流式细胞仪检测粒细胞抗体在白细胞减少症中的应用

目的：为探讨白细胞减少症患者粒细胞相关抗体水平,分析其临床应用价值。方法：采用流式细胞术（FCM）测定了345例白细胞减少症患者及60名正常人粒细胞相关免疫球蛋白（Ig）。结果：发现,初治345例白细胞减少症患者中粒细胞相关抗体（IgG、IgM、IgA）在粒细胞表面阳性百分率均高于正常对照组（P〈0．01）,约82．02％的白细胞减少症患者粒细胞抗体阳性。结论：FCM用于白细胞减少症患者的粒细胞相关抗体的检测,具有快速灵敏、简便、用血量少和结果准确的特点,对临床治疗白细胞减少症提供依据。关键词白细胞减少症粒细胞流式细胞术粒细胞抗体（GAA）     

流式细胞仪用于荧光标记糖皮质激素受体的淋巴细胞研究

本文应用糖皮质激素受体(GR)的荧光素标记配体(DF)和流式细胞仪对正常人外周血淋巴细胞内的GR进行了研究。实验采用全血法和淋巴细胞分离法制备淋巴细胞,用相同的实验条件和信息处理进行比较,发现二种不同方法制备淋巴细胞对GR测定无明显影响。正常人外周血淋巴细胞阳性率为14.457±5.975。不同性别的GR淋巴细胞阳性率分别为,男性:18.128±6.3;女性11.058±2.984,有统计意义上的差别。     

应用四色荧光标记流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群的变化

目的 探讨四色荧光标记流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测鼻咽癌患者服用云芝丹参胶囊后外周血淋巴细胞亚群:辅助性T淋巴细胞(CD4 ),抑制性和细胞毒T淋巴细胞(CD8 ),B淋巴细胞(CD19 ),NK(CD16 CD56 ) 细胞的绝对数和百分率等的变化.方法 收集鼻咽癌患者27例,设立中药组和安慰剂对照组,采用四色荧光标记流式细胞术对服用云芝丹参胶囊后的鼻咽癌患者外周抗凝全血的淋巴细胞亚群CD4 细胞、CD8 细胞、B细胞、NK细胞进行绝对计数和相对计数,并对两组结果进行比较分析.结果 四色荧光标记流式细胞术结果显示:接受放射治疗的鼻咽癌患者在服用云芝丹参胶囊16周后,外周血T淋巴细胞的绝对数和百分率,以及Ts、Th细胞绝对数的下降均明显低于安慰剂组(P＜0.05);中药组和安慰剂组NK细胞百分率的变化均显著增高(P＜0.05); 但两组NK细胞绝对值的变化不存在明显差异(P＞0.05).结论 云芝丹参能明显减轻放射治疗对鼻咽癌患者的淋巴毒性.     

流式细胞术检测抗生素最低抑菌浓度

目的　建立一种流式细胞术 (FCM )快速检测抗生素最低抑菌浓度 (MIC)的方法 ,与常规药敏试验结果进行比较 ,探讨其应用价值。方法　取 2 0株肠杆菌科细菌 ,用碘化丙啶 (PI)染色 ,分别检测阴性对照管和MIC浓度抗生素作用管的平均荧光强度 (MFI) ,计算两者比值 ,据此 ,设定流式细胞药敏试验 (FCST)检测MIC的判断值 ,根据设定的判断值对 2 8株临床分离细菌同时进行常规药敏和FCST双盲测定。结果　 2 0株肠杆菌科细菌测得的MFI比值 x为 2 .0 7,CV为 0 .3 1;将MFI大于阴性对照细菌 2倍 (增加 10 0 % )的最低药物浓度定义为该菌的MIC ,2 8株临床菌株FCST所测得的MIC与常规药敏试验相比r=0 .92 ,(P <0 .0 0 1) ,回归方程为 :Y =1.4X -0 .48。结论　FCST与常规药敏试验结果有显著相关性 ,并且具有快速、稳定、准确、便于自动化等优点 ,有着较大的临床应用前景。     

CFSE标记神经祖细胞方法的建立与验证

目的 建立并验证羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)荧光探针标记神经祖细胞(NPCs)的方法.方法 在胚胎期小鼠侧脑室注射CFSE以标记室周区(VZ)细胞,在注射后的1 h和3 h分别收集组织,通过免疫荧光方法检测其特异性.在注射后的1 h分离出背侧新皮质,通过流式细胞荧光分选术(FACS)分选强阳性细胞,并通过...     

直肠癌细胞的流式细胞仪分析及临床意义

目的:为了探讨直肠癌细胞增殖情况与其预后及淋巴结转移的关系。方法:本文通过对30例Ⅲ期直肠癌(DUKS C期)石蜡包埋组织块及10例正常组织对照石蜡块,进行细胞悬液制备,并采用B-D公司生产的FACS Calibur型流式细胞仪,进行细胞获取和分析。结果:①正常10例直肠组织细胞G₀-G₁期细胞峰值道数为49.82±1.80。②DI(DNA指数)、SPF(S期细胞百分率)、PI(细胞增殖指数)与淋巴结转移情况无关(P>0.05)。③SPF与直肠癌5年生存率关系密切(P<0.01)。结论:S期细胞百分率越高预后越差,而DI、PI与预后无关。     

流式细胞术检测细胞内细胞因子的研究进展

细胞因子作为细胞间信号传导的分子, 主要介导和调节免疫应答及炎症反应, 刺激造血细胞生成和组织损伤的修复等。正常情况下, 细胞因子的表达和分泌受到机体严格地调控。在病理状态下, 细胞因子会出现异常表达。因此, 检测细胞因子对于某些疾病的诊断、治疗具有重要价值。当前,仅对细胞进行定量及活性检测已不能满足需要, 在单细胞水平研究细胞因子的表达更加重要。随着流式细胞术 (flowcytometry, FCM)在临床、科研中的广泛应用, 利用FCM与细胞内细胞因子 (intracellularcytokine, ICK)染色技术相结合,可提供一种有效地在单细胞水…     

流式细胞术检测细胞凋亡比较研究

从三方面探讨检测细胞凋亡流式细胞术的方法.选用大鼠皮质神经元细胞,同时使用碘化丙锭(PI)An-nexin V/PI.JC-1法检测细胞凋亡率.结果显示三种方法的凋亡率分别是:2.60%,6.52%和18.56%,两两之间有显著性差异(P＜0.01).JC-1法最敏感,AV/PI次之,PI单染法不适合检测早期细胞凋亡.     

荧光素与牛血清白蛋白相互作用物的荧光光谱及测试应用

研究了荧光素与牛血清白蛋白（BSA）相互作用的荧光光谱及其最佳测试条件和影响因素。在pH2．2，荧光素-牛血清白蛋白复合物的荧光强度最大，其激发波长（Ex）为467nm，发射波长（Em）为515nm。在BSA1．8～500mg／L范围内，该复合物荧光强度与BSA浓度成线性关系，F：25．776C＋2．8082，r=0．9999。该法简单、快速、灵敏、稳定、成本低。     

石蜡切片厚度对流式细胞仪检测细胞DNA的影响

在肿瘤研究中，应用流式细胞仪技术分析肿瘤细胞的DNA含量及周期细胞群体数目，已成为肿瘤临床诊断、疗效评价及预后推测的重要参考依据。DNA双螺旋结构碱基对与某些核酸荧光染料有良好的亲和力，在激发光的激发下，产生特定的荧光，运用流式细胞仪检测并分析这些荧光强度，从而了解细胞群体中各周期的分布状况，即G。／G1期、S期、G2／M细胞所占的百分比例。     

流式细胞术和微量细胞毒法检测HLA-B27的比较

人白细胞相关抗原 (ＨＬＡ Ｂ2 7)分子 (简称Ｂ2 7)的生理功能是携带提呈的细菌多肽 ,并激活ＣＤ8+ Ｔ细胞。Ｂ2 7因与强直性脊柱炎 (ＡＳ)等脊柱关节病 (ＳＰＡ)的关联 ,是所有疾病与ＨＬＡ相关中最为密切的 ,多年来一直是风湿病学界研究的热点之一[1] 。分析Ｂ2 7的表达对ＡＳ的发病机制、诊断、预防及预后判断都有重要意义[2 ,3 ] 。既往采用微量细胞毒法检测ＨＬＡ Ｂ2 7表型 ,本文采用流式细胞术进行检测 ,并比较了两种方法的优缺点。1　材料和方法1.1　材料　微量细胞毒法用倒置显微镜产自重庆光学仪器厂。标准羊抗人血清、Ｂ2 7抗原…     

肝癌与正常肝组织激光荧光光谱的比较研究

应用激光荧光光谱技术对人体肝癌组织与正常肝组织切片进行了研究；并用峰值波长、峰半高宽、峰不对称因子几个物理量对研究结果作了分析和比较，揭示了病变与正常肝组织之间光谱的差异，为激光荧光光谱技术应用于肝癌诊断提供有用数据。     

流式细胞术定量检测细胞凋亡3种方法的比较研究

目的：探讨流式细胞术定量检测细胞凋亡３种方法的价值。方法：同时使用ＰＩ染色，ＴＵＮＥＬ及Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩ３壹量检测地塞米松处理小鼠的胸腺细胞凋亡发生率。结果：ＰＩ染色，Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩ，ＴＵＮＥＬ３种方法凋亡检出率分别为２７．１９％，３２．２８％，５０．１７％，两者之间均有显著差异。     

流式细胞仪检测血小板线粒体膜电位的方法

目的运用流式细胞仪对血小板线粒体膜电位进行检测,为衰老相关性疾病和药物对线粒体机能作用的研究提供新的研究方法。方法利用抗凝血分离纯化得到的血小板,用荧光探针JC-1对血小板线粒体进行标记,在流式细胞仪上检测血小板线粒体内JC-1荧光强度的变化。结果正常的血小板线粒体保持着较高的膜电位,JC-1在线粒体内形成聚合物,以红色荧光为主。膜电位去极化的异常血小板线粒体内,JC-1分解成单体,以发绿色荧光为主。结论运用流式细胞仪对JC-1标记的血小板线粒体膜电位进行检测是一种简便可行的检测线粒体机能的有效方法。     

三色法流式细胞术检测胞内细胞因子的建立

运用荧光标记的抗细胞表面抗原单抗及抗细胞因子单抗, 结合固定、破膜处理技术, 建立了三荧光染色法流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法, 探讨了不同刺激剂及细胞培养时间的选择, 并对５ 例正常人产生ＩＦＮ γ、ＩＬ ４ 的ＣＤ４ 及ＣＤ８ 细胞进行测定。结果表明： 产生ＩＦＮ γ的ＣＤ４ 及ＣＤ８ 细胞明显多于产生ＩＬ ４ 的细胞, 并且产生ＩＦＮ γ的ＣＤ８ 细胞百分数比较ＣＤ４ 细胞相对增多; 同时产生ＩＦＮ γ／ＩＬ ４ 的ＣＤ４ 、ＣＤ８ 细胞较少。此方法可从单个细胞水平直接用于Ｔ细胞亚群及其细胞因子的检测。     

免疫学技术与方法流式细胞术定量检测细胞 凋亡3种方法的比较研究

目的探讨流式细胞术定量检测细胞凋亡3种方法的价值。方法同时使用PI染色、TUNEL及Annexin V/PI 3种方法定量检测地塞米松处理小鼠的胸腺细胞凋亡发生率。结果PI染色、Annexin V/PI、TUNEL 3种方法凋亡检出率分别为27.19%、32.28%、50.17%，两两之间均有显著差异(P＜0.01)。但仅Annexin V/PI法可将正常细胞、凋亡细胞、死亡细胞区分开来。结论Annexin V/PT法是目前最为理想的凋亡定量检测方法。     

流式细胞术检测CFSE标记人T细胞亚群增殖反应

目的探讨应用流式细胞术和活细胞荧光染料CFSE检测T淋巴细胞各亚群增殖反应的方法学。方法人外周血单个核细胞（PBMC）经CFSE染色后,分别用植物凝血素（PHA）、CD3 mAb和结核杆菌抗原（Mtb-Ag）刺激,加IL-2扩增后,用流式细胞术检测活化增殖后T细胞各亚群的比例,并用ModFit软件分析各亚群的增殖动力模型。结果PHA和CD3 mAb主要活化总T细胞,CD8^＋T细胞的增殖优于CD4^＋T细胞,但CD4^＋T细胞前4代细胞明显多于CD8^＋T细胞。Mtb-Ag主要刺激γδT细胞增殖。结论以CFSE标记淋巴细胞,结合流式细胞术可有效检测出不同T细胞亚群对不同刺激剂的增殖反应以及增殖动力学变化。     

老化相关的自发荧光可作为细胞衰老的标志物

目的 观察衰老的脑组织内自发荧光的波长特点,探讨如何合理地利用和消减老化相关的自发荧光。方法 选取3月龄和24月龄自然老化的C57BL/6J雌、雄性小鼠。以衰老相关β-半乳糖苷酶染色（SA-β-Gal）和脂褐素的沉积评估老年鼠脑组织衰老的程度。以激光共焦显微镜分析老化相关自发荧光的波长特点,免疫组织化学和免疫荧光的方法标记星形胶质细胞。结果 老年鼠海马和下丘脑第三脑室室周旁出现强SA-β-Gal染色、脂褐素的聚集及自发荧光。老化相关的自发荧光发射波长介于500～565nm,下丘脑第三脑室室周旁的星形胶质细胞不仅高表达SA-β-Gal,而且出现很强的自发荧光。采用针对脂褐素的自发荧光消除剂处理脑组织后,老化相关的自发荧光几乎完全消失。 结论 老化相关的自发荧光可以作为特定表型细胞衰老的标志物;恰当的处理老化相关的自发荧光,可极大的提高衰老脑组织免疫荧光检测的特异性。     

流式细胞术检测CD35表型对恶性肿瘤诊断的意义

目的:建立流式细胞术(FCM)检测恶性肿瘤患者血细胞上CD35分子表达的实验方法.方法:选择36例恶性肿瘤患者及25例健康人血标本,用流式细胞术(FCM)检测其红细胞、中性粒细胞及淋巴细胞上CD35的表达.结果:恶性肿瘤患者红细胞、中性粒细胞、B琳巴细胞及CD4+T淋巴细胞上CD35的表达比健康人明显降低(P<0.01);而CD8+T淋巴细胞上CD35的表达比健康人明显升高(P<0.01).结论:建立了FCM检侧恶性肿瘤患者血细胞上CD35分子表达的实验方法.为恶性肿瘤的诊断、疗效观察及判断预后提供科学而先进的检测手段.     

流式细胞术检测体内细胞毒效应方法的研究

目的 建立一种用流式细胞仪检测体内细胞毒效应的方法.方法 用不同浓度的羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞和非靶细胞,以1:1的比例混合靶细胞和非靶细胞,尾静脉回输小鼠,16h后取小鼠脾脏淋巴细胞,流式细胞仪检测CFSE标记靶细胞和非靶细胞的比例,测定体内被杀伤靶细胞的百分率.结果 荧光染料CFSE能有效标记靶细胞,16h后流式细胞仪能很好地检测到体内被杀伤靶细胞的百分率.结论 CFSE荧光染料标记靶细胞并结合流式细胞仪分析的方法能有效地检测到体内细胞毒效应,该技术有望在肿瘤免疫和移植排斥的体内监测中得到广泛应用.