焦炉工人外周血淋巴细胞热休克蛋白72水平及与DNA损伤的关系

目的研究焦炉逸散物对焦炉工人外周血淋巴细胞热休克蛋白72（Hsp72）水平的影响及与DNA损伤的关系，探讨Hsp72在细胞损伤保护中的意义。方法选取267名焦炉工人和30名对照，以Western blot法检测外周血淋巴细胞Hsp72的水平，彗星试验检测DNA损伤水平，个体采样采集作业环境空气样本，高效液相色谱法测定环境苯并[a]芘浓度。结果高暴露组工人外周血淋巴细胞Hsp72水平（G±SG）和Olive尾矩（G±SG）分别为1．24±0．42和4．49±1．24，明显高于低暴露组（1．01±0．35和2．99±1．10）和对照组（0．85±0．34和2．40±1．00），差异有统计学意义（P〈0．05）。以全体研究对象Hsp72中位数为界值，将研究对象分为Hsp72高表达组和低表达组，Hsp72高表达的人数相对比率在对照组、低暴露组、高暴露组分别为36．7％、43．1％和58．3％，呈逐渐增高趋势，差异有统计学意义（P=0．003）。在Hsp72高表达组，Hsp72表达水平随着暴露等级升高而升高，其中高暴露组与对照组的差异有统计学意义（P〈0．05），但各组之间Olive尾矩的差异无统计学意义（P〉0．05）。在Hsp72低表达组中，各组Hsp72水平的差异无统计学意义（P〉0．05），而Olive尾矩随暴露等级升高而升高，其中高暴露组与低暴露组和对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01），且明显高于Hsp72高表达组的高暴露组工人。高暴露组Hsp72水平与Olive尾矩呈负相关（r=0．503，P〈0．01）。结论焦炉逸散物可诱导焦炉工人外周血淋巴细胞Hsp72水平升高，Hsp72对细胞DNA损伤具有保护作用。     

焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白70水平与DNA损伤的关系

目的探讨焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白70(HSP70)水平与DNA损伤的关系。方法应用Westernblot法测定淋巴细胞HSP700水平,用微核分析和慧星试验(CometAssay)测定DNA损伤程度。结果焦炉工组淋巴细胞HSHSP70水平(1960±536)高于对照组(1712±442),差异有显著性(P<0．05);焦炉工组微核率(5162／106±2205／106)和DNA损伤积分(67000／106±64934／106)也都明显高于对照组(2362／106±1241／106、28936/106±30874／106),差异有显著性(P<0．05)。焦炉工人组中淋巴细胞HSP70水平与微核率和DNA损伤积分均呈明显的负相关,且差异有显著性(r值分别为-0．461、-0．663,均P<0．01)。结论焦炉工外周血淋巴细胞HSP70水平的增高可能与保护DNA免受致癌物损伤有关。     

焦炉工人外周血淋巴细胞HSP 72表达特征

目的 研究焦炉工人外周血淋巴细胞热休克蛋白72(HSP72)表达特征及其影响因素.方法 选取某焦化厂焦炉工人267人和对照30人,蛋白印迹(Western blot)法检测外周血淋巴细胞HSP 72的表达,高效液相色谱法测定作业环境空气中苯并(a)芘[B(a)P]浓度.收集研究对象个人信息.结果 炉顶工、炉侧工外周血淋巴细胞HSP 72表达水平(G±SG)(1.20±0.47,1.30±0.37)显著高于对照组(0.85±0.34),炉侧工显著高于炉底工(1.01±0.35),差异有统计学意义(P＜0.05).不同作业环境[B(a)P]浓度与相应作业区工人外周血淋巴细胞HSP72表达水平呈二项式分布(R2=0.9999).Logistic分析显示,与对照组相比,焦炉逸散物暴露引起淋巴细胞HSP 72表达阳性的调整OR为1.31,其中炉顶工、炉侧工调整OR分别为1.49和2.69.多元线性回归分析显示,在低暴露水平下(炉底工、对照组),吸烟指数和饮酒是HSP 72表达水平升高的抑制因素(β分别为-0.0001和-0.05,P＜0.05).结论 焦炉逸散物可诱导外周血淋巴细胞HSP72表达升高,但高暴露剂量为焦炉逸散物对HSP 72表达有抑制作用.低暴露水平下吸烟和饮酒对HSP 72表达有抑制作用.     

焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白的表达与细胞DNA损伤程度

目的 探讨焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白90、60及27(HSP90、HSP60和HSP27)的表达水平与外周血淋巴细胞DNA损伤之间的关系.方法 选取某焦化厂焦炉作业工人288名为接触组,根据作业环境监测结果和工作岗位分为高剂量组(炉顶及炉侧工)172人,低剂量组(炉底及辅助工)116人;同时选取距该焦化厂2 km外、无有毒作业接触史的某医院医护人员和管理人员38名为对照组.取受试者的肘静脉血,应用Western blot法测定外周血淋巴细胞的HSP90、HSP60和HSP27水平,用彗星试验测定外周血淋巴细胞DNA的损伤程度.结果 高剂量组焦炉工淋巴细胞HSP90水平(0.24±0.32)明显高于低剂量组(0.12±0.30)和对照组(0.06±0.33),差异有统计学意义(P《0.05);各组HSP60、HSP27表达水平比较,差异均无统计学意义(P》0.05).高剂量组、低剂量组及对照组间彗星的尾长、Olive尾矩、尾惯量、尾/头(长)总体均呈现高剂量组》低剂量组》对照组的趋势,这4项指标分别在各组间的差异均有统计学意义(P《0.05).随接触剂量增高,DNA损伤程度逐渐加重,3组人群的DNA损伤分级的相关系数为-0.345,差异有统计学意义(P《0.01).结论 焦炉工外周血淋巴细胞HSP90表达水平及DNA损伤程度随多环芳烃接触剂量的增高而增高.     

乐果对人外周血淋巴细胞热应激蛋白70表达的影响

目的研究乐果对人外周血淋巴细胞热应激蛋白70(HSP70)表达的影响,初步探讨HSP70用于有机磷农药生产的环境及生物监测的可能性。方法选取健康对照者11人及不同工种的乐果接触工人35人,分离其外周血淋巴细胞后,用流式细胞仪检测HSP70基础表达及经乐果体外诱导后水平,同时检测其全血乙酰胆碱酯酶(AChE)活力,分析其可能的影响因素。结果接触者与对照者外周血淋巴细胞HSP70基础表达水平分别为41．24%±10．45%和23．97%±4．29%,AChE活力分别为(125．23±7．97)、(145．36±8．78)U/ml,差异均有统计学意义(P＜0．01)。不同工种乐果接触工人其外周血淋巴细胞HSP70基础表达水平分别为47．34%±11．87%和38．05%±8．20%,差异有统计学意义(P＜0．05),但AChE活力差异无统计学意义(P＞0．05)。对接触者HSP70基础表达水平影响有统计学意义的因素按程度大小依次为：健康状况、环境浓度和工龄,它们共可解释HSP70至少88%的变异；对AChE活力影响有统计学意义的因素只有工龄,其只能解释AChE约12%的变异。经体外乐果诱导后,对照组HSP70诱导水平较接触组高,差异有统计学意义(P＜0．01)。不同人群淋巴细胞HSP70表达增加幅度不同,按其大小依次为：对照组、操作工和包装工。对HSP70变化率影响有统计学意义的因素为环境浓度和工龄。结论HSP70可作为综合反映乐果接触工人自身状况及所处作业环境的指标。     

二硫化碳接触工人热应激蛋白70及其抗体水平的变化

目的：探讨二硫化碳诱导人体产生热应激蛋白70（HSP70）及其抗体水平情况。方法：用免疫印迹法（Western blot)和酶联免疫吸附（ELISA）法对职业性接触二硫化碳工人HSP70和HSP70抗体水平进行检测。结果：接触组工人中血浆HSP70抗体阳性率明显高于对照组（P＜0．05），而HSP70蛋白含量在两组间比较差异没有显著性（P＞0．05）；但据HSP70抗体是否为阳性将工人分为阳性组和阴性组后，阳性组HSP70蛋白含量低于阴性组，差异有显著性（P＜0．05）。结论：HSP70及其抗体滴度可反映二硫化碳的接触状况，对接触二硫化作业工人的健康监护有一定意义。     

ERCC4基因遗传变异对焦炉工外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

目的探讨焦炉作业工人核苷酸切除修复交叉互补组4基因（excision repair cross complementation group4，ERCC4）多态性和外周血淋巴细胞DNA损伤的关联。方法选择某焦化厂246名焦炉作业工人和127名对照者，运用彗星试验评价外周血淋巴细胞DNA损伤；根据Hapmap数据库筛选ERCC4基因的标签单核苷酸多态性位点（tagged-single nucleotide polymorphisms，TagSNPs），使用Taq—Man—MGB探针荧光标记聚合酶链反应方法对rs744154、rs3136079及rs318703个TagSNPs进行基因分型；运用PHASE2．0．2遗传分析软件计算单体型。结果焦炉工组外周血淋巴细胞的Olive尾矩（Olive TM）高于对照组（对数转换后分别为1．26±1．12及0．52±0．97），差异有统计学意义（P〈0．01）。焦炉工中，3个TagSNPs的不同基因型携带者Olive TM值的差异无统计学意义（P〉0．05），构建的不同单体型对携带者Olive TM值的差异亦无统计学意义（P〉0．05）；对照组中rs3136079位点TG杂合子携带者Olive TM值最低（0．26±0．96），明显低于野生型纯合子TT（0．66±0．98）及突变型纯合子GG携带者（0．66±0．51），差异均有统计学意义（P〈0．05），构建的CTG／CTG单体型对携带者Olive TM值最高（0．69±1．01），无CTG单体型携带者Olive TM值最低（0．25±0．80），差异无统计学意义（P=0．08）。结论ERCC4基因多态性对焦炉工外周血淋巴细胞DNA损伤程度无影响，但对照组中rs3136079位点TG杂合基因型携带者DNA损伤程度较轻，表明DNA损伤程度受遗传和环境因素交互作用的影响。     

焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白70水平的变化

目的检测焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白70(HSP70)水平的变化。方法在炼焦工人中选取118例作为接触组,无任何职业致癌物接触史的男性健康体检者50例为对照组。采用Western blot法检测淋巴细胞HSP70蛋白表达,并采用高效液相色谱法检测苯并(a)芘(B[a]P)及GB5748—85《作业场所空气中粉尘浓度测定方法》测定粉尘。结果各测定地点粉尘和B[a]P浓度都远远高于国家卫生标准。接触组不同工龄组之间HSP70蛋白的表达水平具有统计学意义(P<0.05),并且随着工龄的增加,HSP70的表达量增加(r=0.931,P<0.01)。结论结果表明焦炉逸散物可能致焦炉工外周血淋巴细胞HSP70表达水平升高并可能与工龄有关。     

甲醛对暴露工人外周血淋巴细胞的遗传损伤作用

目的评价甲醛对暴露工人外周血淋巴细胞染色体和DNA损伤水平。方法选择65名甲醛暴露工人和非甲醛暴露工人70名为研究对象，采用甲基纤维素法和单细胞凝胶电泳法，分析其外周血淋巴细胞微核发生率和DNA断裂损伤。结果暴露组工人外周血淋巴细胞微核发生率、DNA断裂损伤的细胞数，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05），并有随工龄、暴露浓度增加而增高的趋势。但甲醛浓度为0．5mg／m^3～3．11mg／m^3时，DNA断裂损伤细胞与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论甲醛暴露可导致工人外周血淋巴细胞染色体和DNA断裂损伤明显增高，DNA断裂可望成为暴露人群的早期效应标志物和致癌机制之一。     

健康人外周血淋巴细胞热应激蛋白70的表达水平

目的探讨健康人外周血淋巴细胞中热应激蛋白70（HSP70）表达水平，确定机体细胞不同水平HSP70的基础值，以评价不同个体是否适应于某种职业有害因素。方法选择健康人群108名作为研究对象，采用免疫印迹法（Westernblot）检测淋巴细胞中HSP70表达水平。结果该人群≤30岁、〉30岁年龄组HSP70表达水平分别为5．7591±0．66257、6．0663±0．62103，差异有统计学意义（P〈0．05）。按照性别进行分组，男性、女性组HSP70表达水平分别为5．8375±0．55970、5．8813±0．71790，两者差异无统计学意义（P〉0．05）。按照不同体重指数进行分组，消瘦、正常、超重、肥胖，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论外周血淋巴细胞HSP70在不同年龄组间表达水平不同，不同性别和不同体重指数的健康人其HSP70的表达无差异。     

高温作业工人血清抗HSP70抗体水平的研究

本研究用免疫印迹技术，以纯化的ＨＳＰ７０为抗原，检测了高温作业工人血清抗ＨＳＰ７０抗体的水平。实验发现，用人体来源的ＨＳＰ７０作为抗原的检测比动物（大鼠）来源的ＨＳＰ７０作为抗原的反应灵敏得多。用人体细胞制备的ＨＳＰ７０作为抗原时，１０例高温作业工人中有２例呈阳性反应，而非高温对照１０人中仅１例呈弱阳性反应，含此抗体阳性血清用动物来源的ＨＳＰ７０作抗原时显著减弱。用动物源的ＨＳＰ７０作抗原，检测５     

石英尘作用下肺泡巨噬细胞HSP70及其mRNA水平的变化

为了研究石英尘对肺泡巨噬细胞热应激蛋白（ＨＳＰｓ）的影响，采用ＤｏｔＢｌｏｔ技术，从蛋白质和ｍＲＮＡ水平观察了石英尘对培养大鼠肺泡巨噬细胞热应激蛋白ＨＳＰ７０表达的影响。结果表明，石英尘作用下ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ及蛋白质水平都明显增加。提示，其机制可能与活性氧基团有关。     

900 MHz微波辐射对鸡胚心脏的影响

[目的]研究900MHz微波辐射对鸡胚心率、QRS间期、心脏超氧化物歧化酶(SOD)活性和HSP70mRNA水平的影响.[方法]海兰白鸡受精卵28枚,随机分为6组,对照组和辐射组各3小组,两个3小组都分别为4、5、5枚.辐射组在孵化的第5天至第20天每天接受4 h整体微波辐射.对照组不照射.利用壳膜外无损测量鸡胚心电图的方法,测定鸡胚心率和QRS间期;分别在鸡胚发育第13、20天采集心脏组织,以黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性、RT-PCR法测.定HSPT0mRNA水平.[结果]辐射组鸡胚心率在孵化第20天与对照组相比,显著降低,而在第15天差异无统计学意义.辐射组鸡胚心脏组织匀浆的SOD活性在鸡胚孵化第13天与对照组相比,显著降低,而HSP70mRNA水平比对照组显著升高.到第20天时,辐射组鸡胚心脏SOD活性及HSPT0mRNA水平与对照组比较,差异未见统计学意义.[结论]900MHz微波辐射可以引起鸡胚心脏发生应激反应,并影响心率.     

热休克蛋白70在急性阑尾炎患者血浆中表达的临床意义

目的探讨热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）在急性阑尾炎患者血浆中表达的临床意义。方法采集46例正常人和46例急性阑尾炎患者术前2h、术后7d和14d的血液,采用酶免疫吸附法检测血浆HSP70的含量。结果与正常人组相比,急性阑尾炎患者术前2h、术后7d血浆中HSP70含量升高（P均〈0.05）,术后14dHSP70含量高,但与正常人差异无统计学意义（P〉0.05）,术后14d患者的HSP70含量较术前2h、术后7d降低（P〈0.05）。结论 HSP70在急性阑尾炎炎症急性期表达增高,其对急性阑尾炎的病情发展有正面调控作用。     

循环血HSP70在急性创伤患者诊治中的作用

目的研究急性创伤患者循环血热休克蛋白(HSP)70浓度的变化,探讨循环血HSP70在创伤患者诊断、治疗中的作用。方法将57例急性创伤患者按照ISS评分标准分成轻、中、重三组;收集患者伤后1～6、24～36、60～90 h等不同时间段的血液标本,检测血清HSP70浓度。统计分析各组患者血清HSP70浓度变化、颅脑损伤与其他损伤的差别以及合并感染与未合并感染患者之间的差别。结果创伤各组三个时间段血清HSP70浓度均显著高于对照组;重伤组三个时间段血清HSP70浓度显著高于轻、中度伤组;颅脑损伤患者前两个时间段血清HSP70浓度显著高于其他创伤组;感染患者组从第二时间段开始血清HSP70浓度显著高于非感染组。结论急性创伤患者循环血HSP70浓度可以帮助判断伤情、鉴别诊断颅脑损伤与非颅脑损伤,持续升高可预示感染。     

HSP70在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在正常鼻咽组织、鼻咽异型增生和鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测16例正常鼻咽组织、11例鼻咽异型增生组织和47例鼻咽癌组织HSP70蛋白表达，分析鼻咽癌组织HSP70表达与鼻咽癌组织类型、恶性程度（鼻咽癌的病理分级）相关性。结果HSP70在正常鼻咽组织阳性率为18．8％（3／16）、表达弱（＋）；鼻咽异型增生组织阳性率为54．6％（6／11）、强度为中等（＋～＋＋）；鼻咽癌组织阳性表达率分别为70．2％（33／47）、表达强（＋＋＋），各组之间比较差异有显著性（P〈0．01）。在47例鼻咽癌组织标本中，19例为高分化，阳性率为31．5％（6／19）、强度为中等（＋～＋＋）。28例为低分化，阳性率为96．4％（27／28），表达为强阳性（＋＋＋）。结论HSP70表达强度以及阳性率与在鼻咽癌癌变进程呈相关，HSP70表达水平与鼻咽癌的类型、恶性程度（鼻咽癌的病理分级）密切相关。     

HSP70在乐果染毒U87细胞中的保护作用

目的研究HSP70在乐果染毒U87细胞中的保护作用.方法预先给予细胞43℃热应激1 h,然后以浓度为100μmol/L的乐果对细胞分别进行4、8、16h染毒,染毒结束测AChE和SOD活性并与未经热应激诱导组比较.结果在不同染毒时间,预先经热应激处理的试验组,其AChE及SOD活性都较直接染毒的对照组高,差异有非常显著性(P＜0.01),酶活性的变化率在不同时间组间的差异也具有非常显著性(P＜0.01).结论预先进行热应激诱导对乐果染毒U87细胞具有保护作用.     

热休克蛋白70双向免疫印记鉴定及抗体制备

目的验证肺癌组织中热休克蛋白70（HSP 70）表达量,从肺癌组织中获得HSP 70并初步制备其人源性抗体,为进一步研究其生物功能和临床应用奠定基础。方法收集肺癌组织和癌旁组织标本,应用双向电泳-免疫印记方法验证HSP 70的表达量,经过亲和层析和离子交换层析方法获得肺癌组织中HSP 70作为抗原,经过四轮亲和-吸附-洗脱,从人源性肺癌噬菌体单链抗体库中初步筛选其抗体。结果双向电泳-免疫印记结果表明,肺癌组织HSP 70表达量高于癌旁组织。凝胶电泳和免疫印记结果表明,从肺癌组织中获得了人源性HSP 70,以此HSP 70作为抗原,初步筛选出了其抗体。结论人源性HSP 70及其人源性特异结合抗体的获得,为进一步研究其抗肺癌的临床应用提供了基础依据。     

高温对小鼠胸腺细胞亚群及其热休克蛋白70表达的影响

目的 研究高温对小鼠胸腺细胞亚群及其热休克蛋白70（HSP70）表达的影响，探讨热锻炼诱导小鼠胸腺热耐受形成的机制。方法 BALB／c小鼠每天41℃高温处理1h，连续9d，于第1、3、5、7、9天高温后4h取胸腺细胞，用流式细胞术检测胸腺细胞亚群及HSP70表达阳性率。结果 高温使小鼠胸腺重量明显减轻，第1、3天胸腺细胞CD4^ CD8^ 亚群明显减少，第5天后CD4^ CD8^ 亚群比例开始恢复。除第9天外，高温组胸腺细胞HSP70的表达均高于对照组。结论 CD4^ CD8^ 胸腺细胞亚群减少可能是高温致小鼠胸腺萎缩的主要原因，而HSP70表达升高是热耐受形成的分子基础之一，可作为高温致小鼠胸腺细胞损伤的标志物。     

中暑病人血浆中热应激蛋白(HSP70)及其抗体水平的意义

目的　探讨中暑病人热应激蛋白 (HSP70 )及其抗体水平变化和其在中暑发生中的可能作用。方法　应用Westernblot法 ,测定血浆HSP70水平 ;应用酶联免疫反应技术测定血浆HSP70抗体滴度。结果　HSP70在高温中暑组为 42 11.2± 12 86 .2 (积分光密度 )、重症中暑组为 4137.8±12 0 7.5 ,与对照组 (6 0 43.5± 135 4.8)比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。中暑病人HSP70抗体水平在 1∶10、1∶2 0、1∶40阳性率分别为 5 4.1%、48.9%、2 1.6 % ,显著高于对照组 (2 6 .7%、13.8%、0 % ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　HSP70水平的下降和HSP70抗体的出现在中暑发生过程中具有一定的作用。