CK20mRNA在腹腔镜结直肠癌根治术后对肿瘤细胞血循环微转移的影响

目的：探讨血清CK20mRNA与结直肠癌组织学、TNM分期的关系以及腹腔镜结直肠癌根治术后对肿瘤细胞血循环微转移的影响及其临床意义．方法：应用FQ-PCR方法检测20例健康成人（对照组）及55例结直肠癌患者（实验组）,不同术式、手术前、后外周静脉血CK20mRNA的表达;分析血清CK20mRNA与肿瘤组织分化、TNM分期的关系．比较24例腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术患者和31例传统开腹根治术患者外周静脉血CK20mRNA的表达．结果：对照组外周静脉血CK20mRNA阳性表达率为0;CK20mRNA阳性率（0．75）明显高于高、中分化腺癌组（0．23）（P〈0．05）．TNM分期Ⅲ期结直肠癌组外周静脉血CK20mRNA阳性表达率（0．43）显著高于Ⅰ期Ⅱ期患者（0．22）（P〈0．05）．腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术愚者CK20mRNA阳性率术前（0．29）,术后（0．38）,与开腹组相比较差异均无统计学意义．结论：结直肠癌患者外周静脉血CK20mRNA水平与肿瘤分化、TNM分期有关;腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术与传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20mRNA的阳性率和术后肿瘤血循环微转移的危险性．     

FQ-PCR法检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周血CK20 mRNA变化

目的检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周静脉血CK20 mRNA的表达,探讨腹腔镜结直肠癌根治术对术后肿瘤细胞血循环微转移的影响。方法应用FQ-PCR方法检测24例行腹腔镜辅助下结直肠癌根治术患者（腹腔镜组）和31例传统开腹结直肠癌根治术患者（开腹组）外周静脉血CK20 mRNA表达的变化。结果腹腔镜组CK20 mRNA术前阳性率为29.17%（7/24）,术后阳性率为37.50%（9/24）,两者之间无显著性差异（P〉0.05）;腹腔镜组和开腹组手术前后比较,也无显著差异（P〉0.05）。结论腹腔镜结直肠癌根治术和传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20 mRNA的阳性率,即不增加术后肿瘤血循环微转移的危险性。     

腹腔镜结直肠癌根治术对血循环微转移影响的研究

目的 检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周静脉血肿瘤标志物细胞角蛋白20(CK20) mRNA的表达,探讨腹腔镜结直肠癌根治术对术后肿瘤细胞血循环微转移的影响及临床意义.方法 应用FQ-PCR方法检测24例行腹腔镜辅助下结直肠癌根治术和31例传统开腹结直肠癌根治术患者外周静脉血的CK20 mRNA,并用免疫组化(IHC)SP法测定术后组织标本的CK20和CD44 v6的表达水平.结果 TNM分期Ⅲ期结直肠癌患者外周静脉血的CK20 mRNA阳性表达率显著高于Ⅰ期+Ⅱ期患者(P<0.05).腹腔镜辅助下结直肠癌根治术患者CK20手术开始时阳性率为29.16%(7/24),手术结束时阳性率为37.50%(9/24),两组之间差异无统计学意义(P>0.05),手术前后和开腹组比较,差异无统计学意义(P>0.05).CK20 mRNA阳性表达患者结直肠癌组织中CK20(57.14%)和CD44 v6(71.43%)阳性表达率明显高于CK20 mRNA阴性表达患者的CK20(35.29%)和CD44 v6(47.06 %)阳性表达率(P<0.05).结论 结直肠癌患者外周静脉血CK20 mRNA的水平和组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关,腹腔镜结直肠癌根治术和传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20 mRNA的阳性率,不增加术后肿瘤血行微转移的危险性.     

腹腔镜和开腹结直肠癌根治手术患者外周血中CK20mRNA的表达及意义

目的研究结直肠癌患者外周血角蛋白20(cytokeratin20,CK20)mRNA的变化,探讨腹腔镜在结直肠癌手术治疗中的应用价值。方法采用反转录-聚合酶链(RT-PCR)法检测37例行根治手术治疗的结直肠癌患者和8例非恶性病变腹部手术患者的外周血CK20mRNA的表达。结果8例良性病变腹部手术患者外周血CK20mRNA无明显表达。37例结直肠癌患者总的CK20mRNA阳性表达率为39.6%(44/111),且术前、术中和术后CK20mRNA的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。16例开腹手术组和21例腹腔镜组术前、术中、术后相比,各组间CK20mRNA阳性表达率差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论开腹手术和腹腔镜手术2种手术方式对CK20mRNA在结直肠癌患者的外周血中的表达差异无统计学意义。     

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血微转移中的表达

目的检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法采用RT—PCR技术检测32例大肠癌患者、11例肠道良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA定性和半定量表达。结果（1）CK20 mRNA在大肠癌患者中的阳性率为50．00％,相对系数为（0．89±0．17）;在肠道良性病变患者中阳性率为9．09％,相对系数为0．11;在健康体检者中阳性率及相对系数均为0。大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20 mRNA明显增高（P〈0．05）。（2）CK20 mRNA阳性率和相对系数在不同临床分期、远处转移中差异有统计学意义（P〈0．05）;其阳性率在浸润深度、淋巴结转移中无统计学意义,但相对系数有统计学意义（P〈0．05）。阳性者生存率低于阴性者（P〈0．05）。（3）CK20 mRNA与癌胚抗原（CEA）、糖链抗原199（CA199）表达呈正相关（P〈0．05）。结论CK20 mRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后。     

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究

目的：检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA和人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标．方法：采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERTmRNA的定性和半定量表达．以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照．实验数据采用SPSS13．0forWindows软件包统计分析．结果：①CK20mRNA和hTERTmRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50．0％和56．2％,相对系数分别为0．89±0．17和0．88±0．17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9．1％和0％,相对系数分别为0．11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0．大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20mRNA和hTERTmRNA的表达均有统计学差异（P〈0．05）．②CK20mRNA和hTERTmRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关（P〈0．05）;其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关（P〈0．05）．阳性表达者生存率低于阴性者（P〈0．05）．结论：大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERTmRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后．     

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血中的表达及意义

目的探讨大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的表达及临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测48例大肠癌患者手术前、后外周血CK20mRNA的表达情况，并以12例健康志愿者为阴性对照，以胃腺癌细胞株BGC-823作阳性对照。结果CK20mRNA术前阳性表达率分别为60．4％，阳性表达率与Dukes分期、淋巴结转移、远处转移具有相关性（P〈0．05），而与分化程度、肿霜邵位、患者性别无明显相关性（P〉0．05）；术后CK20mRNA阳性表达率明显高于术前（P〈0．05）；12例健康志愿者无一例阳性表达，胃腺癌细胞株BGC-823均为阳性表达。结论CK20mRNA作为标志物用于检测大肠癌的血循环微转移是可靠的，手术操作可促使肿瘤细胞释放入血。     

腹腔镜直肠癌根治术对进展期直肠癌患者微转移的影响

目的:探讨腹腔镜直肠癌根治术对进展期直肠癌患者微转移的影响。方法:选取2013年4月-2017年4月本院普外科收治的160例进展期直肠癌患者作为研究对象,按照手术方式分为腔镜组与开腹组,各80例。采用RT-PCR方法检测所有入选者术前和术后外周血的CK20 mRNA,对其进行定性检测和定量检测。比较手术前后两组外周血CK20 mRNA阳性率,比较腔镜组不同TNM分期患者手术前后外周血CK20 mRNA的OD值。结果:两组术前及术后CK20 mRNA阳性率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。腔镜组Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ期患者术后外周血CK20 mRNA的OD值与术前比较,差异均无统计学意义(P0.05);术前和术后,Ⅰ、Ⅱ与Ⅲ期CK20 mRNA的OD值均依次递增(P0.05)。结论:腹腔镜手术并不增加进展期直肠癌的微转移风险,微转移的数量只与肿瘤的进展程度有关。     

MUC1和CK20 mRNA在早期宫颈癌外周血中的表达及临床意义

目的：研究早期宫颈癌患者外周血中MUC1 mRNA和CK20 mRNA的表达及临床意义。方法：采用RT-PCR法检测40例ⅠA-ⅡA期宫颈癌患者及15例同期入院的排除其他恶性肿瘤的子宫肌瘤患者外周血中MUC1mRNA和CK20 mRNA的表达,并分析其与临床病理因素之间的关系。结果：40例早期宫颈癌患者外周血中MUC1 mRNA和CK20 mRNA的阳性表达率分别为37．5％和30．0％,而在子宫肌瘤患者中的阳性表达率均为0。MUC1 mRNA和CK20 mRNA的单独阳性表达率、任一阳性表达率和双阳性表达率与淋巴结转移和脉管浸润显著相关（P〈0．05）．与宫颈癌的预后因素如年龄、分期、分化、组织类型及肿瘤大小均无相关（P〉0．05）,但随着肿瘤分期及肌层浸润深度的增加,其表达有逐步上升的趋势。结论：MUC1和CK20可作为检测早期宫颈癌外周血微转移的生物学指标,但对预后的意义有待进一步研究。     

结直肠癌血液CK20 mRNA检测对血液微转移诊断的意义

目的 研究结直肠癌患者血液中CK20 mRNA对血液微转移的价值。方法 采用RT-PCR技术对50例结直肠癌患者的血液进行检测。结果 CK20 mRNA阳性率68%（34/50）,阳性率与肿瘤Ducks分期之间相关显著,而与肿瘤病理类型相关不显著。10例结直肠良性病变均为阴性。结论 结直肠癌患者手术前、后检测血液中的CK20 mRNA对于预测后和指导治疗有重要的参考价值。     

喉癌患者外周血CK19mRNA及CK20mRNA的表达

目的研究喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达,探讨其I临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测喉癌患者术前外周血中CK19mRNA、CK20mRNA的表达。结果48例喉癌患者外周血中CK19mRNA阳性率为37．5％（18／48）,CK20mRNA阳性率45．8％（22／48）。10例肿瘤组织中CK19mRNA阳性率为100％（10／10）。CK20mRNA阳性率80％（8／10）;10例声带息肉患者外周血为阴性对照,CK19mRNA阳性率为10％（1／10）,CK20mRNA阳性率为0。结合临床病理资料,喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA表达与喉癌T分期、临床分期及淋巴结转移存在相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用巢式RT—PCR技术,对喉癌患者外周血单个核细胞CK19mRNA和,或CK20mRNA的检测,在分子生物学水平对喉癌细胞对周围组织的浸润及局部扩散提供了参考,有助于指导临床治疗。     

定量RT-PCR检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

目的:检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床价值.方法:采用实时荧光定量RT-PCR法检测51例经病理学确诊的结直肠癌患者和30例健康对照者外周血CK20 mRNA的表达水平.结果:结直肠癌患者中CK20 mRNA阳性率为27.45%,而健康对照组阳性率为6.67%,两者相比差异有统计学意义(P<0.025).随着临床分期的提高,患者外周血中CK20 mRNA的表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义(P>0.05).Dukes'C期与D期患者中>10拷贝/ml者高于A期与B期患者.结论:检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达水平可发现早期脱落的肿瘤细胞,对肿瘤微转移的诊断有一定的提示意义.     

CK19、CK20 mRNA在上皮性恶性肿瘤患者外周血中的表达及其意义

目的：分析上皮性恶性肿瘤患者外周血中CK19、CK20mRNA的表达水平，探讨其临床病理意义。方法：随机选择和收集53例上皮性恶性肿瘤患者的外周血，应用巢式RT－PCR法联合检测其CK19、CK20mRNA表达情况，另取15例上皮性肿瘤组织的为阳性对照，15例非肿瘤患者外周血为阴性对照。结果：53例肿瘤患者外周血中CK19阳性率为35．8％（19／53，CK20阳性率41．5％（22／53），两者至少1项阳性者69．8％（31／53）。15例肿瘤组织中CK20阳性率为100％（15／15），CK19阳性率86％（13／15）；15例阴性对照CK19阳性2例，CK20阳性1例，结合肿瘤的临床病理资料分析，肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达与肿瘤浸润深度，临床分期及淋巴结转移存在明显的相关性，而与肿瘤患者的年龄，性别，肿瘤分化程度无明显相关。结论：CK19、CK20mRNA可作为检测上皮性肿瘤外周血微转移的靶基因。联合检测肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA可增加外周血循环癌细胞的检测率。     

CK20mRNA在胃癌患者外周血中的表达及及其临床意义

目的：研究胃癌患者外周血中CK20mRNA表达以判断癌细胞有无血行播散。方法：采用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）的方法,对胃癌30例,原发性肝细胞肝癌5例、对照组（非癌肿）10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因CK20mRNA进行检测。结果：对照组（非癌肿）10例及原发性肝细胞肝癌5例手术前、后外周血中CK20mRNA均为阴性表达。胃癌组30例,外周血中CK20mRNA手术前阳性表达率26．7％（8／30）,手术后48小时阳性表达率则为33．3％（10／30）。胃癌外周血中CK20mRNA的阳性表达率与细胞病理分化程度无关,与UICC病理贫苦无关,但与肝脏转移有关。结论：胃癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达可作为癌细胞血行播散的标志;有助于判断胃癌的预后;有助于鉴别原发性肝细胞肝癌和胃癌肝转移。胃癌手术中应采用“不接触肿瘤的游离技术”以养活癌细胞的播散。     

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血中阳性表达的临床意义

目的：研究大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志，探讨CK20 mRNA阳性表达与肿瘤病理指标的关系，观察大肠癌患者手术前、后外周血中CK20 mRNA表达的变化情况。方法：采用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）的方法，对大肠癌42例、原发性肝细胞肝癌5例、对照组（非癌肿）10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因CK20 mRNA表达进行检测。结果：对照组（非癌肿）10例及原发性肝细胞肝癌5例手术前、后外周血中CK20 mRNA均为阴性表达。大肠癌组42例，手术前外周血中CK20 mRNA阳性表达率为50．0％（21／42），手术后48h外周血中CK20 mRNA阳性表达率为59．5％（25／42）。大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达率与肿瘤细胞病理分化程度无关，与Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关。结论：大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志，有助于判断大肠癌的预后及鉴别原发性肝细胞肝癌和大肠癌肝转移。手术操作会促使肿瘤细胞向血液中播散，手术过程中应加强预防措施以减少癌细胞的播散。     

大肠癌患者外周血细胞角蛋白-20信使核糖核酸与白细胞介素-10联合检测的临床意义

目的 联合检测大肠癌患者外周血细胞角蛋白－20信使核糖核酸（CK－20 mRNA)与血浆中白细胞介素－10（IL－10）,并评价其临床意义。方法 应用RT－PCR检测大肠癌患者外周血CK－20mRNA；应用ELISA检测其血浆IL－10浓度。结果 对照组25例健康查体者，其外周血中未见CK－20mRNA的表达；观察组46例大肠癌患者，25例外周血中CK－20mRNA表达阳性。大肠癌患者外周血CK－20mRNA的表达与Dukes分期关系为：A组20．0％（1／5），B期27．3％（3／11），C期61．1％（11／18），D期83．3（10／12）；其中C，D期与A，B期比较差异有高度显著性（P＜0．01）。大肠癌患者血浆IL－10浓度明显高于健康查体者，且与Dukes分期显示相关。外周血CK－20mRNA阳性表达的大肠癌患者血浆IL－10水平高于阴性者。结论 联合检测大肠癌患者外周血CK－20mRNA与IL－10，掌握检测大肠癌转移的相关指标，可以及时全面地了解大肠癌患者病情进展情况。     

CK20 mRNA联合组织切片检测直肠癌系膜内转移的临床研究

目的通过检测直肠癌系膜组织中CK20 mRNA的表达水平,研究直肠癌系膜转移与临床病理特征的关系,探讨直肠癌系膜转移规律,为切除直肠系膜的合理范围提供依据。方法取行直肠癌手术切除的直肠癌和直肠系膜组织标本40例,良性肠道疾病的正常直肠系膜组织10例。剪取肿瘤组织和距肿瘤下缘1、2、3、4、5cm的直肠系膜组织,分别进行：①各段系膜组织分别HE染色切片检查;②各段系膜组织中CK20 mRNA表达水平检测（RT-PCR法）,并结合临床病理资料进行分析。结果40例直肠系膜标本HE染色切片中,距肿瘤下缘1、2、3、4、5cm的阳性率分别为：37．5％（15／40）、15．0％（6／40）、0％（0／40）、0％（0／40）、0％（0／40）;40例直肠系膜标本中,距肿瘤下缘1、2、3、4、5cm的系膜组织CK20 mRNA阳性表达率分别为：47．5％（19／40）、27．5％（11／40）、12．5％（5／40）、0％（0／40）、0％（0／40）。CK20 mRNA在正常直肠系膜组织中不表达,系膜中CK20 mRNA的表达与肿瘤分期、肿瘤形态及分化程度有关（P〈0．05）。结论①检测直肠系膜组织中CK20 mRNA的表达（肿瘤微转移）较常规病理组织学检查方法更为敏感;②对于直肠癌,一个相对比较安全的远端直肠系膜切除长度为4cm,但对于TNM分期偏晚、浸润型、低分化直肠癌病例,范围应适当增大。     

c-fos和MMP-7蛋白在结直肠癌中的表达与外周血微转移的关系

目的研究c-fos和基质溶解素（MMP-7）蛋白在结直肠癌中的表达与患者外周血微转移的关系。方法采用免疫组化Maxvision法检测80例结直肠癌（40例无淋巴结转移和40例有淋巴结转移）中c-fos和MMP-7蛋白的表达。同时无淋巴结转移及有淋巴结转移患者中各收集20例的外周血5 ml,运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测患者外周血中CK20mRNA的表达。结果 c-fos和MMP-7蛋白在有淋巴结转移的患者中表达高于无淋巴结转移患者（〈0.05）。c-fos和MMP-7蛋白在有淋巴结转移的患者中共表达高于无淋巴结转移患者（〈0.01）。c-fos与MMP-7蛋白在外周血CK20mRNA检出患者中的共表达高于未检出患者（〈0.01）。无淋巴结转移患者中,MMP-7蛋白在外周血CK20mRNA检出患者中的表达高于未检出的患者（〈0.01）;淋巴结转移患者中,MMP-7蛋白在外周血CK20mRNA检出患者中的表达高于未检出患者（〈0.05）。结论结直肠癌MMP-7蛋白的高表达与患者外周血微转移有关,c-fos蛋白的高表达与患者外周血微转移无关。c-fos和MMP-7蛋白在结直肠癌中高表达与淋巴结转移有关。MMP-7蛋白在促进结直肠癌淋巴结转移过程中,c-fos可能起调节作用。