变应性鼻炎患者外周血Th1和Th2细胞的流式细胞分析

体内Th1和Th2细胞及其分泌的细胞因子失平衡在变应性鼻炎的发病机制中所起的作用受到学者们的重视。通过检测变应性鼻炎患者外周血单个核细胞（PBMC）经PMA刺激培养后的CD3^＋／CD8^-细胞的IL-4和IFN-γ的水平，进一步探讨Th1／Th2失衡在变应性鼻炎发病中所起的作用。     

特异性脱敏治疗对变应性鼻炎血中Th1/Th2细胞比例调节的影响

目的:探讨经鼻内和(或)舌下特异性脱敏治疗常年性变应性鼻炎(PAR)的效果及对患者血清Th1/Th2细胞因子平衡的调节及总IgE(tIgE)水平表达的影响.方法:选择36例PAR患者经鼻特异性脱敏治疗(鼻喷组)和36例PAR舌下特异性脱敏治疗(舌下组),并进行疗效比较,以32例健康成年人作为正常对照组.同时用免疫放射平衡法和双抗夹心法检测鼻喷组及舌下组治疗前后血清IL-2、IL-4、IL-8及tIgE水平;用酶联免疫吸附法检测IFN-γ;鼻分泌物涂片观察局部嗜酸粒细胞的浸润与变化.结果:变应性鼻炎(AR)患者在经鼻和舌下特异性免疫治疗(SIT)前两组血清Th1细胞因子IL-2及IFN-γ含量显著减少,而Th2细胞因子IL-4、IL-8和tIgE含量显著增高,鼻喷组及舌下组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);SIT至维持量后,AR患者血清中IL-2及IFN-γ含量较治疗前明显增高,而IL-4、IL-8及tIgE含量则明显降低(P<0.01或P<0.05).SIT后鼻喷组和舌下组临床总有效率分别为97.22%和94.44%,两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:AR患者体内存在Th1/Th2细胞比例和细胞因子平衡失调,表现为Th2细胞功能亢进.经鼻黏膜和舌下脱敏治疗能通过对AR血中Th1/Th2细胞因子比例平衡和细胞因子水平表达的调控及对血tIgE水平的调节来改善和纠正Th1/Th2细胞失平衡,能明显改善AR的临床症状.     

流式细胞术检测IFN-γ、IL-4在鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血表达的差异

目的检测鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血单个核细胞（PBMC）内IL-4，IFN-γ的表达，探讨细胞因子与鼻息肉和变应性鼻炎发病的关系，以及二者发病机制的不同。方法用流式细胞仪测定30例鼻息肉患者、30例变应性鼻炎患者和30例健康人的PBMC，经PMA诱导培养后IFN-γ／和IL-4的水平，与健康对照组比较，进行统计学分析。结果鼻息肉组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN-γ^＋和CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量均较健康对照组明显升高，比较有统计学意义（P〈0．05）。变应性鼻炎组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN—γ^＋含量较健康对照组明显降低，而CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量则明显升高，比较均有统计学意义（P〈0．05）。结论鼻息肉患者体内分泌IFN-γ、IL-4均增高，分泌多种细胞因子，在鼻息肉的发生发展中起到网络调节作用。而变应性鼻炎患者分泌IL-4增高，分泌IFN-γ却受到抑制，这种细胞因子失平衡可能在变应性鼻炎发病机制中起到重要作用。     

实验性变应性鼻炎小鼠脾细胞培养上清细胞因子测定及其变化特征

目的：探讨变应性鼻炎小鼠模型脾细胞在不同刺激物刺激下培养上清中细胞因子在不同时间段的水平,比较2种刺激物对细胞因子的影响效果,以及在不同时间段细胞因子的分泌情况。方法：用卵清蛋白（OVA）致敏小鼠,并用OVA盐溶液滴鼻激发制成变应性鼻炎模型,对照组用生理盐水替代,在末次激发后取脾单核细胞培养,并分别加入OVA和刀豆蛋白（ConA）刺激脾单核细胞增殖、分泌细胞因子,分别于培养后24、48、72h取培养上清液进行细胞因子IL-4、IL-5、IFN-γ浓度测定。结果：实验组脾单核细胞培养上清中加ConA刺激产生IL-4、IL-5和IFN-γ浓度均明显高于对照组（均P〈0．05）,但IFN-γ／IL-4、IL-5明显降低;加0VA刺激产生的IL-4、IL-5比对照组明显增高但升高幅度比加入ConA的低,而IFN-γ浓度则明显降低（P〈0．05）。脾细胞培养上清中IL-4含量在72h内随时间持续增高,IL-5及IFN-γ在48h内增长显著,48～72h内增长趋缓。结论：小鼠实验性变应性鼻炎体内T细胞被广泛激活,受抗原OVA和非特异性刺激物ConA刺激Th2细胞释放的细胞因子明显增多,而Th1细胞及其细胞因子则受抑制;ConA刺激产生的细胞因子差异更显著。在2种刺激物刺激下72h内各细胞因子是持续增多的。     

益气温阳方对变应性鼻炎患者外周血IL-4、IL-5和IFN-γ的影响

目的 评价益气温阳方治疗变应性鼻炎肺脾虚寒证对细胞因子的影响.方法 选择符合纳入标准的观察对象40例,并选取5例正常健康者作空白对照.中药组20例口服益气温阳方,西药组20例口服西替利嗪,治疗4周.测定变应性鼻炎肺脾虚寒证患者治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)培养上清中的IL-4、IL-5和IFN-γ水平,并采用自身前后比较法及组间对照比较法进行分析.结果 两治疗组患者PBMC培养上清中的IL-4、IFN-γ水平在治疗前后相比差异均有统计学意义(P＜0.01),而IL-5水平的差异则无统计学意义(P＞0.05).中药组患者治疗前后PBMC培养上清中的IL-4、IL-5和IFN-γ水平与西药组对比,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 益气温阳方是治疗变应性鼻炎肺脾虚寒证的有效方剂.     

Th17细胞在小鼠变应性鼻炎模型中的表达及调控作用

目的:通过探讨变应性鼻炎小鼠与正常小鼠、抗IL-17抗体治疗后的变应性鼻炎小鼠的行为学、组织病理学,Th1、Th2、Th17细胞因子的数量以及Th17细胞特异性转录因子的表达水平,评价Th17细胞在变应性鼻炎发病机制中的作用.方法:以卵清蛋白致敏模型组和治疗组小鼠建立BALB/c小鼠变应性鼻炎模型,造模成功后治疗组予IL-17抗体治疗.对照组以生理盐水对照.采集外周血ELISA法测IL-17、IL-4和IFN-γ.并取黏膜行苏木精-伊红染色及RT-PCR法测孤儿核受体(RORγt)mRNA的表达水平.结果:卵清蛋白造模成功,治疗后症状及炎症病理缓解.模型组IL-17、IL-4及RORγt mRNA表达水平均较对照组明显增高,IFN-γ降低;治疗后前三者降低而后者升高(P<0.05).结论:Th17细胞与Th2细胞在变应性鼻炎中大量表达,说明两者可能与其发病机制有关,本实验从IL-17抗体局部治疗有效方面提出治疗依据,通过调控Th17细胞可能成为有效阻止变应性鼻炎的治疗方法.     

白细胞介素5和13受体对变应性鼻炎大鼠血管细胞黏附分子1及γ干扰素的影响

目的 探讨鼻腔联合应用可溶性白细胞介素5受体α( soluble interleukin 5 receptor alpha,sIL-5 Rα)及sIL-13Rα2对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)和γ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)水平的影响.方法 将Wistar大鼠50只以随机数字表法随机分为A组(对照组)、B组(AR组)、C组(sIL-5Rα治疗组)、D组(sIL-13Rα2治疗组)及E组(sIL-5Rα联合sIL-13Rα2治疗组,简称联合治疗组).AR组及各治疗组用卵清蛋白( ovalbumin,OVA)和氢氧化铝致敏,用OVA激发,建立大鼠AR模型,对照组用生理盐水代替.其中sIL-5Rα治疗组、sIL-13Rα2治疗组及联合治疗组在第31 ～ 38天,于激发前30 min每只大鼠每日每侧鼻腔分别滴入100 μg sIL-5Rα、100 μg sIL-13Rα2、sIL-5 Rα及sIL-13Rα2各100 μg,AR组则于激发前30 min滴入磷酸盐缓冲液50μl.比较各组大鼠血清及鼻腔灌洗液中VCAM-1、IFN-γ水平的变化.以SPSS 17.0软件进行统计学分析.结果 B组血清及鼻腔灌洗液中VCAM-1含量较A组明显升高(P值均＜0.01),而IFN-γ含量明显降低(P值均＜0.01);C、D、E组血清及鼻腔灌洗液中VCAM-1含量较B组明显降低(P值均＜0.01),而IFN-γ的含量明显升高(P值均＜0.01);E组血清及鼻腔灌洗液中VCAM-1含量[分别为(283.5±5.7) μg/L、(101.8±4.8)μg/L]分别较C[分别为(311.5±12.6) μg/L、(133.9±5.8) μg/L]、D组[分别为(304.7±6.6) μg/L、(128.5±7.7) μg/L]明显降低(P值均＜0.01),而IFN-γ的含量[E组分别为(874.7±9.6)、(349.2±12.1) pg/ml;C组分别为(600.2±16.1)、(195.5±16.1)pg/ml;D组分别为(577.9±9.6)、(196.7±9.9) pg/ml]明显升高(P值均＜0.01).结论 联合应用sIL-5Rα及sIL-13 Rα2治疗大鼠AR,可明显降低血清及鼻腔灌洗液中VCAM-1含量,同时升高IFN-γ含量,从而达到缓解和治疗AR的目的.     

滨蒿内酯对实验性变应性鼻炎大鼠血清Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的：观察滨蒿内酯（Scoparone）对变应性鼻炎（AR）模型大鼠血清Th1/Th2细胞因子表达的影响。方法32只雄性SD大鼠随机分为4组,即正常对照组（NC组）、变应性鼻炎模型组（模型组）、滨蒿内酯组（Sco组）和地塞米松组（Dex组）。以卵清蛋白致敏和激发方法建立变应性鼻炎模型并予相应治疗。观察大鼠行为学改变及鼻黏膜病理组织学变化,ELISA法检测血清IgE和细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-5水平。结果在Sco组动物,其行为学评分（1.93±0.70）明显低于AR模型组（6.69±0.88,P＜0.01）,与Dex组（2.06±0.55）和NC组（1.45±0.31）比较差异无统计学意义（P＞0.05）;鼻黏膜炎性反应表现明显轻于AR模型组;血清IFN-γ水平（51.01±5.27）明显高于AR模型组（37.41±4.66）,IgE、IL-4和IL-5水平则明显低于AR模型组（均P＜0.01）,但与Dex组和NC组比较均P＞0.05。结论滨蒿内酯可能通过调节Th1/Th2细胞因子表达并抑制IgE分泌而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

Th1和Th2细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎发病中的变化

目的：探讨外周血中Th1、Th2细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎发病中的变化和作用机制。方法：以卵清蛋白致敏激发制成SD大鼠变应性鼻炎模型,以流式细胞仪检测外周血中Th1和Th2细胞的含量,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清和鼻黏膜组织匀浆中的INFγ,IL-4的含量。结果：与健康对照组相比,变应性鼻炎模型的Th1数量有下降趋势,但P〉0．05。Th2细胞却明显升高。P〈0．05。Th1／Th2显著偏离正常比值。P〈0．01。血清和组织匀浆中INF-γ下降,P〉0．05,IL-4含量明显升高,P〈0．01。结论：大鼠变应性鼻炎模型外周血中Th2细胞及相关细胞因子的变化,在其发病过程中可能具有重要的意义。     

血清IL-4、IFN-γ与持续性变应性鼻炎的相关性

目的探讨T辅助细胞亚群失衡介导的免疫反应在常年性变应性鼻炎中的作用。方法24例常年性变应性鼻炎患者和17例健康志愿者,应用酶联免疫试剂盒检测血清白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)水平并进行比较分析。结果常年性变应性鼻炎组血清IL-4含量[37．8±18．36]pg/L明显高于对照组[1．74±3．35] pg/L；IFN-γ含量[0．72±3．35]pg/L明显低于对照组[43．60±22．87]pg/L,其差异有显著性意义(P＜0．01)。常年性变应性鼻炎组血清IFN-γ/IL-4比值明显下调。结论T辅助细胞亚群比例失衡,Th2功能亢进是常年性变应性鼻炎发病的重要原因。     

鼻息肉组织中Th_1、Th_2细胞因子的表达及其意义

目的 :探讨 IL- 4、IL- 5等 8种细胞因子在鼻息肉发病中的作用和对鼻息肉治疗的意义。方法 :采用酶联免疫吸附实验 (EL ISA)法检测 2 5例鼻息肉患者鼻息肉组织中 Th1 细胞因子 IFN- γ、IL- 2、IL- 12和 Th2 细胞因子 IL- 4、IL- 5、IL- 8、IL- 10、IL- 13的表达 ,并比较经皮质激素治疗前后鼻息肉中细胞因子表达的差异。结果 :2 5例中 ,IL- 4、IL- 5、IL- 8、IL- 10、IL- 13等 Th2 细胞因子的表达较正常组织增高 ,其中以 IL- 4、IL- 5最为显著 ,分别达3.9倍和 8.8倍 ;应用皮质激素后细胞因子的表达水平显著降低 ,而 IFN- γ、IL- 2、IL- 12等 Th1 细胞因子浓度较正常组织中降低 ,应用激素后其表达无明显改变。结论 :Th2 细胞因子 IL- 4、IL- 5、IL- 8、IL- 10、IL- 13等的升高 ,在鼻息肉的发病过程中可能具有重要的意义 ,通过改变 Th2 细胞因子的表达趋势 ,可能对鼻息肉的治疗具有一定的意义。     

下咽癌组织Th1/Th2类细胞因子的表达及意义

目的：检测下咽癌组织中辅助性T淋巴细胞(Th)1／Th2类细胞因子的表达，探讨其在下咽癌发生发展中的可能作用。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术，检测5例正常人及20例下咽癌组织中Th1／Th2类细胞因子的基冈表达：结果：20例下咽癌组织中．主导Th2类细胞因子的白细胞介素(IL)-4和IL-10呈强势表达，而主导Th1类细胞因子的干扰素γ(IFN-γ)和IL-2基本不表达或表达较弱。结论：下咽癌组织Th2类细胞因子旱强势表达．可能是下咽癌患者免疫功能低下、促肿瘤生长的原因之一。     

Investigation of Th1/Th2 cytokine profiles in patients with laryngo-pharyngeal, HPV-positive cancers

The aim of this study was to reveal the relationships between the features of the primary tumour, the degree of tumour stage, the presence of human papillomaviruses (HPV) in blood and the severity of Th1/Th2 serum cytokine imbalance in patients with laryngo-pharyngeal cancer. The study was performed on 50 patients (47 men and 3 women), with age ranging from 40 to 83 years (the mean of the patients’ ages was 58.4 ± 9.43 years, with a median of 60 years). A control group was represented by age-matched healthy patients (with no clinical diseases). The viral DNA was detected by PCR; the cytokine levels were determined by ELISA. A clear switch from cytokine Th1 to cytokine Th2 in cancer patients, low levels of IL-2 and IFNγ in advanced stages, as well as a positive correlation of increased levels of both IL-2 and IL-12 with the early stages of laryngo-pharyngeal cancer was observed. Loco-regional metastases were correlated with increased levels of IL-8 and IL-10 and drastic decrease of IFNγ. In advanced cancer stages, we found that the most affected were IL-2 and IFNγ correlated with increased levels of Th2 cytokines. Patients with HPV present in both primary tumours and blood showed increased values of IL-4:IL-2 ratio as compared with patients with HPV-positive primary tumours only, demonstrating the aggravation of the immunosuppressive state. The most important finding of our study is that for a correct evaluation of the Th1 to Th2 switch in cancer patients, it is necessary to establish not only the negative/positive correlations between different Th1 and Th2 type cytokines, but also the ratio between them. These parameters allowed us to state that the presence of HPV DNA in blood was associated with the most severe immunological imbalance that could potentially lead to a poor prognosis of these patients. Our findings encourage us to consider that the ratio between different Th1 and Th2 cytokines could represent a useful marker for clinical and pathological evaluation of cancer patients.     

复发性鼻息肉病人外周血Th1、Th2细胞的流式细胞分析

目的探讨T淋巴细胞活化及释放的Th1、Th2细胞因子失平衡与鼻息肉发病的关系。方法用流式细胞仪测定30例鼻息肉病人和30例健康人的外周血单个核细胞(PBMC),经PMA诱导培养后测定Th1细胞内IFN-γ和Th2细胞内IL-4的水平。结果鼻息肉组的Th2细胞(CD3 CD8-IL-4 )和Th1细胞(CD3 CD8-IFN-γ )水平显著高于正常组(P<0.05)。结论鼻息肉病人体内激活的Th细胞中,Th1细胞和Th2细胞均增高,并分泌多种细胞因子,在鼻息肉的发生发展中起到调节作用。     

滨蒿内酯对大鼠血清Th1／Th2细胞因子及IgE表达的影响

目的：观察滨蒿内酯（Scoparone,20ml／kg,浓度为168mg／L）对变应性鼻炎（AR）大鼠模型血清Th1／Th2细胞因子及IgE表达的影响,以探讨其治疗机制。方法：40只雄性SD大鼠,随机分为4组：正常对照组（NC组）、AR组、滨蒿内酯组（Sco组）和地塞米松组（Dxm组）,以卵清蛋白致敏和激发建立大鼠AR动物模型并给予相应治疗。观察AR大鼠行为学改变;组织病理学方法观察鼻黏膜改变;采用ELISA法检测血清IgE和细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-5水平。结果：Sco组行为学得分明显低于AR组,差异有统计学意义（P〈0．01）,与Dxm组和NC组比较差异无显著性（P〉0．05）。Sco组鼻黏膜炎性反应明显轻于AR组。Sco组血清IFN-γ水平明显高于AR组,而血清IgE、IL-4和IL-5水平明显低于AR组,差异有统计学意义（P〈0．01）;Sco组血清IFN-γ、IgE、IL-4、IL-5水平与Dxm组和NC组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：滨蒿内酯可通过调节Th1／Th2细胞因子的表达,抑制IgE的产生而对AR产生治疗作用。     

槲皮素对大鼠变应性鼻炎血清Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的分析槲皮素（QUE）对大鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis, AR）血清T细胞辅助因子Th1/Th2表达的影响。方法采用二异氰酸甲苯酯（TDI）制作大鼠实验性AR模型并进行评分,45只大鼠按照数字随机法平分为3组：正常对照组、模型组和实验组,正常对照组为正常大鼠,模型组和实验组大鼠进行变应性鼻炎造模。实验组利用QUE 80 mg/kg腹腔注射治疗2周,而正常对照组和模型组均注射等量生理盐水。2周后HE染色观察各组大鼠鼻黏膜组织学变化;ELISA法检测血清中细胞因子白细胞介素-2（IL 2）、干扰素-γ（IFN γ）以及IL 4、IL 5水平;实时荧光定量PCR（q PCR）检测基因Tim1、Tim3表达。结果2周后实验组评分显著低于正常对照组与模型组（P＜0.05）;ELISA检测显示模型组IL 2、IFN γ显著低于正常对照组（P＜0.05）,IL 4,IL 5显著高于正常对照组（P＜0.05）;实验组IL 2、IFN γ显著高于模型组（P＜0.05）,IL 4,IL 5显著低于模型组（P＜0.05）;q PCR检测显示实验组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显低于模型组（P＜0.05）,模型组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显高于正常对照组（P＜0.05）,实验组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显高于正常对照组（P＜0.05）。结论QUE能不同程度减轻大鼠变应性鼻炎鼻部症状,改善鼻黏膜炎症程度;通过调节Th1和Th2细胞因子表达,从而调节大鼠变应性鼻炎Th1/Th2细胞因子平衡,对变应性鼻炎具有一定保护作用。