菊苣酸通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路抑制口腔癌KB细胞增殖、侵袭与黏附的研究

目的 探讨菊苣酸对口腔癌KB细胞增殖、侵袭与黏附的影响及机制。方法 将KB细胞分为对照组和低、中、高剂量实验组,分别用0,5,10和20μmol·L^-1菊苣酸干预24 h。比较4组细胞的穿膜细胞数、细胞黏附率,以及磷脂酰肌醇3激酶p85亚单位（PI3Kp85）和磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）的表达情况。结果 低、高剂量实验组和对照组的穿膜细胞数百分比分别为（79.37±8.04）%,（64.66±7.61）%和（100.00±0）%,细胞黏附率分别为（84.06±3.27）%,（64.64±7.22）%和（100.00±0）%,PI3Kp85相对表达量分别为0.70±0.10,0.08±0.02和0.78±0.05,p-Akt相对表达量分别为0.50±0.06,0.27±0.05和0.81±0.07,低、高剂量实验组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 菊苣酸能够抑制口腔癌KB细胞的增殖、侵袭与黏附,该作用与抑制PI3K/Akt信号通路的活化有关。     

血管外膜脂肪组织源性脂联素通过磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路促进血管内膜损伤后内皮细胞增生的研究

目的 研究血管外膜脂肪组织分泌的脂联素对血管内膜损伤后内皮细胞增生的影响及可能的分子机制.方法 将C57BL/6J野生型小鼠72只完全随机分为A组（仅剪开颈部皮肤后再缝合）、B组（给予颈动脉套管结扎）、C组（剪开颈部皮肤后于颈动脉周围移植脂联素基因敲除小鼠脂肪组织）及D组（颈动脉套管结扎同时于颈动脉周围移植脂联素基因敲除小鼠脂肪组织）,每组18只.手术8周后处死小鼠,取各组小鼠左颈总动脉切片,采用苏木精-伊红染色,观察各组小鼠颈动脉内膜增生情况并测定内膜增厚程度,以内膜面积与中膜面积的比值表示.应用酶联免疫吸附试验检测各组小鼠颈动脉组织内脂联素水平.采用蛋白质印迹法检测各组小鼠颈动脉组织内磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）及其磷酸化产物的水平.体外实验将小鼠内皮细胞以5＆#215;104个/ml接种于内皮细胞生长培养基中,将细胞分为对照组、脂联素组（在对照组基础上加入重组脂联素100 mg/L）及PI3K抑制组（在对照组基础上加入重组脂联素100 mg/L和PI3K抑制剂LY29400 250 μg/L）,利用标记5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）的微小RNA（miR-21）模拟物转染小鼠内皮细胞,使其在细胞中呈过表达状态,通过荧光显微镜观察各组内皮细胞的增生情况,比较BrdU阳性细胞百分率.结果 B组小鼠颈动脉内膜增厚程度明显大于A组、C组和D组,差异均有统计学意义[（1.37±0.09）比（0.82±0.18）、（0.71±0.05）、（1.03±0.06）,P值分别为0.023、0.001、0.010].B组小鼠脂联素的表达水平明显高于A组、C组和D组,差异有统计学意义[（95±6） ng/L比（77±5）ng/L、（55±5）ng/L、（70±7）ng/L,P=0.049、0.021、0.027].C组与D组小鼠颈动脉组织内AKT及PI3K磷酸化产物水平较A组与B组降低.体外实验脂联素组内皮细胞的BrdU阳性细胞率较对照组明显增加,差异有统计学意?     

枇杷叶提取物通过激活磷脂酰肌醇 3激酶 /蛋白激酶 B信号通路减轻脂多糖诱导的肺细胞损伤

目的探讨枇杷叶提取物对脂多糖( LPS)诱导的人 Ⅱ型肺泡上皮细胞 A549增殖、凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法 2019年 6月至 2020年 7月,采用 LPS诱导的 A549细胞建立肺损伤模型( LPS组)同时将正常培养的细胞作为对照组。不同剂量( 1 mg/L、2 mg/L、4 mg/L)的枇杷叶提取物处理细胞( LPS+枇杷叶 -L组、 LPS+枇,杷叶 -M组、 LPS+枇杷叶 -H组),添加磷脂酰肌醇 3激酶( PI3K)/蛋白激酶 B(Akt)信号通路抑制剂 LY294002与枇杷叶提取物处理细胞( LPS+枇杷叶 -H+ LY294002组);采用 MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用 2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的含量;采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛的含量;蛋白质印迹法( Western blotting)检测磷酸化磷脂酰肌醇 -3-激酶( p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶 B(p-Akt)、 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X(Bax)蛋白蛋白表达量。结果与对照组比较, LPS组吸光度［( 1.38±0.06)比( 0.55±0.02)］及 SOD的含量［( 81.66±5.36)U/L比(14.65±1.06)U/L］降低,凋亡率［(6.41±0.25)%比( 27.43±1.00)%］、 Bax蛋白水平及 LDH［(242.86±6.09)U/L比( 875.92±15.01)U/ L］、丙二醛［( 121.55±3.17)μmol/g比( 424.46±6.48)μmol/g］的含量升高, Bcl-2、p-PI3K［( 0.60±0.04)比( 0.13±0.01)］、 p-Akt［( 0.51±0.04)比( 0.09±0.01)］蛋白水平降低,差异有统计学意义( P<0.05);与 LPS组比较, LPS+枇杷叶 -M组、 LPS+枇杷叶 -H组吸光度［( 0.55±0.02)比( 0.86±0.03)、(1.18±0.05)］及 SOD［( 14.65±1.06)U/L比( 36.84±2.08)U/L、(70.97±3.03)U/L］的含量升高,凋亡率［( 27.43±1.00)%比( 22.24±0.81)%、(14.78±0.49)%］、 Bax蛋白水平及 LDH［( 875.92±15.01)U/L比( 641.95±9.81)U/L、(365.47±7.02)U/L］、丙二醛［( 424.46±6.48)μmol/g比( 277.94±6.90)μmol/g、(156.30±3.26)μmol/g］的含量降低, Bcl-2、p-PI3K［( 0.13±0.01)比( 0.32±0.01)、(0.54±0.03)］、 p-Akt［( 0.09±0.01)比( 0.25±0.02)、(0.42±0.03)］蛋白水平升高,均差异有统计学意义( P<0.05);添加 LY294002可明显逆转枇杷叶提取物对 LPS诱导的 A549细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论枇杷叶提取物可通过激活 PI3K/Akt信号通路减轻 LPS诱导的 A549细胞增殖抑制、凋亡和氧化应激效应,为探究枇杷叶治疗细菌感染     

气道重塑与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在支气管哮喘发病机制中的研究进展

支气管哮喘是一种以可逆性气流受限为特征的气道慢性炎症性疾病。在支气管哮喘众多发病机制中,气道重塑与磷脂酰肌醇 3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)通路联系紧密。气道重塑与支气管气道平滑肌细胞的增殖和凋亡密切相关。PI3K/PKB信号通路作为细胞内一条重要的信号传导通路,起到抑制细胞凋亡、促进细胞周期的进展,介导细胞增殖等作用,因而可以结合气道重塑与PI3K/PKB通路对支气管哮喘的发病和治疗进行探讨和研究。该研究现对支气管哮喘、气道重塑、PI3K/PKB通路的研究进展进行了综述,以期为支气管哮喘的治疗提供借鉴。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路参与哮喘气道炎症反应的研究现状

哮喘是一种常见且易反复发作的气道免疫炎症疾病,多种细胞及其组分可共同参与并促进其病理过程.气道炎症是哮喘的基本特征,可引起气道高反应,常表现为炎症细胞的增加及炎性细胞的浸润.磷脂酰肌醇3激酶(phosphati-dylinositol 3-kinase,PI3K)的活化可导致丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/thr...     

单酰基甘油脂肪酶抑制药通过磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路对胃癌细胞生物学活性的影响北大核心CSCD

目的 探究单酰基甘油脂肪酶(MAGL)抑制药对胃癌细胞侵袭、迁移及磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 体外培养人胃癌细胞系MKN-45,分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组给予正常DMEM培养基培养,不作任何处理;低、中、高剂量实验组分别用含1,10和20μmol·L^(-1) MAGL抑制药的DMEM培养基进行培养。用噻唑蓝法、划痕实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移、侵袭能力,用蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白的表达情况。结果 中、高剂量实验组和空白组的细胞抑制率分别为(9.12±0.48)%,(23.78±0.65)%和0.00%,侵袭细胞数分别为(221.64±28.66),(118.58±18.75)和(308.21±36.36)个,划痕愈合率分别为(18.36±2.88)%,(11.03±1.72)%和(27.05±4.10)%,PI3K蛋白相对表达水平分别为0.64±0.05,0.48±0.07和1.18±0.08,p-AKT蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06,0.45±0.09和0.97±0.07。中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 MAGL抑制药可能通过调控PI3K/AKT信号通路,抑制胃癌MKN-45细胞增殖、侵袭及转移。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在黄芪甲苷防治疾病中的作用

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在细胞增殖、凋亡抑制、细胞迁移、囊泡转运和细胞癌转化中起重要作用。黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,ASI)是黄芪的主要成分之一,具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、促进血管内皮增生等多方面药理作用。黄芪甲苷通过多层次、多靶点作用于PI3K/Akt信号通路调节细胞的表型和功能,在治疗和预防多种疾病中至关重要。本文总结了黄芪甲苷在多种疾病中的具体作用机制,以期揭示黄芪甲苷在疾病预防和治疗中的可能性,为其后续研究提供一定的理论依据。     

鸢尾素对局灶性脑缺血再灌注大鼠磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路及Th1/Th2失衡的影响北大核心CSCD

目的探究鸢尾素对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织的保护作用。方法用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠,并随机分为模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组15只;另取15只正常大鼠仅分离右颈总动脉不进行其他操作作为假手术组。于造模结束第2天,低、中、高剂量实验组分别按50,100和200 mg·kg^(-1)的剂量灌胃给予50 mg·mL^(-1)鸢尾素溶液;对照组按200 mg·kg^(-1)的剂量灌胃给予50 mg·mL^(-1)葛根素;假手术组和模型组均灌胃给予等体积0.9%NaCl。6组每天给药1次,连续给药4周。用流式细胞术检测Th1和Th2细胞数量,用蛋白质印迹法检测脑组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路蛋白表达。结果低、高剂量实验组和对照组、模型组、假手术组的PI3K蛋白磷酸化分别为0.21±0.04,0.46±0.05,0.49±0.07,0.12±0.03和0.64±0.05,AKT蛋白磷酸化分别为0.89±0.06,1.37±0.08,1.41±0.12,0.68±0.04和1.74±0.26,Th1细胞比例分别为(30.46±3.37)%,(23.43±3.37)%,(22.73±1.28)%,(36.85±3.45)%和(20.28±3.93)%,Th2细胞比例分别为(3.60±0.38)%,(4.16±0.45)%,(4.23±0.37)%,(2.91±0.43)%和(5.15±0.39)%。低、高剂量实验组和对照组、假手术组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论鸢尾素可能通过激活PI3K/AKT通路从而降低Th1细胞比例、升高Th2细胞比例,进而实现对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织的缓解。     

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白自噬通路在支气管肺发育不良中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。方法 将A549细胞(腺癌人类肺泡基底上皮细胞)一定条件培养后分成对照组、支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组。支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组高氧环境培养,置于37℃、85%氧气孵化箱中培养48 h,前者不加药剂、后者加10μmol/L的雷帕霉素干预;对照组常规环境培养,置于37℃、5%二氧化碳孵化箱中培养48 h,不加药剂。利用高氧构建支气管肺发育不良的细胞模型,利用蛋白质印迹实验和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验验证自噬对高氧处理后A549细胞肺泡表面标志物合成蛋白复合物(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)的影响,利用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)实验检测自噬对高氧处理后A549细胞增殖的影响,利用蛋白质印迹实验验证PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。结果 蛋白质印迹实验和RT-qPCR实验表明自噬激活剂雷帕霉素挽救了高氧处理后A549细胞SPC、AQP5表达的下调。EdU实验表明雷帕霉素显著促进了高氧处...     

长链非编码 RNA MIR4435-2HG靶向微小 RNA-1-3p调控信号通路磷脂酰肌醇激酶 /蛋白激酶 B对胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA MIR4435-2HG(LncRNA MIR4435-2HG)通过调控微小RNA-1-3p(miR-1-3p)的表达对胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制.方法 体外培养正常胰腺细胞系hTERT-HPNE与胰腺癌细胞系PANC-1、SW1990、PaTu8988、BxPC-3,将胰腺癌PaTu8988细胞按照随机数字表法分为si-MIR4435-2HG组(转染MIR4435-2HG siRNA)、si-con组(转染siRNA Control)、miR-1-3p组(转染miR-1-3p mimics)、miR-con组(转染miR-1-3p阴性对照)、si-MIR4435-2HG+an-ti-miR-1-3p组(共转染MIR4435-2HG siRNA与miR-1-3p抑制剂)、si-MIR4435-2HG+anti-miR-con组(共转染MIR4435-2HG siR-NA与miR-1-3p抑制剂的阴性对照),同时将未经任何处理的细胞作为NC组.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中MIR4435-2HG与miR-1-3p的表达;双荧光素酶报告基因检测MIR4435-2HG与miR-1-3p的相互作用.四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)分析敲低MIR4435-2HG及上调miR-1-3p表达对胰腺癌细胞增殖的影响;Transwell迁移及侵袭实验检测MIR4435-2HG及上调miR-1-3p表达对胰腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响.蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)及磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白的表达.结果 MIR4435-2HG在胰腺癌细胞中的表达水平明显高于正常胰腺细胞;MIR4435-2HG可特异性结合miR-1-3p并调控其表达活性;敲低MIR4435-2HG与上调miR-1-3p表达后,可抑制胰腺癌PaTu8988细胞增殖,明显减弱细胞迁移及侵袭能力[其中NC组、miR-con组、si-MIR4435-2HG组增殖活性分别为48 h:(1.21±0.10)、(1.18±0.12)、(0.86±0.09),细胞迁移数量分别为(90.56±9.16)、(88.56±8.91)、(26.49±2.10),细胞侵袭数量分别为(160.79±16.12)、(155.09±15.49)、(69.23±7.10),均P<0.05],下调PaTu8988细胞中cyclin D1、MMP2、MMP9、p-Akt、PI3Kp110α、PI3Kp110β的表达;抑制miR-1-3p表达可促进胰腺癌PaTu8988细胞增殖、迁移及侵袭.结论 敲低LncRNA MIR4435-2HG可通过靶向调控miR-1-3p表达并抑制PI3K/Akt信号通路活化而降低细胞增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达,进而减弱胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力.     

microRNA—155通过磷脂酰肌醇3激酶/丝—苏氨酸蛋白激酶信号通路调节低氧诱导的缺血性脑卒中的血管生成研究

目的 研究微小RNA155（miRNA-155）通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/丝-苏氨酸蛋白激酶（AKT）信号通路调节低氧诱导的缺血性脑卒中的血管生成作用机制。方法 用线栓法建立永久性局灶脑缺血大鼠模型,并在实施造模手术前48 h给予CoCl₂构成持续低氧环境。将造模后的大鼠随机分为模型组、对照组、实验A组和实验B组,每组15只;另取15只健康大鼠给予只穿线不结扎处置作为假手术组。模型组和假手术组术后均不给予任何处理;对照组造模手术后5 min给予单侧脑室注射10 mg·kg^-1慢病毒载体miRNA-155-siRNA-NC1 10μL;实验A组造模手术后5 min给予单侧脑室注射10 mg·kg^-1慢病毒载体miRNA-155-siRNA 10μL;实验B组造模手术后5 min给予单侧脑室注射10 mg·kg^-1 LY294002 10μL。5组大鼠均每周给药1次,每组均干预28 d。用免疫组化法检测大鼠的脑组织微血管密度（MVD）,用蛋白质印迹法检测大鼠脑组织中血管内皮生长因子（VEGF）...     

反义磷脂酰肌醇3-激酶寡脱氧核苷酸抑制白介素-1诱导的NF-κB活化

目的　研究反义磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI 3 激酶 )寡脱氧核苷酸 (oligodeoxynucleotides,ODN)对核因子 κB(NF κB)活化的影响。方法　Lipofectin介导反义PI 3 激酶ODN转染HepG2细胞 ,以逆转录PCR法检测PI 3 激酶mRNA表达水平 ,用SandwichELISA法检测NF κB的活化。结果　(1)反义PI 3 激酶ODN抑制PI 3 激酶mRNA表达。 (2 )反义PI 3 激酶ODN呈剂量 (1～ 8μg)和时间 (5～ 2 4h)依赖性地抑制NF κB活化 ,2 μg反义PI 3 激酶ODN与细胞共孵育 8h时抑制效果最好。结论　反义PI 3 激酶ODN通过阻断PI 3 激酶表达抑制NF κB活化 ,预示反义PI 3 激酶ODN可潜在抑制IL 1的炎症活性     

中医药调控PI3K/AKT信号通路防治慢性心力衰竭研究状况

慢性心力衰竭(CHF)是各种心血管疾病的终末期表现,是各种心脏结构或功能疾病所造成的心室充盈和(或)射血分数受损的一组综合征。该病的发病机制复杂多样,大多与细胞凋亡的活性增强有关。磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路参与CHF的发生、发展和病理形成。相关研究表明,PI3K/AKT通路是中药治疗CHF的关键靶通路。本文对近年来中药调控PI3K/AKT通路干预CHF的机制和作用进行分析和总结,发现中药提取物、中成药及中药复方均可改善CHF的心肌细胞损伤,其作用机制与细胞凋亡、炎症因子、氧化应激和心室重构密切相关。同时创造性地总结了PI3K/AKT通路在防治CHF中存在的对立性争议,并分析了产生争议原因,以期为CHF的治疗和新药研发提供新思路。     

红参对卵巢储备功能减退大鼠卵巢储备功能和卵巢组织磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路的影响

目的探讨红参对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠卵巢功能的改善作用以及潜在机制。方法 2022年 8—11月进行 DOR大鼠模型建立实验。将 48只 SD雌性大鼠分为空白组、模型组、模型+雌二醇组以及模型+红参组,每组 12只。采用腹腔注射去氧乙烯基环己烯(VCD)225 mg/kg建立 DOR大鼠模型。模型组与空白组均给予 0.9%氯化钠溶液灌胃,模型组+雌二醇组给予 0.15 mg/kg戊酸雌二醇溶液灌胃,模型+红参组给予 5 g/kg红参混悬液灌胃,1次/天,共 30 d。 30 d后比较各组大鼠治疗前后体质量变化;观察卵巢组织病理切片变化;检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇、促性腺激素释放激素(GnRH)和抗缪勒管激素(AMH)激素水平变化;蛋白质印迹法检测卵巢组织中磷脂酰肌醇 3-激酶 p85α(PI3K p85α)、蛋白激酶 B(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达量和磷酸化水平。结果用药后,模型+雌二醇组大鼠体质量差值为(15.0±0.7)g高于模型组的(10.9±1.3)g,体质量明显增加(P<0.05)。模型+红参组大鼠体质量差值为(14.9±0.4)g,高于模型组的(10.9±1.3)g(P<0.05),但与模型+雌二醇组的(15.0±0.7)g比较差异无统计学意义(P>0.05)。病理切片显示,模型+雌二醇组和模型+红参组卵泡数量多于模型组,卵巢结构较为清晰,颗粒结构更为紧凑,黄体数量较模型组增多;ELISA实验显示,用药后,模型+红参组和模型+雌二醇组 AMH、雌二醇和 GnRH明显升高,FSH、LH明显降低(P<0.05)其中模型+红参组激素水平恢复更明显(P<0.05)。蛋白质印迹法显示,与模型组比较,用药后,模型+红参组和模型+雌二醇组,p-PI3K p85α、p-Akt和 pmTOR均显著下降(P<0.05);与雌二醇组比较,模型+红参组 p-PI3K p85α、p-Akt、p-mTOR水平降低(P<0.05)。结论红参可以有效改善 DOR模型大鼠的内分泌,可能通过调控 PI3K/Akt/mTOR信号通路参与改善卵巢功能。     

生长抑素联合人转录因子叉头框蛋白 D1通过磷脂酰肌醇 3激酶 /蛋白激酶 B通路调控胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨生长抑素联合人转录因子叉头框蛋白 D1(FOXD1)通过磷脂酰肌醇 3激酶 /蛋白激酶 B(PI3K/AKT)通路调控胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究。方法研究于 2018年 12月至 2019年 12月进行,通过体外培养 PANC-1细胞,过不同浓度( 0 mg/L、100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L)的生长抑素( SST)处理细胞,记为生长抑素各剂量组,其中 0 mg/L和 400 mg/经L的生长抑素作为对照组( Control)和生长抑素组( SST);将过表达载体( pcDNA)和过表达 FOXD1(FOXD1)转染至 PANC-1细胞,经过 400 mg/L的生长抑素及 20 mol/L的 PI3K抑制剂 LY294002处理细胞,记为 SST+pcDNA组、 SST+FOXD1组和 SST+ FOXD1+LY294002组。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法( MTT)检测细胞增殖; Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法( Western blotting)检测增殖细胞核抗原( PCNA)、基质金属蛋白酶 -2(MMP-2)、基质金属蛋白酶 -9(MMP-9)、 FOXD1和 PI3K/ AKT相关蛋白的表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测 FOXD1 mRNA的表达。结果与 Control组相比, SST组可以抑制 FOXD1 mRNA(0.47±0.03)及蛋白表达( 0.42±0.04)、增殖( 0.52±0.05)、迁移( 66.8±7.2)和侵袭( 63.7±6.5)能力,下调 p-PI3K(0.43±0.04)、 p-AKT(0.39±0.03)蛋白表达;与 SST+pcDNA组相比, SST+FOXD1组可以促进以抑制 FOXD1 mRNA(0.67±0.05)及蛋白表达( 0.64±0.06)、增殖( 0.71±0.07)、迁移( 86.9±8.5)和侵袭( 81.5±7.3)能力,上调 p-PI3K(0.62±0.05)、 p-AKT(0.65±0.06)蛋白表达。与 SST+FOXD1组相比, SST+FOXD1+LY294002组可以抑制 FOXD1 mRNA(0.37±0.04)及蛋白表达(0.35±0.03)、增殖( 0.53±0.05)迁移(67.2±6.5)和侵袭( 62.5±5.2)。结论生长抑素通过调控 FOXD1的表达抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与抑制 PI3K/AKT通路有关。     

磷脂酰肌醇-3-激酶在胰岛素与表皮生长因子激活MAPK信号通路中的不同作用

目的　研究磷脂酰肌醇 3 激酶 (phosphatidylinositol3 kinase, PI3K)在胰岛素和表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor, EGF)刺激丝裂原激活的蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase,MAPK)信号通路中的作用。方法　主要应用免疫印迹方法分析MAPK的磷酸化水平,利用PI3K特异性抑制剂wortmannin了解PI3K在其中所起的作用。结果　胰岛素和EGF均能有效、快速地刺激MAPK的磷酸化;wort mannin抑制胰岛素刺激的MAPK磷酸化,但对EGF刺激的MAPK磷酸化却没有明显影响。与此相反,胰岛素和EGF刺激的蛋白激酶B的磷酸化,均可被wortmannin同样有效地抑制。另外,wortmannin抑制胰岛素刺激的MAPK磷酸化具浓度依赖性;其不能抑制EGF刺激的MAPK磷酸化的性质并不随EGF刺激浓度的改变而改变。结论　PI3K在胰岛素和EGF刺激的MAPK磷酸化信号通路中起不同的作用。     

鱼腥草总黄酮调控PI3K/Akt信号通路诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究

目的：探讨鱼腥草总黄酮调控磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路对人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的诱导作用。方法：取对数期MCF-7细胞,随机分为4组（5个复孔）,低、中、高剂量组分别用3,6,9 g·L^-1鱼腥草总黄酮处理,对照组用磷酸盐缓冲液（PBS）处理。干预48 h后进行细胞形态学观察;对比干预12,24,48 h时的细胞凋亡率;对比干预48 h时PI3K、Akt、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和PI3K、Akt、磷酸化Akt（pAkt）、Bcl-2、Bax蛋白相对表达量。结果：Hoechst 33258染色结果显示,干预后3剂量组部分细胞体积缩小、染色质浓缩,出现凋亡小体,且中剂量组凋亡现象最为明显;细胞凋亡率、Bax mRNA和蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最高、高剂量组其次、低剂量组其稍低、对照组最低,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;细胞凋亡率组内比较,对照组随时间的延长变化不显著（P>0.05）,3剂量组均随时间的延长显著增加（P<0.05）;PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最低、高剂量组其次、低剂量组稍高、对照组最高,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;Akt mRNA和蛋白相对表达量组间比较差异均不显著（P>0.05）。结论：鱼腥草总黄酮可促进人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡,其中浓度为6 g·L^-1时促凋亡作用最强,推测是通过下调PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白表达,上调Bax mRNA和蛋白的表达,与PI3K/Akt信号通路有关。     

PTEN/磷脂酰肌醇3激酶通路参与高压力负荷心肌肥厚的机制

目的探讨压力负荷下心肌组织PTEN(phosphataseand tensin homologue deleted on chromosom e ten)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路的变化,及血管紧张素受体(angio-tensinⅡreceptors)AT1及AT2拮抗剂对它的影响,探讨心肌肥厚的信号转导机制。方法腹主动脉缩窄法建立大鼠高压力负荷心肌肥厚模型,实验动物分为手术组(n=8);缬沙坦(valsartan)组(n=8):手术组+valsartan(1 mg.kg-1.d-1);PD123319组(n=8):手术组+PD123319(30 mg.kg-1.d-1);假手术组(n=8)。放免法检测心肌及血浆AngⅡ浓度,测定心指数并对心肌组织作HE染色,免疫沉淀法检测心肌组织PTEN、PI3K、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达及磷酸化,α-骨骼肌蛋白(-αskeletal actin)蛋白表达。结果大鼠术后14 d,valsartan组血浆AngⅡ浓度高于假手术组及PD123319组(P<0.05),valsartan组心肌AngⅡ浓度则低于假手术对照组及PD123319组(P<0.05)。手术组PI3K/Akt磷酸化高于假手术组(P<0.01),手术组PTEN蛋白表达低于假手术组(P<0.01);valsartan组PI3K/Akt磷酸化低于手术组及PD123319组(P<0.05),valsartan组PTEN高于手术组及PD123319组(P<0.05),PI3K/Akt磷酸化及PTEN蛋白表达量手术组与PD123319组间差异无显著性(P>0.05)。结论高压力负荷下,PTEN蛋白表达降低,心肌组织PI3K/Akt磷酸化增强,参与心肌重构的病理过程,且主要通过AT1起作用。     

汉黄芩素调节磷脂酰肌醇 3激酶 /丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 /核因子 κB信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠辅助性 T细胞 17/调节性 T细胞平衡的影响

目的探讨汉黄芩素( Wog)调节磷脂酰肌醇 3激酶( PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶( Akt)/核因子 κB(NF-κB)信号通路对慢性阻塞性肺疾病( COPD)大鼠辅助性 T细胞 17(Th17)/调节性 T细胞( Treg)平衡的影响。方法 2022年 8-12月,大鼠采用随机数字表法分为 Model组、低剂量 Wog组( Wog-L组, 50 mg/kg)、高剂量 Wog组( Wog-H组, 100 mg/kg)、阳性药物氨茶碱组(Ami组, 2.3 mg/kg)、 IGF-1(PI3K激活剂)组( 1.33 mg/kg)、 Wog-H+IGF-1组(100 mg/kg+1.33 mg/kg)、对照组(CK组),每组 12只。除 CK组外,其他组大鼠均需利用烟熏法联合气管滴注脂多糖( LPS)的方法构建 COPD模型,建模成功 24 h后,进行给药处理,每天 1次给药,持续 4周。检测呼气峰流量( PEF)、每分钟通气量( MV)、吸气峰流量( PIF);流式细胞术检测外周血中 Th17/ Treg;HE染色检测肺组织病理;酶联免疫吸附法检测大鼠肺组织中白细胞介素( IL)-17、IL-10水平;蛋白质印迹法检测肺组织中维甲酸相关孤核受体 γt(RORγt)、叉头框蛋白 P3(Foxp3)、磷酸化 PI3K(p-PI3K)、磷酸化 Akt(p-Akt)、磷酸化 NF-κB p65(pNF-κB p65)蛋白。结果与 CK组比较, Model组大鼠 PEF(12.56±0.47比 8.72±0.39)、 PIF(9.35±0.32比 7.24±0.17)、 MV(132.26±5.78比 96.63±3.28)、 Treg(31.18±2.62比 15.52±1.01)比例、 IL-10(23.35±1.16比 8.85±0.27)明显降低(均 P<0.05); Th17(3.14±0.13比 18.86±1.67)比例、 Th17/Treg(0.10±0.01比 1.22±0.11)、肺泡间隔( 33.36±1.48比 49.78±1.73)、气道炎症评分( 0比 4.56±0.23)及 IL-17(75.83±3.60比 185.56±8.62)水平明显升高(均 P<0.05)。与 Model组比较, Wog-L组、 Wog-H组 PEF(9.66±0.40,11.49±0.51)、 PIF(8.28±0.19,9.03±0.22)、 MV(105.54±4.11,126.67±5.72)、 Treg(19.93±1.18,27.73±2.05)比例、 IL-10(11.56±0.33,20.72±0.59)水平明显升高(均 P<0.05); Th17(3.14±0.13比 18.86±1.67)比例、 Th17/Treg(0.10±0.01比 1.22±0.11)、肺泡间隔( 43.45±1.26,35.78±1.12)、气道炎症评分( 3.75±0.17,0.86±0.07)、 IL-17(162.27±7.14,103.35±4.33)水平明显降低(均 P<0.05)。与 CK组比较, Model组大鼠 RORγt(0.15±0.01比 1.34±0.11)、 p-PI3K(0.22±0.01比 0.86±0.07)、 p-Akt(0.18±0.01比 0.75±0.06)、 p-NF-κB p65(0.11±0.01比 0.69±0.06)蛋白表达升高, Foxp3(1.45±0.27比 0.35±0.02)蛋白表达降低(均 P<0.05)。与 Model组相比, Wog-L组、 Wog-H组 RORγt(1.08±0.10,0.36±0.02)、 p-PI3K(0.71±0.06,0.35±0.03)、 p-Akt(0.62±0.06,0.28±0.02)、 p-NF-κB p65(0.52±0.05,0.26±0.02)蛋白表达明显降低, Foxp3(0.57±0.04,1.13±0.09)蛋白表达明显升高(均 P<0.05)。 Wog-H组与 Ami组大鼠上述各指标水平近似,均差异无统计学意义( P>0.05)。 IGF-1逆转了高剂量 Wog对 COPD大鼠 Th17/Treg的影响。结论 Wog促进 COPD大鼠 Th17/Treg平衡的机制可能与下调 PI3K/Akt/NF-κB通路有关。     

新型磷脂酰肌醇-3激酶δ抑制剂idelalisib

磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)是一种胞内磷脂酰肌醇激酶,吉利德正在开发的血癌新药idelalisib是首个选择性口服PI3K抑制剂,与α、β、γ亚基相比,其可高度选择性地作用于δ亚基。idelalisib可阻滞PI3Kδ-Akt信号通路并促进细胞凋亡,从而有效治疗难治性惰性非霍奇金淋巴瘤(iNHL)。研究表明idelalisib能够显著增加B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞系的凋亡,同时没有显著增加正常T细胞的凋亡。在一系列临床研究中显示出良好的治疗前景,且安全性及耐受性均较好。