恩替卡韦通过微小RNA-199a-5p抑制乙型肝炎病毒复制的机制研究

目的 研究恩替卡韦(ETV)通过微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)抑制乙型肝炎病毒复制的机制。方法 将HepG2.2.15细胞标记为空白对照组;根据恩替卡韦浓度的不同将细胞分为低剂量实验组(10μmol·L^-1 ETV)、中剂量实验组(20μmol·L^-1 ETV)、高剂量实验组(30μmol·L^-1 ETV);miR-199a-5p, anti-miR-199a-5p、anti-miR-con、miR-con转染至HepG2.2.15细胞,分别标记为miR-199a-5p组、anti-miR-199a-5p组、anti-miR-con组、miR-con组,转染后anti-miR-199a-5p组、anti-miR-con组继续用30μmol·L^-1的ETV进行培养,分别标记为ETV+anti-miR-199a-5p组、ETV+anti-miR-con组。蛋白质印迹法检测各组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应法检测H...     

扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响

目的 探究扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响及机制。方法 选取Hep3B细胞随机分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR-105-5p组。低浓度组、中浓度组和高浓度组分别用0.5,1和2μmol·L^-1的扁蒴藤素处理,高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR-105-5p组先分别转染anti-miR-NC和anti-miR-105-5p再用2μmol·L^-1的扁蒴藤素处理,对照组不转染也不用扁蒴藤素处理。用细胞计数法-8(CCK-8)实验检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p的表达水平,用蛋白质印迹(Western blot)法检测小鼠双微体基因(MDM2)蛋白表达水平。结果 对照组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR-105-5p组的细胞存活率分别为(100.00±0.00)%,(46.44±7.23)%,(56.23±6.64)%,(85.8...     

阿帕替尼上调miR-324-5p表达抑制结肠癌细胞的研究

目的 探讨阿帕替尼对结肠癌细胞生物学行为的影响和机制。方法 将结肠癌细胞HCT116分为对照(NC)组,低、中、高剂量组(0.5,1.0和2.0μmol·L^-1阿帕替尼),转染1组(2.0μmol·L^-1阿帕替尼+anti-miR-NC),转染2组(2.0μmol·L^-1阿帕替尼+anti-miR-324-5p)。细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖率;Transwell法检测细胞迁移和侵袭;荧光定量聚合酶链反应法检测miR-324-5p表达。结果 NC组,低、中、高剂量组、转染1组、转染2组HCT116细胞增殖率分别为(100.00±2.79)%,(94.29±1.74)%,(76.48±1.65)%,(51.48±1.75)%,(51.58±0.88)%和(93.64±3.90)%;迁移细胞数分别为(206.27±9.30),(163.23±3.84),(133.83±4.26),(104.32±5.72),(107.93±3.14)和(194.51±3.96)个;侵袭细胞数分别为(153.47±4.37),(121.4...     

连翘苷通过调控miR-483-3p对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响

目的:探讨连翘苷(PHN)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症损伤的影响及分子机制。方法:人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)随机分为对照组、oxLDL组(50 mg·ml^-1)、oxLDL(50 mg·ml^-1)+PHN低(1μmol·L^-1)、中(10μmol·L^-1)、高(100μmol·L^-1)剂量组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+anti-miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+anti-miR-NC组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+PHN(100μmol·L^-1)+miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+PHN(100μmol·L^-1)+miR-NC组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot法检测活化的半胱胺酸蛋白酶(Cleaved-Caspa...     

槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响

目的 研究槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响和机制。方法 分离婴幼儿血管瘤内皮细胞,分成对照组、实验低剂量组(80μmol·L^-1槲皮素)、实验中剂量组(160μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量组(320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+pcDNA组(转染阴性对照载体,320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+高迁移率蛋白1(HMGB1)组(转染HMGB1过表达载体,320μmol·L^-1槲皮素处理)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析细胞增殖情况,用流式细胞术分析细胞凋亡情况,用蛋白质印迹法检测HMGB1、剪切的胱天蛋白酶3(C-caspase-3)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。结果 对照组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+pcDNA组、实验高剂量+HMGB1组细胞中HMGB1蛋白表达水平分别为0.89±0.09,0.76±0.08,0.63±0.06,0.55±0.05,0.56...     

柚皮苷通过上调miR-628-5p抑制宫颈癌ME-180细胞增殖和周期进展

目的 探讨柚皮苷影响宫颈癌ME-180细胞增殖和周期的机制。方法 将宫颈癌ME-180细胞分成宫颈癌ME-180细胞分成对照组（正常培养）、实验组(64μmol·L^-1的柚皮苷处理)、实验组+Anti-miR-NC组(64μmol·L^-1的柚皮苷+转染inhibitor control处理)、实验组+Anti-miR-628-5p组(64μmol·L^-1的柚皮苷+转染miR-628-5p inhibitor处理)。转染前将对数期的ME-180细胞浓度调整为每毫升5×10⁴个,接种于无菌细胞培养板,细胞融合度至75%～85%时,用0.5%胰蛋白酶消化,用Lipofectamine^?2000转染试剂将inhibitor control、miR-628-5p inhibitor转染进细胞。用实时定量反转录聚合酶链反应方法检测miR-628-5p表达;用噻唑蓝法测定各组细胞增殖活力;用碘化丙啶单染法检测周期;用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;用蛋白质印迹法检测蛋白...     

红车轴草总黄酮通过调控miR-99a-3p/CD36表达对高糖诱导的大鼠胰岛β细胞的保护作用北大核心CSCD

目的研究红车轴草总黄酮对高糖诱导的大鼠胰岛β细胞损伤的影响,及其潜在的分子机制。方法本实验分为对照组,模型组,低、中、高剂量实验组,miR-NC组,miR-99a-3p组,anti-miR-NC,anti-miR-99a-3p组,模型+miR-NC组,模型+miR-99a-3p组,模型+si-NC组,模型+si-CD36组,高剂量实验+anti-miR-NC组和高剂量实验+anti-miR-99a-3p组。对照组给予5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖处置;模型组给予25 mmol·L^(-1)葡萄糖处置;低、中、高剂量实验组分别给予12.5,25.0和50.0 mg·L^(-1)红车轴草总黄酮和25 mmol·L^(-1)葡萄糖处置;miR-NC组、miR-99a-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-99a-3p组分别转染miR-NC、miR-99a-3p、anti-miR-NC、anti-miR-99a-3p;模型+miR-NC组、模型+miR-99a-3p组、模型+si-NC组、模型+si-CD36组均给予25 mmol·L^(-1)葡萄糖处理,并分别转染miR-NC、miR-99a-3p、si-NC、si-CD36;高剂量实验+anti-miR-NC组、高剂量实验+anti-miR-99a-3p组均给予50.0 mg·L^(-1)红车轴草总黄酮+25 mmol·L^(-1)葡萄糖,并分别转染anti-miR-NC或anti-miR-99a-3p。用流式细胞术测定细胞凋亡率,用定量实时聚合酶链反应检测细胞中miR-99a-3p和CD36 mRNA的表达水平。结果模型组INS-1细胞中CD36 mRNA(2.74±0.27 vs 1.01±0.08)和细胞凋亡率[(27.63±2.71)%vs(5.69±0.58)%]均较对照组显著升高,miR-99a-3p(0.38±0.03 vs 1.00±0.09)较对照组显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,低、中、高剂量实验组的上述结果相反。模型+miR-99a-3p组的细胞凋亡率[(12.48±1.19)%vs(26.84±2.41)%]较模型+miR-NC组显著降低,miR-99a-3p表达量(0.79±0.07 vs 0.34±0.03)较模型+miR-NC组显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型+si-CD36组INS-1细胞中CD36 mRNA(1.35±0.12 vs 2.81±0.26)及细胞凋亡率[(13.54±1.32)%vs(25.87±2.52)%]均较模型+si-NC组显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高剂量实验+anti-miR-99a-3p组INS-1细胞中miR-99a-3p(0.43±0.14 vs 0.88±0.06)较高剂量实验+anti-miR-NC组显著降低,CD36 mRNA(2.51±0.22 vs 1.41±0.13)及细胞凋亡率[(20.45±2.03)%vs(10.56±1.02)%]均较高剂量实验+anti-miR-NC组显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论红车轴草总黄酮可能通过调控miR-99a-3p/CD36以减轻高糖对大鼠胰岛β细胞INS-1的损伤,进而抑制细胞的凋亡。     

多西他赛通过miR-144-3p对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究多西他赛通过miR-144-3p对卵巢癌细胞增殖、凋亡以及血清肿瘤标志物糖类抗原125(CA125)、附睾分泌蛋白4(HE4)水平的影响。方法 将BALB/c雌性裸小鼠随机分为对照组(腹腔注射生理盐水)、模型组(皮下接种SKOV3细胞建立裸鼠移植瘤模型)、多西他赛组(建立裸鼠移植瘤模型后腹腔注射2.5 mg·kg^-1多西他赛)。分离培养各组小鼠卵巢癌细胞。将模型组小鼠卵巢癌细胞进行转染处理,分别转染miR-NC、miR-144-3p并记为miR-NC组、miR-144-3p组;分别转染anti-miR-NC、anti-miR-144-3p后,均用多西他赛(50μmol·L^-1)处理并记为anti-miR-NC+多西他赛组、anti-miR-144-3p+多西他赛组。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CA125、HE4水平;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞miR-144-3p表达水平。结果 对照组、模型组、多西他赛组、miR-NC组、miR-14...     

黄芪对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究黄芪在高糖诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移中的作用及其机制。方法 取VSMCs随机分为对照组（普通培养）、高糖组(25mmol·L^-1葡萄糖)、实验组(25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)、第1转染组(转染阴性对照寡核苷酸+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·ml^-1黄芪)、第2转染组(转染miR-18a-5p模拟物+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)。以细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞的存活率;以划痕实验检测细胞迁移情况;以实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测miR-18a-5p的表达;以蛋白质印迹法检测线粒体融合蛋白2 （MFN2）蛋白的表达。结果 对照组、高糖组和实验组VSMCs存活率分别为（100.00±10.00）%,（188.24±18.17）%和（123.52±12.66）%;VSMCs迁移率分别为（15.16±1.64）%,（53...     

三子颗粒下调miR-205-5p抑制小鼠脾虚型肠道腺瘤生长研究

目的 探讨三子颗粒通过降低微小核糖核酸-205-5p(miR-205-5p)水平抑制小鼠脾虚型肠道腺瘤生长的作用。方法取70只4周龄的雄性C57BL/6J小鼠,采用对氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠结直肠腺瘤模型,将建模小鼠随机分为模型组、阿司匹林(200 mg·kg^-1)组、miR inhibitor-NC(2 mg·kg^-1)组、miR-205-5p inhibitor(2 mg·kg^-1)组和三子颗粒低、中、高剂量(1.7、3.4、6.8 g·kg^-1)组,造模期间ig给药,每天1次。比较各组小鼠肠道腺瘤的数量并测量腺瘤体积;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肠道腺瘤的病理情况;CCK-8法检测各组小鼠肠道腺瘤细胞增殖活力;原位末端标记(TUNEL)法检测小鼠肠道腺瘤细胞凋亡;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肠道腺瘤miR-205-5p表达量及磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Ki67 mRNA表...     

LncRNA TUG1通过调节miR-181b-5p/PDCD4轴对高糖诱导的心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)通过调节miR-181b-5p/程序性细胞死亡蛋白4(PDCD4)轴对高糖诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法 采用高糖（25 mmol/L葡萄糖）在体外构建糖尿病心肌病（DCM）细胞模型。AC16细胞分为NG组、HG组、HG+sh-NC组、HG+sh-TUG1组、HG+miR-NC组、HG+miR-181b-5p组、HG+sh-TUG1+anti-miR-NC组、HG+sh-TUG1+anti-miR-181b-5p组、HG+miR-181b-5p+pcDNA组、HG+miR-181b-5p+pc-PDCD4组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力；乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒检测LDH释放总量；采用实时定量聚合酶链反应（q RT-PCR）检测TUG1、miR-181b-5p和PDCD4 mRNA表达；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测B细胞淋巴瘤2-相关X(Bax)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)和PDCD4蛋白表达；caspase-Glo3检测试剂盒评估casp...     

知母皂苷AⅢ通过miR-129-5p/STAT3轴调节肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨知母皂苷AⅢ(TAⅢ)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响机制。方法:用不同浓度的TAⅢ处理A549细胞后,CCK-8法检测TAⅢ对A549细胞的细胞毒性。体外培养A549细胞,分为对照组(Control组)、TAⅢ组(20μmol·L^-1)、TAⅢ+anti-NC组、TAⅢ+anti-miR-129-5p组,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-129-5p、信号转导和转录激活因子3(STAT3)mRNA表达,蛋白质印迹(Western blot)检测STAT3及其磷酸化蛋白(p-STAT3)表达,平板克隆实验检测细胞增殖活力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶实验验证miR-129-5p和STAT3的靶向关系。BALB/c裸鼠移植瘤实验检测TAIII在体内的抗肿瘤活性,免疫组织化学(IHC)法检测肿瘤组织Ki-67、p-STAT3表达。结果:低浓度TAⅢ(1,5μmol·L^-1)对A549细胞存活率无显著影响(P>0.05),高浓度TAⅢ(10,20,30,6...     

羊栖菜多糖通过miR-7抑制MPP+诱导的SK-N-SH损伤

目的 羊栖菜多糖(SFPS)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP⁺)诱导的SK-N-SH损伤的影响及分子机制。方法 将SK-N-SH细胞用0.3 mmol·L^-1的MPP⁺处理作为模型(Model)组;以正常培养的细胞作为对照(Con)组,用质量浓度分别为10、30、100 mg·L^-1的羊栖菜多糖和0.3 mmol·L^-1的MPP⁺处理作为羊栖菜多糖低、中、高浓度组;将SK-N-SH细胞再分为Model+miR-NC组、Model+miR-7组、Model+SFPS-H+anti-miR-NC组、Model+SFPS-H+anti-miR-7组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-7表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;试剂盒检测细胞MDA含量、SOD活性和培养液中LDH含量。结果 不同浓度羊栖菜多糖处理后,MPP⁺诱导的SK-N-SH细胞中miR-7表达水平升高,细胞的...     

槲皮素通过调控GAS5/miR-18b-5p轴抑制神经内分泌肿瘤细胞活性的研究

目的 探讨槲皮素抑制胃肠胰神经内分泌肿瘤(GEP-NEN)的作用机制。方法 将人胰腺神经内分泌瘤细胞BON-1细胞随机分为对照组、槲皮素组(80μmol·L^-1槲皮素)、槲皮素+si-NC组(转染si-NC+80μmol·L^-1槲皮素)、槲皮素+si-生长抑制特异性基因5(GAS5)组(转染si-GAS5+80μmol·L^-1槲皮素)。用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA相对表达水平,用荧光原位杂交(FISH)实验检测细胞中GAS5和miR-18b-5p的阳性表达情况。结果 双荧光素酶报告基因结果发现,GAS5与miR-18b-5p靶向结合。对照组、槲皮素组、槲皮素+si-NC组、槲皮素+si-GAS5组细胞的GAS5表达水平分别为1.00±0.13、1.72±0.19、1.78±0.14和1.16±0.11,miR-18b-5p表达水平分别为1.00±0.15、0.67±0.08、0.72±0.06和0.95±0.11,Bax m...     

芸香苷改善椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的研究

目的 从细胞水平探究芸香苷对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响及作用机制。方法 将大鼠椎间盘髓核细胞随机分为对照组、模型组[白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]、低剂量实验组(25μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、中剂量实验组(50μmol·L^-1芸香苷+10ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量实验组(100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量+SIRT1激动药组[100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β+1μmol·L^-1沉默信息调节因子1(SIRT1)激动药SRT1720]。用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验、蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测炎性因子的表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、高剂量+...     

小檗胺对糖尿病肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 研究小檗胺对体外糖尿病肾小管上皮细胞(RTEC)损伤的影响。方法 将RTEC分成对照组、模型组(高糖)、低剂量实验组(2 mg·L^-1小檗胺和高糖)、中剂量实验组(4 mg·L^-1小檗胺和高糖)、高剂量实验组(8 mg·L^-1小檗胺和高糖)、BBM-H+miR-NC组(转染mimics control, 8 mg·L^-1小檗胺和高糖)、BBM-H+miR-135b组(转染miR-135b mimics, 8 mg·L^-1小檗胺和高糖)。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,以流式细胞术检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达,以化学荧光法检测活性氧(ROS)水平,以硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,以黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果 对照组、模型组和低、...     

淫羊藿苷调控mTOR/Akt/CREB通路对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响

目的 探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路的影响。方法 将小鼠足细胞MPC5分为5组：正常对照组(5.5 mmol·L^-1葡萄糖)、高糖组(30 mmol·L^-1葡萄糖)、淫羊藿苷组(30 mmol·L^-1葡萄糖+5μmol·L^-1淫羊藿苷)、GDC-0349组(30 mmol·L^-1葡萄糖+50μmol·L^-1 GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349组(30 mmol·L^-1葡萄糖+5μmol·L^-1淫羊藿苷+50μmol·L^-1 GDC-0349)。培养48 h后，噻唑蓝法检测MPC5细胞活力；吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况；流式细胞术检测MPC5细胞凋亡；蛋白印迹法检测MPC5细胞自噬[微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin-1...     

氟伐他汀对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨氟伐他汀对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞（CFs）增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法将CFs随机分为A、B、C、D、E、F、G、H、I、J和K组。A组未给予氟伐他汀和AngⅡ处理;B组用0.1μmol·L^-1 AngⅡ刺激细胞6 h; C、D、E组在0.1μmol·L^-1 AngⅡ刺激细胞6 h后,再分别用0.1,1.0和10.0μmol·L^-1氟伐他汀处理12 h; F组将miR-NC转染至0.1μmol·L^-1 AngⅡ处理6 h后的CFs细胞中;G组将miR-590-5p转染至0.1μmol·L^-1 AngⅡ处理6 h后的CFs细胞中;H、I、J、K组分别将anti-miR-NC、anti-miR-590-5p、pcDNA3.1和pcDNA3.1-STAT3转染至1.0μmol·L^-1氟伐他汀和0.1μmol·L^-1AngⅡ处理12 h后的CFs细胞中。用噻唑蓝法检测细胞增殖,用Transwell法检...     

灵芝酸D通过调控p53/Bax通路对人结直肠肿瘤细胞的作用机制研究

目的 探究灵芝酸D（GAD）对人结直肠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 将直肠癌细胞系SW620分为6组：空白对照组（完全培养基）、低(5μmol·L^-1 GAD)、中(10μmol·L^-1 GAD)、高(20μmol·L^-1 GAD)3个剂量实验组、Pifithrin-α组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α)和联合组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α+20μmol·L^-1 GAD)。用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖能力,用Caspase-3/Caspase-8/Caspase-9检测试剂盒检测相应蛋白活性,用蛋白质印迹法检测抑癌蛋白p53（p53）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白质的表达水平。结果 空白对照组和低、中、高3个浓度实验组细胞增殖活性分别为（96.33±2.62）%,（95.00±1.63）%,（70.33±5.91）%和（49.00±3.56）%;4组Caspase-...     

依托咪酯对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

目的 探讨依托咪酯对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响。方法 将人CHON-001软骨细胞分为空白组(常规培养基培养)、模型组(用10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、高剂量实验组(用5μmol·L^-1依托咪酯+10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、抑制药组[用5μmol·L^-1无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt3a)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制药IWR-1-endo+10 ng·mL^-1 IL-1β培养]、抑制药+高剂量实验组(用10 ng·mL^-1 IL-1β+5μmol·L^-1依托咪酯+5μmol·L^-1 IWR-1-endo培养)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞的增殖情况,用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)染色法检测细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中促炎因子的含量;用蛋白质印迹法测定基质金属蛋白酶(...