基于TLR4/NF-κB通路探讨藏红花素对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用CSCD

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路研究藏红花素对局灶性脑缺血再灌注损伤(FCIR)大鼠的神经元保护作用,探讨藏红花素防治FCIR损伤可能的作用机制。方法:将128只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、藏红花素组、藏红花素+脂多糖组,每组32只。造模前7 d开始,藏红花素组通过腹腔注射藏红花素溶液;藏红花素+脂多糖组通过腹腔注射藏红花素溶液、脂多糖溶液;假手术组和模型组通过腹腔注射生理盐水。4组注射剂量均为5 mL/(kg·d),1次/d,连续干预7 d。采用线栓法复制FCIR大鼠模型。再灌注24 h后,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评价大鼠神经功能缺损状况;采用氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、干湿重法分别计算脑梗死率和脑组织含水量;采用苏木精-伊红(HE)染色法、TUNEL染色法观察皮质神经元病理学改变和凋亡状况;采用ELISA法检测脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子水平;采用Western blot法检测TLR4、核因子-κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα、Cleved Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果:(1)神经功能、脑梗死率及脑含水量:与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分、脑梗死率、脑含水量明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组mNSS评分、脑梗死率、脑含水量均明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组mNSS评分、脑梗死率、脑含水量均明显升高(P<0.05)。(2)皮质神经元病理学改变及凋亡状况:假手术组皮质神经元形态正常、结构完整;模型组皮质神经元可见排列紊乱、数量减少、空泡变性、胞浆固缩深染、核膜边界不清、炎细胞浸润等病理学改变;藏红花素组皮质神经元病理学改变明显改善。与假手术组比较,模型组皮质神经元凋亡指数明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组凋亡指数明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组凋亡指数明显升高(P<0.05)。(3)炎症因子水平:与假手术组比较,模型组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05)。(4)蛋白表达:与假手术组比较,模型组TLR4、Cleved Caspase-3相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2表达比值均明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组TLR4、Cleved Caspase-3相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2表达比值均明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组TLR4、p-NF-κB、p-IκBα相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα表达比值明显升高(P<0.05)。结论:藏红花素能够抑制FCIR大鼠炎症反应和皮质神经元凋亡,减轻皮质神经元损伤,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路活化有关。     

艾拉莫德通过TLR4/NF-κB通路抑制骨关节炎软骨细胞模型凋亡及炎症反应

目的 研究艾拉莫德对骨关节炎(OA)软骨细胞模型凋亡及炎症反应的调控作用及机制。方法 培养软骨细胞株ATDC5,采用10 ng/mL白细胞介素(IL)-1β刺激的方法建立OA软骨细胞模型,给予不同浓度(0.6、1.2、1.8 mg/L)艾拉莫德处理,转染pcDNA质粒或pcDNA-Toll样受体4(TLR4)质粒。检测细胞增殖活力(以A₄₉₀表示)、凋亡率,裂解型caspase-3(Cleaved caspase-3)、TLR4、核因子-κB(NF-κB)p-p65表达水平,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8水平。结果 模型组A₄₉₀低于对照组,凋亡率、Cleaved caspase-3、TLR4、NF-κB p-p65、TNF-α、IL-6、IL-8水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度艾拉莫德组A₄₉₀高于模型组,凋亡率、Cleaved caspase-3、TLR4、NF-κB p-p65、TNF-α、IL-6、IL-8水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05...     

p38MAPK抑制剂对钛颗粒刺激巨噬细胞分泌炎症因子的影响

目的:探讨p38MAPK抑制剂(SB203580)对外培养的RAW246.7细胞分泌炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)]的影响。方法:以体外正常培养RAW246.7细胞为A组,以0.1 mg/m L钛颗粒(Ti Ps)刺激RAW246.7细胞为B组,以10μmol/L SB203580干预的B组细胞为C组。Western blot检测p-p38MAPK蛋白表达,ELISA检测细胞分泌TNF-α,IL-6水平。结果:与A组比较,B组p-p38MAPK蛋白含量培养液上清中TNF-α、IL-6含量都明显升高(P<0.05);与B组比较,C组p-p38MAPK蛋白明显抑制(P<0.05),培养液上清中TNF-α、IL-6含量都明显下降(P<0.05);与A组比较,C组p-p38MAPK蛋白明显抑制(P<0.05),培养液上清中TNF-α、IL-6含量亦有所减少,但两组之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:Ti Ps能通过刺激RAW246.7细胞,激活p38MAPK通路,上调TNF-α、IL-6等炎症因子的表达。p38MAPK信号通路可作为抑制炎性骨溶解的新靶点,对临床上防治人工关节置换术后无菌性松动具有重要意义。     

GLP-1对糖尿病模型大鼠肾脏的抗炎及抗氧化作用及对p38MAPK通路的影响

目的研究胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对糖尿病(DM)模型大鼠肾脏的抗炎及抗氧化作用及对p38MAPK通路的影响。方法选择成年雄性SD大鼠并随机分为对照组、DM组、GLP-1组,后两组采用链脲佐菌素腹腔注射的方式建立DM模型,GLP-1组给予GLP-1腹腔注射干预、连续8周。比较三组间肾功能指标、炎症指标[核因子κB (NF-κB)、白细胞介素(IL)-1β、IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、氧化应激指标[一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)]、p38MAPK通路基因的差异。结果 DM组大鼠的血肌酐、血尿素、24 h尿蛋白水平及肾脏中NF-κB、IL-1β、IL-17、TNF-α、ROS、NO、i NOS的含量、p38MAPK、Caspase-3的表达水平明显高于对照组,肾脏中SOD、GSH-Px的含量及PPARγ的表达水平明显低于对照组; GLP-1组大鼠的血肌酐、血尿素、24 h尿蛋白水平及肾脏中NF-κB、IL-1β、IL-17、TNF-α、ROS、NO、i NOS的含量、p38MAPK、Caspase-3的表达水平明显低于DM组,肾脏中SOD、GSH-Px的含量及PPARγ的表达水平明显高于DM组。结论 GLP-1对糖尿病模型大鼠肾脏具有抗炎及抗氧化作用,且该作用与p38MAPK通路的抑制有关。     

核因子κB抑制剂PDTC对颈椎病大鼠椎间盘炎症反应的抑制作用

目的探讨核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)对颈椎病大鼠椎间盘炎症反应的抑制作用。方法构建动静力失衡性颈椎病大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组,PDTC低、中、高剂量组,另外设立假手术组(仅切开颈部皮肤),每组大鼠10只,PDTC低、中、高剂量组大鼠每天分别腹腔注射50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg PDTC,假手术组及模型组腹腔注射等量生理盐水,连续28 d。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠椎间盘组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β)及IL-6含量,Realtime PCR检测TNF-α,IL-1β及IL-6 mRNA表达,Western blot检测各组大鼠椎间盘组织中NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达。结果与假手术组比较,模型组中大鼠椎间盘组织中TNF-α,IL-1β及IL-6 mRNA及蛋白含量提高(P <0. 05),p-NF-κB p65、p-IκBα表达量上调(P <0. 05)。与模型组比较,PDTC低、中、高剂量组大鼠椎间盘组织中TNF-α,IL-1β及IL-6 mRNA及蛋白含量降低(P <0. 05),p-NF-κB p65、p-IκBα表达量下调(P <0. 05),并呈剂量依赖性。结论 PDTC能显著地抑制颈椎病大鼠椎间盘炎症反应,并其作用呈剂量依赖性。     

变应性鼻炎患者中MAPK和NF-κB信号通路的表达变化

目的探讨变应性鼻炎(AR)患者中促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)和核转录因子(NF-κB)信号通路的表达及变化。方法采用酶联免疫吸附试验检测AR患者(试验组)和健康体检者(对照组)血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-Iβ、IL-4、p38MAPK和NF-κB的表达。结果与对照组相比,试验组中TNF-α、IL-Iβ、IL-4、p38MAPK和NF-κB的表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 AR患者血清中TNF-α、IL-Iβ、IL-4、p38MAPK和NF-κB呈过度表达状态;检测患者血清中的相关细胞因子,NF-κB有利于了解患者过敏状态并协助AR的诊断。     

粉防己碱对高脂饮食兔血清白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α及血管壁细胞核因子-κB表达的影响

目的观察中药粉防己碱对高脂饮食兔血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血管壁细胞核因子-κB表达的影响,进一步探讨粉防己碱抗动脉粥样硬化的机制。方法将18只雄性日本大耳白兔随机分为正常对照组(普通饲料)、高脂模型组(高脂饲料)和粉防己碱组(高脂饲料+粉防己碱)。喂养12周后处死动物,放射免疫法检测血清IL-1β,TNF-α含量;采用逆转录聚合酶链式反应对血管壁细胞核因子-κBmRNA表达定量分析;Western杂交定量分析血管壁细胞核因子-κBp65蛋白亚基。结果高脂模型组血清IL-1β,TNF-α显著高于正常对照组和粉防己碱组(P<0.05),正常对照组和粉防己碱组差异无显著性意义(P>0.05);高脂模型组(1.414±0.106)NF-κBmRNA显著高于正常对照组(0.085±0.062)和粉防己碱组(0.453±0.034),而高脂模型组NF-κB蛋白亚基p65(10.08±5.75)显著低于正常对照组(35.90±3.07)和粉防己碱组(35.91±4.38)(P<0.001)。结论粉防己碱有抑制炎症因子IL-1β,TNF-α合成和分泌的作用;高血脂激活NF-κB,p65易位入胞核促进转录而降解,而粉防己碱对其有抑制作用,这可能是粉防己碱抗AS作用的机制。     

IRAK4基因对高糖诱导的心肌细胞炎症因子分泌及凋亡的影响

目的探讨沉默白细胞介素1受体相关激酶4(IRAK4)基因对高糖诱导的心肌细胞炎症因子分泌及凋亡的影响。方法分别将siRNA阴性对照和siRNA IRAK4转染H9C2心肌细胞,并进行高糖干预。实验分为正常对照组(采用含5. 5 mmol/L D-葡糖糖的正常培养基培养细胞)、高糖对照组(正常培养基培养24 h后更换为含33 mmol/L D-葡糖糖的高糖培养基培养72 h)、高糖+siRNA-NC组(转染siRNA阴性对照24 h后更换为高糖培养基)、高糖+siRNA-IRAK4组(转染siRNA IRAK4 24 h后更换为高糖培养基)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的活力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中IRAK4蛋白、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、核转录因子κB(NF-κB)蛋白水平。结果与正常对照组相比,高糖条件显著上调心肌细胞中IRAK4蛋白(P 0. 05),抑制细胞的活力、促进其凋亡(P 0. 05),提高炎症因子IL-6、TNF-α水平(P 0. 05),上调p-p38MAPK、NF-κB蛋白水平(P 0. 05);沉默高糖诱导的心肌细胞中IRAK4的表达量显著提高心肌细胞活力(P 0. 05)、降低其凋亡率(P 0. 05),抑制炎症因子IL-6、TNF-α水平(P 0. 05),下调p-p38MAPK、NF-κB蛋白水平(P 0. 05)。结论沉默IRAK4显著抑制高糖诱导的心肌细胞的凋亡,提高细胞的活力,可能通过调节p38MAPK、NF-κB活性及其下游炎症介质的表达调控。     

罗格列酮对兔二次打击多器官功能障碍综合征的保护作用

[目的]探讨在兔二次打击多器官功能障碍综合征(MODS)动物模型中PPAR-γ、NF-κB、TNF-α、IL-10的表达,血气及生化指标的变化以及罗格列酮及GW9662对其的影响.[方法]在失血性损伤的基础上以脂多糖(LPS)腹腔注射作为二次打击制备兔MODS模型,使用PPAR-γ的激动剂罗格列酮和拮抗剂GW9662进行干预,测定24 h后PPAR-γ、NF-κB、TNF-α、IL-10在肝脏中的表达以及血气及生化指标的变化.[结果]T-H组与D-H-S组较之sham组中PPAR-γmRNA的表达下降,具有显著差异性(P<0.05).在D-H组中,罗格列酮亚组较空白组明显升高,具有显著差异性(P<0.05).GW9662亚组较之罗格列酮亚组明显下降,具有显著差异性(P<0.05).在T-H组较之于sham组,NF-κB、TNF-α的含量增加且具有显著性(P<0.05),IL-10与sham组没有显著性差异(P>0.05).在D-H-S组中NF-κB、TNF-α的含量较T-H组明显增加(P<0.05),IL-10较sham组明显升高(P<0.05),与T-H组相比没有明显差异(P>0.05).在D-H-R组,NF-κB、TNF-α的含量较D-H-S组明显减少(P<0.05),IL-10的含量较D-H-S组明显增加(P<0.05).在D-H-G组NF-κB、TNF-α的含量较D-H-R组明显增加(P<0.05),IL-10的含量较D-H-R组明显减少(P<0.05).在未使用PPAR-γ激动剂或拮抗剂的情况下,T-H组中血气及生化指标较之sham组均没有明显改变,在D-H组中血气及生化指标较之sham组及T-H组均明显升高(P<0.05).在D-H组中罗格列酮组较空白组血气及生化指标明显下降(P<0.05),GW9662组较罗格列酮组血气及生化指标明显升高(P<0.05).[结论]PPAR-γ的激动剂罗格列酮能够改善兔二次打击MODS模型的器官功能.     

参芪地黄汤对系膜增生性肾小球肾炎大鼠的作用及对p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的]探讨参芪地黄汤对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠的保护作用及对38丝裂原激活蛋白激酶/核转录固子Kappa B(p38MAPK/NF-xB)通路的影响。【方法】将40只大鼠随机分为假手术组、模型组及参芪地黄汤低剂量组和高剂量组,每组10只,采用胃肠道综合免疫法建立MsPGN大鼠模型(假手术组大鼠麻醉后仅暴露左肾,其余操作同模型组),其中参芪地黄汤低剂量组、高剂量组大鼠于模型建立成功后分别给予参芪地黄汤生药量(1.4 mg/mL、2.8 mg/mL溶液)10 mL/(kg·d)灌胃给药(连续4周),假手术组、模型组大鼠同时问灌胃等量生理盐水,检测各组尿液中的24 h尿蛋白及血尿素氮、血肌酐含量。ELISA法检测各组大鼠肾脏组织中白介素-8(IL-8)、肿癌环死因子α(TNF-α)水平;免疫印法检测各组大鼠肾脏组织中p38MAPK/NF-xB通路蛋白(p38MAPK、P-p38MAPK、NF-xB p65)水平,【结果】与假手术组比较,模型组及低剂量组、高剂量组大鼠24 h尿蛋白、尿素氮、血肌酐水平及肾组织中IL-8、TNF-α水平、P-p38MAPK/p38MAPK、NF-kB p65蛋白水平均升高(P<0.05);与模型组比较,低剂量组、高剂量组大鼠24 h尿蛋白、尿素氮、血肌酐水平及肾组织中IL-8、TNF-α水平、P-p38MAPK/p38MAPK、NF-xB p65蛋白水平均降低(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组大鼠各指标水平均降低(P<0.05)。【结论】参芪地黄汤对MsPGN大鼠有保护作用,可能是通过抑制p38MAPK/NF-kB通路活化,进而抑制肾脏组织炎症反应实现。     

血必净注射液对复苏后大鼠细胞因子和p38丝裂素活化蛋白激酶通路的影响

目的 探讨窒息致心搏骤停(CA)心肺复苏(CPR)后大鼠心、脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)的变化及血必净注射液的影响.方法 采用呼气末夹闭气管窒息法建立大鼠CA模型后进行CPR.将50只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及小、中、大剂量血必净治疗组(血必净注射液浓度分别为5.0、7.5、15.0 ml/kg)5组.复苏24 h后处死大鼠,取心、脑组织标本,电镜下观察心、脑组织的病理改变;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测心、脑组织中TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量.结果 组织病理观察显示,心、脑细胞超微结构出现损伤性改变,以模型组最重,大剂量血必净组最轻.模型组心、脑组织中TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量较对照组明显升高(均P<0.01);血必净治疗组心、脑TNF-α、IL-1β、p38MAPK含量较模型组明显下降,其中大剂量组较小剂量组下降更明显(均P<0.05).结论 CA复苏后大鼠心、脑组织内TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量增多;血必净注射液可明显调节心、脑组织中的TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量,而且存在明显量-效关系,从而缓解CA大鼠复苏中缺氧及再灌注后炎症因子所带来的损伤.     

消退素D1对非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠背根神经节炎症的作用

目的:研究消退素D1(Resolvin D1,Rv D1)对非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)炎症的影响及内在机制。方法:选取30只雄性大鼠建立非压迫性腰椎间盘突出症模型。随机分为假手术组、模型组、Rv D1组(100 ng)。术后连续3天模型组和Rv D1组分别鞘内注射10μl磷酸盐缓冲液、Rv D1。于术前1天及术后连续7天检测各组大鼠术侧50%缩足阈值(50%paw withdrawal threshold,PWT)。术后第7天,酶联免疫吸附测定术侧L5 DRG中TNF-α和IL-1β的蛋白表达量,免疫组化法检测DRG中p-ERK及NF-κB/p65的阳性表达。结果:术后各时间点,模型组大鼠50%PWT较假手术组明显降低(P<0.01);TNF-α和IL-1β表达明显升高(P<0.01);p-ERK、NF-κB/p65蛋白水平明显升高(P<0.01)。术后第2~7天,Rv D1组与模型组相比,50%PWT显著升高(P<0.05);TNF-α和IL-1β的蛋白表达明显降低(P<0.01);p-ERK及NF-κB/p65蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论:Rv D1促进背根神经节炎症的消退,可能与调节炎症介质TNF-α和IL-1β的表达及ERK和NF-κB/p65通路活性有关。     

紫檀芪对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子分泌的影响

目的:研究紫檀芪(pterostilbene,PTE)对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导巨噬细胞炎症因子分泌的影响及可能机制。方法:采用MTT法检测PTE对巨噬细胞RAW264.7活性的影响;先用不同浓度的PTE预处理RAW264.7,后用PA处理,ELISA法检测巨噬细胞培养上清液中炎症因子IL-18、IL-1β和TNF-α水平,采用蛋白质印迹法检测巨噬细胞中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、半胱天冬酶1(caspase-1)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65的表达。结果:与对照组比较,0～200 μmol/L浓度的PTE对巨噬细胞的活力无影响。50 μmol/L和100 μmol/L的PTE可显著抑制PA诱导的巨噬细胞炎症因子IL-18、IL-1β和TNF-α水平的升高,降低PA诱导巨噬细胞中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达的升高。PTE可减少PA诱导胞质中p-IKK和p-NF-κB p65表达的升高,以及IκBα表达的降低。PTE还可降低PA诱导的p-NF-κB p65的核转位。结论:PTE可抑制PA诱导巨噬细胞炎症因子表达的升高,其机制可能与其抑制炎症小体活化的通路有关。     

槐角黄酮调控miR-199a-3p/p38MAPK/NF-κB对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌的影响

目的 探讨槐角黄酮对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌的影响。方法 将乳腺癌细胞BT549分为正常对照(NC)组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、miR-NC组、miR-199a-3p组、高剂量+anti-miR-NC组、高剂量+anti-miR-199a-3p组。采用CCK-8、克隆形成实验评估细胞增殖;采用Transwell法评估细胞迁移和侵袭。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-199a-3p表达。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及白细胞介素-1β(IL-1β)水平。采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测p-p38MAPK和p-p65蛋白表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,miR-199a-3p表达升高,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-199a-3p组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,细胞...     

消退素D1对突出髓核所致根性神经痛的影响

目的研究消退素D1对突出髓核所致根性神经痛的影响及内在机制。 方法选取56只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，按照随机数字表法分为假手术组、模型组、消退素D1 10ng组、消退素D1 100ng组，每组14只，建立非压迫性椎间盘突出症模型。术后1d、2d、3d，假手术组和模型组分别注射磷酸盐缓冲液（PBS）10μl，消退素D1 10ng组和消退素D1 100ng组分别注射含有消退素D1 10ng和100ng的PBS 10μl。于术前1d及术后连续7d分别检测各组大鼠术侧后肢50%缩足阈值（PWT）。术后7d，取大鼠脊髓组织经酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）和白介素10（IL-10）的蛋白表达量，采用蛋白质印记Western blot法检测脊髓组织中细胞外信号调节激酶（ERK）核转录因子NF-κB/p65（NF-κB/p65）的含量变化。 结果术后1d至7d，模型组大鼠50% PWT较假手术组明显降低（P<0.05）；术后3d、4d、5d、6d、7d，消退素10ng组与模型组比较，50% PWT显著升高（P<0.05）；术后2d、3d、4d、5d、6d、7d，消退素100ng组与模型组比较，50% PWT显著升高（P<0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平明显升高（P<0.05），IL-10的表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组比较，消退素10ng组和消退素100ng组的TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平明显降低（P<0.05），IL-10的表达水平明显升高（P<0.05），且消退素100ng组的蛋白含量下降更显著（P<0.05）。与假手术组比较，模型组p-ERK、NF-κB/p65蛋白水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，消退素10ng组和消退素100ng组p-ERK及NF-κB/p65蛋白水平明显降低（P<0.05），且消退素100ng组降低的更明显（P<0.05）。 结论消退素D1通过调节炎症介质表达及p-ERK和NF-κB/p65通路的活性，促进神经根炎症的消退，为治疗腰椎间盘突出症提供了新的思路。     

蒽贝素对家兔心脏骤停模型中心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨蒽贝素对家兔心脏骤停模型中心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 30只成年雄性新西兰大白兔随机分为3组:假手术(Sham)组,CPR组和蒽贝素组。检测促炎因子(TNF-α,IL-1β及IL-6),核因子-κB(NF-κB)p65的表达水平,心脏肌钙蛋白(c Tn I),监测血流动力学、检测心肌坏死率、细胞凋亡指数(AI)以及组织学损伤程度。结果较Sham组,CPR组与蒽贝素组TNF-α,IL-1β及IL-6的表达水平均提高(P均<0.05)。较CPR组,蒽贝素组有效地下调了TNF-α,IL-1β及IL-6的表达水平(P<0.05),并下调了血清c Tn I表达水平,降低坏死率与细胞凋亡指数,下调了NF-κB p65表达水平(P<0.05)。同时,蒽贝素改善了血流动力学,心肌功能以及心肌形态。结论蒽贝素通过其抗炎作用有效的改善心脏骤停后心肌缺血再灌注损伤,从而起到保护心脏的作用。     

p38丝裂素活化蛋白激酶/核转录因子-κB转导通路在脓毒症所致内皮细胞凝血功能障碍中的作用

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶/核转录因子-κB(p38MAPK/NF-κB)是否参与了脓毒症所致的内皮细胞凝血功能障碍.方法 选取22例脓毒症患者血浆刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),以8名健康人血浆刺激HUVEC 60 min作为阴性对照,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为阳性对照.用酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)、免疫荧光法检测p38MAPK和NF-κB的磷酸化.结果 脓毒症患者血浆TNF-α水平(ng/L)明显高于健康对照者(155.68±89.74比5.00±0.47,P<0.01).与20%的健康人血浆比较,用20%的脓毒症患者血浆刺激HUVEC后,组织因子(TF,μg/L)于180 min时达高峰(5.87±0.14比1.25±0.11,P<0.01),血管性血友病因子(vWF,μg/L)于120 min达到高峰(9.59±0.07比3.59±0.06,P<0.01)并随后下降.用20%的脓毒症患者血浆刺激HUVEC后p38MAPK和NF-κB发生活化,p38MAPK的活化早于NF-κB(2 min比5 min);加入p38MAPK特异性抑制剂SB239063后,NF-κB的磷酸化和核移位受阻.结论 p38MAPK/NF-κB转导通路在脓毒症引起的凝血功能障碍中具有一定的作用.     

黄芩素靶向p38 MAPK通路抗肺纤维化的作用机制研究

目的:探讨黄芩素(baicalein)抗肺纤维化(PF)的疗效,并通过测定p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化程度,探讨其可能的作用机制。方法:6周龄健康SD雄性大鼠96只,随机分为正常对照组(C组)、肺纤维化模型组(M组)、p38 MAPK抑制剂SB 203580组(S组)和黄芩素组(B组),每组24只。造模或治疗后利用ELISA法检测血浆中促炎细胞因子高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1(CINC-1)的水平;比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;Real-time PCR法观察结肠组织p38及p-p38基因表达水平。结果:M组大鼠血浆HMGB1、CINC-1均明显升高(P0.01),肺组织MPO活性升高(P0.01),p38磷酸化程度显著升高(P0.05);与M组比较,S组和B组大鼠血浆HMGB1、CINC-1均明显降低(P0.01),肺组织MPO活性下降(P0.01),p38磷酸化程度显著下调(P0.05)。结论:黄芩素减轻博来霉素(BLM)诱导的大鼠肺纤维化,其作用机制可能与抑制p38 MAPK信号通路有关。     

党参多糖通过调控MAPK/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠肺组织的保护作用

目的 观察党参多糖对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠肺组织的保护作用,并探讨其作用机制。方法 50只雄性昆明小鼠随机分为对照组,模型组,地塞米松组,党参多糖高剂量组（300 mg/kg）和党参多糖低剂量组（150 mg/kg）5个组。采用腹腔注射LPS法建立ALI小鼠模型。除对照组外,其余小鼠均根据分组给予灌胃给药。多参数肺功能检测系统检测小鼠0.3 s用力呼气量（FEV0.3）和用力肺活量（FVC）及其比值,苏木精-伊红（HE）染色法检测小鼠肺组织病理学变化,瑞氏-吉姆萨染色法检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞分类和计数,ELISA法检测BALF中IL-1β、IL-6、髓过氧化物酶（MPO）、TNF-α水平,Western blot法检测p-p38、p-IκB-α、p-p65蛋白表达量。结果 与对照组比较,模型组小鼠出现了明显的肺病理损伤,FEV 0.3、FVC、FEV0.3/FVC检测值显著降低,肺组织湿质量/干质量（W/D）、BALF中性粒细胞、淋巴细胞、IL-1β、IL-6、MPO、TNF-α水平、p-p38 MAPK、p-IκB-α、p-p65蛋白表达显著...     

脂质体介导的p65反义寡核苷酸对大鼠急性出血坏死性胰腺炎的作用

目的探讨脂质体介导的p65反义寡核苷酸(ASODN)对大鼠急性出血坏死性胰腺炎(ANP)的作用。方法72只大鼠随机分成假手术组、胰腺炎组、脂质体组、ASODN组(20OD ml)、ASODN+脂质体组、随机ODN组,观察各组大鼠术后6h及12h胰腺病理、血清淀粉酶、血清IL-1、TNF-α、胰腺组织核转录因子(NF-κB)活性的变化。结果同假手术组相比,各处理组的血清淀粉酶活性、IL-1、TNF-α水平、胰腺组织NFκB活性明显升高(P<0.01),但各处理组间的血清淀粉酶活性差异无显著性。同胰腺炎组相比,脂质体组和随机ODN组的胰腺病理评分、血清IL-1、TNF-α、胰腺组织NFκB活性的差异有显著性(P<0.05),而ASODN组和ASODN+脂质体组的胰腺病理评分、血清IL-1、TNF-α、胰腺组织NFκB活性下降(P<0.05),其中ASODN+脂质体组下降更为明显。结论脂质体介导的p65反义寡核苷酸可明显抑制ANP大鼠的血清致炎性细胞因子的表达,改善胰腺病理,提示NF-κB在急性胰腺炎(AP)的发病机制中起关键性调控作用,其p65ASODN可应用于AP的治疗。