石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用

在肾脏的病理诊断中,肾穿刺组织必须进行冷冻切片免疫荧光染色[1,2]、石蜡切片HE、Masson、PAS、PASM染色和电镜检查等,以达到正确的诊断.光镜观察时须有10个以上的肾小球才能作出客观的诊断[3,4].在肾脏的病理诊断中,冷冻切片免疫荧光染色具有不可或缺的作用,但有时各种原因导致所取的肾小球数目不够或基层单位无冷冻切片设备等因素均给诊断带来困难.因此,我们通过对肾活检组织石蜡切片进行免疫荧光染色,取得了较好的效果,现介绍如下.     

环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法

环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法肖莎陈浦辉郭琳琅在肾脏疾病的研究中，肾小球基底膜银染色技术具有重要意义。如若采用半薄切片染色，在光镜下观察则可获得比石蜡切片更为清晰的结果。但因树脂包埋块为非水溶性质，故其半薄切片的特殊染色就较为困难。我们运用...     

六胺银加马松三色双重染色在肾穿刺活检组织中的应用

肾小球病是发病率较高的疾病，肾穿刺检查是确诊肾脏疾病的重要手段，光镜观察肾组织病变在进行肾小疾球疾病诊断和分类工作中起重要作用[1]。常规HE染色不能清晰地显示肾小球基膜，在实际工作中除免疫荧光抗体检测外， PAS、PASM、Masson 特殊染色才能将基膜清晰地显示出来[2]。尤其是六胺银加马松三色双重染色在光镜下观察基膜增厚和钉突、双轨，对诊断膜性肾小球肾炎及其它各种肾小球疾病有重要价值，是观察肾小球基膜改变的重要方法之一[3]。     

改良Masson染色法在肾穿刺活检组织染色中的应用

肾穿刺活检组织常规特殊染色有3种染色：过碘酸雪夫反应(PAS)、高碘酸-乌托品银(PASM)、Masson染色。其中Masson三色染色主要用来观察肾小球嗜复红蛋白沉积物(免疫复合物)及肾脏内胶原纤维增生等。但常规的Masson三色染色法对肾小球内免疫复合物显色颜色对比不鲜艳。我们采用改良的Masson三色染色法,通过组织切片的补充固定法、试剂浓度的改良组合、     

微波在肾穿刺活组织检查快速病理诊断中的应用

微波在肾穿刺活组织检查快速病理诊断中的应用师锁柱程庆砾陈香美朱宁陈振玉肾穿刺活组织检查（肾活检）是目前确诊肾小球疾病及肾间质病变的唯一方法。由于肾活检标本小、切片薄（厚２μｍ），在固定、浸蜡、包埋、切片及染色等方面要求较高，加上染色种类较多（每例病人...     

CD10和CD34双染色应用于增生性肾小球肾炎病理诊断

目的观察CD10和CD34免疫组化双染色在增生性肾小球肾炎病理诊断中的意义。方法利用免疫组化双染色法在一张肾活检组织切片上同时标记CD10和CD34,检测肾活检组织130例。光镜下观察肾小球固有细胞的显色情况,判断肾小球固有细胞的增生程度。结果肾小囊脏层及壁层上皮细胞被CD10标记,显示红色。肾小球毛细血管内皮细胞被CD34标记,显示棕色。肾小球系膜细胞和基质不被CD10和CD34标记,不显示红色或棕色。系膜增生性肾小球肾炎CD10(??)、CD34(+);毛细血管内增生性肾小球肾炎CD10、CD34均呈(???);膜增生性肾小球肾炎CD10(??)、CD34(+);新月体性肾小球肾炎CD10(??)、CD34(+);肾小球微小病变CD10、CD34均呈(??)。结论肾活检病理光镜检查包括HE、PAS、PASM和MASSOM等染色,结合CD10和CD34免疫组化双染色,能够更准确地对增生性肾小球肾炎做出病理变化和病理类型的诊断。     

石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用

在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。     

肾穿刺组织冷冻切片常见问题及对策

正肾穿刺组织冷冻切片是进行免疫荧光检查的重要环节。切片质量的优劣直接关系免疫荧光染色技术成功与否,其对肾脏疾病的诊断及分类具有重要的作用。切片内见足量的肾小球是成功的保障~[1-2]。免疫荧光检查所用的肾穿刺组织极小,制作冷冻切片具有较大的挑战性。病理技术人员只有熟练运用冷冻切片技术,掌握制片技巧,才能制作出合格的冷冻切片。肾穿刺组织冷冻切片过程中,常见下列问题:切片内无肾小球;切片不完整;切片出现冰晶空洞;切片卷曲、折叠;切     

H-E染色在环氧树脂半薄切片中的应用

半薄切片是进行超薄切片前的必要环节，有助于准确定位。常用的染色方法有甲苯胺蓝、吉姆萨染色法等。这些染色单一，仅能提供组织细胞着色深浅不同的蓝色，对特殊组织与特殊结构则不能选择性的染色。若经H-E染色则可提供更为详细的结构，弥补石腊切片的不足，且结构介于光镜和电镜之间，可应用到临床中，提高病理诊断水平。为此，我们在实验工作中摸索出改进的苏木素、伊红(H-E)染色法用于半薄切片，清晰地显示组织结构，提高切片分辨率。现介绍如下。     

PASM-Masson套染在肾穿刺活检中的应用

肾穿刺活检组织病理诊断是肾脏疾病诊断以及鉴别的重要方法,包括常规HE染色、特殊染色、免疫荧光染色及电镜检查等。其中,特殊染色是肾穿刺活检组织的重要辅助检查方法,主要包括PAS染色、PASM染色、Masson染色以及刚果红染色等。在日常工作中,如果对穿刺肾组织分别进行染色,所需时间长,工作量大,不利于病理医师镜下观察免疫复合物沉积及其位置[1]。     

改良半薄切片多色性染色方法

半薄切片有助于电子显微镜超薄切片的准确定位。现有的半薄切片有各种不同的染色方法,但在观察时往往组织结构、细胞核及细胞浆分辨不够清楚。我们在半薄切片中改进染色液的配制和染色方法,并     

电镜半薄切片应用于光镜研究的探讨

电镜半薄切片通常用于电镜超薄切片前的定位观察 ,我们在定位观察时发现 ,由于切片薄 ,结构显示清晰 ,可用于光镜研究 ,其观察结果优于石蜡切片。多年来 ,我们已将电镜半薄切片应用于实验研究和研究生课题实验。方法 :取材后将组织修为 1立方毫米左右 ,常规电镜样品处理 ,环氧树脂 6 18包埋 ,修块 ,L KBV型超薄切片机切片 ,切片厚度 1微米 ,脱树脂后 ,苏木精染色 ,H· E或甲苯胺兰染色 ,37℃温箱烤干 ,封片 ,观察。结果 :苏木精染色显示 ,细胞核呈紫兰色 ,胞浆淡兰色 ;H·E染色显示 ,细胞核为紫兰色 ,细胞质淡粉红色 ,但伊红染色较石蜡…     

骨髓活检标本石蜡包埋制片方法

塑料包埋技术用于骨髓活检有许多优点，但目前还未能完全满足病理诊断需要。经过聚合后的骨髓组织，虽然能制成较薄的切片，但如需作免疫组织化学染色就相当困难。我们经过用多种脱钙液反复试验比较，最后选用“Formical-4”脱钙液用于骨髓活检标本脱钙，不论HE或免疫组织化学染色均收到良好效果。现将108例骨髓活检标本石蜡包埋制片方法介绍如下。     

肾穿刺活检组织切片制备技术的改进

肾穿刺活检组织切片的制备是病理技术工作中一项特殊的技术,其制备质量的优劣在一定程度上关系到临床肾病诊治工作的开展。为提高肾穿刺活检组织切片制备技术、准确把握肾脏疾病的诊断与治疗,作者收集141例肾穿刺活检组织标本,在组织标本的切割分配与固定、半薄切片的制备以及常规染色、特殊染色和免疫组化染色方面,对肾穿刺活检组织切片的制备进行改良,效果良好,现介绍如下。     

酵母多糖所致大鼠多器官功能衰竭中肾小球损伤与NF-κB p65活性的关系

目的:观察在酵母多糖所致大鼠多器官功能衰竭(MOF)中,NFκBp65的活性与肾小球损伤的关系。方法:将20只Wistar雌性大鼠随机分为MOF模型组和对照组,每组各10只,通过腹腔注射酵母多糖石蜡油悬液建立模型。24h后,取血检查肝、肾功能及进行血气分析,并处死大鼠,取肾组织进行HE染色、PAS染色、PASM染色及Masson染色,并用免疫组化染色和ELISA法检测肾小球中NFκBp65的活性。结果:MOF模型组血PO2、pH值显著低于对照组;而ALT和sCr的水平明显高于对照组(P<0.01)。病理观察显示,MOF模型组大鼠的肾小球呈明显的增生性改变,部分肾小球硬化,肾小球及其周围可见大量的炎症细胞浸润;肾小球内NFκBp65的活性明显增强,且与肾小球内的细胞数、基底膜系膜区的面密度呈正相关;而与毛细血管袢的面密度呈负相关。结论:酵母多糖所致大鼠MOF中肾小球的损伤可能与NFκBp65的活性增强有关。     

提高电镜超薄切片染色效率的装置

随着电镜技术应用的普及,利用电镜观察肾小球超微结构进行临床诊断的样品日益增多.传统的超薄切片染色方法不能1次进行大批量染色操作(费时、费工,且易造成污染).为此,笔者对传统的电镜染色法作了探索和改进,最终做出了制作简便、染色量大、染色效果稳定的电镜超薄切片染色装置.     

过碘酸-Schiff染色法与苏丹黑B双重染色在肌病诊断中的应用

在肌病病理诊断过程中,对骨骼肌活检标本冰冻切片进行H-E染色后,观察时发现有空泡现象的组织切片,除排除冰晶以外,一般考虑是否有糖原累积或脂质沉积,需要分别进行糖原染色与脂肪染色,以做进一步的鉴别诊断.过碘酸-Schiff染色法(periodic acid schiff,PAS),是一种常用的糖原染色方法;苏丹黑B是常用脂肪染色方法之一.笔者尝试将这2种染色方法在同一张切片上先后进行染色,实验结果表明,方法可行、结果满意;并且给观察提供方便.     

显示大鼠下颌下腺颗粒曲管细胞方法的探讨

本应用几种方法观察研究了大鼠下颌下腺颗粒曲管（GCT）细胞，包括石蜡切片Malory染色，树脂包埋半薄切片甲苯胺蓝染色，石蜡切片、半薄切片免疫组织化学法（PAP法，免疫金银法），和透射电镜观察。应用这些方法进行比较与印证，对GCT细胞的形态结构、功能及异质性特征等提出可靠的见解。本对上述几种方法步骤的具体条件和要领进行了探讨。     

对Grocott六胺银染色改良的体会

在肾脏疾病的研究中,肾小球肾炎的病变主要表现在肾小球,尤其是肾小球基底膜的改变。常规的HE染色不能清晰地显示肾小球基底膜,要通过特殊染色,才能将肾小球基底膜清晰地显示出来,以便观察肾小球肾炎对肾脏损伤的程度。我们针对肾小球肾炎对肾脏损伤模型制作的石蜡切片,对G roc     

局灶节段性肾小球硬化症C4d表达的特点及意义

目的研究不同类型的原发性局灶节段性肾小球硬化症（FSGS）中C4d表达的特点及意义。方法采用免疫组化染色方法，并结合PASM—C4d套染和免疫组化双标染色方法，观察了97例FSGS中C4d在肾小球上沉积部位和强度，及其与病理类型之间的关系。结果88例（90．7％）FSGS的肾小球C4d阳性表达，C4d主要沉积在FSGS肾小球硬化病变处。细胞型、顶端型、塌陷型及非特殊型FSGS中均表现为硬化病变处血管袢C4d不均匀粗线状沉积，系膜区散在多少不等的颗粒状沉积；顶端型和非特殊型为节段沉积，细胞型和塌陷型为球性沉积。门部型FSGS主要在门部有C4d颗粒状沉积，未见血管袢沉积。结论补体经典途径激活参与了FSGS的发病机制；硬化病变处血管袢C4d不均匀粗线状沉积是细胞型、塌陷型、非特殊型和顶端型FSGS重要的免疫病理形态特点之一。