p38 MAPK信号通路在膝关节骨性关节炎中医药诊疗中的作用

骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)是以关节软骨进行性退变、滑膜炎症和疼痛为主要特征的关节类疾病。其发病机制目前尚未完全明确,一般认为是年龄、性别、肥胖、创伤、炎症、遗传易感性等力学及生物学因素共同作用导致软骨细胞、细胞外基质以及软骨下骨3者降解和合成偶联失衡的结果。近年来,信号通路在KOA软骨细胞增殖、凋亡的研究中成为了热点,且信号通路在KOA发病机制和靶向治疗的研究也逐渐起步,通常会涉及KOA软骨细胞中细胞因子、相关基因和蛋白的表达等。这些关于信号通路与KOA的研究主要集中在软骨细胞的增殖和凋亡、细胞外基质的合成和降解以及软骨下骨的硬化等方面,其中研究比较多的是p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)信号通路。文献研究表明,p38 MAPK信号通路可调控软骨细胞增殖、凋亡,维持细胞外基质代谢平衡,调节基质金属蛋白酶、促炎症因子的产生,参与胶原蛋白和蛋白多糖降解,在KOA病理进程中起重要的调控作用。而以整体观念和辨证施治理论为指导的中医药疗法治疗该病针对性强,疗效显著,可以从根本上控制病情的发展,为治本之道。本文从p38 MAPK与KOA发病机制的关系入手,对p38 MAPK信号通路在KOA中医药诊疗中的研究进展作一综述,为KOA的临床诊疗提供新的分子靶点。     

针刀对膝骨性关节炎兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖相关蛋白表达的影响

目的:观察针刀对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)相关蛋白表达的影响,探讨针刀治疗KOA的相关机制。方法:新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组和电针组,每组10只,以左后肢伸直位固定制动法制备KOA模型。针刀组以膝关节内、外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏横剥法进行针刀松解,每周1次,共治疗3周;电针组电针左后肢"阴陵泉""阳陵泉""内膝眼""外膝眼",每次20min,每周治疗3次,共3周。X线观察膝关节影像学改变,光镜观察关节软骨形态学改变,Western blot法分别检测膝关节整合素β1(Integrinβ1)、Col-Ⅱ、基质金属蛋白酶3(MMP-3)及Aggrecan的蛋白表达水平。结果:X线结果显示,造模后,模型制备成功,关节病损情况属于早中期膝骨关节炎。光镜结果显示,模型组关节软骨层表面粗糙不平,表层软骨细胞稀少,细胞排列紊乱,部分软骨细胞坏死,潮线模糊或扭曲不完整,部分软骨有血管通过或血管翳生成,电针组及针刀组关节软骨组织结构均较模型组明显改善,针刀组较电针组改善更明显。Mankin评分比较,模型组较空白组明显升高(P0.01),针刀组较模型组明显降低(P0.01)。Western blot结果显示,模型组膝关节组织中Integrinβ1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较空白组显著降低(P0.01),MMP-3蛋白表达显著升高(P0.01);针刀组Integrinβ1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较模型组显著升高(P0.01,P0.05),MMP-3蛋白表达较模型组显著降低(P0.01);电针组Integrinβ1蛋白表达较模型组明显升高(P0.05),其它指标与模型组的差异均无统计学意义(P0.05)。结论:针刀可能通过对软骨力学环境的影响,激活整合素力学信号转导通路,促进细胞外基质Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达,下调MMP-3的蛋白表达水平,阻抑软骨细胞外基质的降解,延缓软骨损伤与关节退变程度,达到治疗KOA的目的。     

“补肾活血方”对骨关节炎软骨保护的效应与机制研究

目的：探讨补肾活血方对骨关节炎关节软骨保护的效应与机制。方法：膝骨关节炎患者60例,随机分为治疗组和对照组各30例,采用酶联免疫吸附法测定血清中软骨寡聚基质蛋白（COMP）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP1）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）活性含量。结果：治疗组和对照组COMP、TNF—α、MMP-3、TIMP1治疗后较治疗前显著降低;治疗组治疗后较治疗前MDA含量明显降低,SOD含量明显升高．差异显著：对照组MDA、SOD治疗前后差异无显著性。结论：补肾活血方可能通过调控关节软骨细胞外基质的降解以及调节基质金属蛋白酶,抑制炎症,抑制氧自由基损伤,抑制软骨细胞凋亡,延缓软骨损伤,延缓关节退变,对骨关节炎的软骨有保护和促进修复作用。     

中药保护关节软骨的作用机制研究进展

通过文献整理,从组织形态学、细胞因子、软骨细胞凋亡等多方面概述了近些年来中药在保护关节软骨方面的作用机制及研究进展,中药治疗骨关节炎主要通过减轻损伤、延缓退变及促进软骨分化和修复起作用,其机制包括:1)抑制软骨细胞炎性因子的表达及产生;2)抑制关节软骨基质金属蛋白酶表达;3)促进生长因子表达;4)促进胶原蛋白形成;5)促进关节软骨细胞增殖;6)抑制关节软骨细胞凋亡等方面。     

基于HSPA5/GPX4信号通路探讨针刀干预膝关节骨关节炎兔软骨细胞铁死亡的作用机制

目的：观察针刀疗法对膝关节骨关节炎（KOA）兔膝关节软骨细胞热休克蛋白A家族成员5(HSPA5)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路的影响,探讨针刀干预KOA软骨细胞铁死亡的作用机制。方法：将27只新西兰兔随机分为正常组、模型组和针刀组,每组9只。采用改良Videman法连续固定兔左侧后肢6周建立KOA模型。造模后,针刀组给予针刀干预,每周1次,连续3周。运用奎森功能障碍指数（Lequesne MG评分）评估兔膝关节局部症状、体征及功能;HE染色法与番红-固绿染色法分别观察兔软骨细胞与组织形态;透射电镜观察兔软骨细胞线粒体结构;运用铁离子试剂盒检测兔软骨组织铁含量;流式细胞仪检测兔软骨组织线粒体膜电位（Δψm）和活性氧（ROS）水平,并计算线粒体损伤率;实时荧光定量PCR检测兔软骨组织HSPA5、GPX4、Ⅱ型胶原α1链（COL2A1）、基质金属蛋白酶（MMP）3、MMP13 mRNA表达;Western blot法检测兔软骨组织HSPA5、GPX4、Ⅱ型胶原蛋白（COL-Ⅱ）、MMP3、MMP13蛋白表达;免疫荧光法检测兔软骨组织HSPA5、GPX4平均荧光强度。结果：干预前,...     

强骨宝对去卵巢大鼠疲劳性损伤诱发膝骨关节炎关节软骨的修复作用

目的：观察强骨宝对去卵巢大鼠疲劳性损伤诱发膝骨关节炎（KOA）的作用,以探讨该方对关节软骨的保护机制。方法：将24只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组及强骨宝组,每组8只。空白对照组不进行手术干预,模型组及强骨宝组均采用去卵巢联合跑台运动构建KOA模型。术后连续灌胃30d,于第30天灌胃后行大鼠膝关节MRI影像学检测并取材。采用HE染色及Mankin评分观察、评价膝关节病理学改变,ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及软骨寡聚基质蛋白（COMP）含量,Western blot法检测关节软骨中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-7(ADAMTs-7)的表达情况。结果：与模型组比较,强骨宝组MRI关节液信号减弱,且无关节囊局部信号增强情况;强骨宝组软骨表面更加平滑,潮线层次清晰,炎症细胞浸润减少;关节软骨Mankin评分显著降低（P<0.01）;血清中IL-1β、TNF-α、COMP含量均显著下降（P<0.01）;关节软骨中MMP-3、ADAMTs-7蛋白表达显著降低（P<0.0...     

针刀结合手法对膝关节骨性关节炎患者关节液中MMP-3和TIMP-1的影响

目的:探讨针刀结合手法对膝关节骨性关节炎(KOA)患者的作用机制。方法:将100例膝关节骨性关节炎患者随机分为观察组与对照组,每组50例。观察组采用针刀结合手法治疗。对照组采用口服双氯芬酸片治疗。观察两组治疗前后关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)代谢的变化。结果:治疗后两组关节液中MMP-3、TIMP-1含量均呈下降趋势,与治疗前比较,差异均有统计学意义(P0.01,P0.05)。与对照组比较,观察组下降明显,且接近正常值水平,两组间差异有统计学意义(均P0.05)。结论:针刀结合手法治疗能使膝关节骨性关节炎患者关节液中MMP-3、TIMP-1含量下降,MMPs/TIMPs趋于平衡,从而有可能让软骨退行性变的部分因素得到控制,抑制软骨基质的破坏,从而减轻关节软骨的降解与破坏。这可能是本法治疗KOA的机制之一。     

回医烙灸对兔膝骨性关节炎基质金属蛋白酶及其抑制剂表达影响的研究

目的:探讨回医烙灸对兔膝骨性关节炎(KOA)软骨细胞外基质MMP2、MMP3、和TIMP-1表达的影响。方法:健康成年新西兰兔按随机数字表法分为空白对照组、模型对照组与烙灸干预组,每组各10只。采用Hulth法制备兔KOA模型,4周后烙灸干预组给予兔左后肢局部膝关节烙灸治疗,1次/天,20 min/次;空白对照组和模型对照组不予任何干预。4周后取兔膝关节软骨进行SP免疫组化检测,蛋白免疫印迹法、RT-PCR分别检测MMP2、MMP3和TIMP-1蛋白表达与mRNA表达。结果:烙灸干预组软骨组织的SP免疫组化、软骨外基质的MMP2、MMP3蛋白表达和mRNA均较模型对照组降低(P 0. 05),而TIMP-1的上述指标均较模型对照组增高(P 0. 05)。结论:烙灸疗法可以下调关节软骨细胞外基质的基质金属蛋白酶,上调其蛋白酶抑制剂,改善外基质环境,减少兔KOA关节软骨的破坏。     

针刀松解法对膝骨性关节炎兔软骨基质金属蛋白酶-3和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响

目的观察针刀松解法对膝骨关节炎(KOA)兔软骨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)的影响,探讨针刀治疗KOA的机制。方法将40只清洁级6月龄健康新西兰兔随机取10只为空白组,剩余30只统一造模,关节制动方法制造KOA模型,造模成功后将30只兔随机分为模型组、针刀组和电针组,每组10只。针刀组以膝关节内外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏、横剥法进行针刀松解,每星期1次,共治疗3次;电针组取阴陵泉、阳陵泉、内膝眼、犊鼻穴,电针频率2~100 Hz,强度为3 m A,每次电针20 min,每星期治疗3次,共治疗3星期。光镜观察软骨形态改变,Western blot法检测膝关节软骨Col-Ⅱ、MMP-3蛋白表达水平。结果 HE染色模型组家兔膝关节滑膜存在不同程度增生、水肿,光镜下见模型组关节软骨呈明显退行性变。电针组和针刀组软骨组织损伤减轻,且有修复趋势。针刀组兔膝关节软骨破坏程度明显减轻。针刀组Col-Ⅱ蛋白表达较模型组明显升高(P0.01);针刀组Col-Ⅱ蛋白表达与电针组比较,差异具有统计学意义(P0.05);模型组Col-Ⅱ蛋白表达水平降低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P0.05)。模型组MMP-3蛋白表达较空白组明显升高(P0.01);针刀组MMP-3蛋白表达较空白组降低,但无统计学意义(P0.05);针刀组MMP-3蛋白表达与模型组和电针组比较,差异均具有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论针刀松解治疗KOA兔,能够使软骨MMP-3水平下降,Col-Ⅱ表达水平升高,从而阻抑软骨退变,起到治疗作用。     

针刀治疗膝骨关节炎机制研究概况

膝骨性关节炎(KOA)是以膝关节软骨的变性、周围韧带松弛、肌肉萎缩及滑膜炎症等为主要特征的临床综合征。针刀治疗KOA可缓解疼痛、改善功能、延缓病程、提高患者生活质量,然其机制尚不明确。笔者总结针刀治疗KOA的相关文献,从分子生物学、生物力学、血液流变学、中枢镇痛机制等方面对针刀治疗KOA的机制研究概况进行总结,从而深化针刀治疗KOA的认识,为临床运用针刀治疗KOA提供理论依据。     

补肾活血方对膝骨关节炎大鼠MMP-3、MMP-13及OPG/RANKL轴的影响

目的:检测不同质量分数的补肾活血方对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠模型膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化受体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)轴相关因子mRNA表达的影响,探讨补肾活血方对KOA大鼠模型骨重建及治疗作用的机制。方法:采用随机数字表法将48只Wistar大鼠分为正常对照组,模型对照组,依托考昔片组,补肾活血方中药小、中、大剂量组6组,每组8只。采用木瓜蛋白酶膝关节腔内注射法制备KOA大鼠模型。确认造模成功后,依托考昔片组给予依托考昔3.125μg/g混悬液灌胃,补肾活血方小、中、大剂量组分别给予补肾活血方0.52,1.04,2.08 g/kg混悬液灌胃,正常对照组和模型对照组给予同体积蒸馏水灌胃,1d1次,连续4周。给药结束后,对KOA模型鼠进行关节软骨退行性改变组织学分级评分(Mankin′s评分),采用实时荧光定量核酸扩增检测系统检测关节软骨内MMP-3、MMP-...     

针刀松解术对类风湿关节炎肘关节僵硬患者关节液MMP-3、MMP-9、TIMP-1的影响

目的观察针刀松解术对类风湿关节炎肘关节僵硬患者关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)含量变化,探讨针刀松解术调控关节软骨细胞外基质降解的作用机制。方法将60例类风湿关节炎肘关节僵硬患者分为A组、B组和C组,每组20例。A组采用中西药基础治疗方案治疗,B组在A组的基础上采用电针治疗,C组在A组的基础上采用针刀松解术治疗。观察3组治疗前后关节液中MMP-3、MMP-9及TIMP-1含量变化,并比较临床疗效。结果 C组总有效率为95.0%,B总有效率中80.0%,A组总有效率60.0%,3组总有效率比较,差异有统计学意义(P0.05)。3组治疗前关节液中MMP-3、MMP-9及TIMP-1含量比较差异无统计学意义(P0.05)。3组治疗后关节液中MMP-3、MMP-9含量较治疗前降低(P0.05),TIMP-1含量较治疗前升高(P0.05);C组治疗后关节液中MMP-3、MMP-9含量低于A组和B组(P0.05),TIMP-1含量高于A组和B组(P0.05)。结论在中西药治疗基础上,针刀松解术治疗类风湿关节炎肘关节僵硬患者临床疗效显著;可调节RA患者关节中MMP-1与TIMP-1的比例关系,降低MMP-1的表达,增加TIMP-1的表达,有效调控关节软骨细胞外基质的降解。     

火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎鼠关节形态及软骨LOXL2的影响

目的:探讨火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)大鼠行为学、关节形态及软骨中赖氨酰氧化酶相关蛋白2(LOXL2)影响性。方法:选择30只健康雄性大鼠,10只作为对照不作任何处理。20只大鼠建立KOA模型,成模后随机分成2组,分别予普通针刺和火针膝周密刺,1次/3 d,连续6次。观察各组大鼠Leauesne MG评分、关节软骨细胞情况,外周血及关节软骨转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、LOXL2水平变化。结果:治疗后火针组Leauesne MG评分中的局部疼痛刺激反应、步态、关节活动范围、关节肿胀度较对照组、模型组差异有统计学意义(P<0.05)。血清及关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α含量水平显著低于模型组(P<0.05),LOXL2显著高于模型组(P<0.05)。火针组电镜下软骨细胞形状规则、细胞核完整且饱满,微绒毛少量存在,内质网丰富,有散在的染色质。结论:火针膝周密刺能减轻K0A关节软骨损伤,降低炎性反应,改善软骨LOXL2水平,这可能是火针治疗KOA一个作用机制。     

中药通过调控信号通路治疗骨关节炎作用机制研究概述

多种信号通路在骨关节炎的发生与发展中起着重要作用,涉及炎症反应的调控、软骨细胞的破坏及胞外基质的降解等。中药治疗骨关节炎具有一定优势,近年来研究发现单味中药有效成分及中药复方可通过抑制核因子-κB的活化及核转位,降低白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α等炎症因子及基质金属蛋白酶-13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5等基质降解酶的水平,减轻关节炎症反应及软骨破坏,减缓骨关节炎进展;通过调控Wnt/β-连环蛋白信号通路,减轻软骨细胞的破坏和细胞外基质的降解,同时上调Runt相关转录因子2及骨钙素的表达,促进骨膜间质干细胞的增殖和成骨细胞分化;通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPK)信号通路中关键蛋白如p38MAPK、细胞外调节激酶、c-Jun氨基末端激酶等的表达及激活,降低软骨破坏;通过激活转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号通路,上调TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4等关键蛋白及TGF-β I型、II型受体的表达,降低基质金属蛋白酶-1...     

针刀、电针和圆利针对实验性膝骨关节炎兔关节软骨病理和超微结构的影响

目的从形态学角度探讨不同干预方法对制动致关节损伤的治疗机理,观察针刀、电针和圆利针干预对关节软骨形态学的影响。方法 6月龄新西兰兔随机分为正常组、模型组、针刀组、电针组和圆利针组,每组9只,用改良的Videman法左后肢伸直位固定制动法建立兔膝关节损伤模型。电针组电针KOA兔左侧"阳陵泉—阴陵泉""内膝眼—外膝眼",疏密波,连续波,频率2/100 Hz,强度3 mA,每次20 min,隔日1次,1周3次,共6周;针刀组KOA兔左侧内、外侧副韧带及髌韧带的中点前缘、起、止点进入,刀口线与韧带方向平行,分别松解5次,每周1次,共6次;圆利针进针点与针刀组一致,分别松解5次,每周1次,共6次。通过HE染色在普通光学显微镜下观察实验性KOA兔关节软骨潮线及间隙、钙化层及深层软骨改变情况;并于扫描电镜下观察关节软骨表面超微结构变化。结果关节软骨HE染色切片显示,针刀、电针和圆利针有效抑制了软骨基质的退变,促进了软骨的再生修复,且针刀组效果优于电针组和圆利针组,圆利针组优于电针组;扫描电镜下,可见三种疗法均有效改善了软骨表面结构的破坏,且针刀组优于电针组和圆利针组,圆利针组优于电针组。结论针刀、电针和圆利针均能有效改善实验性KOA模型兔软骨组织的损伤情况,并促进软骨细胞的再生修复,进而恢复组织的正常结构和功能,以松解法为主的针刀和圆利针的疗效优于电针。     

补肾中药对关节软骨的保护作用机制研究进展

补肾中药治疗骨关节炎主要通过减轻损伤、延缓退变及促进软骨分化和修复两方面起作用,其机制包括（1）抑制促分解细胞因子的表达;（2）阻止自由基的生成,抑制NOS的活性,减少NO的生成;（3）对关节软骨细胞凋亡的调控;（4）对关节软骨细胞增殖的作用;（5）对关节软骨基质的作用;（6）提高促合成性细胞因子的表达等方面。     

NF-κB信号通路在推拿促进膝骨性关节炎软骨修复中的作用

推拿作为临床广泛应用的中医外治疗法之一,对膝骨性关节炎(Knee osteoarthritis, KOA)疗效显著,但其作用机制尚不明确。信号通路介导的KOA软骨细胞增殖、凋亡日益被人们关注,与KOA发病机制、靶向治疗的相关研究也逐渐起步。核因子-κB(NF-κB)信号通路在KOA软骨中存在病理性激活,其所介导的炎症反应与软骨细胞凋亡和KOA发病过程密切相关。本文拟从推拿调控炎症反应的角度,探讨其通过抑制NF-κB信号通路病理性激活促进KOA软骨修复的作用机制,为推拿治疗KOA的基础研究提供新的思路。     

独活寄生汤对膝骨性关节炎的作用机制研究进展

独活寄生汤邪正兼顾,具有祛风湿、止痹痛、益肝肾、补气血之功,本方对膝骨性关节炎的临床疗效已得到证实,能有效延缓膝骨性关节炎的病程。通过对近五年相关实验研究,发现独活寄生汤治疗膝骨性关节炎的作用机制研究主要集中于炎性细胞因子和细胞凋亡两个方面。独活寄生汤能抑制基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的释放,从而延缓关节软骨的退变,线粒体凋亡、内质网应激性凋亡等在骨关节炎的发病过程中发挥着重要的调控作用。     

针刺对膝骨关节炎大鼠MMP-3、TIMP-1及TGF-β1的影响

目的:研究针刺对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨针刺治疗KOA的作用机制。方法:选用SD大鼠30只,随机分成空白组、模型组和治疗组,模型组和治疗组采用木瓜蛋白酶右后膝关节注射的方法制备大鼠KOA模型,针刺治疗2周后测定各组大鼠滑膜MMP-3、TIMP-1及TGF-β1的含量。结果:模型组软骨组织中MMP-3和TIMP-1含量较空白组显著增多(P0.01),治疗组MMP-3和TIMP-1含量较模型组显著降低(P0.05),但仍然略高于空白组;模型组软骨组织中TGF-β1含量较空白组显著降低(P0.01),治疗组TGF-β1含量较模型组增多(P0.05),但仍略低于空白组。结论:针刺能有效平衡KOA模型大鼠中MMP-3和TIMP-1的异常表达,并且对TGF-β1具有一定的上调功能,这可能是针刺治疗KOA有效的机制之一。     

补肾活血法治疗膝骨性关节炎机制的研究进展

膝骨性关节炎（knee osteoarthritis,KOA）是骨科常见病、多发病,它是以关节软骨破坏,周围反应性骨质增生为病理特征的关节疾患。随着人口结构的老龄化,其发病率逐年增加,严重影响患者的生活质量。但是,目前对其病因及发病机制还不清楚,一般认为与年龄、损伤、肥胖、生物酶、自由基、细胞因子等因素相关,尚无根治性疗法,