HPLC-MS／ESI同时测定人血浆中文拉法新及其3种代谢产物

目的:建立一种快速灵敏的反相高效液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中文拉法新(VEN)和其3种代谢产物:氧云甲基文拉法新(ODV)、氮去甲基文托法新(NDV)和氮、氰双去甲基文拉法新(DDV)的浓度。方法:以艾司唑仑为内标,样本碱化后用乙醚捉取2次,合并有机相,40℃氮气吹干,100μL流动相定容;用 BDS HYPERSIL C_(18)反相色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)进行分离,以乙腈-缓冲溶液(30 mmol·L~(-1)醋酸铵 2.6mmol·L~(-1)甲酸 0.13 mmol·L~(-1)三氟乙酸)(40:60,v/v)为流动相,采用梯度洗脱程序,柱温为50℃,流速为1.0 mL·min~(-1)。采用质谱电喷雾电离源(ESI)将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子和/或主要碎片离子峰。结果:VEN、ODV、NDV、DDV 以及内标艾司唑仑在6min 内完全分离;各物质在2～900 ng·mL~(-1)时线性关系良好,相关系数均大于0.9991;萃取回收率均大于77%;方法回收率均大于91%;最低检测浓度:VEN 0.4 ng·mL~(-1)、ODV0.2 ng·mL~(-1)、NDV 0.3 ng·mL~(-1)、DDV 0.2 ng·mL~(-1);日内日间RSD 均小于11%。结论:本方法简单快速,灵敏准确,可用于药物动力学、药物代谢机制以及血药浓度的临床监护、中毒分析的研究。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中去甲文拉法辛的质量浓度

目的建立液质联用法测定Beagle犬血浆中去甲文拉法辛的质量浓度,并应用该方法研究琥珀酸去甲文拉法辛缓释片在Beagle犬体内的药代动力学行为。方法采用液液萃取法处理血浆样品,色谱柱选择Venusil ASB C_(18)柱,以甲醇-浓度5 mmol·L~(-1)醋酸铵缓冲溶液(体积比35∶65)为流动相,采用多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式进行检测。结果去甲文拉法辛的质量浓度在0.50~100μg·L~(-1)内与峰面积线性关系良好,相关系数r为0.999 0,日内和日间精密度RSD≤6.2%,去甲文拉法辛的提取回收率在79.6%~83.3%内,基质效应在96.5%~98.8%内。结论本方法适用于琥珀酸去甲文拉法辛缓释片在Beagle犬体内药代动力学行为的研究。     

CYP2D6的多态性与文拉法辛的临床效应

背景:文拉法辛(V)是一种5-羟色胺和去甲肾上腺素重摄取抑制剂,用于抑郁症的一线治疗。它主要是由具有高度多态性的细胞色素P450酶CYP2D6代谢,产生有药理学活性的代谢物O-去甲基文拉法辛(ODV)。还有一小部分是由CYP3A4代谢,生成N-去甲基文拉法辛(NDV)。目的:本研究的目的是评价文拉法辛的ODV表型是否对药物动力学和临床结果有影响。方法:100例行文拉法辛治疗的患者,测定血清中V、ODV和NDV的浓度,并计算ODV/V浓度的比值,以测定O-去甲基化作用。对于ODV/V比率异常高或异常低的个体进行基因分型。用临床综合印象量表(ClinicalGl…     

HPLC—MS／ESI法测定人血浆中文拉法新及其代谢产物氧去甲基文拉法新对映体血药浓度

目的:建立反相高效液相色谱-质谱法同时测定人血浆巾文拉法新(VEN)及其主要代谢产物氧去甲基文拉法新(ODV)对映体的浓度。方法:使用万古霉素手性柱(CHRIOBIOTIC V~(TM))(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-醋酸铵缓冲液(30 mmol·L~(-1))(15:85,pH 6.0)为流动相对两化合物进行手性拆分,流速设为1.0 mL·min~(-1),柱后分流比为3:1。采用质谱电喷雾电离正源(ESI~ )将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子峰。结果:在所建立的色谱条件下,VEN 与 ODV得到很好的手性分离。S-( )与 R-(-)-VEN 在5.0～400 ng·mL~(-1)S-( )与 R-(-)-ODV 在4.0～300 ng·mL~(-1)范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9991;萃取回收率均大于76%;方法回收率均大于92%;最低检测浓度:S-( )与R-(-)-VEN 为1.0 ng·mL~(-1),S-( )与 R-(-)-ODV 1.5ng·mL~(-1);日内及日间 RSD 均小于9%。结论:本方法简单、快速、灵敏、准确,可用于 VEN 人体内立体选择性代谢的研究。     

人血浆中文拉法辛浓度的HPLC测定及其药物动力学

建立了HPLC-荧光法测定文拉法辛的血药浓度.采用液液萃取处理血浆样品,色谱柱为C8柱,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(30:70,pH 5.5),激发和发射波长分别为276和598nm,流速1.5ml/min.文拉法辛在5～2000ng/ml的浓度范围内线性关系良好.方法提取回收率为96.9%～104.3%,日内和日间RSD均小于8%.10名健康志愿者空腹单剂量口服150mg盐酸文拉法辛缓释胶囊,药物动力学参数Cmax、Tmax、AUC0→∞、t1/2分别为(168±12.3)ng/ml、(6.1±1.8)h、(4510±1462)ng·h·ml-1和(5.7±0.7)h.     

RP-HPLC法同时测定Beagle犬血浆中曲马多、文拉法辛和罗通定浓度

目的:建立同时测定 Beagle 犬血浆中曲马多、文拉法辛和罗通定浓度的反相高效液相色谱法。方法:Beagle 犬血浆标本以维拉帕米为内标,经碱化和石油醚-乙醚(7:3)提取后,以0.025 mol·L~(-1)磷酸二氢钠-甲醇(70:30)为流动相,流速1min·mL~(-1),经碳十八烷基键合硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,采用荧光法于λ_(ex)=295 nm,λ_(em)=302 nm 检测。结果:曲马多标准曲线范围3.125～3200μg·L~(-1),Y=0.0051X 0.0473(r=0.9996),最低定量限为3.125μg·L~(-1),高、中、低3种浓度的日内精密度均<10%,日间精密度均<10%,方法回收率79.3%～111.2%;文拉法辛标准曲线范围6.25～1600μg·L~(-1),Y=0.0036X-0.0070(r=0.9998),最低定量限为6.25μg·L~(-1),高、中、低3种浓度的日内精密度均<7%,日间精密度均<6%,方法回收率92.5%～108.8%;罗通定标准曲线范围4.6875～2400μg·L~(-1),Y=0.0064X-0.0004(r=0.9999),最低定量限为4.6875μg·L~(-1),高、中、低3种浓度的日内精密度均<9%,日间精密度均<5%,方法回收率89.3%～112.1%。结论:本法简便、快速、准确,用于 Beagle 犬同时服用曲马多、文拉法辛和罗通定的药动学研究,取得满意结果。     

液相色谱串联质谱法测定人血浆中文拉法辛及其代谢物的浓度

目的建立测定血浆中文拉法辛及其代谢物O-去甲基文拉法辛的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法血浆样品中加入内标(氘6-文拉法辛和氘6-O-去甲基文拉法辛),直接沉淀法处理样品。色谱柱为CAPCELL PAK C18 MGⅢ分析柱(100 mm×2.0 mm,5μm),流动相为含0.3%甲酸的水溶液-含0.3%甲酸的乙腈溶液(78∶22,V/V),流速为0.3 mL.min-1。正离子多离子反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 278→58(文拉法辛)、m/z 264→58(O-去甲基文拉法辛)、m/z 284→58(氘6-文拉法辛)、m/z 270→58(氘6-O-去甲基文拉法辛)。结果文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的线性范围均为2～1 000μg.L-1,定量下限均为2μg.L-1,提取回收率在90.14%～97.33%,批内、批间RSD均小于8%。结论本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于人血浆内文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的含量测定研究。     

文拉法辛与细胞色素P450酶的相关性研究进展

文拉法辛是具有5-HT和NE双重再摄取抑制作用的新型抗抑郁药,与文拉法辛代谢密切相关的2种酶是CYP3A4和CYP2D6。CYP2D6将其生物转化为主要的活性代谢产物——O-去甲基文拉法辛（ODV）,同时CYP3A4将文拉法辛转化为非活性代谢产物N-去甲基文拉法辛（NDV）。在常规治疗剂量下文拉法辛对于CYP3A4缺乏明显的诱导或抑制作用。而CYP2D6的活性直接影响文拉法辛和ODV的代谢和浓度,由于CYP2D6存在着基因遗传多态性,不同表型有着不同的文拉法辛代谢能力,而慢代谢者更易发生不良反应。研究证实文拉法辛与ODV的浓度比log（VENL／ODV）可作为异常代谢的指标,较简便地发现大多数异常基因型患者。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中文拉法辛和O-去甲基文拉法辛浓度的不确定度评价

目的：评价高效液相串联质谱（Liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）法测定人血清中文拉法辛和O-去甲基文拉法辛浓度的不确定度。方法：对可能会引入不确定度的步骤进行分析,包括测量重复性、样品称量、溶液配制、样品处理、仪器允差、基质效应、提取回收、标准曲线拟合等,评估扩展不确定度。结果：文拉法辛低（12 ng·mL^-1）、中（120 ng·mL^-1）、高（300 ng·mL^-1）浓度质控样品的拓展不确定度分别为：U_L=0.847 ng·mL^-1,U_M=7.518 ng·mL^-1,U_H=20.776 ng·mL^-1;O-去甲基文拉法辛低（60 ng·mL^-1）、中（600 ng·mL^-1）、高（1 500 ng·mL^-1）浓度质控样品的拓展不确定度分别为：U_L=11.666 ng·mL^-1,U_M=91.479 ng·mL^-1,U_H=254.523 ng·mL^-1（P=95%,k=2）。结论：LC-MS/MS法测定人血清中文拉法辛和O-去甲基文拉法辛浓度的不确定度主要来源于标准曲线拟合、基质效应和提取回收过程。选择合适的同位素氘代内标浓度能够有效降低标准曲线拟合过程引入的不确定度。     

HPLC荧光检测法测定新药文拉法辛血浆浓度的方法研究

目的 :建立一种反相高效液相色谱法测定血浆中文拉法辛浓度。方法 :血样经固相萃取 ,以 1%三乙胺 -乙醚洗脱所需组分 ;用ODS柱分析 ,流动相为乙腈 - pH 6 8磷酸盐缓冲液 -三乙胺 (30∶70∶1) ,磷酸调 pH至 2 8;内标为马普替林 ;荧光检测 ,激发波长为 2 76nm ,发射波长为 5 98nm。结果 :文拉法辛的线性范围为 10～ 80 0ng·mL-1;最低检出量为3ng ,最低血药检测浓度为 6ng·mL-1(S/N >3) ;文拉法辛在浓度 10 ,5 0 ,10 0 ,5 0 0ng·mL-1的萃取回收率和方法回收率分别为 98 4%～ 10 2 0 %和 98 2 %～ 10 5 7% ;日内与日间的RSD分别小于 6 %和 9% (n =5 ) ;马普替林的萃取回收率为 81 7%。结论 :本法灵敏 ,简单 ,准确 ,重现性好 ,可满足药动学研究与治疗药物监测的要求。     

反相高效液相色谱法测定曲马多及其代谢产物O-去甲基曲马多人血药及尿药浓度

目的 建立血浆和尿液中曲马多(镇痛药)及其代谢产物O-去甲基曲马多的反相高效液相色谱分析方法.方法 用zorbax SB-C_(18)色谱柱,0.05 mol·L~(-1)KH_2PO_4(用磷酸调节pH至4.0)-乙腈(90:10)为流动相,流量1.0 mL·min~(-1);荧光检测波长E_x=216 nm,E_m=308 nm.结果 血浆中,曲马多、O-去甲基曲马多的线性范围分别为12.5～800.0、5～320 ng·mL~(-1),低、中、高3种浓度绝对回收率均大于86%,相对回收率为93%～105%,日内和日间RSD分别小于9%和8%.尿液中,曲马多、O-去甲基曲马多线性范围分别为12.5～4 000、5～1 280 ng·mL~(-1),低、中、高3种浓度绝对回收率均大于80%,相对回收率为91%～107%,日内和日间RSD均小于9%.在血浆和尿液中均稳定,差异均在±10%以内.结论 本方法准确可靠、专一性好、操作简便.     

液质联用法测定人血浆中艾瑞昔布及其主要代谢产物的浓度北大核心CSCD

目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中艾瑞昔布及两种代谢产物的活性。方法以地西泮为内标,用萃取剂(乙酸乙酯-二氯甲烷=4∶1,v/v)处理后进样分析。色谱柱为Ec Lipse XDB-C_(18)(2.1 mm×150 mm,3μm),流动相为水(0.1%甲酸)-甲醇(0.1%甲酸)=43∶57(v∶v),流速为0.3mL·min^(-1)。离子源用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测模式(MRM)进行检测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与准确度、稳定性、基质效应和提取回收率。结果血浆中艾瑞昔布的标准曲线方程为y=5.00×10^(-2)x+8.95×10^(-5)(r=0.999 6),在0.1~100 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限为0.1 ng·mL^(-1);血浆中艾瑞昔布羟基代谢产物的标准曲线方程为y=1.19×10^(-2)x+4.09×10^(-5)(r=0.999 9),在0.2~200 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限为0.2 ng·mL^(-1);血浆中艾瑞昔布羧基代谢产物的标准曲线方程为y=1.85×10^(-3)x-6.12×10^(-4)(r=0.996 6),在2~2000 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限为2 ng·mL^(-1)。3种化合物的日内和日间精密度均小于15%,基质变异系数小于15%,回收率为68.8%~83.9%。结论该方法简便快速、灵敏度高、准确性好、选择性强,适用于同时测定人血浆中艾瑞昔布及其代谢产物的浓度,可以满足临床药物浓度监测及药代动力学研究的需要。     

反相高效液相色谱法测定血浆中文拉法辛浓度

目的 :建立高效液相色谱法检测人血浆中文拉法辛浓度。方法 :血浆样品经石油醚 乙醚 (2∶1 )提取后 ,有机相再用50mmol·L- 1盐酸反萃取并浓缩进样。色谱柱为氰基柱 (2 50× 4.6mm ,5μm) ,乙腈 -0 .1mol·L- 1NH4 H2 PO4 (2 5∶75)为流动相 ,UV检测波长 2 2 9nm。结果 :文拉法辛血浆最低检测浓度 1 0 μg·L- 1,线性范围 2 5～ 80 0 μg·L- 1,萃取回收率 75.5%～79.3%,加样回收率 97.4%～ 1 0 1 .2 %,日内RSD 4.87%～ 6 .39%,日间RSD 7.55%～ 1 0 .80 %。结论 :该法准确可靠 ,已用于临床患者文拉法辛血药浓度测定。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平的浓度

目的:建立同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平浓度的方法。方法:血浆样品经甲醇(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后,以盐酸吡格列酮为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18),流动相为含0.01%甲酸的水溶液-含0.01%甲酸的甲醇溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为50℃,进样量为5μL;采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 237.00→194.05(卡马西平)、m/z 278.20→58.10(文拉法辛)、m/z 358.08→135.04(罗格列酮)、m/z 347.15→315.17(硝苯地平)、m/z 357.09→134.06(内标)。结果:卡马西平、盐酸文拉法辛、盐酸罗格列酮、硝苯地平血药浓度的线性范围分别为2.00~2 000.00、2.12~2 120.00、2.00~2 000.00、2.04~1 020.00 ng/mL(r分别为0.995 9、0.990 5、0.991 5、0.991 0,n=5),最低检测限分别为0.200、0.106、0.100、1.020 ng/mL;日内、日间RSD均小于15%,相对误差的绝对值小于15%;提取回收率为65.66%~96.36%(RSD<15%,n=5),基质效应为80.99%~114.33%。采用该法测得2例癫痫患者体内卡马西平的血药浓度分别为(1 500.41±169.11)、(1 159.01±59.24)ng/mL(RSD分别为11.27%、5.60%,n=3),2例高血压患者体内硝苯地平的血药浓度分别为(14.68±1.92)、(21.18±3.59)ng/mL(RSD分别为16.98%、13.10%,n=3)。结论:该方法操作简便,专属性强,灵敏度、准确度高,可用于上述药物的血药浓度监测及药动学研究。     

奥氮平联合文拉法辛治疗难治性抑郁症的临床效果

目的 观察奥氮平联合文拉法辛治疗难治性抑郁症的临床效果。方法 选取2020年5月—2021年5月厦门市仙岳医院收治的难治性抑郁症患者60例,根据随机数字表法分为OLA+VEN组和VEN组,每组30例。VEN组患者单纯给予盐酸文拉法辛缓释胶囊治疗,OLA+VEN组患者在VEN组基础上加用奥氮平片治疗,2组均连续治疗8周。比较2组患者治疗效果,治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、副反应量表(TESS)评分、健康调查量表36(SF-36)评分、心理弹性量表评分及不良反应。结果 OLA+VEN组患者总有效率为96.67%,高于VEN组的73.33%(χ²=4.706,P=0.030);治疗1、2、4、6、8周末,2组患者HAMD评分均较治疗前降低(P<0.05或P<0.01),OLA+VEN组治疗2、4、6、8周末HAMD评分低于VEN组(P均<0.01);治疗1、2、4、6、8周末,OLA+VEN组TESS评分与VEN组比较差异无统计学意义(P均>0.05);治疗8周后,2组患者SF-36评分、心理弹性量表评分较治疗前升高,且OLA+VEN...     

文拉法辛相关PK-PD关系及影响因素研究进展

文拉法辛（venlafaxine,VEN）是一种新型抗抑郁药物，能有效拮抗5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）和去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）的再摄取，相比较其他抗抑郁药物，文拉法辛的药动学/药效学（pharmacokinetics-pharmacodynamics,PK-PD）更有规律可循且具有毒副作用较小、口服吸收快、生物利用度高等特点，本文综述了VEN的PK-PD模型化研究及其定量关系以及影响VEN体内过程的因素，包括性别、体质量、个体基因型、肝肾功能损伤、药物相互作用等相关因素。     

高效液相色谱-荧光法测定人血浆中文拉法辛及相对生物利用度

目的建立人血浆中文拉法辛的HPLC-荧光测定法，研究2种文拉法辛胶囊的相对生物利用度。方法以拉呋替丁为内标，血浆样品萃取后经Diamonsil C18柱分离，流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液（磷酸调pH为5．95）25：75（v／v），荧光检发射波长（Ex）为276nm，检测波长（EM）为598nm。18名健康志愿者采用随机交叉方式分别单剂量口服文拉法辛胶囊100mg后研究两者的相对生物利用度。结果血浆中文拉法辛与内源性杂质分离完全，在5．1～490．7μg·L^-1浓度与峰面积比线性良好，回归方程为：Y=0．074X＋0．0285（r^2=0．9998），最低定量限为5．1μg·L^-1；文拉法辛绝对回收率为98．6％～100．5％（n=20），内标绝对回收率为84．2％～85．7％（n=20），方法回收率为89．3％～108．7％（n=15），日内精密度（RSD）〈3．6％（n=15），日间精密度（RSD）〈9．6%（n=15）。单次服用100mg文拉法辛胶囊T或R后的AUC0-24。分别为（1146．4±339．6）和（1132．9±311．3）μg·h·L^-1；Cmax分别为（167．7±49．1）和（177．6±47．8）μg·L^-1；tmax分别为（1．9±0．3）和（1．8±0．6）h。与R相比，T的相对生物利用度为（103．7％±13．3％）。结论该法简单，准确度高，灵敏度好。方差分析结果两制剂的主要药动学参数之间无明显差异，两者为生物等效制剂。     

O-去甲基文拉法辛琥珀酸盐的合成工艺研究

目的 优化O-去甲基文拉法辛的合成工艺.方法 以对羟基苯乙酸为原料,经苄基保护,依次经过酰化、缩合、还原、氢解脱苄、成盐反应成功合成了目标化合物.结果 反应条件得到了优化,避免了使用二甲胺气体、正丁基锂和四氢锂铝试剂,总收率为30％(以对羟基苯乙酸计).结论 该路线原料价廉易得,反应条件温和,操作简便,适合于工业化生产.目标化合物经1 H-NMR、MS结构确证.     

HPLC法测定盐酸文拉法辛胶囊有关物质

目的:建立测定盐酸文拉法辛胶囊有关物质的HPLC法。方法:选用C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1 mol.L-1磷酸二氢铵溶液(20∶80),检测波长为205 nm。结果:盐酸文拉法辛与有关物质分离良好,最低检测限0.8 ng。结论:方法操作简便准确,耐用性好。     

高效液相色谱法测定盐酸文拉法辛缓释片的主药含量

目的:建立测定盐酸文拉法辛缓释片中盐酸文拉法辛含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-0.02 mol.mL-1磷酸二氢钠溶液(用10%磷酸调节pH值至3.0)(V∶V∶V=25∶15∶60),柱温为35℃,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为226 nm。结果:盐酸文拉法辛进样量在0.604 8～3.024μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 0,n=5),平均加样回收率为97.51%,RSD=0.75%(n=9)。结论:本方法简便、准确度高、重现性好、可操作性强,可用于盐酸文拉法辛缓释片中盐酸文拉法辛的含量测定。