微囊化牛嗜铬细胞移植于帕金森病样大鼠脑纹状体内的行为观察

帕金森病（ＰＤ）的基本病理生理改变是黑质致密带、蓝斑及自主神经节的神经元变性,致使黑质／纹状体通路中的多巴胺（ＤＡ）减少,引起一系列临床症状。目前,由于药物治疗只能部分地改善ＰＤ症状,且不能阻止其病情发展、人们试图在脑内移植ＤＡ能细胞,以替代变性的神...     

微囊化人嗜铬细胞异种移植用于实验大鼠镇痛的研究

目的　评价微囊化人嗜铬细胞(ME HCC)移植入大鼠蛛网膜下腔后治疗慢性神经痛的效果,观察 ME HCC对脊髓组织的影响。　方法　将Wistar雄性大鼠采用四股结扎法结扎单侧坐骨神经,制作慢性神经痛模型;取 ABO同型健康成人脑死亡后的双侧肾上腺进行嗜铬细胞分离和原代培养,培养的嗜铬细胞记为HCC;用2%海藻酸钠(Alginate)包裹 HCC并进行体外培养。30只慢性神经痛模型大鼠被随机分为3组:蛛网膜下腔移植入Alginate空微囊组为A组;蛛网膜下腔移植入HCC组为B组;蛛网膜下腔移植入ME HCC组为C组。观察大鼠自发痛行为的改变以及电痛阈的改变,于移植术后第12周每组随机取5只大鼠制作腰段脊髓组织病理切片,观察移植物对脊髓组织的影响。　结果　移植后第1~9周与移植前相比,A组大鼠自发痛行为无明显改善,B组和C组大鼠自发痛行为显著改善;移植后第10~12周,B组大鼠5 min离地时间为 103±20 s,C组大鼠5 min离地时间为72±15 s,两组之间有显著性差异(P<0 05);A组大鼠电痛阈无显著性差异(P>0 05),B组和C组大鼠疼痛明显减轻,电痛阈由(0 26±0 05)mA升至(0 68±0 12)mA(P<0 05),B组和 C组之间无显著性差异(P>0 05);术后第10~12周B组电痛阈降至(0 36±0 04)mA,C组电痛阈为(0 66±0 05)mA,两组之间有显著性差异(P<0 05)。移植术     

微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞脑内移植治疗偏侧帕金森病样大鼠及猴的实验研究

以右侧帕金森病样大鼠和猴为模型,分别将微囊化和非微囊化牛肾上腺嗜铬细胞（ＢＣＣ）及空微囊定向植入右侧脑纹状体内,观察动物行为、脑组织生化和组织学变化。结果表明：植入的ＢＣＣ能够在异种脑内存活、分泌多巴胺等单胺类物质并纠正帕金森病样大鼠及猴的异常行为。海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠微囊具有免疫保护作用,可明显地延长ＢＣＣ在异种宿主脑内的存活时间,作用超过１０个月。微囊化ＢＣＣ脑内移植有望成为治疗帕金森病的一种有效方法。     

微囊化件肾上腺髓质嗜铬细胞脑内移植治疗偏侧帕金森病样大 …

以右侧帕金森病样大鼠和猴为模型,分别将微囊化和非微囊化牛肾上腺嗜铬细胞（ＢＣＣ）及空微囊定向植入右侧脑纹状体内,观察动物行为、脑组织生化和组织变化。结果表明,植入的ＢＣＣ能够在异种脑内存活,分泌多巴胺等单胺类物质并纠正帕金森病样大鼠及猴的异常行为。海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠微囊具有免疫保护作用,可明显地延长ＢＣＣ在异种宿主脑内的顾活时间,作用超过１０个月。微囊化ＢＣＣ脑内移植有望成为治疗帕金森病     

微囊化周围神经组织腹腔移植的实验研究

目的 观察微囊化周围神经组织移植体内后的生物活性,分析其在体内存活的时效. 方法 采用注射的方法 将微囊化周围神经组织移植到小鼠的腹腔. 结果 微囊化周围神经组织移植6周后,在小鼠的腹腔内保持了原有的形状和结构,囊内的细胞正常生存并保持增殖功能. 结论 微囊化神经组织可在体内保持活性至少6周,完善微囊化技术有望延长其存活时效,提高其促进神经损伤修复的效果.     

糖尿病犬经肝动脉肝内移植微囊化猪胰岛细胞的安全性和有效性

目的评估移植于I型糖尿病犬肝脏中的微囊化新生猪胰岛细胞(NPI)的生物相容性、免疫学特性及生理学特性。方法I型糖尿病犬分为A、B两组,每组15只,A组每只犬分别经肝动脉灌注微囊化新生猪胰岛细胞40～60万个,B组每只犬分别经肝动脉灌注未微囊化新生猪胰岛细胞40～60万个,两组动物移植后均不使用免疫抑制治疗。移植前后分别测量移植受体的肝脏功能及淋巴细胞CD4 /CD8 比值。移植6个月后所有移植受体的肝脏均进行病理学检查。结果移植后A组外源性胰岛素用量从移植前的22 u逐渐降至5 u,B组所需外源性胰岛素从移植前的24 u下降至10 u。移植后2～3周B组胰岛素用量恢复到移植前的水平,而A组的部分动物的胰岛素剂量继续减至8 u。B组受体移植后血的CD4 较移植前升高,而A组的CD4 和CD8 细胞移植后无明显变化。移植后所有受体的肝功能及组织结构未见异常。结论微囊化的新生猪胰岛细胞在受体犬的肝脏中有很好的生物相容性。微囊可以延长移植物的存活,且异种移植微囊化的新生猪胰岛细胞能够纠正糖尿病犬的高血糖状态。     

微囊化大鼠胰岛移植物的制备与异种移植

为降低胰岛移植中排斥反应，用海藻酸钠－聚赖氨酸生物膜制备微囊化大鼠胰岛，体外培养，胰岛素释放试验功能良好，胰岛素释放量与单纯胰岛差异无显著意义；异种移植可成功地纠正糖尿病小鼠的高血糖状态平均达４个月之久。表明：大鼠，胰岛微囊化可在不便用免疫抑制剂的情况下，有效地延长胰岛在糖尿病小鼠体内的生存期。     

海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病的实验研究

采用Ｓｕｎ海藻酸钠－多聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊制作技术,分别包裹大鼠胰岛和胰岛素分泌细胞系,移植于糖尿病小鼠腹腔。结果表明ＡＰＡ微囊化大鼠胰岛或胰岛素分泌细胞移植,均可使糖尿病小鼠血糖降低至接近正常水平达３周至１１０天;移植微囊无明显的组织学反应。证明该ＡＰＡ微囊化胰岛细胞移植具有较好的治疗效果,微囊具有较好的生物相容性和免疫隔离作用。为进一步发展生物型人工胰岛奠定了基础。     

不同途径肝内微囊移植对肝功能及肝血流影响的对比研究

目的 探求经门静脉及肝动脉途径肝内移植微囊对肝功能及门脉血流的影响.方法 将海藻酸钠在无菌条件下制作成为直径50～500μm的微囊.将健康雄性犬20只随机分为V组和A组,V组为经门静脉移植组,再分为V1、V2组,A组为经肝动脉移植组,再分为A1、A2组;每组动物5只;V1、V2、A1、A2组分别移植微囊16 000个/...     

微囊化猪甲状腺组织移植治疗甲状腺功能减退大鼠的实验研究

海藻酸钠－多聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊化猪甲状腺组织移植治疗２８只实验性甲状腺功能减退大鼠，对照组１７只移植非微囊化猪甲状腺组织。结果显示，移植后两组受体的Ｔ３、Ｔ４水平升高，其中对照一更为显著，但９周后明显下降，甚至低于移植前水平。而实验组保持持续升高，超过４０周；移植后两组受体的ＴＳＨ水平均明显下降，但以实验组为显著，而且持续降低超过４０周。而对照组维持时间较短，移植９周后开始回升。移植     

主要前炎性因子对中性粒细胞－血管内皮细胞粘附影响的单细胞定量研究

用体外单细胞定量法研究中性粒细胞（ＰＭＮ）和血管内皮细胞（ＶＥＣ）的粘附性。结果发现：脂多糖内毒素（ＬＰＳ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、白细胞介素－１（ＩＬ－１）均可诱导ＶＥＣ粘附性迅速升高，１２ｈ后达高峰。ＴＮＦ和ＬＰＳ两者可导致ＰＭＮ粘附性迅速升高，３０ｍｉｎ达高峰，以后基本保持该状态，ＩＬ－１则对ＰＭＮ的粘附性无明显影响。实验结果提示主要前炎性因子在导致ＰＭＮ－ＶＥＣ粘附性增高作用上有很高的一致性，但也有一定差别。     

足叶已甙致人胃低分化腺癌细胞和慢性淋巴细胞性白血病细胞凋亡对比观察

在相同条件下，通过测定细胞死亡率、DNA电泳、末端脱氧核苷转移酶介导的生物素标记寡核苷酸末端标记（TUNEL），对比观察足叶已甙（VP－16）作用下人胃低分化腺癌细胞(BGS－180）和慢性淋巴细胞性白血病细胞（HL－60）的凋亡情况。结果显示，低剂量VP－16短时间作用HL－60细胞，细胞的死亡以凋亡为主，并可被蛋白激酶C（PKC）激活所抑制；而VP－16致BGS－180细胞的死亡以坏列死为主，不被PKC所抑制。细胞外Ca^z 鳌合剂EDTA对VP－16作用下两种细胞的死亡不影响。提示化疗药对HL－60细胞和BGS－180细胞的作用机制不同，在其导致BGS－180细胞的死亡中凋亡并不是主要的方式。     

NADH在辐射诱导的L02肝细胞凋亡损伤中的防护作用

为研究细胞辅酶NADH在细胞辐射凋亡损伤中的防护作用，将L02肝细胞经5．0Gy照射后加入不同浓度（0－600μg/ml）的NADH，培养6、12、24h，观察细胞凋亡率并检测3组Fas，Bax，Bcl－2蛋白表达，透射电镜观察细胞凋亡形态。结果表明，辐射可以诱导细胞凋亡损伤，NADH抑制细胞辐射诱导的凋亡呈剂量依赖性，并可以上调Bcl－2蛋白和下调Fas、Bax蛋白表达。提示NADH对L02肝细胞有明显的抗辐射亡损伤作用，其作用机制可能与Fas、Bcl－2和Bax的调控有关。     

胶质细胞源性神经营养因子在大鼠生后腰段脊髓中分布的实验研究

为探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对大鼠脊髓运动神经元的作用,采用免疫组织化学方法,观察GDNF在大鼠生后1、3、7、10、14和28天腰段脊髓中的分布.结果发现,在生后1、7和28天脊髓灰质前角运动神经元有强阳性染色,生后3天脊髓灰质前角运动神经元呈弱阳性染色,生后1、3、7和28天脊髓灰质后角神经元和少量胶质细胞也呈阳性反应.此外,在各组大鼠腰段脊髓后根内的胶质细胞亦可见GDNF免疫阳性反应.提示GDNF可能对脊髓运动神经元的发育、存活以及功能的正常发挥起重要作用.     

脑脊液细胞玻片离心法与常规涂片法对癌性胸水诊断价值的探讨

应用脑脊液细胞玻片离心法与常规涂片法，对１８例癌性胸水进行检查，结果发现脑脊液细胞玻片离心法检查阳性率为８０％，而常规涂片法阳性率为２６％。统计学处理，有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。从而说明脑脊液细胞玻片离心法对癌性胸水诊断具有很大价值。     

肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力的研究

对肝癌患者红细胞免疫粘附功能和血清中调节因子变化进行了研究。肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞的活性低于正常人，并对其变化机制进行了探讨。肝癌患者（４０例）血清中，红细胞免疫促进因子［（４５．１±５．１）％〕低于正常人［（９８．８±８．１）％］；而红细胞免疫抑制因子［（５３．１±７．２）％）高于正常人［（２７．０±４．１）％］。研究表明在肝癌患者中，红细胞免疫功能减低与血清中调节因子变化密切相关。     

子宫内膜细胞的培养和侵袭性研究

为探讨不同子宫内膜细胞在子宫内膜异位症(EM）发病机制中的作用，体外分离培养EM患者和对照组子宫内膜共49例。观察间质和上皮细胞的形态学特点，并采用Transwell—Col Insert细胞培养板，比较不同细胞的侵袭行为。结果显示，间质细胞侵袭能力强于上皮细胞；EM组子宫内膜细胞侵袭力强于对照组。提示在子宫内膜异位种植过程中，间质和上皮细胞可能具有不同的功能；EM患者子宫内膜本身具有不同于对照组的特性，使其更易于异位种植生长。     

纤维蛋白诱导活化系膜细胞表达明胶酶A、B的机制研究

为观察纤维蛋白对系膜细胞（HMC）表达明胶酶A（MMP-2）、明胶酶B（MMP-9）的作用并探讨其活化机制,应用RT-PCR、明胶酶谱分析法分别在基因转录水平与蛋白质活性水平上检测纤维蛋白对HMC表达MMP-2、MMP-9的作用,采用纤维蛋白酶谱法与平板法检测纤维蛋白对HMC表达纤溶酶原激活物（PA）活性的影响。结果发现,纤维蛋白呈剂量与时间依赖性促进HMC MMP-2与MMP-9表达的上调,并同时促进HMCtPA与uPA的表达;应用抑肽酶阻断纤溶酶活性后能够完全阻断pro-MMP-2与pro-MMP-9的活化。提示肾脏局部沉积的纤维蛋白可以促进HMC表达与活化MMP-2、MMP-9、而MMP-2与MMP-9的活化依赖于PA/纤溶酶系统的调控。     

利用腹壁反射建立人工膀胱反射弧的实验形态学研究

研究利用腹壁反射建立“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”人工膀胱反射弧的神经形态学基础。将SD大鼠右侧T13前根近端与右侧S2前根远端通过一段自体移植神经在硬膜囊内行显微缝合，保持T13后根完整，同时切断实验侧L5～S4脊神经前根，经3～4个月轴突再生后，建立“腹壁反射-脊髓中枢膀胱”这一新的人工膀胱反射弧。神经缝合术后8个月，对该反射弧进行神经形态学观察。光镜下观察，T13前根再生的神经纤维已通过，T13与S4神经远端缝合部；电镜下观察，实验侧膀胱平滑肌内可见到副交感神经末梢，其基本结构与对照侧类似，而在阴性对照组未发现有正常结构的副交感神经末梢。本实验结果表明，腰骶髓截瘫平面以上的躯体运动神经轴突长入膀胱平滑肌内副交感神经节细胞，并由此将异化的躯体反射冲动传递到其支配的膀胱平滑肌细胞，是人工反射弧产生膀胱控制性排尿的神经形态学基础。