二维液相色谱法同时测定人血浆中伊马替尼及去甲伊马替尼药物浓度及临床应用

目的 基于全自动二维液相色谱技术,建立一种能同时测定人血浆中伊马替尼及活性代谢物N-去甲伊马替尼简单而灵敏的方法,并应用于临床检测。方法 标本经简单去蛋白前处理后直接进样分析,待测物在一维色谱柱Aston SX1(3.5 mm×25 mm,5 μm)上进行初步萃取分离,通过中间柱Aston SCB(4.6 mm×10 mm,3.5 μm)转移至二维色谱柱Aston SCB(4.6 mm×125 mm,5 μm)进行二次分离分析,一维流动相为CAA-1D移动相,流速0.8 mL·min^–1;二维流动相为伊马替尼-2D移动相,流速1.2 mL·min^–1,柱温40 ℃,检测波长264/235 nm。结果 伊马替尼与血液中其他杂质分离良好,伊马替尼及N-去甲伊马替尼浓度分别在13.44~1 400 ng·mL^–1及13.17~1 372 ng·mL^–1内与峰面积呈良好的线性关系(r²=0.999 9,r²=0.999 9),伊马替尼3个浓度水平(33.6,896,1 120 ng·mL^–1)及N-去甲伊马替尼3个浓度水平(32.93,878.08,1 097.60 ng·mL^–1)回收率分别为>96%及98%,浓度日内、日间RSD均<5.0%。结论 该方法准确度高,重现性好,自动化程度高,相比传统HPLC更具优越性,适用于临床伊马替尼血药浓度检测及其药动学研究。     

HPLC法同时检测肺癌患者血浆中奥希替尼与吉非替尼的药物浓度

摘要：目的:建立HPLC法同时检测肺癌患者血浆中吉非替尼和奥希替尼的血药浓度。方法:色谱柱:Waters X-bridge C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈:5 mmol·L-1磷酸二氢钾（pH 4.0,含0.3%三乙胺）=32∶68（V∶V）;检测波长:251nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃;内标为埃克替尼。血浆样品经乙酸乙酯液液萃取后进样测定。结果:血浆中吉非替尼和奥希替尼分别在0.062 75～2.51μg·ml-1和0.063 25～2.53μg·ml-1内呈良好的线性关系（r>0.999）,方法的回收率为95%～110%,RSD均小于11%,方法的提取回收率均高于85%,所有稳定性考察均符合要求。应用该方法对10例肿瘤科使用奥希替尼和吉非替尼治疗的肺癌患者进行血药浓度监测,结果表明奥希替尼平均谷浓度为（0.206±0.098）μg·ml-1,吉非替尼平均谷浓度为（0.571±0.206）μg·ml-1。结论:该方法简便准确,专属性高,可用于临床上吉非替尼和奥希替尼的治疗药物监测,为促进其临床个体化用药提供技术支撑。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的　建立测定人血浆中万古霉素浓度的高效液相色谱方法。方法　采用HypersilC18柱( 4 0mm× 2 5 0mm ,5 μm)流动相为甲醇∶水 ( 2 0∶80 )含 0 1%三乙胺和 1%四氢呋喃 ,检测波长 2 30nm。结果　本方法线性范围 0 4～ 10 0 μg/ml,最低检测限 80ng/ml ,血浆平均回收率 10 0 2 % ,日内、日间RSD均小于10 %。结论　本方法简单快捷、灵敏度高、色谱效果好、结果准确 ,可用于万古霉素血浓度监测及体内药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血清中甲磺酸阿帕替尼谷浓度

目的：建立灵敏、准确的高效液相色谱法用于检测人血清中甲磺酸阿帕替尼谷浓度。方法：选用凡德他尼作为内标,以乙酸乙酯作为提取剂,采用Shim-pack GIST C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动A相：0.2%三氟乙酸水溶液（1：499,V/V）,流动B相：乙腈,采用梯度洗脱法,总运行时间20 min;流速1.0 mL·min ^-1;柱温30℃;检测波长260 nm。结果：甲磺酸阿帕替尼在20~1 000 ng·mL^-1范围内血清中浓度与响应值之间呈现良好线性关系,线性方程为Y=0.017 9X+0.079 7（r=0.999 9）,最低定量限为20 ng·mL^-1,提取回收率为79.9%~85.2%,4个不同质控浓度水平（最低定量限、低、中、高浓度）的日内和日间准确度为88.6%~105.4%,日内和日间精密度为2.0%~9.2%。血样短期稳定性、长期稳定性、3次冻融循环及血样处理后室温放置12 h稳定性良好。结论：该检测方法灵敏、准确,可用于甲磺酸阿帕替尼治疗药物监测研究。     

反相高效液相色谱法测定血清中阿帕替尼的浓度

目的建立简单高效的阿帕替尼反相高效液相色谱测定法。方法血清中阿帕替尼用3mL乙醚-石油醚(10∶1)单步提取;色谱柱:Symmetry RP18(5μm,4.6mm×250mm,waters),流动相:乙腈-0.2%TFA水溶液(36∶64)。检测波长:阿帕替尼260nm,内标卡马西平286nm。结果阿帕替尼在0.2~8μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9991)。结论此方法简便快速,可用于阿帕替尼血药浓度监测。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中头孢地尼的浓度

目的:建立人血浆中头孢地尼浓度的反相高效液相色谱测定方法.方法:以甲硝唑为内标,血浆样品经三氯乙酸(TCA)沉淀蛋白处理,色谱柱为Nucleodur C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),保护柱为自填C18柱,流动相为0.025 mol·L-1磷酸二氢铵溶液(pH 3.0)-乙腈(90.5:9.5),检测波长为286 nm,流速为1.0 ml·min-1.结果:头孢地尼的线性范围为0.05～2.00 μg·ml-1(r=0.999 8).日内精密度RSD为3.7%～5.9%,日间精密度RSD为3.5%～5.7%.绝对回收率为65.0%～72.4%.结论:该法灵敏、准确、简便,检测限低(LOQ),重现性好,可用于血浆头孢地尼浓度的测定.     

反相高效液相色谱法测定人血浆中氟尿嘧啶浓度

目的研究测定人血浆中的氟尿嘧啶浓度的色谱方法.方法色谱柱为C18柱(大连依力特,250 nm×4.6 mm×5μm),柱温25℃,流动相为KH2P04-H3PO4缓冲液(0.01M,pH2.95),波长269 nm.结果回归方程为Y=2.2368X+2.7756(r=0.9998),其线性范围为:5～2500μg/L,最低检测浓度为2 μg/L(S/N=3).结论本方法简单、快速、准确,适用于临床氟尿嘧啶的浓度测定及治疗药物监测.     

反相高效液相色谱法测定人血浆中氟尿嘧啶浓度

目的 研究测定人血浆中的氟尿嘧啶浓度的色谱方法。方法 色谱柱为C_(18)柱(大连依力特,250nm×4.6mm×5μm),柱温25℃,流动相为KH_2PO_4-H_3PO_4缓冲液(0.01M,pH2.95),波长269nm。结果 回归方程为Y=2.2368X+2.7756(r=0.9998),其线性范围为:5～2500μg/L,最低检测浓度为2μg/L(S/N=3)。结论 本方法简单、快速、准确,适用于临床氟尿嘧啶的浓度测定及治疗药物监测。     

高效液相色谱法测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的:建立HPLC法测定人血浆中替米沙坦浓度。方法:采用Dimak Diamonsil钻石C18色谱柱(200 mm×4．6 mm,5μm);流动相,水-三乙胺-乙腈(73:0．12:27);荧光检测激发波长为305 nm,发射波长为380 nm。结果:替米沙坦线性范围为1 -200 ng·ml-1,最低检测限为0．25 ng·ml-1。结论:该法准确、灵敏、简便。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的 建立人血浆中万古霉素浓度的高效液相色谱测定方法。方法 采用高效液相色谱法,以去甲万古霉素为内标进行检测,分析柱采用Kinetex C₁₈(100 mm×4.6 mm,2.6μm),并以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾(pH=3.2)为流动相进行梯度洗脱,流速为1 ml/min,柱温为40℃,检测波长为220 nm,血浆样品以硫酸锌沉淀后进样,进样量为10μl。结果 血药浓度在2.22～111.11μg/ml内线性关系良好(R²=0.9995,n=6),日内相对标准偏差<4.86%,日间相对标准偏差<3.72%,回收率>94.6%。结论 高效液相色谱法灵敏、准确,可在临床上运用于血浆万古霉素药物浓度的检测,指导临床进行个体化给药,提高疗效,降低不良反应的发生率。     

高效液相色谱法测定人全血中瑞芬太尼浓度

目的:建立测定人血中瑞芬太尼的高效液相色谱-紫外检测方法,为临床监测血药浓度提供方法学.方法:采用液-液萃取法,用1-氯丁烷提取全血中的瑞芬太尼,选用GI97559(瑞芬太尼乙基类似物)为内标定量.色谱柱为Zorbax SB-CN(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(1∶2∶0.43),柱温30℃,流速1.5mL*min-1,紫外210 nm检测,按内标法定量.结果:标准曲线在3～200 μg*L-1范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(r=0.9966).最低检测浓度为2μg*L-1.提取回收率77.34%～87.72%.方法回收率97.13%～100.99%,日内RSD小于5.3%,日间RSD小于6.3%.结论:本方法快速、准确、灵敏,可用于瑞芬太尼的临床药动学研究.     

高效液相色谱双波长法测定人血浆中舒尼替尼的浓度

目的 建立人血浆中舒尼替尼的高效液相色谱测定方法,用于临床进行药物浓度监测.方法 血浆样品经乙酸乙酯乙酯萃取后,采用高效液相色谱法(HPLC)进行分析.XDB-C18柱分离,流动相采用甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠溶液,流速为1 ml/min;梯度洗脱在0～6 min甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠溶液为70:30,6.1～15 min甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠溶液为80∶20;利用光电二极管阵列检测器对流份进行双波长同时检测(舒尼替尼391 nm,内标300 nm),柱温30℃.结果 内源性物质不干扰测定,舒尼替尼的线性范围为0.5～12mg/L(r =0.996),最低定量限为0.5mg/L,基质效应为93.36％～104.26％(n=5),加样回收率为73.12％ ～86.50％ (n =5).结论 建立的HPLC方法简便、灵敏、准确、所需样本量小,可以用于临床血药浓度测定.     

二维液相色谱法测定脑脊液中替加环素浓度及其临床应用

目的 建立二维液相色谱法检测人脑脊液中替加环素浓度,用于颅内感染患者的药物浓度监测。方法 采用外标法定量,第一维色谱柱为Aston SNX5苯基色谱柱（50 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为磷酸铵（氨水调pH7.5）-甲醇（45:55,V/V）,流速1.0 ml/min。第二维色谱柱为Aston SC5 C₁₈色谱柱（275 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为磷酸铵（氨水调pH7.4）-磷酸铵（氨水调pH3.0）-乙腈（30:50:20,V/V/V）,流速1.2 ml/min。检测波长340 nm,色谱柱温40 ℃,进样量：200 μl。结果 脑脊液中替加环素64.5～1 290.0 ng/ml内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 8）;日内、日间精密度RSD<5%,准确度为98.80%～106.51%。结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏,适用于临床人脑脊液替加环素的浓度监测,可为颅内感染患者的个体化给药提供科学依据。     

反相高效液相色谱法测定血浆中阿米替林及其代谢物去甲替林的总浓度和游离浓度

目的　建立灵敏、简便、适合临床监测阿米替林及其代谢物去甲替林总浓度与游离浓度的反相高效液相色谱法(RP HPLC)。方法　血样在碱性条件下 ,经一步液 液提取法后 ,在C 18柱上进行分离。流动相为乙腈∶水 =30∶70(V/V) ,其中含三乙胺 0 5 %和磷酸 0 3%。血浆样品药物总浓度测定为RP HPLC ,游离药物测定为超滤离心 /RP HPLC。结果　阿米替林和去甲替林的标准曲线在 4～ 2 0 0μg·L-1(总浓度 )和 4～ 6 4μg·L-1(游离浓度 )范围内呈线性。两药的平均回收率分别为 10 2 0 %± 3 77%与 99 3 %± 7 13 % ;日内RSD分别为 2 40 %～ 4 39% ,3 0 2 %～4 2 8% ;日间RSD分别为 4 92 %～ 6 15 % ,6 35 %～7 48%。测定了 7例健康志愿者单剂量口服盐酸阿米替林片 5 0mg后 6h的血药浓度。血浆阿米替林总浓度为 18 0～ 2 7 2 μg·L-1,游离浓度为 1 4～ 2 5 μg·L-1。血浆去甲替林总浓度为 (2 0± 0 4) μg·L-1(1 5～ 2 5 μg·L-1)。阿米替林的血浆蛋白结合率在 89 8%～ 92 6 %之间。结论　本方法简便、快速 ,灵敏度与选择性高 ;成本低 ,可用于临床上阿米替林治疗中的血药总浓度和游离浓度监测     

高效液相色谱法测定人血浆中尼扎替丁的浓度

目的:建立用高效液相色谱法(HPLC法 )测定人血浆样品中尼扎替丁浓度的定量分析方法.方法:色谱柱为 Nucleosil100-5硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5 μ m); 流动相为乙腈-甲醇-水-氨水(1 000 ∶200 ∶25 ∶1.25),流速为1.0 mL/min; 检测波长为325 nm.结果:血浆中尼扎替丁在15.625～2 000 μ g/mL范围内浓度与峰面积具良好线性关系(r=0.999 8),回收率在 98.99% ～104.06% 之间,日内精密度 RSD在 0.47% ～ 0.51% 之间(n=5),日间精密度 RSD在 0.27% ～ 0.52% 之间(n=5).血浆中尼扎替丁的最低检测限是15.625 μ g/mL.结论:HPLC法简便、快捷、灵敏、准确,适用于临床药代动力学及药效学的研究.     

高效液相色谱法测定人血浆卡托普利浓度

目的:建立柱前衍生化高效液相色谱法测定人血浆卡托普利浓度.方法:分析柱为Waters Nova-pak C18.流动相为乙腈:双蒸水:磷酸(103:197:0.3).UV检测波长为260nm.用对溴苯甲酰溴化物(p-BPB)与血浆的卡托普利在常温下衍生化反应30min.经衍生化反应的血浆酸化后用乙酸乙酯提取,分离有机相并碱化之,弃去上层,再进行酸化提取后测定.内标物为苯甲酰基苯甲酸.结果:测定卡托普利的线性范围为10～500mg·L-1,最低检测浓度为5mg·L-1.日内精密度<8.27%,日间精密度<7.70%.方法回收率均>90%.结论:本方法精密、准确,适用于卡托普利的药代动力学研究,也可用于测定尿中卡托普利浓度.     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的:建立万古霉素浓度的快速高效液相色谱法测定方法。方法:以替硝唑为内标,血浆样品通过硫酸锌(0.005g)沉淀,采用ODS C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;以甲醇-磷酸二氢钾缓冲液(20∶80,v/v)为流动相;流速为1.2mL.mim-1;检测波长为281nm;柱温为25℃;进样量为20μL。结果:万古霉素最低检测浓度为80μg.L-1,血浆样品浓度在5.0~80.0mg.L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.999 3,(n=5);相对回收率在96.86~102.2%;日内RSD为3.8%、2.1%、0.81%,日间RSD为3.4%、2.7%、1.6%。结论:本方法简便、快速、可靠。     

高效液相色谱法测定人血浆中喷昔洛韦浓度

目的:建立测定人血浆中泛昔洛韦人体内活性代谢物喷昔洛韦的高效液相色谱法。方法:血浆样品用10%三氯醋酸沉淀蛋白。色谱柱为Zorbax SB-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.02mol.L-1磷酸二氢钾溶液(pH7.0)-甲醇-乙腈(90∶10∶0.1),流速为1.0mL.min-1,紫外检测波长为254nm。结果:血浆中内源性物质对样品测定无干扰。本方法线性范围为0.05~5mg.L-1(r=0.999 4),最低定量质量浓度为0.05mg.L-1,方法回收率为100.1%~101.5%,日内、日间RSD均小于7%。结论:本法简便、灵敏、准确,适用于泛昔洛韦药动学的研究。