮肤相比,GR-α在慢性皮炎皮损角质形成细胞及真皮血管内皮细胞的表达明显减弱。NF-κB在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达主要分布在表皮角质形成细胞中,在正常对照组皮肤中均为胞质表达,而在慢性皮炎组中为胞质表达和(或)胞核均有表达。TNF-α及IL-1β在慢性皮炎与正常对照皮肤角质形成细胞胞质中的表达无明显差异,为弱阳性反应。结论:慢性皮炎皮损区角质形成细胞中GR-α的表达下调有可能会影响皮损局部的抗炎机制。