缺氧对新生鼠脑细胞生物氧化的影响及干预治疗

目的 了解缺氧对新生鼠脑细胞生物氧化的影响。寻找有效的干预治疗方法。方法 通过新生鼠缺氧模型测定脑细胞线粒体的最大呼吸速度（ＭＲＲ）、呼吸控制比（ＲＣＲ）及ＡＴＰ合成量的变化并观察脑蛋白水解物注射液的干预治疗作用。结果 缺氧使脑细胞生物氧化障碍，ＭＲＲ、ＲＣＲ降低，ＡＴＰ合成量较对照组减少，干预治疗对代谢有一定改善作用。结论 围生期缺氧干扰了脑细胞生物氧化功能，脑蛋白水解物注射液有助于脑细胞代谢。     

灵芝孢子对2型糖尿病大鼠脑细胞线粒体Ca2+的影响

目的 观察2型糖尿病大鼠脑细胞线粒体Ca^2＋变化，从而探讨灵芝孢子对上述指标的影响。方法用链尿佐菌素复制糖尿病大鼠模型．观察灵芝孢子对糖尿病大鼠细胞线粒体Ca^2＋的影响。结果模型组脑细胞线粒体Ca^2＋显著高于正常组和灵芝组（P〈0．05），差异有统计学意义。结论Ca^2＋参与脑细胞损伤。灵芝孢子粉对糖尿病大鼠脑组织具有保护作用。     

地塞米松预处理对新生鼠缺氧缺血脑损伤的保护作用

【目的】观察地塞米松(dexamethasone,DXM)预处理对缺氧缺血新生鼠脑组织兴奋性氨基酸(excitatory amino acid,EAA)和C-fos蛋白表达的影响,探讨不同剂量DXM对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia braindamage,HIBD)的保护作用。【方法】60只新生鼠随机分为4组,假手术组,HIBD组,小剂量DXM预处理组及大剂量DXM预处理组,每组15只。所有动物均于造模后2h断头处死,应用高效毛细管电泳和免疫组化方法,分别检测假手术组、HIBD组、小剂量DXM预处理组(0.5mg/kg)及大剂量DXM预处理组(10mg/kg)的脑组织兴奋性氨基酸(谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸)含量及C-fos蛋白表达水平。【结果】HIBD组的各种EAA含量及C-fos蛋白表达均较假手术组明显升高(P<0.01);小剂量DXM预处理组的各种EAA含量及C-fos蛋白表达较HIBD组无明显变化(P>0.05);大剂量DXM预处理组EAA含量较HIBD组明显减少(P<0.01),较小剂量DXM预处理组减少(P<0.05);大剂量DXM预处理组C-fos蛋白表达较HIBD组及小剂量DXM预处理组均明显降低(P<0.01)。【结论】缺氧缺血促进脑组织EAA的释放,诱导C-fos蛋白表达;大剂量DXM预处理可能通过抑制EAA释放,降低C-fos蛋白表达而对HIBD起保护作用。     

缺氧缺血对新生鼠脑反应性功能的影响及药物干预

围产期缺氧缺血性脑损伤是国内外学者关注的焦点问题之一,其发病机理已有多方面的研究,有效的临床治疗是目前急待解决的问题。本研究应用近红外光谱测定技术（Ｎｅａｒｉｎｆｒａｒｅｄｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ,ＮＩＲＳ）观察缺氧缺血对新生鼠脑反应性功能的影响,并...     

血糖对缺氧缺血新生大鼠脑Bcl-2表达的影响

目的应用竞争性RTPCR技术,研究不同血糖浓度对缺氧缺血新生大鼠脑内的细胞凋亡抑制基因Bcl2基因表达的影响。方法将7日龄SD新生大鼠按发生缺氧缺血后的时间进行分组。结果缺氧缺血前重度高血糖组的基因表达时间较缺氧缺血组至少延迟12小时,且表达强度更甚于缺氧缺血组。缺氧缺血前低血糖组的基因表达则显著弱于缺氧缺血组。结论提示缺氧缺血前低血糖对缺氧缺血新生大鼠的脑损害作用,部分可能是通过对Bcl2基因的负向调节而实现,而缺氧缺血前重度高血糖对缺氧缺血新生大鼠的脑保护作用,部分可能是通过对Bcl2基因的正向调节而实现。     

血糖对缺氧缺血新生大鼠脑Bcl-2表达的影响

目的 应用竞争性RT-PCR技术，研究不同血糖浓度对缺氧缺血新生大鼠脑内的细胞凋亡抑制基因-Bcl-2基因表达的影响。方法 将7日龄SD新生大鼠按发生缺氧缺血后的时间进行分组。结果 缺氧缺血前重度高血糖组的基因表达时间较缺氧缺血组至少延迟12小时，且表达强度更甚于缺氧缺血组。缺氧缺血前低血糖组的基因表达则显著弱于缺氧缺血组。结论 提示缺氧缺血前低血糖对缺氧缺血新生大鼠的脑损害作用，部分可能是通过对Bcl-2基因的负向调节而实现，而缺氧缺血前重度高血糖对缺氧缺血新生大鼠的脑保护作用，部分可能是通过对Bcl-2基因的正向调节而实现。     

核转录因子c—fos和c—jun在新生鼠缺血缺氧脑细胞中的表达

目的 探讨新生鼠缺氧缺血性脑损伤中ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ表达的意义。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只分为２组,实验组１８只,对照组６只,制备脑缺氧缺血动物模型,用ＲＴ－ＰＣＲ和斑点杂交方法检测新生鼠缺氧缺血性脑损伤后ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ在神经细胞中的表达。结果 ２组ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达在不同时间段差异均有显著性（Ｐ〈０．００１）,其中７２ｈ组和９６ｈ组的表达均比２４ｈ高;缺氧缺血后２４～９６ｈ,ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ在躯体感觉皮质区,海马回ＣＡ３区和基底节区表达比对照组高,２组比较差异有显著性（Ｐ〈０．００１）;２组ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达在不同脑区差异也有显著性（Ｐ〈０．００１）,海马区与基度节区大于皮质区。结论 ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达增加不仅是脑缺氧缺血的结果,而且可能参与了对神经细胞损害过     

早期干预对缺氧缺血脑损伤新生鼠大脑皮质突触重塑的影响

目的:探讨早期干预对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠发育阶段大脑皮质突触质量影响,对干预效果进行评估。方法:取7日龄Wistar仔鼠,随机分成假手术(C)组、实验1(E1)组和实验2(E2)组,后两组制作HIBD模型。E 2组自HIBD后24 h开始到28天,在脑发育的关键时期每天2次进行丰富环境智能训练。于3组鼠术后24 h～28天分5个时间点处死取额叶皮质,常规光、电镜制样,形态学观察并对突触后膜致密区(PSD)厚度和活性区长度进行测试。结果:E 1组和E 2组造模后24 h额叶皮质出现严重损伤,主要表现为脑组织水肿、神经元及其重要细胞器严重受损,灶性神经元皱缩甚至缺失,突触前膨大膜损伤、突触小泡减少,PSD疏松、厚薄不均,PSD形态计量参数显著降低。E 2组14天后与E 1组比较脑水肿明显减轻、结构清晰,神经元结构接近C组;与E 1组比较PSD明显增厚,活性带长度有所增加。结论:早期对HIBD新生鼠实施丰富环境智能训练可促进突触重塑,有利于损伤修复和智能发育。     

N-乙酰半胱氨酸对缺氧缺血新生大鼠脑细胞间黏附分子-1及细胞凋亡的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对缺氧缺血脑损伤(HIBD)大鼠脑细胞间黏附分子-1及细胞凋亡的影响。方法7d龄SD大鼠，90只，随机分成3组，(1)假手术组(Sham)(n=30)；(2)HIBD模型组(Control)(n=30)：HIBD模型后即刻腹腔注射等量生理盐水；(3)HIBD药物组(NAC)(n=30)：HIBD模型后即刻腹腔注射N-乙酰半胱氨酸(NAC)，200mg/kg。各组大鼠于处置后6h、12h、24h、48h、7d分别采用免疫组化法和Tunel法检测脑组织中细胞间黏附分子-1(ICAM—1)和细胞凋亡数目。结果HIBD模型组脑组织中ICAM—1的表达和细胞凋亡数与假手术组和HIBD药物组相比均升高，有显著性差异。结论NAC可抑制HIBD脑细胞ICAM-1的表达及脑细胞的细胞凋亡程度，NAC对缺氧缺血新生大鼠脑损伤有保护作用。     

胞外Ca2+浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨胞外不同Ca^2＋浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的促进作用.方法对体外培养的HL-60细胞经一定剂量的32P辐射后发现加入不同浓度的Ca^2＋继续培养24、48h,流式细胞仪检测凋亡率.结果胞外Ca^2＋作用于HL-60细胞24、48h后发现对辐射诱导细胞凋亡随Ca^2＋浓度的增加细胞凋亡率增大,Ca^2＋有明显的促凋亡作用,相关性很好r24=0.9001（P=0.0145）,r48=0.9343（P=0.0063）.结论胞外不同浓度的Ca^2＋对辐射诱导HL-60细胞有明显的促进凋亡的作用.     

铅对三叉神经细胞胞内游离钙[Ca^2＋]i及电压依赖性钙通道ICa的影响

目的 观察铅对SD大鼠三叉神经细胞内游离钙的影响及其对电压依赖性钙通道作用,以探讨铅对三叉神经细胞毒性作用的机制.方法 用全细胞膜片钳方法检测铅对三叉神经细胞电压依赖性钙通道的作用,并用激光共聚焦和FLUO-3/AM荧光探针标记技术,从单个细胞水平检测铅对胞内游离Ca2 瞬间动态变化的影响.结果 铅可致三叉神经细胞内游离钙[Ca2 ]i升高,铅又可抑制三叉神经细胞电压依赖性钙通道电流ICa.结论 铅致三叉神经细胞内游离钙[Ca2 ]i升高作用与胞内钙库释放有关;铅抑制三叉神经细胞电压依赖性钙通道ICa作用与其抑制高电压激活(HVA)钙通道有关.     

降钙素基因相关肽对新生鼠HIE脑组织内皮素及脑细胞内钙的影响

【目的】研究降钙素基因相关肽(calciumgene-relatedpeptide,CGRP)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemicencephalopathy,HIE)脑组织内皮素(endothelin,ET)及脑细胞内游离钙离子(intracellularfreecal-cium,IFCa)的影响。【方法】将45只7日龄SD(Spraque-Dawley)大鼠平均分成3组:①CGRP治疗组于HIE模型后即给予CGRP3μg/(kg.d)加生理盐水(NS)2ml稀释后,腹腔内注射,共3d;②NS组于HIE模型后即给予NS2ml/d,腹腔内注射,共3d;③正常对照组(假手术组)。各组于3d后断头取脑,采用放射免疫法检测脑组织ET含量,应用钙荧光指示剂Fura-ZAM法测定IFCa。【结果】NS组ET及IFCa含量[(93.41±12.73)ng/L及(129.47±17.21)nmol/L]明显高于正常对照组[(57.58±6.31)ng/L及(93.72±24.16)nmol/L]和CGRP治疗组[(61.68±6.83)ng/L及(103.35±12.46)nmol/L](P<0.01),而CGRP治疗组ET及IFCa含量与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。【结论】CGRP能拮抗ET收缩血管的作用,改善脑循环,抑制ET的合成及释放,同时能阻止脑细胞钙内流,保护缺氧缺血性脑损伤。     

2，2'，4，4'-四溴联苯醚对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞胞内游离钙离子浓度的影响

目的 研究2,2',4,4'-四溴联苯醚（2,2',4,4'-tetrabromodiphenyl ethers,PBDE-47）对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的影响。方法 取对数生长期的SH-SY5Y细胞,分别染毒终浓度为0（溶剂对照）、1、5、10 μmol/L的PBDE-4...     

银杏叶提取物对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后Survivin表达的影响

目的观察银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,EGB)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)后缺血侧脑组织Survivin表达的影响,探讨其神经保护机制。方法健康7日龄Sprague-Dawley新生大鼠72只随机分为假手术组(n=24)、对照组(n=24)及EGB治疗组(n=24)。采用经典的Rice法制成HIBD模型,应用TUNEL法检测细胞凋亡情况,并采用免疫组织化学二步法检测Survivin表达的变化。结果与假手术组相比,对照组伤后1、3、7、14d的细胞凋亡数及Survivin表达水平均明显升高(P<0.01);与对照组相比,EGB治疗组伤后7、14d的细胞凋亡数明显降低(P<0.01),且在伤后1、3d的Survivin表达明显升高(P<0.05)。结论EGB可促进抗凋亡因子Survivin的表达而减少HIBD后的细胞凋亡,发挥神经保护作用。     

褪黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

近年来,新生儿缺氧缺血性脑病的发病率呈逐渐增加趋势,其原因大多为产妇分娩时各种原因造成的胎儿宫内窘迫、新生儿窒息所致,目前临床上除积极消除难产因素,及时给予清理呼吸道、吸氧等常规处理外,尚无有效的脑保护药物,我们自2008年1—5月进行了褪黑素（MT）对新生动物缺氧缺血性脑损伤保护作用的研究,报道如下。     

肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤Caspase-3表达的影响

目的 探讨肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)半胱天冬酶3(Caspase-3)表达的影响. 方法 健康新生7日龄SD大鼠12只,随机分为对照组(N组,n=4),左颈总动脉结扎HIBD组(H组,n=4)及肌苷治疗组(Ⅰ组,n=4),在缺氧缺血后3 d进行尼氏染色.另取120只新生7日龄SD大鼠按上述随机分组,每组40只,用Western blot方法检测各组在缺氧缺血后6 h、12 h、24 h、3 d、7 d时间点的Caspase-3表达情况. 结果尼氏染色可见肌苷治疗组能减轻脑组织的损伤.HIBD组Caspase-3在缺氧缺血后6 h开始出现裂解片段,24 h达高峰,各时间点的表达明显高于对照组,而肌苷治疗组裂解片段的表达较HIBD组减少,两者之间比较(P＜0.05). 结论肌苷治疗能够减少HIBD大鼠Caspase-3的激活,从而减轻细胞凋亡,提示肌苷通过抑制Caspase-3的活化而具有保护神经元的作用.     

新生猪HIE脑皮层细胞凋亡、钙内流及抑癌基因p53蛋白的相关性研究

【目的】　探讨新生动物缺氧缺血性脑病（ ＨＩＥ） 脑皮层细胞凋亡的发生及其相关的诱导因素。【方法】　用琼脂电泳观察“ＤＮＡ 梯带”的出现,用流式细胞术（ＦＣＭ） 对脑皮层细胞凋亡及细胞内游离钙（ＩＦＣａ） 、抑癌基因ｐ５３表达水平进行动态研究。【结果】　缺氧缺血后４ｈｒ 新生猪同侧额顶叶脑皮层细胞未见明显凋亡,７２ｈｒ 后实验组凋亡率较对照组及尼莫通治疗组明显出现（ ｎ ＝ １５ ,１２ ,１３ ;－ｘ ±ｓ＝ ２７ ．５０ ±１６ ．２ ,３ ．２３ ±２ ．９３ ,９ ．１７ ±５ ．７６ ,Ｆ＝ １８ ．７５６ ４ ,Ｐ＜ ０ ．０００ １） ;ＨＩ 后４ｈｒ ＩＦＣａ 及ｐ５３ 基因阳性表达率明显增高（ ｎ ＝ １２ ,１２ ,１２ ;－ｘ ±ｓ ＝ ３４８ ．９６ ±３９ ．５９ ,１６０ ．９８ ±３７ ．０５ ,２６０ ．１８ ±６６ ．８１ ,Ｆ＝ ４１ ．１６８ １ ,Ｐ＜ ０ ．０００ １ ;－ｘ ±ｓ ＝ ６ ．０７ ±５ ．５５ ,１ ．１８ ±０ ．５３ ,３ ．１３ ±２ ．１８ ,Ｆ＝ ６ ．０７６ ７ ,Ｐ＝ ０ ．００５ ７） ,且两者间呈显著正相关（ ｒ ＝ ０ ．４９７ ７ ,Ｐ＝ ０ ．００２） ;ＨＩ 后７２ｈｒ 凋亡率与４ｈｒ ＩＦＣａ 水平呈显著正相关（ ｒ ＝ ０      

硫酸软骨素加钙对卵巢切除大鼠骨密度和骨钙含量的影响

目的探讨硫酸软骨素加钙对卵巢切除大鼠模型骨密度和骨钙含量的影响。方法选用卵巢切除大鼠所诱发的骨质疏松模型，给予硫酸软骨素加钙治疗，同时设假手术组及模型对照组。3个月后测定大鼠骨密度、骨钙含量。结果发现假手术组和高剂量组大鼠股骨骨密度和股骨钙含量显著高于阴性对照组（P〈0．05）。结论表明硫酸软骨素加钙能增加卵巢切除大鼠的骨密度，对雌激素缺乏所诱发的骨钙丢失具有抑制作用。     

钙与大豆异黄酮的联合作用对去卵巢大鼠骨生物力学特性的影响

目的 探讨钙和大豆异黄酮的联合作用对去卵巢大鼠骨生物力学特性的影响.方法 将160只12月龄SD清洁级雌性大鼠随机分为4组,分别为假手术对照(蒸馏水)组、骨质疏松模型(蒸馏水)组、大豆异黄酮(10 mg/ml,染毒容量为3 ml/kg)组、雌激素(0.1 mg/ml,染毒容量为0.1 ml/kg)组,每组再按照加钙(1...     

A Substance P Antagonist Increases Brain Intracellular Free Magnesium Concentration after Diffuse Traumatic Brain Injury in Rats

Objective: Magnesium (Mg) deficiency has been shown to increase substance P release and induce a pro-inflammatory response that can be attenuated with the administration of a substance P-antagonist. Neurogenic inflammation has also been implicated in traumatic brain injury (TBI), a condition where brain intracellular free magnesium (Mg_f) decline is known to occur and has been correlated with functional outcome. We therefore examined whether a substance P antagonist restores brain intracellular free magnesium concentration following TBI.

Methods: Male, adult Sprague-Dawley rats were injured using the Cernak impact acceleration model of diffuse TBI. At 30 min after injury, animals were administered either 0.25 mg/kg i.v. n-acetyl tryptophan or equal volume saline. Prior to and 4 h after induction of injury, phosphorus magnetic resonance spectra were acquired using a 7-tesla magnet interfaced with a Bruker console. Mg_f was calculated from the chemical shift of the beta ATP. Before injury, Mg_f was 0.51 ± 0.05 mM (SEM).

Results: By 4 hr after injury, Mg_f had significantly declined to 0.27 ± 0.02 mM in saline treated rats. In contrast, rats treated with n-acetyl tryptophan had a Mg_f of 0.47 ± 0.06 mM at 4 h after injury, which was not significantly different from preinjury values. There were no significant differences in pH between the treatment groups.

Conclusion: It seems that any beneficial effect of a substance P antagonist on functional outcome following TBI may be related to improvement in brain Mg homeostasis induced by the compound.