富氢液对小鼠肾缺血再灌注时NLRP3炎症小体活性的影响

目的评价富氢液对小鼠肾缺血再灌注时NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体活性的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠30只,体重20～25 g,6～8周龄,采用随机数字表法分为5组(n=6):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)、肾缺血再灌注+NLRP3抑制剂MCC950组(I/R+M组)、肾缺血再灌注+富氢液组(I/R+H组)和肾缺血再灌注+MCC950+富氢液组(I/R+M+H组)。采用夹闭双侧肾蒂30 min后恢复灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。I/R+M组和I/R+M+H组术前连续14 d腹腔注射MCC950 20 mg/kg;I/R+H组和I/R+M+H组术后1 h腹腔注射富氢液5 ml/kg,其余各组给予等容量生理盐水。于再灌注24 h时,心脏采集血标本,检测BUN、Cr和肾损伤分子-1(Kim-1)水平,采用ELISA法测定血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度。然后处死小鼠,取肾组织,光镜下观察病理学结果,采用TUNEL法测定凋亡细胞计数,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)和caspa...     

缺血后处理对大鼠缺血再灌注肾损伤后尿NGAL蛋白表达的影响

目的:评估缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)对大鼠缺血再灌注肾损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)的保护作用,及其对尿中性粒细胞明胶酶脂质相关运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)表达的影响。方法:雄性SD大鼠144只,体重180~200 g,随机分为3组(n=48):缺血再灌注组(IRI组):夹闭双侧肾蒂45 min后恢复灌注;缺血后处理组(IPO组):在IRI组基础上进行短暂反复6遍再灌注10 s/缺血损伤10 s处理后恢复灌注;假手术组(sham组):仅开腹,游离双侧肾脏,分离肾蒂不夹闭;每组于术前及术后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集血、尿液及肾组织标本,苦味酸法检测大鼠血清肌酐(Scr),自动生化分析仪检测大鼠血尿素氮(BUN),ELISA法检测尿NGAL表达改变,显微镜下观察肾组织病理学改变。结果:肾组织病理检查结果示:12 h、24 h、48 h IPO组大鼠肾损伤程度较相应时间IRI组均明显减轻,与肾功能(Scr、BUN)结果一致(P0.05);与sham组相比:IPO及IRI组大鼠尿NGAL均在术后2 h开始升高,12 h到达峰值,除再灌注0 h、2 h外,IPO组各时间点尿NGAL表达均明显低于IRI组(P值均0.05)。结论:IPO对大鼠缺血再灌注肾损伤肾功能有保护作用,并可降低IRI所致的尿NGAL蛋白表达水平,NGAL可能成为肾IRI新的治疗靶点。     

缺氧诱导因子-1调控血红素氧化酶-1在急性肾损伤的作用机制

目的探究缺氧诱导因子-1(HIF-1)在肾缺血再灌注损伤中引起急性肾损伤(AKI)的作用及机制的研究。方法 C57小鼠20只(6～8周龄, 体重20～25 g), 其中10只为野生型(WT)鼠, 10只为纯合子肾小管上皮细胞特异敲低HIF-1(cKO)小鼠。按照简单随机法进行分组, 将WT小鼠随机分为假手术(Sham)组和缺血再灌注(IR)组, 每组各5只;cKO小鼠分随机为Sham组与IR组, 每组各5只。用1%戊巴比妥钠注射小鼠尾静脉, 手术组分离两侧肾动静脉结扎60 min后解除夹闭, 24 h后切除肾脏, 构建肾缺血再灌注模型。通过苏木精-伊红(HE)染色判断肾小管损伤情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肾脏组织中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和铁含量;蛋白质印迹法(Western blot)检测血红素氧化酶1(HO-1)及铁死亡相关指标的蛋白表达水平;免疫组织化学染色(IHC)检测HIF-1、HO-1、铁死亡相关组织的表达。两组间差异比较采用单样本t检验。结果 HE染色结果显示, WT小鼠中IR组肾小管上皮细胞受损程度高于Sham组(9.78±1.07比2.43±0...     

川芎嗪对小鼠急性肾缺血再灌注损伤的影响

目的 :探讨川芎嗪对小鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 :采用无损动脉夹夹闭右肾肾蒂阻断血流 30min ,然后放开动脉夹再灌注 15min、6 0min、2 4h制造小鼠急性肾缺血再灌注模型 ,观察血肌酐、血清尿素氮、血清丙二醛、血浆一氧化氮和肾含水量的变化。结果 :与生理盐水组相比 ,川芎嗪组在缺血再灌注 2 4h血肌酐、血清尿毒氮、血清丙二醛水平显著降低 (P <0 .0 1) ;再灌注 15min的血浆一氧化氮升高 (P <0 .0 5 ) ;肾含水量无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :川芎嗪对小鼠急性肾缺血再灌注有一定的保护作用     

缺血后处理减轻肾缺血再灌注损伤后肾小管间质的纤维化

目的 观察缺血后处理可以减轻大鼠肾缺血再灌注损伤(IPI)后肾小管间质纤维化的作用及其机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,摘除右肾后对左肾行缺血后处理,即10s再灌注,10 s缺血,6次循环后再灌注12周.实验动物分为缺血再灌注损伤组(IRI),缺血后处理组(IPO)和假手术组(Sham),全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),Masson特殊染色法观察小管间质纤维化程度;Western blotin法测定α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子(TGF-β)和磷酸化Smad2蛋白表达(p-Smad2);免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和TGF-β1的分布.结果 IRI组和IPO组较Sham组出现了明显肾间质纤维化,但是IPO组肾间质纤维化与IRI组比较有所减轻;α-SMA、TGF-β1和p-Smad2的水平明显减低,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肾脏缺血再灌注损伤可以引起小管间质纤维化.缺血后处理可以影响此病理改变,其保护机制可能为缺血后处理抑制TGF-β1和p-Smad2信号通路激活.     

硝苯地平对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨硝苯地平对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠42只,体重220～250 g,随机分为3组(n=14):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和硝苯地平组(N组).IR组和N组采用夹闭双侧肾动、静脉45 min后恢复灌注的方法制备大鼠肾缺血再灌注模型,S组不夹闭双侧肾动、静脉.N组于夹闭前15 min和再灌注前15 min分别尾静脉注射硝苯地平0.1 mg/kg,IR组分别尾静脉注射等量溶剂.于再灌注6和24 h时留尿,测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性;抽取腹主动脉血,测定血清肌酐(Cr)、MDA和一氧化氮(NO)浓度,然后处死大鼠取肾,采用流式细胞仪检测肾皮质细胞凋亡情况、热休克蛋白70(HSP70)的表达,免疫组化法测定内皮素-1(ET-1)的表达.结果 与S组比较,IR组血清Cr和MDA浓度、尿NAG活性、HSP70和ET-1表达水平及肾皮质细胞凋亡率均升高(P＜0.05),血清NO浓度差异无统计学意义(P＞0.05);与IR组比较,N组血清Cr和MDA浓度、尿NAG活性、ET-1表达水平及肾皮质细胞凋亡率降低,血清NO浓度升高(P＜0.05),HSP70表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 硝苯地平可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,可能与其抑制ET-1表达有关.     

乌司他丁对肾缺血再灌注大鼠肾组织超微结构的影响

目的　探讨乌司他丁在大鼠肾缺血再灌注损伤时肾功能和肾组织超微结构改变中的作用。方法　 30只雄性SD大鼠随机分为 3组 :假手术对照组 (双肾未缺血 ,静脉注射生理盐水 )、肾缺血再灌注组 (双肾缺血 ,静脉注射生理盐水 )、乌司他丁组 (双肾缺血 ,静脉注射乌司他丁 1 2 5万U/只 ) ,每组 10只。大鼠急性缺血性肾损伤模型为双肾缺血 4 5min、再灌注 2 4h ,观察缺血后肾功能和肾组织超微结构改变。结果　肾缺血再灌注组血肌酐 ( 16 7± 39) μmol/L、血尿素氮 ( 2 1± 7)mmol/L ,乌司他丁组血肌酐 ( 116± 13) μmol/L、血尿素氮 ( 14 1± 2 6 )mmol/L ,2组比较差异有显著性意义 (P<0 0 5 ) ;乌司他丁减轻肾组织超微结构损害。结论　乌司他丁对大鼠肾缺血再灌注损伤时肾功能和肾组织超微结构有明显保护作用     

HIF-PHI减轻炎症反应预防小鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨低氧诱导因子—脯氨酰羟化酶抑制剂(hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor, HIF-PHI)预处理小鼠能否减轻炎症反应, 减少细胞凋亡, 缓解肾脏缺血再灌注损伤。方法将雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI+HIF-PHI组, 每组6只, 其中IRI+HIF-PHI组提前1周隔天灌胃罗沙司他20 mg/kg。建立肾脏缺血再灌注模型后, 检测各组小鼠血清肌酐(sCr)水平;HE染色观察小鼠肾组织病理变化并进行损伤评分;原位末端标记法(TUNEL)评估肾组织细胞凋亡;实时定量逆转录聚合酶链(RT-PCR)反应检测肾脏组织内低氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白介素1β(IL-1β)的mRNA表达水平;免疫荧光及免疫组化分别检测HIF-1α, 炎症因子TNF-α和IL-1β表达情况。结果与IRI组相比, IRI+HIF-PHI组小鼠sCr水平明显降低(P<0.01), 肾组织损伤情况明显改善, 肾小管损伤半定量评分更低(P...     

肾动脉分支阻断技术对糖尿病小鼠缺血再灌注损伤及肾功能的保护作用

目的观察相对于传统的肾动脉阻断术(RAC),肾分支支脉阻断术(SRAC)对糖尿病小鼠(diabetic mice)缺血再灌注损伤及肾功能的保护性作用。方法糖尿病小鼠42只,随机分组为假手术组(Sham组)、肾动脉阻断组(RAC组)、肾分支动脉阻断组(SRAC组),每组14只。经过8周的饲养和观察后,将小鼠单侧肾蒂结扎,诱导出对侧孤立肾的模型。对3组小鼠按照不同的肾血管夹闭方式,诱导出不同的肾脏缺血再灌注损伤模型。在诱导肾脏缺血30min后,予以再灌注24h,分别取血样、尿样和肾皮质标本留作后续化验和组织学检查。结果术后24h,SRAC组小鼠的血肌酐、血尿素氮、尿微量白蛋白与尿肌酐比(UMAB/Ucr)显著低于RAC组(P0.05)。结论 SRAC可有效地减少糖尿病小鼠缺血再灌注导致的早期肾脏损伤并加速肾功能的恢复。     

蛋白激酶B介导的APPL1在肾缺血再灌注损伤致肾脏慢性纤维化的机制研究

目的观察蛋白激酶B(Akt)介导下pH域磷酸络氨酸结合域和亮氨酸拉链基元1(APPL1)对肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)小鼠肾纤维化的保护机制。方法取雄性C57BL/6小鼠24只,随机分为2组:普通小鼠假手术组(WT-C组)、普通小鼠肾缺血再灌注组(WT-I/R组);取APPL1基因敲除小鼠48只,随机分为4组:APPL1基因敲除假手术组(AK-C组)、APPL1基因敲除肾缺血再灌注组(AK-I/R组)、APPL1基因敲除+Akt抑制剂处理组(AK-L组)、APPL1基因敲除+生理盐水处理组(AK-S组)。除WT-C组和AK-C组外,其余组均制备肾IRI模型。AK-L在造模成功后腹腔给予Akt抑制剂(LY294002)6 mg/kg,后每隔24 h再腹腔注射相同剂量LY294002到第7天,AK-S组注射生理盐水。再灌注24 h时每组随机取6只小鼠,检测BUN和Scr浓度,进行肾小管损伤评分,测定肾组织APLL1表达和Akt磷酸化水平。再灌注14 d时每组随机处死6只小鼠,评估肾纤维化程度,测定肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白、α-平滑肌动蛋白、APLL1的表达和Akt磷酸化水平。结果再灌注24 h时血清BUN和Scr的浓度、肾小管损伤评分比较,WT-C组与AK-C组之间差异无统计学意义(P0.05);与WT-C组、AK-C组比较,WT-I/R组、AK-I/R组、AK-L组和AK-S组升高(P0.05),AK-L组最高(P0.05)。再灌注14 d时,肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白和α-平滑肌动蛋白的表达及和肾纤维化程度比较,WT-C组与AK-C组之间差异无统计学意义(P0.05);与WT-C组和AK-C组比较,WT-I/R组、AK-I/R组、AK-L组和AK-S组纤维化指标表达升高及肾纤维化程度升高(P0.05),AK-L组最高(P0.05)。再灌注24 h和14 d时,与WT-C组比较,WT-I/R组肾组织APPL1表达上调及Akt磷酸化水平升高(P0.05);再灌注24 h时,与AK-C组比较,AK-I/R组和AK-S组Akt磷酸化水平升高(P0.05),与AK-I/R组比较,AK-L组Akt磷酸化水平降低(P0.05)。结论 Akt介导下APPL1对肾IRI小鼠的肾慢性纤维化有保护作用。     

Nrf2/TGF－β通路在肾小管间质纤维化中的作用及机制

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)/转化生长因子-β(TGF-β)通路在失神经支配肾脏缺血再灌注损伤(IRI)导致的肾小管间质纤维化(TIF)中的作用及机制。方法成年雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(均n=12):假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(IR组)、失神经假手术组(RDN组)和失神经肾脏缺血再灌注组(DIR组)。分别于造模后1 d或7 d取材, 利用苏木精伊红(HE)染色法观察肾脏病理学改变、马松染色法观察TIF程度及免疫组化观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达, 检测血尿素氮、肌酐和中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、白细胞介素-4、10、13(IL-4、IL-10、IL-13)水平, 蛋白印迹法检测Nrf2、TGF-β和磷酸化母亲DPP同源物3(果蝇)(Smad3)蛋白表达。结果与Sham组比较, 再灌注1 d组(IR-1)和DIR-1组肾脏病理损伤、血清尿素氮、肌酐和NGAL水平、肾组织MDA、IL-4、IL-10和IL-13水平升高而SOD活性降低, Nrf2、转化生长因子(TGF)-β...     

静脉注射含饱和氢气生理盐水减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 研究静脉注射含饱和氢气生理盐水对小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制.方法 健康、雄性的C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只.假手术组(SO组)小鼠仅接受中线开腹、双侧肾蒂游离及关腹操作;缺血再灌注组(IR组)小鼠用无损伤动脉夹同时钳夹双侧肾蒂,阻断45 min,制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射生理盐水,5 ml/kg;实验组小鼠制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射含饱和氢气生理盐水,5 ml/kg.各组小鼠于肾脏再灌注6 h时检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr);检测肾组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;观察肾脏组织形态学变化并检测肾小管上皮细胞的凋亡情况;观察肾组织中巨噬细胞的浸润情况;检测各组小鼠肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和IL-17 mRNA的水平.结果 实验组血清BUN和Scr水平明显低于IR组(P<0.05).实验组肾组织病理改变较IR组明显减轻,其肾小管损伤评分明显低于IR组(P<0.01),肾小管上皮细胞凋亡明显轻于IR组(P<0.05).实验组肾组织内MDA含量低于IR组(P<0.05).实验组小鼠肾组织内中性粒细胞和巨噬细胞的浸润较IR组减少(P<0.05).实验组TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17mRNA的水平均低于IR组(P<0.05).结论 静脉注射含饱和氢气生理盐水能够在一定程度上减轻肾脏IR损伤,其机制可能与抑制肾脏IR后炎症反应有关.     

吡咯烷二巯基氨甲酸对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及机制

目的 探讨吡咯烷二巯基氨甲酸(PDTC)对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及可能的机制.方法 选择成年、健康及雄性的Wistar大鼠56只,随机分为缺血再灌注损伤(IRI)组,PDTC组及对照组.IRI组:24只,建立大鼠肾缺血再灌注模型;PDTC组:24只,缺血再灌注前15 min经鼠尾静脉注射PDTC 150 mg/kg,其余步骤同IRI组;对照组:8只,不给予缺血再灌注处理.IRI组和PDTC组分别于再灌注后2、6和24 h检测大鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;检测肾组织中自细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织中核因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织的病理变化.取对照组的各项数据作为正常对照.结果 IRI组大鼠再灌注后各时间点的血Cr、BUN、IL-8及TNF-α含量、NF-κB和iNOS mRNA表达水平均高于对照组和PDTC组(P<0.05).再灌注后6 h时,PDTC组大鼠肾组织中IL-8和TNF-α含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).再灌注后24 h时,PDTC组大鼠各项生化指标与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05).PDTC组大鼠肾损伤的病理变化较IRI大鼠明显减轻.结论 PDTC通过抑制NF-κB,有效减少IL-8,TNFα和iNOS的产生,对肾缺血再灌注有良好的保护作用.     

罗格列酮对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的研究罗格列酮对肾缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制。方法将60只大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注损伤组、罗格列酮10 mg/kg组、罗格列酮20 mg/kg组、罗格列酮40 mg/kg组和罗格列酮80 mg/kg组,每组各10只。利用血管夹夹闭大鼠双侧肾蒂构建肾缺血再灌注损伤模型。ELISA检测大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达量;Western blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和p-PPAR-γ表达水平;RT-PCR检测肾脏IL-8、TNF-α和IL-6信使核酸序列(mRNA)水平;黄嘌呤氧化酶法检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;TBA法检测丙二醛(MDA)的含量;过碘酸雪夫氏(PAS)染色检测肾组织病理形态。结果与假手术组相比,缺血再灌注损伤组肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6、p-PPAR-γ以及MDA表达水平均明显增加,而CAT、GPX和SOD活性明显降低以及PPAR-γ表达差异无统计学意义;与缺血再灌注损伤组相比,罗格列酮预处理可明显减少肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6以及MDA表达水平,但可明显增加CAT、GPX和SOD活性以及p-PPAR-γ表达水平,但对PPAR-γ表达水平无影响。结论罗格列酮预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护,其作用机制与激活PPAR-γ抑制氧化应激和炎症相关。     

TRPM2-CnA-Drp1通路在丙泊酚减轻小鼠肝缺血再灌注致肾损伤中的作用

目的评价瞬时受体电位M2(TRPM2)-钙调磷酸酶A(CnA)-线粒体动力相关蛋白1(Drp1)通路在丙泊酚减轻小鼠肝缺血再灌注致肾损伤中的作用。方法 SPF级雄性C57BL6小鼠24只,8周龄,体重20～23 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(IR组)、丙泊酚组(P组)和TRPM2激动剂腺苷二磷酸核糖(ADPR)+丙泊酚组(AP组)。采用夹闭肝左、中叶门静脉和肝动脉60 min恢复灌注的方法制备肝缺血再灌注损伤模型。P组于造模前1 h时腹腔注射生理盐水0.2 ml,造模前30 min时腹腔注射1%异丙酚30 mg/kg;AP组于造模前1 h时腹腔注射ADPR 10 mg/kg(溶于0.2 ml生理盐水中),造模前30 min腹腔注射1%异丙酚30 mg/kg;S组和IR组分别于造模前1 h和30 min时腹腔注射等体积生理盐水。于再灌注6 h时摘眼球采血检测血清BUN、Cr、ALT和AST水平,然后处死小鼠取肾组织,透射电镜下观察线粒体超微结构,并计算线粒体长径,采用Western blot法检测TRPM2、CnA、磷酸化Drp1(p-Drp1...     

2型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤及肾康注射液的治疗作用

目的:探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的病理生理改变,并观察肾康注射液(SKI)对其治疗的效应。方法:利用高糖高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型,并采用高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验判定模型大鼠发生胰岛素抵抗的情况。将造模成功的SD大鼠随机分为糖尿病肾缺血再灌注组(DMIR)、糖尿病肾缺血再灌注SKI治疗组(DMIR+SKI)、糖尿病假手术组(DMS)和正常对照组(NCS)。应用右肾切除联合左肾动脉夹闭45 min,再灌注24 h的方法诱导肾IRI。DMIR+SKI组大鼠提前应用SKI(6.0 g·kg~(-1)·d~(-1))干预治疗8周。诱导肾IRI后,观察大鼠尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肾损伤分子~(-1)(KIM~(-1))、肾功能改变和肾组织病理改变。结果:DMIR组大鼠尿NAG、KIM水平、血清肌酐和血尿素氮水平均明显高于DMS和NCS组(P0.01),DMIR+SKI组大鼠上述指标则明显低于DMIR组(P0.01)。DMIR组大鼠肾小管上皮细胞出现明显的肿胀、变性与坏死,肾小管刷状缘消失,管腔可见碎片或管型,DMIR+SKI组肾小管损伤程度则相对较轻,肾小管损伤评分低于DMIR组(P0.01)。结论:SKI可降低T2DM大鼠肾IRI的血清肌酐和血尿素水平,降低肾小管损伤标志物尿NAG和KIM~(-1)水平,减轻肾组织病理损伤。     

缺血再灌注对肾细胞内钙水平和细胞凋亡的影响

目的　观察缺血再灌注损伤对肾细胞游离钙 ([Ca2 ]i)水平和细胞凋亡的影响。　方法　 30只Wistar大鼠 ,分组建立急性缺血再灌注肾损伤模型 ,应用Fura 2 /AM荧光指示剂测定缺血再灌注大鼠肾细胞 [Ca2 ]i水平 ,流式细胞术检测肾细胞凋亡率。　结果　缺血再灌注 1、2、2 4h肾细胞Ca2 超载水平分别为 15 6 .2、181.6和 2 6 0 .6nmol/L ,与对照组 (10 9.7nmol/L)相比差异有统计学意义(P <0 .0 1) ;1、2、2 4h肾细胞凋亡率分别为 9.5 8%、9.79%和 11.2 3% ,与对照组 (1.5 1% )相比差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。缺血再灌注细胞Ca2 超载与肾细胞凋亡率有正相关趋势 (r =0 .83,P >0 .0 5 )。　结论　缺血再灌注肾细胞呈现Ca2 超载 ,与肾细胞凋亡率呈正相关趋势 ,提示肾细胞钙超载可能是再灌注损伤肾功能障碍的重要原因。     

缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 评价缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重250～280 g,随机分为5组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IP组)、缺血后处理组(IPo组)和缺血预处理联合后处理组(IP+IPo组).S组仅开腹,游离双侧肾脏,分离双侧肾蒂但不夹闭.采用夹闭双侧肾蒂45 min、再灌注6 h的方法 制备肾缺血再灌注模型.IP组夹闭双侧肾蒂5 min,再灌注5 min,反复3次,余操作同I/R组;IPo组夹闭双侧肾蒂45 min后,再灌注10 8,缺血10 s,反复3次,再灌注6 h.于再灌注6 h时,经心脏抽血后迅速处死大鼠取肾,测定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的浓度;采用硫代巴比妥酸法测定肾组织丙二醛(MDA)含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性;光镜下观察肾组织病理学结果 ;TUNEL法检测肾组织凋亡细胞,计算凋亡指数(AJ).结果 与S组比较,其余各组血清Cr和BUN的浓度升高,肾组织SOD活性降低,MDA含量和AI升高(P<0.05);与I/R组比较,IP组、IPo组和IP+IPo组血清Cr和BUN的浓度降低,肾组织SOD活性升高,MDA含量和AJ降低(P<0.05),肾损伤减轻;与IP组和IPo组比较,IP+IPo组肾组织SOD活性升高,AI降低(P<0.05),肾损伤减轻.结论 缺血预处理联合后处理可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,较单独应用时效果好.     

胆总管结扎预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 探讨胆总管结扎预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤的可能机制.方法 C57BL/6小鼠分为3组进行实验.胆总管结扎预适应组(CBDL组)结扎胆总管(d0),2d后(d2)再通,再过2d后(d4)行左肾缺血再灌注手术;假手术组仅结扎胆囊管(d0),d4再行左肾缺血再灌注手术;对照组不进行任何处理.监测血胆红素总量(TBil)的变化情况.肾脏缺脏再灌注后24 h(dS)检测各组小鼠血清肌酐(Cr).蛋白质印迹法检测CBDL组和假手术组肾脏热休克蛋白27 (HSP-27)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达情况.结果 CBDL组胆总管结扎2d后,TBil达到最高,再通2d后,TBil基本降至正常水平.CBDL组Cr低于假手术组(P＜0.05).CBDL组HSP-27和eNOS的表达量高于假手术组(P＜0.05).结论 胆道结扎预适应能明显减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤,其机制可能与引起肾脏局部HSP-27和eNOS高表达有关.     

USP14抑制对肾缺血再灌注诱导的急性肾损伤及IRE1/JNK信号通路的影响

目的 研究USP14的抑制是否可以减轻缺血再灌注（ischemia-reperfusion,IR）诱导的急性肾损伤以及潜在机制。方法 通过对小鼠进行左侧肾动脉夹闭45 min和再通建立体内肾IR模型;HE染色观察各组肾组织损伤情况;生化试剂盒检测血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、肌酐（serum creatinine,Scr）水平;Western blot检测内质网（endoplasmic reticulum,ER）应激相关蛋白（GRP78、CHOP、IRE1和JNK）和凋亡相关蛋白（cleaved capase-3和Bcl-2）的表达;通过TUNEL检测肾组织细胞的凋亡水平。结果 与模型组比较,IR组中小鼠肾损伤和肾功能障碍在再灌注期呈时间依赖性逐渐加重,肾组织中USP14的表达和BUN及Scr的水平增加（P<0.05）;与IR+sh-NC组比较,IR+sh-USP14组中小鼠肾病理损伤及肾组织中USP14、BUN、Scr的水平降低（P<0.05）。此外,与模型组比较,IR组小鼠肾组织中肾细胞凋亡,cleaved caspase-3和ER应激相关...