BacT/ALERT 3D结核分支杆菌快速培养系统在脊柱结核诊断中的应用

目的 分析BacT/AIERT 3D法培养脊柱结核病灶标本的结果,探讨其在脊柱结核诊断中的价值.方法 对符合本实验要求的53例脊柱结核患者的43例进行手术治疗,术中收集结核肉芽肿、脓液及硬化骨作为标本,标本预处理后分别接种于三个BacT/ALERT 3D液体培养基和三个罗氏培养基进行培养;另10例患者行CT引导下脓肿或病椎穿刺.标本用BacT/ALERT 3D法培养,抗痨2周后术中取同样标本再用BacT/ALERT3D法培养.阳性者萋-尼抗酸染色镜检后,接种PNB和TCH培养基进行菌种鉴定.结果 43例患者BacT/ALERT 3D法培养阳性19例(人型结核杆菌为16例,牛型结核杆菌为3例),罗氏培养法阳性11例,阳性率分别为44%、25%,差异有统计学意义(P<0.005);阳性结果平均报告时间分别为16d和30d.其余10例患者入院即行CT引导下脓肿或病椎穿刺后BacT/ALERT 3D法培养,结果9例阳性,均为人型结核杆菌,阳性率90%,化疗2周后术中取同样标本经BacT/ALERT 3D法培养仅2例阳性,阳性率20%,化疗前后结核分枝杆菌BacT/ALERT 3D法培养阳性率差异有统计学意义(P<0.05).BacT/ALERT 3D法培养标本阳性率在结核肉芽肿(44%)、脓液(23%)和硬化骨(9%)差异有统计学意义(P<0.05).结论 BacT/ALERT 3D法是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法,培养阳性率与培养物的取材时间、标本种类有直接关系.     

BacT/ALERT 3D全自动培养仪检测分枝杆菌的临床应用研究

目的探讨BacT／ALERT 3D全自动培养仪在结核病诊治中的应用价值。方法用BacT／ALERT 3D全自动培养仪（3D法）对临床送检的402份标本（其中结核病患者标本330份，非结核病患者标本72份）进行结核分枝杆菌分离培养，阳性者进行药物敏感性试验，同时与BACTETB460系统（Bactec法）和改良罗氏培养法（L—J法）进行比较。结果330份结核病患者标本中，3D法、Bactec法和L—J法的阳性分离率分别为42．1％、43．9％和31．2％；初分离平均阳性时间为16．1d、12．8d和25．6d，平均药敏时间12．9d、12．4d和22．4d，总报告时间分别为29d、25．2d和48d。3D法在阳性分离率和平均报告时间均明显优于改良罗氏法（P〈O．05）、与Bactec法相近（P〉0．05）。3种方法污染率分别为4．0％、6．2％和3．5％；3D法低于Bactec法（P〈0．05）、与L—J法相近（P〉0．05）。3D法与Bactec法和L—J法药敏总符合率分别为97．28％和94．79％。在72份非结核病人标本中，3种方法培养均为阴性。结论BacT／ALERT3D全自动培养仪检测分枝杆菌具有阳性分离率高、快速、污染率低、安全可靠、自动化程度高，是一种比较理想的快速检测分枝杆菌的方法。     

2327例血液及体液快速培养结果分析

目的：提高血培养及体液培养阳性率，快速准确作出病原学诊断。方法：用BacT/ALERT3D全自动血培养仪对2327份血液和体液标本进行检测，针对不同年龄患者选用标准血培养瓶，并对其检出阳性的时间、阳性率和病区分布、细菌种类及部分细菌耐药性进行评估。结果：培养时间缩短到5d，培养阳性率为20．7％，其中血液为16．9％，各种体液为32．2％，共检出细菌49种，真菌6种，血培养中葡萄球菌的比例高达60．1％，其中凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林耐药率高达90％。结论：BacT／ALERT 3D全自动血培养仪提高了血培养及体液培养阳性率，缩短了检出时间。     

BacT/ALERT 3D全自动微生物培养系统的应用分析

败血症、菌血症是严重的甚至危及生命的疾病。能否快速、准确地从血中检出病原菌．是能否治愈和挽救患者生命的关键所在。提高血培养阳性率、缩短病原菌检出时间是众多微生物检验工作者和自动化生产商不懈追求的目标。现对我院BacT／ALERT3D全自动微生物培养系统的应用情况分析如下。     

噬菌体生物扩增法在关节结核诊治中的临床应用研究

目的 探讨噬菌体生物扩增法(phage amplified biologically assay,PhaB)快速检测关节结核脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值.方法 采用PhaB技术对关节结核患者36例,非结核性关节炎患者20例关节液中的结核分枝杆菌进行检测,同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 36例关节结核积液,PhaB阳性率为47.2%(17/36)、涂片抗酸染色阳性率为2.7%(1/36)、罗氏培养阳性率为5.5%(2/36).20 例非结核性关节炎患者PhaB、涂片抗酸染色、罗氏培养特异性均为100.0%.结论 PhaB法检测关节积液中结核分枝杆菌只需2d,操作简便、灵敏度高、特异性强,不需要特殊仪器设备,可作为诊断关节结核的一种好方法.     

噬菌体生物扩增法检测脓肿型颈部淋巴结结核患者脓液中结核分枝杆菌

目的探讨噬菌体生物扩增法在检测脓肿型颈部淋巴结结核患者脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值,寻找一快速检测方法。方法采用噬菌体生物扩增技术对21例脓肿型颈部淋巴结结核患者的脓液标本进行检测,同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果噬菌体生物扩增法阳性率为47.6%（10/21）,涂片抗酸染色阳性率为28.6%（6/21）,罗氏培养阳性率为42.8%（9/21）。检验所需时间：传统的罗氏培养法需8周,而噬菌体生物扩增法仅需2d。结论噬菌体生物扩增法检测颈淋巴结脓液中结核分枝杆菌阳性率高于传统方法,且耗时明显缩短。 关键词：颈部淋巴结结核;结核分枝杆菌;噬菌体生物扩增法     

HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染及耐药性分析

目的了解HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染及其耐药状况。方法对601例HIV/AIDS患者标本用中性改良罗氏（Lowenstein-Jensen）培养基和BacT/ALERT 3D 240全自动培养仪同时进行分枝杆菌培养;培养阳性者用硝基苯甲酸（PNB）培养基、噻吩-2-羧酸肼（TCH）培养基进行菌种初步鉴定和用绝对浓度间接法进行8种抗结核药物敏感性试验。结果分枝杆菌培养阳性116例,检出率为19.30%;其中结核分枝杆菌93株,检出率为15.41%,非结核分枝杆菌23株,检出率为3.89%;93株结核分枝杆菌总耐药率为26.88%,耐多药率（MDR-TB）为7.53%,广泛耐药率（XDR-TB）为1.08%;23株非结核分枝杆菌总耐药率为100%。并且多数呈多重耐药。结论HIV/AIDS患者并发分枝杆菌感染率及其耐药率较高,尤其是非结核分枝杆菌耐药率更高,对HIV/AIDS患者疑为分枝杆菌合并感染时,应对相关标本进行分枝杆菌培养、鉴定和药敏试验,以便指导临床合理用药。     

长春地区非结核分枝杆菌试验结果分析

目的:证明检测非分枝杆菌对临床诊断及选用抗结核药物起关键作用。方法:应用BG/ALERT3D检测法、改良罗氏(L-J)培养法及分枝杆菌的鉴定程序。结果:从516份临床患者标本中检测出213株结核分支杆菌,其中结核分支杆菌(188/213)、牛型分支杆菌(14/213)、非结核分支杆菌(11/213),结核分支杆菌的培养阳性率为37.8%。结论:按MTC鉴定程序对213株结核分支杆菌进行了鉴定,11株为非结核分支杆菌,其中海分支杆菌3株、堪萨斯分支杆菌3株、胞内氏分支杆菌2株、偶然分支杆菌2株、鸟分支杆菌1株,长春地区非分支杆菌约占5.2%左右。     

BacT/ALERT3D系统在结核性脑膜炎诊断中的应用

目的:评价Bac T/ALERT 3D系统在诊断结核性脑膜炎中的应用价值。方法:收集2009年1月~2014年6月间200例结核性脑膜炎患者早期脑脊液标本480份,每份标本分别用离心涂片法、罗氏培养法和Bac T/ALERT 3D系统培养法检测,对其结果进行分析,总结3种方法对确诊结核性脑膜炎之间的差异。结果:480份脑脊液标本中,离心涂片法、罗氏培养法、Bac T/ALERT 3D系统培养法的结核杆菌阳性检出率分别为3.13%、5.42%、10.63%,Bac T/ALERT 3D系统培养法结核杆菌初代分离时间短于罗氏培养法。结论:Bac T/ALERT 3D系统有较高的检出率、较快的检出时间,有助于提高结核性脑膜炎的发现率,值得临床推广应用。     

三种方法检测结核分枝杆菌的比较

目的比较PCR技术与抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,及在临床诊断中的应用价值。方法对108例临床确诊的结核病患者、90例结核性胸膜炎患者的痰标本和50例非结核患者痰标本应用PCR法、痰涂片抗酸染色法和改良罗氏培养法检测,对3种检测方法的结果进行分析比较。结果抗酸染色法检测结核杆菌阳性率为44.4%,改良罗氏培养法阳性率为57.4%,PCR技术检测阳性率为80.5%。结论 PCR技术是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。     

荧光定量聚合酶链反应技术检测痰结核分枝杆菌DNA及其临床应用研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)技术在肺结核诊断中的临床价值。方法对144例活动性肺结核的痰及30例健康对照者的痰进行 FQ-PCR 检测,并与痰涂片检查法、改良罗氏培养法结果进行比较。结果 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率、痰涂片抗酸检查法阳性率、改良罗氏培养法阳性率分别为61.1%(88/144)、51.4%(74/144)、55.6%(80/144),以 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率为最高,FQ-PCR 检测特异性为100%。结论 FQ-PCR 技术检测痰结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,该方法快速、准确,对肺结核的诊断有一定价值。     

荧光定量PCR诊断肾结核的临床应用价值

目的提高肾结核患者尿中结核分枝杆菌的检出率。方法用荧光定量PCR仪检测门诊及住院33例疑似肾结核患者尿液中的结核分枝杆菌。结果 33例疑似肾结核患者尿中21例检测出结核分枝杆菌,非肾结核患者尿中未检出结核分枝杆菌,正常对照组检测结果均为阴性。结论荧光PCR技术具有较高的敏感度和特异度,检测尿中结核分枝杆菌阳性率高,与临床符合率高,对临床肾结核的诊断且有良好的应用前景。     

VITEK-MS 质谱仪直接检测BacT/ALERT 3D仪阳性血培养瓶微生物的实验研究

目的评估基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（VITEK-MS）仪直接检测BacT/ALERT 3D仪阳性培养瓶微生物方法的可行性与准确性。方法选取2016 年9 月-2016 年11 月安徽医科大学第一附属医院微生物室BacT/ALERT 3D全自动培养仪当天报告阳性的血培养瓶,差速离心法处理后直接用VITEK-MS 进行检测,并与常规鉴定法进行比较。结果150 例阳性培养瓶中,除13 例培养瓶中无细菌生长外,VITEK-MS 直接鉴定法正确检测出97 例（70.8%）菌株,错误检测出10 例（7.3%）菌株,30 例（21.9%）鉴定无结果。其中,革兰阴性杆菌正确鉴定出61 例（88.4%）菌株,鉴定无结果8 例（11.6%）;革兰阳性球菌正确鉴定出36 例（52.9%）菌株, 鉴定错误10 例（14.7%）,鉴定无结果22 例（32.4%）。结论利用VITEK-MS 直接鉴定阳性血培养瓶的方法准确性高、特异性强,革兰阴性杆菌鉴定准确率远高于革兰阳性球菌,且鉴定时间短（只需2 h）。该方法可以作为快速诊断阳性血培养瓶的新方法。     

耐药肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌L型四种检测方法比较

目的:比较耐多药肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌L型的四种实验室检查方法及其临床意义.方法:对103例耐多药肺结核患者的痰标本分别采用萋-尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法、改良罗氏培养法、聚合酶链反应(PCR)和结核分枝杆菌L型培养法进行检测.结果:结核分枝杆菌L型培养阳性率高于抗酸染色涂片、改良罗氏培养和PCR检测(P＜0.05～P＜0.005).结论:结核分枝杆菌L型培养可提高结核分枝杆菌的阳性检出率,对结核病的早期、快速诊断具有重要价值;耐多药肺结核患者有较高的结核分枝杆菌L型感染率,这也是结核病程缓慢变化、复发、难治的重要原因.     

荧光定量PCR技术在结核分枝杆菌检测中的应用

目的探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）技术在结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法采用荧光定量PCR、抗酸染色和改良罗氏培养三种方法同时检测156例结核患者标本,对检测结果进行比较。结果荧光定量PCR、抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的阳性率分别为50%、25.64%、33.33%,以荧光定量PCR检测的阳性率最高。结论荧光定量PCR方法检测结核分枝杆菌具有灵敏度高、简便、快速的特点,可作为结核病诊断的常规方法,在临床上有重要应用价值。     

五种检测方法在结核病诊断中的应用评价

目的评估涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF法、结核分枝杆菌RNA荧光定量PCR法、结核分枝杆菌DNA荧光定量PCR法在结核病诊断中的应用价值。方法对374例疑似肺结核病患者、120例肺结核患者及70例非结核病患者的痰液标本分别用涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNAPCR、TB-DNA PCR进行结核分枝杆菌检测,将检测结果进行分析和比较。结果涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测374例疑似肺结核病患者痰液标本阳性率分别为6.68%、13.37%、20.05%、19.25%、22.73%,其中XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测阳性率差异无统计学意义(χ2=1.51,P0.05),TB-RNA PCR阳性率高于改良罗氏培养基培养法(χ2=4.75,P0.05),改良罗氏培养基培养法高于涂片抗酸染色法(χ2=9.28,P0.05)。五种方法检测120例肺结核患者及70例非结核病患者的敏感性分别为20.83%、35.00%、50.83%、47.50%、54.17%,特异性分别为100.00%、100.00%、98.57%、100.00%、98.57%。结论 XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR与涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法相比,具有敏感、快速、可定量的特点,可以作为结核病辅助诊断的有效检测方法。     

全自动微生物培养系统在单采血小板细菌培养中假阳性结果的质量控制

[目的]分析全自动微生物培养系统在单采血小板细菌污染中的质控价值,并分析常见血小板细菌的细菌种类.[方法]对2008年的2 390份保存24 h后(22℃振荡保存)的单采血小板采用BacT/ALERT细菌培养仪进行细菌筛检.初筛阳性进一步转种培养,转种培养阳性进一步进行细菌种类鉴定.[结果]2 390份单采血小板细菌培养的结果中初筛阳性29例,再经转种培养后阳性的有6例,其中5例检出细菌.1例未检出.初筛阳性率1.2%,真阳性率0.21%,假阳性率83%.[结论]BacT/ALERT全自动微生物培养系统在单采血小板细菌污染质控中,对保障合格的血小板发放到临床医疗单位具有重要的意义,但是要严格依照仪器的说明书操作,保证操作规范,以避免假阳性结果.     

噬菌体变色法检测结核分枝杆菌

目的建立一种结核分枝杆菌快速检测方法。方法痰标本常规处理,离心集菌,取100μl于试管中,另一支加入标准株H37Rv结核分枝杆菌作阳性对照。两支试管分别加入噬菌体D29,37℃培养,用硫酸亚铁铵杀死结核分枝杆菌菌体外的噬菌体,柠檬酸三钠和氯化钙混和液中和硫酸亚铁铵。加入耻垢分枝杆菌和硝酸钾,37℃培养过夜,加入显色剂显色。同时用罗氏培养方法对照检测。结果临床标本的噬菌体变色法和罗氏培养法表明两方法结果具有一致性(P0.05)。结论噬菌体变色法可作为结核分枝杆菌的快速检测方法之一。     

环介导等温扩增法对痰标本中结核分枝杆菌检测效果的评估

目的 探讨环介导等温扩增法对痰标本中结核分枝杆菌的检测效果。方法 选取痰标本422个,以罗氏培养基培养法检测结果为金标准,开展环介导等温扩增法检验,比较两种检查方法的准确率。结果 罗氏培养基培养法和环介导等温扩增法的检测阳性率高于直接涂片染色法(P0.05),同时罗氏培养基培养法和环介导等温扩增法的检测阳性率差异无统计学意义(P0.05)。结论 环介导等温扩增法可有效检测出痰标本中结核分枝杆菌。     

噬菌体生物扩增法快速鉴定结核分枝杆菌的临床价值

目的探讨噬菌体生物扩增法(Phab)快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值.方法应用Phab、罗氏法及涂片法共同检测236例痰标本.结果痰标本3种方法检测结果比较236份临床确诊的活动性肺结核患者痰标本,涂片、罗氏培养和Phab法检查结果分别有64份(27.1%)、78份(33.1%)和114份(48.3%)阳性;比较Phab与涂片和培养的阳性检测率,Phab检出率远高于涂片法,差异有统计学意义(X2=77.706,P＜0.01),Phab检出率高于罗氏法检出率,差异有统计学意义(X2=95.678,P＜0.01).结论FASTPlaque TB方法能快速、简便地检测结核分枝杆菌,且检出率较高,可作为结核病诊断的重要方法.