登革热病毒感染后NS1抗原检测的应用评价

目的通过使用不同的检测方法及检测试剂,评价本地区登革热病毒感染后NS1抗原检测的应用价值。方法收集2014年-2015年确诊的登革热阳性病例血清标本127例及相应的对照样本155例,同时采用酶联免疫及real-time RT-PCR法,针对登革热病毒NS1抗原、Ig M抗体和核酸3种靶标进行检测,判断NS1抗原检测的价值。结果登革热病毒感染早期(5 d),核酸检测及抗原检测阳性率高于抗体检测,差异有统计学意义(χ2=77.537,P=0.000)。急性期过后(≥10 d)抗体检测阳性率较高,差异有统计学意义(χ2=14.797,P=0.002)。进口Panbio Dengue Early ELISA(Pan-E)试剂特异性(100.00%)高于国产试剂(92.30%),同时国产试剂敏感性(86.61%)高于进口Pan-E试剂(83.46%)。结论本地区登革热病毒感染后NS1抗原检测具有较高的敏感性和特异性,相对抗体检测可以有效提前诊断时间,2种方法的联合应用可以提高阳性检出率。     

中国首例黄热病输入病例的实验室检测

目的通过实验室检测发现并确诊中国首例输入性黄热病病例。方法利用ELISA法检测1例疑似登革热病例样本中登革病毒NS1抗原,采用实时荧光RT-PCR法检测样本中黄热病、登革热与寨卡等几种病毒的核酸。结果ELISA法检测登革病毒NS1抗原阴性,实时荧光RT-PCR法检测该病例样本中登革热与寨卡病毒核酸阴性,黄热病毒核酸阳性。结论该病例为全国首例输入性黄热病实验室确诊病例。     

ELISA法筛检献血者抗-HIV调查结果分析

目的:筛检献血者抗-HIV,避免经输血感染.方法:用ELISA法筛检献血者,对结果进行分析.结果:35 627例献血者用ELISA法筛检出25例阳性,经确认实验1例阳性,为HIV1 型.结论:献血者已有HIV感染,需引起注意,制定措施.     

2014年广东省登革热流行期间实验室诊断评价

目的本研究旨在评估登革热NS1抗原、病毒RNA和IgM抗体检测在登革热病毒感染早期实验室诊断中的应用。方法 2014年6—11月,连续采集广东省疑似登革热患者432份血清样本,所有样本同时进行了4项商用诊断试验,包括NS1快速诊断试验(RDT)、NS1酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量RT-PCR(qRT-PCR)试验和IgM/IgG ELISA试验。结果 361例(83.6%)样本被检出登革病毒NS1抗原或病毒RNA或IgM抗体阳性,其中317例(87.8%)和43例(11.9%)为原发性和继发性登革热病例。NS1抗原总阳性率最高(358份,82.9%),其次是病毒RNA(268份,74.3%)和IgM抗体(179份,49.5%)。在采集标本时,本研究观察到疾病早期NS1抗原和病毒RNA呈阳性、而IgM抗体是逐渐出现阳性的时间变化。NS1 RDT(97.0%)和NS1 ELISA试验(98.6%)对急性期和急性后期标本的敏感性均显著高于qRT-PCR(88.9%)和IgM-ELISA(59.3%)试验(P 0.01)。NS1 RDT和NS1ELISA的检测结果相似,具有较好的一致性(κ=0.363,P 0.001),qRT-PCR对急性期标本的敏感性高于IgM-ELISA(P 0.01)。结论在以原发性感染为主的非登革热疫区国家,应重视高灵敏度的NS1抗原检测。病毒RNA检测对登革热早期诊断仍有价值,而IgM抗体检测最适合作为第5天或第5天以上患者的辅助诊断方法。为了从诊断角度及时做出适当的疫情反应,迫切需要这些信息和进一步的调查。     

河北省1例输入性登革热病例的病毒分离及其分子特征分析

目的从疑似登革热病例血清中分离病毒,获取全基因组数据并分析分子进化特征。方法采集河北省1例由柬埔寨输入的登革热疑似病例的血清样本,用胶体金法检测登革病毒IgM和IgG抗体以及NS1抗原;利用Vero E6细胞从血清中分离登革病毒,并采用Real-time PCR对病毒进行分型;扩增病毒全基因片段,将序列与国内外分离株序列进行比对,构建系统发生树。结果胶体金检测显示该病例血清登革病毒IgM、IgG抗体和NS1抗原均为阳性,从早期血清中分离到登革病毒,鉴定为I型登革病毒,分子进化分析揭示该分离株与东南亚地区毒株最为相似,病毒全基因组和E基因核苷酸序列同源性最高达99.99%,而与近年国内其他地区分离株进化关系较远。结论国内登革热的防控依旧需要加强输入性病例的监测。     

四种登革热检测方法的应用比较分析

目的比较登革热尿液核酸检测(Urine RT-PCR)、NS1抗原检测(NS1 ELISA)、血清核酸检测(Serum RT-PCR)和血清IgM抗体检测(IgM ELISA)等4种方法在登革热疑似病例中的检测效果。方法收集2019年北海市93例疑似登革热病例的尿液和血清标本,采用4种方法分别检测登革病毒核酸、NSl抗原和IgM抗体等,分析比较各方法的检出情况。结果4种检测方法中阳性率最高者为Urine RT-PCR (70.97%),最低者为IgM ELISA (48.39%);4种方法的阳性率差异有统计学意义(χ2=10.69,P0.05)。Urine RT-CR与NS1 ELISA的一致率最高(92.47%),Kappa值为0.830。将疑似病例按病程分为早期(1～5天)和中晚期(6～16天) 2组;Urine RT-PCR法在病程1～16天均能检出,Serum RT-PCR和NS1 ELISA法检出性者的病程为1～9天,IgM ELISA法为2～16天;病程早期Urine RT-PCR和NS1 ELISA的阳性率最高,均为64.71%;病程中晚期Urine RT-PCR和IgM ELISA的阳性率最高,均为88.00%;同一病程分组4种方法的阳性率差异均有统计学意义。结论 Urine RT-PCR法的检测能力要优于其他3种方法,有条件的实验室可将该法用于登革病毒日常检测。     

早期检测新生儿乙型肝炎病毒Pre-S1抗原的价值

目的探讨新生儿血清中乙型肝炎病毒Pre-S1抗原（Pre-S1Ag）表达与新生儿感染的相关性。方法选取HBsAg阳性母亲所生的165例新生儿作为研究对象,新生儿于出生后24 h内、1月龄检测外周血乙型肝炎病毒Pre-S1Ag、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等两项指标。结果新生儿出生24 h Pre-S1Ag和HBsAg阳性率分别为8.48%（14/165）、11.52%（19/165）,1月龄为6.06%（10/165）、6.67%（11/165）。结论新生儿24 h血Pre-S1Ag阳性可作为HBV新生儿感染的筛检指标,新生儿30 d血Pre-S1Ag阳性可作为HBV新生儿感染的确认指标。     

海沧区1例输入性登革热的调查处理

目的分析1例登革热疑似病例发病原因,为类似事件处理提供依据。方法根据患者来自登革热疫区（安哥拉）,采集其血清进行检测抗体。结果患者急性期血清IgM和IgG均阴性,NS1抗原阳性;恢复期血清IgM和IgG均阳性。根据患者来自疫区,结合临床症状体征及实验室检测结果,确定为感染后输入性登革热确诊病例。经采取综合防治措施,未出现二代病例。结论海沧区输入性登革热引起流行的风险大,应采取有效防控措施。     

浙江口岸首次发现入境登革热的实验室诊断

目的确证杭州机场截获发热患者为登革热,为口岸卫生检疫提供技术支持。方法分离患者血清,用ELISA试剂盒检测登革热Ig M抗体;同时提取血清中的病毒核酸,采用登革热通用型实时荧光RT-PCR、RT-LAMP及RTPCR法进行检测,并进行核酸分型检测,同时对RT-PCR的扩增产物进行测序分析。将测序结果与Gen Bank中的其他国家或地区的登革1型病毒株进行比对,分析该病毒的来源。结果血清学检测登革热Ig M抗体为阳性,登革1型病毒RT-LAMP检测结果为阳性,经序列分析该病毒株与印度株(JN940920.1)最为接近,同源性最高,达到97%。结论杭州机场截获的输入性发热患者确证为登革1型病毒感染,该患者为浙江口岸首次发现的输入性登革热。     

2种不同方法登革热NS1抗原检测试剂盒的性能评价

目的评价登革热NS1抗原检测试剂盒酶联免疫吸附法(北京万泰生物药业股份有限公司)和登革热NS1抗原检测试剂盒胶体金法(北京健乃喜生物技术有限公司)的性能。方法以荧光RT-PCR方法检测登革病毒核酸作为对照组,分别用酶联免疫吸附法、胶体金法NS1抗原试剂盒对已知核酸阳性和阴性血清进行检测,比较2种方法的灵敏度和特异性,并进行配对资料的χ~2检验分析。结果检测53份已知登革核酸阳性血清,阳性符合率分别为88.68%、83.02%;酶联免疫吸附法试剂盒检测已知阴性血清93份,均为阴性,阴性符合率为100%;胶体金法试剂盒检测已知阴性血清83份,82份阴性,阴性符合率为98.80%。2种试剂盒检测结果差异无统计学意义(χ~2=1.33,P0.05)。结论酶联免疫吸附法试剂盒能够用于大量样品的筛查,而胶体金法试剂盒则有耗时少、耗材少等优势,在医院对登革热的早期检测起重要作用。