辅酶Q2基因突变所致辅酶Q10缺乏性肾病综合征1例

该文报道1例辅酶Q(coenzyme Q, CoQ)2基因突变所致CoQ10缺乏性肾病综合征病例并进行文献复习。该患者以血尿、蛋白尿及视力下降为临床表现, 予足量糖皮质激素治疗2个月余, 蛋白尿无缓解。出生史无特殊, 其父母非近亲婚配、均体健。全外显子组测序结果显示, CoQ2基因c.973A>G(p.T325A)和c.517C>T(p.R173C)突变, 结合肾活检明确为遗传性肾病, 予减停糖皮质激素后改为补充CoQ10治疗, 5周后24 h尿蛋白量由6.01 g下降至1.53 g。     

乳腺癌与瘦素受体基因变异的关系

目的 探讨瘦素受体(OB-R)基因第exon4、exon6变异与乳腺癌的关系.方法 收集山西省肿瘤医院乳腺外科2005年1月至12月行手术治疗的乳腺癌患者癌灶组织85例,良性病组织30例,健康人群抗凝血50例.采用PCR扩增、测序的方法检测标本中OB-R基因exon4、exon6的变异情况.结果 OB-R基因exon4在乳腺癌、乳腺良性疾病患者和健康对照者均未发生变异.OB-R基因exon6的668核苷酸位点处发生了A→G的碱基颠换,导致Gln223Arg,乳腺癌组68例(68.24%),良性疾病组20例(66.67%)和健康对照组33例(66.00%)分别发生碱基颠换,但三组比较差异无统计学意义(P》0.05).在乳腺癌组的52例超重和肥胖患者中有43例(82.69%)OB-R基因exon6位点处碱基颠换明显高于与正常体重的17例(51.52%)患者,两组比较有统计学意义(χ2=12.89,P《0.01).结论 OB-R基因exon4与乳腺癌发生无关,exon6的变异与体重指数改变的乳腺癌患者有关.     

后纵韧带骨化症患者基因变异及表型分析

目的：通过对后纵韧带骨化症（OPLL）患者进行全外显子组测序（WES）,明确其可能的致病原因。方法：提取2017年1月至2019年12月收治的93例OPLL患者外周血基因组DNA,进行WES及生物信息学分析,筛查与OPLL相关的基因变异。结果：在2例OPLL患者中发现了ENPP1基因的2个错义变异,其中患者1携带1个c.T802C(p.Tyr268His)杂合变异,患者2携带1个c.T253C(p.Cys85Arg)杂合变异和1个c.T802C(p.Tyr268His)杂合变异。2个变异位点在不同物种中均具有高度保守性,多种蛋白预测软件均预测变异有害或可能有害,表型分析发现2例患者均发生了颈椎、胸椎OPLL及黄韧带骨化症。患者2血清磷水平在正常低限,血清碱性磷酸酶水平高于正常值。结论：ENPP1基因变异可能是OPLL患者的致病原因。该研究丰富了ENPP1基因变异谱,也为今后OPLL患者应用新的治疗方法提供了分子诊断依据。     

非诺贝特治疗脂蛋白肾病尿检完全缓解3例报告及文献复习

目的 观察非诺贝特治疗脂蛋白肾病(LPG)的疗效.方法 回顾性观察南京军区总医院经肾活检确诊的LPG患者40例,其中3例经非诺贝特治疗后尿检完全缓解,分析这3例患者的临床病理表现及治疗反应.结果 3例患者肾脏表现均为中等量蛋白尿,肾功能正常,血白蛋白正常或偏低,实验室检查有血浆载脂蛋白(Apo)E升高,肾活检可见肾小球内大量脂蛋白栓子堵塞毛细血管及ApoE染色阳性,3例患者经非诺贝特等药物治疗后,短期内尿蛋白显著减少,随访1年蛋白尿完全缓解,肾功能长期稳定.结论 非诺贝特可以降低脂蛋白肾病患者的蛋白尿,部分患者尿检可完全缓解.     

Denys-Drash综合征及其致病基因突变鉴定二例报道

目的 研究中国Denys-Drash综合征(DDS)患者Wilms瘤基因1(WT1)的基因突变。 方法 应用PCR方法扩增出WT1基因全部10个外显子及其相邻内含子序列，经纯化后进行PCR产物直接测序。 结果 2例患者WT1基因分别存在1个杂合错义突变。例1的X外显子9第1180位碱基C→T突变，造成第394位精氨酸改变为色氨酸，即p.R394W(c.1180C>T)。例号2的S外显子9第1203位碱基C→A突变，造成第401位组氨酸改变为谷氨酰胺，即p.H401Q(c.1203C>A)。其中第1203位碱基C→A突变，p.H401Q (c.1203C>A)，在国内外文献及突变数据库中均未见报道，属新发现的突变。 结论 DDS综合征WT1基因中外显子9为突变热点，并发现一种新的WT1基因突变。     

C．R.P.C.四步法腹腔镜根治性前列腺切除术的安全性和疗效分析

目的 探讨经腹膜外途径C.R.P.C.四步法腹腔镜根治性前列腺切除术治疗局限性前列腺癌的安全性和疗效。方法 回顾性分析2015年4月至2017年12月同济医院收治的102例前列腺癌患者的病例资料。年龄(67±5)岁。术前总PSA值(45.32±18.33)ng/ml。前列腺体积(42±12)cm3。102例均行磁共振检查和前列腺穿刺活检确诊为前列腺癌,临床分期cT1c～cT3b期。102例均在全麻下行经腹膜外途径腹腔镜根治性前列腺切除术。术中采用C.R.P.C.四步法,即控制背深静脉复合体(control dorsal deep venous complex,C);识别前列腺膀胱交界面、精囊层面、狄氏间隙层面3个解剖层面(recognize three anatomical layers,R);保留尿道括约肌和膀胱颈(preserve urethral sphincter and bladder neck,P);连续行尿道吻合(continuous anastomosis between urethra and bladder neck,C),特别注意3、5、7、9点方向4针。记录手术...     

手术切除的非小细胞肺癌XRCC1和TYMS基因多态性检测结果分析

目的 总结分析手术切除的非小细胞肺癌患者肿瘤组织标本XRCC1基因399密码子多态性检测、TYMS基因5'非翻译区增强子序列多态性检测表达规律,探讨其在指导手术切除的非小细胞肺癌以术后化疗个体化为目的肿瘤标志物联合检测中的临床意义.方法 回顾性总结分析首都医科大学附属北京友谊医院胸外科2010年2月-2014年6月150例NSCLC患者手术切除的肿瘤组织XRCC1和TYMS基因多态性检测结果.应用SPSS 21.0进行统计分析.结果 XRCC1 399基因型常见的有Arg/Arg、Arg/Gln和Gln/Gln,分别为88例(58.7％)、55例(36.7％)和7例(4.6％).TYMS携带5'-UTR串联重复序列常见的是3R/3R、2R/3R和2R/2R基因型分别为106例(70.7％)、38例(25.3％)和6例(4.0％).结论 手术切除的NSCLC中,XRCC1 399基因型Arg/Arg最为常见,其次为Arg/Gln型;TYMS基因型3R/3R占70％以上,尤其是腺癌中比例更高.不建议将XRCC1 399 Arg/Gln基因型作为排除铂类化疗的标志物,同时也不建议将TYMS 3R/3R基因型作为排除培美曲塞化疗的标志物.     

全外显子组测序发现中国Joubert综合征家系C5orf42基因的新突变

目的探究一个中国Joubert综合征家系的致病基因及位点。方法对该Joubert综合征家系的先证者进行全外显子组测序,按照ACMG解读规则筛选致病性变异位点,利用聚合酶链式反应(PCR)和Sanger测序进行验证,并在其他家庭成员及192例健康对照者中进行测序验证。结果在先证者的5号染色体的C5orf42基因上存在2个杂合突变位点,分别为c.3676CT,p.R1226X以及c.8310_8311insT,p.L2770fsX5,这两个位点在家系中符合遗传共分离规律。结论全外显子组测序结合Sanger测序发现C5orf42基因的c.3676CT,p.R1226X以及c.8310_8311insT,p.L2770fsX5位点为引起该Joubert综合征家系临床病变的突变位点。     

中国儿童 PAX2基因突变的临床表型和基因型分析

目的总结和分析中国儿童PAX2基因突变的临床表型和基因型特征, 为该疾病的监测、治疗和预后提供信息。方法该研究为病例系列分析研究。收集2014年1月至2022年12月华中科技大学同济医学院附属同济医院儿童肾脏专科PAX2基因突变患儿的临床资料, 提取患儿外周血基因组DNA并进行全外显子组测序。检索PubMed、Medline、中国知网和万方数据库, 归纳和总结中国PAX2基因突变患儿的临床、病理及基因型改变特征, 并与该中心病例进行比较。结果该研究纳入13例PAX2基因突变患儿, 男9例, 女4例, 其中尿检查异常12例, 影像学检查双肾体积偏小7例, 肾囊肿5例。临床表型为先天性肾脏和尿路畸形8例, 肾-视神经乳头缺损综合征1例, 血尿或蛋白尿3例。5例患儿接受了肾活检, 表现为局灶节段性肾小球硬化C3肾小球病1例, 局灶节段性肾小球硬化1例, 薄基底膜病变1例, IgA肾病2例。13例患儿基因检测结果显示9例为新生突变, 其中4种为新突变类型:c.321G>A、c.213-8C>G、c.63C>A、c.449C>T。76dupG(p.V26Gfs*28)突变...     

慢性肾衰竭患者微炎症状态与脂蛋白(a)及动脉粥样硬化的相关性分析

目的:探讨慢性肾衰竭患者微炎症状态与脂蛋白(a)及动脉粥样硬化的相关性。方法:选取我院2013年8月~2015年8月的98例慢性肾衰竭患者,作为试验组,选取同期健康体检的98例,作为对照组,对两组研究对象的血清C反应蛋白(CRP)、脂蛋白(a)进行检测,同时对慢性肾衰竭患者进行颈动脉B超检测,分析慢性肾衰竭患者微炎症状态与脂蛋白(a)及动脉粥样硬化的相关性。结果:试验组的血清C反应蛋白、脂蛋白(a)的含量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);试验组患者的血清C反应蛋白的含量≥4.0 mg/L的平均颈总动脉内膜-中层厚度(IMT)、粥样斑块发生率明显高于血清C反应蛋白的含量小于4.0 mg/L,差异具有统计学意义(P0.05);慢性肾衰竭患者血清C反应蛋白与脂蛋白(a)存在良好的正相关(R=6.089,P=0.005);慢性肾衰竭患者血清C反应蛋白和脂蛋白(a)与平均颈总动脉内膜-中层厚度、粥样斑块发生率存在良好的正相关(R=5.986,P=0.006;R=5.411,P=0.006;R=5.369,P=0.007;R=5.025,P=0.009)。结论:慢性肾衰竭患者微炎症状态可以通过脂蛋白(a)的代谢参与动脉粥样硬化的形成,从而为深入的治疗提供可靠依据。     

脂蛋白肾病载脂蛋白E基因序列分析

目的报道2例脂蛋广1肾病（LPG）及其载脂蛋白E（apoE）的基因测序分析,探讨apoE基因突变与LPG发病之间的关系。方法①采用直接测序法分析2例经肾活检证实为LPG患者的apoE基因序列;②荟萃分析国内已发表的有关LPG患者apoE基因测序结果并复习国内外相关文献。结果2例LPG;患者中,1例携带一个已被报道过的apoE基因点突变,DNA序列为编码区C606T杂合子突变,致相应的氨基酸发生改变（Arg158Cys）,另一例未发现apoE基因突变。结论LPG患者部分存在apoE基因编码区突变,部分未发现与国内外报道有关的apoE基因突变类型,说明LPG的发病机制可能不仅仅与apoE基因编码区突变有关。     

微小RNA-139-3p靶向调控性别决定区相关高迁移率族盒蛋白4减轻心肌细胞氧化应激损伤

目的研究微小RNA(miR)-139-3p对H2O2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2细胞氧化应激的影响及其可能机制。方法分别将miR-139-3p模拟物(mimics)及其阴性对照(miR-NC)、性别决定区相关高迁移率族盒蛋白4(Sox4)过表达载体(pc-Sox4)及其对照(pcDNA3.1)转染H9c2细胞, 细胞共分为6组:对照组、H2O2组、mimic组(转染mimics)、miR-NC组(转染miR-NC)、pcDNA3.1组(转染mimics和pcDNA3.1)和pc-Sox4组(转染mimics和pc-Sox4), 除对照组外的其他细胞均在转染后建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤模型。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测H9c2细胞活力;比色法检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量;原位缺口末端标记法(TUNEL)染色检测H9c2细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测Sox4表达;荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-139-3p表达水平;生物信息学网站预测miR-139-3p与Sox4的互补结合位点, 双荧光素酶报告基因实验验证两者之间的靶...     

特发性低促性腺激素型性腺功能减退患者KAL1基因突变分析

目的:分析男性特发性低促性腺激素型性腺功能减退(IHH)患者KAL1基因突变。方法:30例IHH患者运用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)结合PCR产物直接测序技术分析KAL1基因外显子突变。结果:在30例IHH患者中共发现3例KAL1基因突变,其中1例无义突变,为(c.1270C>T,p.R424X);2例移码突变,分别为(c.279_280delAG,p.G94fs)和(c.1886_1887delTT,p.L629fs)。结论:本文检测到3例KAL1基因突变,其中2例突变是新发现的突变,1例是文献报道过的突变,为IHH的分子遗传学研究积累了宝贵资料。     

先天性脊柱侧凸发状分裂相关增强子-7基因外显子突变的筛查

目的:探讨汉族人群中发状分裂相关增强子-7(hairy-and-enhancer-of-split-7,HES7)基因外显子(exon)突变与先天性脊柱侧凸(congenital scoliosis,CS)发病的关系。方法:2009年6月～2010年12月在我院行手术治疗且有完整影像学资料的汉族散发非综合征型CS患者60例(病例组),其中男23例,女37例,年龄12.9±4.4岁;对照组为80例正常汉族人,其中男32例,女48例,年龄13.7±3.2岁。从每例受检者外周血中提取基因组DNA,设计引物扩增HES7基因exon(共4个:exon 1～4)序列,目的产物纯化后DNA自动测序,应用DNAstar软件的MegAlign将两组测序结果进行对比,并与美国NCBI基因库所公布的HES7基因exon序列进行比对分析,比较两组exon突变情况。结果:病例组和对照组HES7基因exon 1和exon 4序列均与基因库HES7基因exon序列一致;exon 2第81位点在两组中均存在G/A多态性,但基因多态性分布频率无显著性差异(P=0.727);exon 3第37位点在两组中均存在T/C多态性,但基因多态性分布频率也无显著性差异(P=1.000)。结论:中国汉族散发非综合征型CS患者HES7基因exon无突变,在中国汉族人群中HES7基因exon突变与散发非综合征型CS的发病可能无关。     

四例脂蛋白肾病患者载脂蛋白E基因突变筛查

目的 通过对4例脂蛋白肾病患者及家系成员载脂蛋白E(apoE)基因的分析， 研究脂蛋白肾病的发病机制。 方法 调查患者家系情况，对其中2例患者的家系成员进行尿常规筛查及血肌酐、血脂和血清脂蛋白的检测。PCR法扩增4例患者apoE基因的外显子， DNA测序， 发现突变后，寻找限制性内切酶酶切位点。使用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法筛查正常对照及其家系成员。 结果 4例脂蛋白肾病患者中有2例携带杂合的apoE基因缺失突变 (142-144-0)，2例患者携带杂合的apoE点突变 (Arg25Cys)，2种突变均可见于尿液检查正常的亲属，并均表现为apoE升高。 结论 4例脂蛋白肾病的患者中发现两种apoE基因的突变，apoE Arg25Cys和apoE(142-144-0)。结合既往的研究结果，apoE(142-144-0)同时见于5例(本研究2例，前期研究3例)患者，为中国脂蛋白肾病患者常见的致病性基因突变。患者家系成员中的携带者可以不表现出肾脏病。     

原发性肝癌患者原发灶和转移灶中p16状态的比较

目的　探讨p16基因在原发性肝癌发生、转移过程中的动态变化。方法　收集 18例患者原发性肝癌原发灶及远处转移灶石蜡标本 3 6块 ,以PCR SSCP方法检测p16基因exon 2。结果　 18例中p16变异占 2 2 .2 % (4 /18) ,其中 2例仅在转移灶发现 ,另 2例为原发灶和转移灶均发生变异 ,ex on 2缺失占 11.1% (2 /18) ,突变占 11.1% (2 /18) ,但该 4例变异均发生在 7例原发性肝癌转移同时伴有复发的患者 (5 7.1% ,4/7) ,显著高于仅转移无复发患者 (0 /11) (P <0 .0 5 )。 4例p16变异病例的术后复发转移时间 (7个月 )显著早于 14例无变异者 (2 1个月 ) (P <0 .0 5 )。结论　在原发性肝癌的复发转移过程中 ,p16变异起重要作用 ;小部分p16变异也可始发于转移灶。     

儿童IgA肾病血清miR-152-5p及miR-210-5p的表达及其临床价值

目的探讨miR-152-5p及miR-210-5p在儿童IgA肾病(IgAN)中的表达及其临床价值。方法选取2018年1月至2022年6月由本院收治的109例IgAN患儿(IgAN组)、100例非IgA肾病的肾炎患儿(非IgAN组)和60例体检正常者(对照组)作为研究对象。其中IgAN患儿根据牛津分型评分(MEST)分为MEST≥3分组(41例)和MEST<3分组(68例), 并根据尿蛋白量分为尿蛋白≥1.0 g/24 h组(56例)和尿蛋白<1.0 g/24 h组(53例)。比较各组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及半乳糖缺乏型IgA1分子(Gd-IgA1)水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1诊断IgAN的价值。采用Pearson相关分析miR-152-5p、miR-210-5p表达水平与IgA/C3及Gd-IgA1的相关性。结果 IgAN组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1水平均明显高于非IgAN组和对照组(均P<0.00...     

基于高通量测序技术的骨肉瘤基因研究与个体化治疗

 目的 探索骨肉瘤突变的新基因,探讨通过检测化疗药物相关基因来指导骨肉瘤的个体化治疗。方法 采用第二代高通量测序技术对23例骨肉瘤患者的手术切除标本进行化疗相关药物靶基因检测,并对其中10例患者标本的339个基因进行突变检测。经系统分析后发现骨肉瘤相关的特异性突变以及患者对化疗药物的敏感程度。结果 2009年2月至2013年4月,西京医院术前病理报告确诊为骨肉瘤的23例患者,男16例,女7例;年龄6～58岁,平均18.5岁。每个骨肉瘤标本均存在基因突变。在所有的突变中,确定了85个未报道过的基因突变位点,其中间变性淋巴瘤激酶（anaplasticlymphoma kinase,ALK）基因在全部样本中均出现突变,共同突变位置发生在第19和第29个外显子（第19个外显子c.A3089C:p.His1030Pro,第29个外显子c.A4381G:p.Iie1461Val;c.A4472G:p.Lys1491Arg;c.C4587G:p.Asp1529Glu）;NOTCH基因与患者血清碱性磷酸酶水平相关。药敏结果显示23例骨肉瘤患者均对异环磷酰胺敏感,铂类敏感率为39.1%,阿霉素敏感率为21.7%。吉西他滨、多西紫杉醇类及培美曲塞敏感率分别为36.3%、47.8%和46.5%。当术前化疗使用的药物全部对患者敏感时,化疗效果均为有效。当使用的药物不全（患者对1种或2种药物敏感）时,只有6例患者得到有效化疗,15例无效,差异有统计学意义。结论 ALK基因与NOTCH基因可能均为致癌基因,在不同方面参与骨肉瘤的病理过程。骨肉瘤个体化治疗可能成为提高化疗效果并最终提高骨肉瘤生存率的关键。     

miR-124-3p在电刺激预处理减轻小胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤中的作用：与小胶质细胞极化的关系

目的评价miR-124-3p在电刺激预处理减轻小胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧(OGD/R)损伤中的作用及其与小胶质细胞极化的关系。方法将生长良好的BV2小胶质细胞采用随机数字表法分为4组(n=30):对照组(C组)、OGD/R组、电刺激预处理组(E组)和miR-124-3p抑制剂组(I组)。C组在正常条件下培养, OGD/R组氧糖剥夺2 h后复糖复氧24 h, 制备OGD/R损伤模型;E组在氧糖剥夺前给予100 mV/mm的直流电刺激4 h, 余同OGD/R组;I组在氧糖剥夺前48 h转染micrOFF? mmu-miR-124-3p抑制剂, 余同E组。采用CCK-8法检测细胞存活率, ELISA法检测上清液TNF-α、IL-1β及IL-10浓度;分别采用免疫荧光法和Western blot法检测M1型小胶质细胞表面标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型小胶质细胞表面标志物精氨酸酶1(Arg-1)的表达;采用q-PCR法检测iNOS和Arg-1的mRNA及miR-124-3p表达。结果与C组比较, 其余3组细胞存活率降低, 上清液TNF-α、IL-1β和IL-10浓度升高, 细胞i...     

小鼠颈部游离皮瓣移植模型的构建

目的构建一种小鼠颈部游离皮瓣移植模型, 并初步探讨同种异体皮瓣移植排斥规律。方法选择MHC不相符的近交系BALB/c小鼠(第四军医大学动物实验中心)作为供体, 以C57bl/6小鼠为受体, 将小鼠利用随机数字表法分为3组, 包括同基因移植组:C57bl/6→C57bl/6;急性排斥组:BALB/c→C57bl/6不用药;免疫抑制剂组:BALB/c→C57bl/6联合输注3 mg/(kg·d)雷帕霉素。供体腹股沟皮瓣以小鼠股动静脉为蒂, 获取皮瓣后, 将血管穿过套管, 并将内膜翻折出并固定;受体区域选择小鼠颈部, 在颈部去除皮肤, 舌下腺等结构后暴露颈动脉和颈外静脉, 利用血管套管技术, 将皮瓣股动脉与颈动脉相接, 将皮瓣股静脉与颈外静脉相接。观察皮瓣存活, 病理染色检查血管通畅情况, 生存资料采用Kaplan-Meier方法统计, 组之间的差异采用Log-Rank法来比较。结果供体皮瓣获取时间为(43±3) min, 总手术时间为(91±7) min, 皮瓣整体缺血时间(73±2) min。同基因移植组皮瓣均获得长期存活, 急性排斥组皮瓣在术后10 d左右均发生了排斥;免疫抑制组皮瓣中...