糖原合成酶激酶3β对卵巢癌紫杉醇耐药性的影响及机制研究

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)对卵巢癌紫杉醇耐药性的影响及机制。方法运用氯化锂(Li Cl)增加卵巢癌细胞内失活性GSK-3β的表达,MTT法测定紫杉醇的半数抑制浓度(IC50),流式细胞仪检测p-GSK-3β(ser9)的表达量,免疫荧光观察其细胞内定位情况。结果 Li Cl 20mmol/L处理1 h后,24、48、72 h SKOV3细胞紫杉醇的IC50从(10.11±0.87)、(1.07±0.17)、(0.03±0.01)μg/m L增加至(11.56±0.96)、(1.74±0.24)、(0.06±0.01)μg/m L,除24 h外差异均有统计学意义(P<0.05)。Li Cl处理后SKOV3细胞内p-GSK-3β(ser9)的平均荧光强度由(661.67±37.63)增加到(841.67±41.53),差异有统计学意义(P<0.05)。Li Cl处理后SKOV3细胞核内p-GSK-3β(ser9)表达水平上调。结论 GSK-3β失活性磷酸化水平的增加,尤其是细胞核内表达水平的上调可导致卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的增强。     

微小染色体缺陷维持蛋白3对黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响北大核心CSCD

目的探究微小染色体缺陷维持蛋白3(MCm3)通过Wnt/β-catenin信号通路对黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响。方法将人恶性黑色素瘤细胞A375分为对照组(空白对照),si-NC组(转染si-NC组)、si-MCm3组(转染si-MCm3组)。以噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活力,以划痕实验和Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭能力,以蛋白质印迹(Western blot)法检测Wnt3a蛋白(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平。结果对照组、si-NC组和si-MCm3组72 h的细胞存活率分别为(249.31±18.66)%,(253.26±12.63)%,(168.71±16.01)%,侵袭细胞数分别为(375.55±11.83),(366.94±20.04),(148.53±11.75)个,划痕愈合率分别为(53.64±5.71)%,(51.37±4.33)%和(22.37±2.07)%,si-MCm3组与对照组和si-NC组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组和si-NC相比,si-MCm3组细胞Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1均显著降低(均P<0.01)。结论敲低MCm3可抑制黑色素瘤细胞的迁移和侵袭,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路相关.     

小鼠高迁移率族蛋白B1 A盒蛋白的原核表达及分离纯化

<正>高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)是广泛存在于真核细胞内的高度保守的非组蛋白染色体蛋白,全长648bp,由215个氨基酸残基构成。HMGB1分子包含2     

黄腐酚对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的影响及其机制

目的 探讨黄腐酚降低人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的机制。方法 将KOV3/DDP细胞分为卵巢癌组（无干扰）、10 μmol·L^-1黄腐酚组（10 μmol·L^-1黄腐酚培养）、20 μmol·L^-1黄腐酚组（20 μmol·L^-1黄腐酚培养）、40 μmol·L^-1黄腐酚组（40 μmol·L^-1黄腐酚培养）、80 μmol·L^-1黄腐酚组（80 μmol·L^-1黄腐酚培养）、160 μmol·L^-1黄腐酚组（160 μmol·L^-1黄腐酚培养）。采用CCK-8检测SKOV3/DDP细胞存活率;克隆形成实验检测SKOV3/DDP细胞克隆数目;流式细胞仪检测SKOV3/DDP细胞凋亡率;CCK-8检测黄腐酚对SKOV3/DDP细胞DDP耐药性的影响;免疫印迹检测SKOV3/DDP细胞中耐药蛋白ABCB1、MDR-1和P-gp的表达。结果 与卵巢癌组相比,10 μmol·L^-1黄腐酚组SKOV3/DDP细胞存活率无明显变化（P>0.05）;与10 μmol·L^-1黄腐酚组相比,20、40、80、160 μmol·L^-1黄腐酚组SKOV3/DDP细胞存活率均显著降低（P<0.05）。卵巢癌组及10、20、40、80、160 μmol·L^-1黄腐酚组SKOV3/DDP细胞克隆数目分别为（86±12）、（82±10）、（61±11）、（46±9）、（29±11）及（20±7）,组间比较,差异有统计学意义（F=43.270, P<0.001）。卵巢癌组及10、20、40、80、160 μmol·L^-1黄腐酚组SKOV3/DDP细胞凋亡率分别为（2.56±0.20）%、（3.20±0.36）%、（15.21±1.22）%、（26.30±1.60）%、（33.20±2.25）%及（45.63±2.10）%,组间比较,差异有统计学意义（F=775.200, P<0.001）。与DDP相比,DDP联合黄腐酚对SKOV3/DDP细胞的活性抑制率较高,差异有统计学意义（P<0.05）;与卵巢癌组相比,10 μmol·L^-1黄腐酚组ABCB1、MDR-1和P-gp蛋白表达水平无显著差异（P>0.05）;与10 μmol·L^-1黄腐酚组相比,20、40、80、160 μmol·L^-1黄腐酚组SKOV3/DDP细胞中ABCB1、MDR-1和P-gp蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）。结论 黄腐酚可降低卵巢癌SKOV3/DDP细胞的耐药性,抑制细胞活性,促进细胞凋亡,可能与下调ABCB1、MDR-1和P-gp蛋白表达相关。     

miR-619-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响北大核心CSCD

目的探究miR-619-5p在人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7增殖、迁移和侵袭中的作用及机制。方法乳腺癌和正常乳腺组织及细胞中miR-619-5p的表达利用生物信息学分析或经qRT-PCR法检测;分别转染miR-619-5p模拟物或抑制剂后,qRT-PCR法测定miR-619-5p、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子mRNA的表达;CCK-8法用于检测细胞增殖;划痕愈合实验和Transwell TM实验观察细胞迁移和侵袭能力转变;EMT相关分子的蛋白表达由Western blot检测。生物信息学预测miR-619-5p靶基因,并对潜在靶基因CREB1作初步分析。结果miR-619-5p在乳腺癌中低表达。与对照组相比,过表达miR-619-5p后,miR-619-5p表达水平上调,EMT上皮标志物表达上调,促EMT分子及间质标志物表达下调,细胞的增殖、迁移与侵袭能力削弱,CREB1表达下调;低表达miR-619-5p组结果与上述结果相反。结论乳腺癌组织及细胞中miR-619-5p表达更低,miR-619-5p可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT,其效应可能通过靶向CREB1实现。     

罗米地辛对卵巢癌细胞顺铂耐药及PD-L1表达的影响

目的 探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂罗米地辛调控卵巢癌细胞顺铂耐药及PD-L1表达的作用。方法 体外培养顺铂耐药卵巢癌细胞系COC1/DDP,用CCK-8实验检测细胞活力和顺铂半数抑制质量浓度(IC_(50)),用流式细胞术检测细胞凋亡和PD-L1的表达水平,用实时荧光PCR实验检测细胞PD-L1和STAT3的表达水平,用Western blot检测组蛋白乙酰化水平。结果 与Control组相比,Romidepsin组的卵巢癌细胞活力显著下降(P<0.05),IC_(50)值降低,细胞早期凋亡率和晚期凋亡率显著升高(P=0.004、P=0.003),PD-L1 mRNA的表达水平和蛋白表达水平显著升高(P=0.012 7),组蛋白H3乙酰化水平显著升高(P<0.000 1),STAT3的表达水平显著降低(P=0.027 4)。结论 Romidepsin可能通过调控组蛋白乙酰化水平和STAT3的表达水平逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性,促进顺铂诱导细胞凋亡,提高PD-L1的表达水平。     

基于糖原合成酶激酶3β/核因子-κB通路探讨参芪抑瘤方联合顺铂对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的 基于糖原合成酶激酶3β(GSK3β)/核因子-κB(NF-κB)通路探讨参芪抑瘤方联合顺铂对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法 皮下接种H22瘤株建立小鼠H22实体移植瘤模型,待造模成功后随机分为模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组10只;另取10只正常小鼠作为空白组。空白组和模型组均给予0.9%NaCl;对照组腹腔注射2.5 mg·kg^-1顺铂,每周2次;低、中、高剂量实验组灌胃给予13.52、27.03和54.06 g·kg^-1·d^-1参芪抑瘤方煎液+腹腔注射2.5 mg·kg^-1顺铂,每周2次。6组小鼠均连续治疗13 d,处死小鼠,计算肿瘤体积;用蛋白质印迹法检测瘤组织中GSK3β/NF-κB通路相关蛋白的表达水平;用反转录酶-聚合酶链反应检测GSK3β/NF-κB通路相关基因和细胞增殖抗原标记物(Ki67)和细胞增殖核抗原(PCNA) mRNA相对表达量。结果 中、高剂量实验组和对照组、模型组的第13天肿瘤体积分别为(2 014.80±885.60)、(1 324.75±873....     

顺铂联合热疗对卵巢癌铂敏感细胞株COC1和铂耐药细胞株COC1/DDP的影响

目的 探讨热疗联合化疗对卵巢癌铂敏感细胞株COC1和铂耐药细胞株COC1/DDP增殖、凋亡的作用、逆转耐药细胞的耐药性及其可能机制.方法 采用MTT法检测热疗及联合不同浓度的顺铂(1.25、2.5、5、10、20μg·mL-1)对卵巢癌细胞株COC1,COC1/DDP生长的抑制作用;RT-PCR法检测两种细胞株中Sur...     

转录延伸因子A样3因子对食管鳞癌TE-1和KYSE-30细胞增殖、迁移和凋亡的影响北大核心CSCD

目的探索转录延伸因子A样3因子(TCEAL3)对食管鳞癌TE-1和KYSE-30细胞系增殖、迁移、凋亡的影响。方法将食管鳞癌细胞TE-1和KYSE-30细胞株分成TE-1对照组和KYSE-30对照组(均转染空载慢病毒)、TE-1实验组和KYSE-30实验组(均转染TCEAL3过表达慢病毒)。以蛋白质印迹法检测TCEAL3、高迁移率族蛋白A1(HMGA1)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达水平;以CCK8实验检测细胞的增殖情况;以Transwell迁移实验检测细胞迁移情况;以流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果TE-1对照组和TE-1实验组、KYSE-30对照组和KYSE-30实验组的TCEAL3蛋白相对表达水平分别为0.31±0.02和0.56±0.02,0.25±0.02和0.49±0.05;细胞增殖率分别为(1721.01±21.16)%和(1229.69±59.17)%,(1715.27±89.70)%和(781.05±136.75)%;凋亡率分别为(3.99±1.60)%和(32.20±2.96)%,(5.15±0.20)%和(32.20±0.53)%;迁移细胞数分别为(189.00±6.67)和(120.00±28.40)个,(189.00±30.20)和(111.00±27.60)个;HMGA1蛋白表达水平分别为0.79±0.11和0.37±0.06,0.67±0.03和0.33±0.03;MMP2蛋白表达水平分别为0.55±0.02和0.32±0.04,0.61±0.02和0.37±0.01。上述指标,TE-1实验组与TE-1对照组比较,KYSE-30实验组与KYSE-30对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论TCEAL3可能通过抑制HMGA1的表达,从而下调MMP2的表达来抑制食管鳞癌细胞的增殖能力和迁移运动能力,并促进凋亡。     

线粒体铁蛋白对顺铂抑制人肺癌细胞A549/DDP增殖的作用机制北大核心CSCD

目的探讨线粒体铁蛋白(FTMT)通过hepcidin-BMP6-SMAD7信号通路对顺铂(DDP)抑制人肺癌细胞A549/DDP增殖的作用。方法实验分为0(正常RPMI-1640培养基),1.0,2.5,5.0,7.5和10μg·mL^(-1)DDP组(1.0,2.5,5.0,7.5和10μg·mL^(-1)DDP培养基处理)。以噻唑蓝(MTT)法检测A549和A549/DDP在DDP作用后的细胞存活率;以流式细胞术检测细胞凋亡、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(MMP)的水平;以逆转录聚合酶链反应(qPCR)法检测细胞中FTMT、铁蛋白重链(FTH)、铁蛋白轻链(FTL)基因的表达水平。结果DDP诱导后细胞的存活率随着药物浓度的增加而显著降低。0和10μg·mL^(-1)DDP组A549/DDP细胞早期凋亡率分别为(1.75±0.43)%和(0.95±0.28)%,坏死率分别为(2.35±0.42)%和(7.40±0.49)%,ROS水平分别为(4.25±0.49)%和(12.31±0.96)%,MMP水平分别为(89.00±2.38)%和(82.40±0.95)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。随着DDP浓度的增加,A549/DDP细胞中的Bax、caspase3、FTMT、铁调素、转铁蛋白受体(TfR1和TfR2)、BMP6、SMAD7和hjv的mRNA水平先升高后降低,Bcl-2和储铁蛋白(FTH和FTL)的mRNA水平先降低后升高。结论FTMT的高表达与DDP的耐药有一定关系,FTMT-hepcidin-BMP6-SMAD7信号通路参与了DDP诱导人肺癌A549/DDP细胞的凋亡过程。     

桦木酸对人胃癌MKN-45细胞上皮-间充质转化的影响北大核心CSCD

目的观察桦木酸(betulinic acid,BA)对转化生长因子-β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)诱导的人胃癌MKN-45细胞迁移与侵袭能力的影响,并从上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)方面探讨相关作用机制。方法体外培养MKN-45细胞,采用CCK-8法分别检测24、48和72 h不同浓度BA对MKN-45细胞增殖的影响;通过细胞划痕实验和Transwell侵袭实验观察BA(5、10、20μmol·L^(-1))和TGF-β1抑制剂LY2109761(10μmol·L^(-1))对TGF-β1(10μg·L^(-1))诱导后MKN-45细胞侵袭与转移水平的影响;采用Western blot法检测各组MKN-45细胞中TGF-β1、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达情况。结果BA能以时间及浓度依赖性地抑制MKN-45细胞的增殖,干预24、48、72 h后的IC 50值分别为212.8、22.72、13.17μmol·L^(-1)。与空白组相比,TGF-β1诱导后MKN-45细胞的划痕迁移(P<0.05)与Transwell侵袭(P<0.01)水平明显增加;MKN-45细胞中TGF-β1(P<0.01)、N-Cadherin(P<0.05)、MMP-2(P<0.01)明显上调,E-Cadherin(P<0.01)明显下调。与TGF-β1组相比,LY2109761能明显逆转TGF-β1诱导的MKN-45细胞迁移与侵袭能力(P<0.01),下调TGF-β1、N-Cadherin、MMP-2(P<0.01),并上调E-Cadherin(P<0.01);BA能呈浓度依赖性地抑制TGF-β1诱导下MKN-45细胞的迁移与侵袭能力(P<0.01),下调TGF-β1(P<0.01)、N-Cadherin(P<0.01)、MMP-2(P<0.05或P<0.01),并上调E-Cadherin(P<0.01)。结论BA能抑制胃癌MKN-45细胞的迁移与侵袭能力,其机制可能与阻滞TGF-β1诱导的EMT进程有关。     

干扰核黄素代谢对细胞卵巢癌HO8910细胞顺铂敏感性的影响（英文）北大核心CSCD

目的研究干预核黄素(RIB)代谢途径对卵巢癌HO8910细胞顺铂(DDP)敏感性的影响。方法采用慢病毒包装sh RNA载体干扰RIB转运体2(RFT2)和RIB竞争性抑制剂氯丙嗪(CHL)干预RIB代谢途径。HO8910卵巢癌细胞分为正常细胞对照组、sh RNA对照组、RFT2 sh RNA组、CHL 50μmol·L^(-1)组、DDP 20μmol·L^(-1)组、RFT2 shR NA+DDP组、CHL+DDP组和DDP+RIB 20μmol·L^(-1)组。各组细胞处理48 h后CCK-8方法检测细胞存活;结晶紫染色方法检测克隆形成能力;流式细胞仪检测凋亡、线粒体膜电位、活性氧(ROS)含量和CD44^+CD133^+细胞比例。结果与单独DDP处理组对比,RFT2 sh RNA或CHL联合DDP能明显降低HO8910细胞活性(P<0.01),减少细胞集落形成能力(P<0.01),降低细胞线粒体膜电位(P<0.01),增加细胞ROS含量和细胞凋亡比例(P<0.01),同时减少CD44^+CD133^+细胞比例(P<0.01),RIB可减弱DDP对HO8910细胞的作用(P<0.01)。结论干扰RIB代谢途径能增强DDP对卵巢癌HO8910细胞的杀伤作用,该作用与增强DDP氧化损伤和降低干细胞样肿瘤细胞比例有关;RIB可减弱DDP对HO8910细胞的作用。     

川楝素对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 研究川楝素对体外卵巢癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能的作用机制.方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为低、中、高剂量实验组和对照组,分别以50,60,70μmol·L-1川楝素与等量生理盐水干预,分别干预24,48和72 h.用活细胞计数(CCK-8)法检测人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制情况;用细胞划痕实验...     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的影响

目的探究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的作用。方法建立稳定表达EMMPRIN基因的SKOV3细胞为实验组,分别以转染pc DNA3.0空载体的SKOV3细胞和正常卵巢上皮细胞IOSE80分别作为对照组和空白组。用流式细胞术检测凋亡率,用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,用免疫印迹法检测EMMPRIN、Bcl-2和Bax的表达水平。结果空白组、对照组和实验组的凋亡率分别为(10.27±1.35)%,(12.40±0.70)%和(5.67±0.96)%,平均相对迁移指数分别为(0.25±0.03),(0.64±0.03)和(0.83±0.02),平均侵袭细胞数分别为(45.75±2.87),(120.00±3.92)和(153.25±8.06),EMMPRIN表达量分别为(0.12±0.02),(0.22±0.01)和(0.34±0.02),Bcl-2表达量分别为(0.06±0.01),(0.55±0.02)和(0.87±0.03),Bax表达量分别为(0.37±0.02),(0.28±0.01)和(0.12±0.01)。实验组的上述指标与空白组和对照比较,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。结论 EMMPRIN过表达后人卵巢癌细胞SKOV3细胞凋亡能力降低,细胞迁移和侵袭能力增强。     

米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP细胞凋亡和性激素受体的影响

目的 探讨米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP增敏作用以及凋亡率、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的影响.方法 采用RPMIl640培养液时CAOV3/DDP细胞株进行培养,将CAOU3/DDP细胞株分5组:对照组(不加任何药物)、顺铂组(2μg/ml)、高剂量米非司酮加顺铂组(15μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、中剂量米非司酮加顺铂组(10μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、低剂量米非司酮加顺铂组(5μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂).培养结束后采用MTT法观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株增殖活力的影响;采用流式细胞术观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株凋亡率、ER、PR的影响.结果 与对照组比较,顺铂组对细胞增殖活力、细胞凋亡率以及ER、PR阳性率的影响,差异均无统计学意义(P>0.05);与顺铂组比较,各剂量米非司酮加顺铂组对细胞增殖活力、生存率以及细胞凋亡率、PR阳性率的影响,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且随着米非司酮浓度的升高,对CAOV3/DDP细胞抑制作用逐渐增强,细胞凋亡率显著上升,PR阳性率下降(P<0.05,P<0.01),各组ER阳性率无统计学意义(P>0.05).结论 米非司酮联合顺铂对CAOV3/DDP细胞增殖活力均具有显著抑制作用,且与米非司酮的浓度呈剂量依赖关系,米非司酮可提高顺铂化疗的敏感性,其增敏作用与抑制孕激素分泌,促进卵巢癌细胞凋亡有关     

甲硫氨酸限制对口腔癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响北大核心CSCD

目的探讨甲硫氨酸限制对人口腔鳞状癌细胞CAL-27的增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用计数法检测甲硫氨酸限制对口腔癌细胞CAL-27增殖的影响;平板克隆法检测CAL-27细胞克隆形成;流式细胞术结合PI单染法检测CAL-27细胞的周期;Annexin V-PE/7AAD双染法检测CAL-27细胞的凋亡;划痕与Transwell实验检测CAL-27细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax、细胞周期蛋白CDK2和CDK4以及迁移侵袭蛋白N-cadherin和E-cadherin的表达水平的变化。结果甲硫氨酸限制明显抑制口腔癌CAL-27细胞的增殖和克隆形成(P<0.01);甲硫氨酸限制将口腔癌细胞CAL-27阻滞在G_(0)/G_(1)期(P<0.01);甲硫氨酸限制明显诱导口腔癌细胞CAL-27细胞发生凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);Western blot结果表明甲硫氨酸限制明显下调口腔癌CAL-27细胞的凋亡蛋白Bcl-2的表达以及周期蛋白CDK2和CDK4的表达,并且明显下调迁移和侵袭蛋白N-cadherin以及上调E-cadherin的表达水平。结论口腔癌细胞CAL-27具有甲硫氨酸依赖性;通过甲硫氨酸限制明显抑制口腔癌细胞CAL-27细胞的增殖、迁移和侵袭,可为甲硫氨酸限制疗法应用于口腔癌的治疗提供理论依据。     

紫草素对非小细胞肺癌细胞增殖和迁移的影响北大核心CSCD

目的研究紫草素对非小细胞肺癌NCI-H358细胞增殖和迁移的抑制作用。方法将NCI-H358细胞随机分为对照组和低、中、高剂量实验组。对照组细胞给予常规培养,低、中、高剂量实验组分别以5,10,20μmol·L^(-1)紫草素处理24 h。以细胞计数(CCK-8)法检测NCI-H358细胞活力;以划痕愈合实验评估细胞的迁移能力;以蛋白质印迹法检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关蛋白表达水平。结果对照组和低、中、高剂量实验组细胞的存活率分别为(98.72±1.33)%,(90.68±3.52)%,(76.41±5.64)%,(52.85±3.76)%;迁移率分别为(98.54±2.85)%,(67.94±5.31)%,(42.46±2.23)%,(23.26±4.79)%;p-Akt的表达水平分别为0.42±0.05,0.28±0.03,0.16±0.04,0.17±0.02;p-PI3K的表达水平分别为0.26±0.03,0.15±0.03,0.14±0.02,0.11±0.02;p-mTOR的表达水平分别为0.69±0.08,0.51±0.05,0.33±0.05,0.25±0.04。低、中、高剂量实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论紫草素通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制非小细胞肺癌NCI-H358细胞的增殖和迁移。     

SPHK1在甲状腺乳头状癌中的表达及其对IHH4细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨鞘氨醇激酶1(SPHK1)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及对IHH4细胞侵袭和迁移的影响.方法 采用免疫组化检测110例PTC组织及癌旁组织中SPHK1的表达,分析SPHK1表达与其临床指标的关系.采用小于扰RNA-SPHK1转染PTC细胞系IHH4,Transwell实验和细胞划痕实验分析其对IHH4细...     

微小RNA-101-3p对卵巢癌细胞紫杉醇敏感性的影响北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-101-3p(miR-101-3p)调控Notch同源物1(Notch1)对卵巢癌细胞紫杉醇敏感性的影响。方法将A2780/Taxol细胞分为紫杉醇组(用1.8μmol·L^(-1)紫杉醇处理),第1转染组(转染miR-101-3p mimics,用1.8μmol·L^(-1)紫杉醇处理),第2转染组(转染pcDNA3.1-Notch1,用1.8μmol·L^(-1)紫杉醇处理),第3转染组(同时转染pcDNA3.1-Notch1和miR-101-3p mimics,用1.8μmol·L^(-1)紫杉醇处理)。用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-101-3p在A2780和A2780/Taxol细胞中的表达水平。48 h后,用CCK-8检测细胞增殖活性。用流式细胞术检测细胞周期,用蛋白质印迹(Western blot)法检测Notch1的表达水平。结果miR-101-3p在A2780和A2780/Taxol细胞中的表达水平分别为1.00±0.04,0.35±0.05,差异有统计学意义(P<0.05)。紫杉醇组、第1转染组、第2转染组、第3转染组的细胞48 h增殖率分别为(141.82±5.45)%,(106.06±7.35)%,(184.24±8.20)%,(146.06±7.57)%;G0/G1期细胞百分比分别为(40.17±2.93)%,(53.38±2.56)%,(19.97±3.22)%,(35.49±4.51)%;S期细胞百分比分别为(36.74±4.07)%,(33.05±3.13)%,(40.12±3.29)%,(37.05±2.39)%;G2/M期细胞百分比分别为(23.09±1.42)%,(13.57±0.58)%,(39.92±2.68)%,(27.46±4.59)%;Notch1的相对表达水平分别为1.03±0.09,0.53±0.04,1.89±0.21,1.26±0.11。第1转染组、第2转染组分别与紫杉醇组比较,第3转染组与第2转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-101-3p在紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol中低表达,过表达miR-101-3p可通过靶向下调Notch1的表达增强A2780/Taxol细胞紫杉醇敏感性。