慢性肺心病急性发作期淋巴细胞IL-2R及转铁蛋白受体的变化

应用Wu系列单克隆抗体(McAb),对25例慢性肺心病急性发作期患者淋巴细胞白细胞介素2受体(IL-2R)、转铁蛋白受体(TfR)及T淋巴细胞亚群进行检测。结果表明,慢性肺心病急性发作期患者IL-2R与TfR均低于正常对照组(P<0.001,P<0.05),其CD_4细胞亦较正常对照组为低(P<0.005),CD_8细胞在两者间无明显差异(P>0.10)。患者PaO_2与IL-2R的表达是高度正相关(r=0.82,P<0.001),提示血氧水平可影响淋巴细胞IL-2R的表达。慢性肺心病急性发作期IL-2R、TfR降低及CD_4细胞减少的意义有待进一步研究。     

IgE高亲合力受体的研究进展

IgF Fc段高亲和力受体(FcεRⅠ)在变态反应性疾病中起重要作用.典型的FcεRⅠ是αβγ2异四聚体复合物,表达在超敏反应效应细胞(即肥大细胞和嗜碱性粒细胞)膜表面.IgE与FcεRⅠ结合,导致肥大细胞和嗜碱粒细胞激活,并释放和合成各种炎症性介质和细胞因子等.IgE高亲和力受体也表达于嗜酸粒细胞和抗原提呈细胞(APC)如单核细胞、郎格汉斯细胞和树突状细胞表面.表达在抗原提呈细胞表面的FCεRⅠ是αγ2三聚体形式,它不能引起细胞脱颗粒,但可诱导炎症性细胞因子基因表达,并以IgE依赖性方式放大APG的抗原提呈效应.本文对FcεRⅠ的研究进展进行综述.     

SLE患者淋巴细胞膜上IL-2R表达的动态分析

本实验采用Wu Tac单克隆抗体的间接荧光抗体法,动态观察了系统性红斑狼疮(SLE)患者和正常供血员(对照组)的外周血淋巴细胞经PHA刺激后,于不同时间(0、24、48、72小时)内细胞膜上白细胞介素2受体(IL-2R)的表达。结果表明在给予PHA刺激培养24、48和72小时后,与对照组比较SLE患者淋巴细胞的IL-2R表达明显下降,提示了SLE的T淋巴细胞反应性降低可能与被激活的T细胞表面IL-2R的表达功能缺陷有关。此结果将有助于进一步探讨SLE的免疫调节紊乱的发生机制。     

急性期过敏性紫癜患儿血清细胞因子及单核细胞Fcγ受体表达变化初探

目的 观察急性期过敏性紫癜(HSP)患儿单核细胞(MC) Fcγ受体(FcγR)表达变化,进一步探讨HSP免疫发病机制.方法 急性期HSP患儿30例,同年龄健康对照儿童15例.流式细胞术检测MC表面活化型受体FcγR Ⅰ和Fc-γRⅢ表达水平;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测活化型FcγRⅡa、抑制型FcγRⅡb、细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-α)、趋化因子(IP-10、RANTES、iNOS)和BLyS/April mRNA表达;试验酶联免疫吸附(ELISA)检测血浆IL-4、IL-10和TNF-α蛋白浓度.结果 (1)急性期HSP患儿MC FcγR Ⅰ和FcγRⅢ表达明显高于对照组(P＜0.05);FcγRⅡamRNA表达较对照组明显增高(P＜0.05),而FcγR Ⅱb mRNA表达较对照组显著降低(P＜0.05);(2)急性期HSP患儿MC细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-α)、趋化因子(IP-10、RANTES、iNOS)及BLyS/April表达均明显高于正常对照组(P＜0.05),相关性分析发现细胞因子和趋化因子与FcγRⅡa/FcγRⅡb均呈正相关;(3)急性期HSP患儿血浆炎症细胞因子IL-4、IL-10和TNF-α浓度显著增高(P＜0.05),其中TNF-α浓度与MC FcγRⅡb mRNA表达呈负相关(r=-0.73,P＜0.05).结论 急性期HSP出现细胞因子表达异常和单核细胞活化型/抑制型Fcγ表达失衡.     

巨噬细胞Ia抗原表达和抗原提呈功能调控的研究——Ⅵ.人单核细胞表面HLA-Ⅱ类抗原和IL-2R与其抗原提呈功能的关系

取健康青壮年男性献血员的新鲜外周静脉血,肝素抗凝,经密度梯度离心获得单个核细胞。又经粘附法和尼龙毛柱分离法分别获得高纯度的单核细胞和T淋巴细胞。用单克隆抗体分别阻断单核细胞表面的 HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP 抗原,经洗涤后,将单核细胞与PPD共同温育24小时,观察单核细胞向T淋巴细胞提呈PPD的能力。另一组先将单核细胞与 PPD作用24小时,然后用单克隆抗体阻断单核细胞表面的 IL-2R1小时,再观察单核细胞的抗原提呈功能。结果表明,分别阻断单核细胞表面的 HLA-DR、DQ、DP 和IL-2R 后,其抗原提呈能力均显著减弱。     

1,25二羟维生素D3对人淋巴细胞免疫功能的调节作用

通过淋巴细胞增殖试验、混合淋巴细胞反应及分析淋巴细胞表面IL-2R 和TfR 表达等研究了1.25-(OH)_2D_3对人淋巴细胞的免疫调节作用。结果表明,1,25-(OH)_2D_3对PHA 诱导的淋巴细胞增殖有抑制作用,IC_(50)为19.1nmol/L 外源性IL-2可部分逆转这种作用;低浓度的1,25-(OH)_2D_3能显著增强MLR 诱导的细胞增殖;在由PHA 和MLR 诱导的淋巴细胞表面IL-2R 和TfR 表达中,对TfR 的表达呈抑制作用,对IL-2R 的表达无影响。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th2型细胞因子受体水平的研究

目的探讨Th2型细胞因子受体(IL-4R、IL-6R、IL-10R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及其临床意义.方法应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30例正常人外周血单核细胞(PBMC)中IL-4R、IL-6R和IL-10R mRNA的表达水平;用ELISA法检测血清中IL-4、IL-6和IL-10水平.结果①活动期SLE患者和非活动期SLE患者及正常人Th2型细胞因子受体阳性表达率为100%.②PBMC中,IL-4R mRNA表达水平活动期SLE患者(1组)为0.604±0.147,非活动期SLE患者(2组)为0.40±0.13,正常人(3组)为0.37±0.07;IL-6R mRNA表达水平1组为0.90±0.27,2组为0.52±0.11,3组为0.57±0.24;IL-10R mRNA表达水平1组为0.87±0.29,2组为0.72±0.21,3组为0.68±0.14.1组和2组间比较无显著性差异(P＜0.05),1组和3组间比较有显著性差异(P=0.00),2组和3组间比较无显著性差异(P＞0.05).③血清中IL-4、IL-6和IL-10水平1组显著高于2组和3组(P＜0.05),2组显著高于3组(P＜0.05).活动期SLE患者和非活动期SLE患者血清中的IL-4水平与PBMC上的IL-4R的表达水平呈正相关(r=0.622和r=0.859,P＜0.05).活动期SLE患者和非活动期SLE患者血清中的IL-6水平与PBMC上的IL-6R的表达水平呈正相关(r=0.887和r=0.615,P＜0.05).活动期SLE患者和非活动期SLE患者血清中的IL-10水平与PBMC上的IL-10R的表达水平呈正相关(r=0.888和r=0.787,P＜0.05).结论Th2型细胞因子及其受体的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用.检测SLE患者PBMC中Th2型细胞因子受体的表达水平可作为疾病的活动性指标之一.     

单核巨噬细胞极化在慢性活动性乙型肝炎中的表达及意义

目的:研究慢性活动性乙型肝炎患者单核巨噬细胞的数量与功能变化。方法:随机选择51 例慢性乙型肝炎患者(其中轻中度20 例,重度31 例)以及正常对照13 例。采用Percoll 分层液分离PBMCs,以CD14 标记单核细胞,流式细胞仪检测PBMCs 表面分子CD80、CD86、HLA-DR、CD163 的表达;ELISA 检测血清细胞因子IL-10、IL-12 与IL-23 的水平;免疫组织化学染色检测CD68 在肝脏的分布。结果:轻中度慢性乙型肝炎组、重度慢性乙型肝炎组CD80 表达水平低于对照组。慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞CD86 的表达低于对照组,其中重度组与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者HLA-DR 的表达低于对照组,其中轻中度组与重度慢性乙型肝炎组间HLA-DR 的表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。此外,慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞CD163 的表达明显高于对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者肝脏汇管区CD68 阳性细胞浸润增加,汇管区增大(P<0.05)。轻中度慢性乙型肝炎组、重度慢性乙型肝炎组与对照组血清IL-10 表达水平之间两两比较差异显著,均具有统计学意义(P<0.01)。结论:慢性乙型肝炎患者巨噬细胞参与肝脏病变的发生,外周血中单核细胞存在M1 型/ M2 型平衡失调,向M2 型极化的现象,可能参与其慢性化发展。     

重型乙型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子表达及临床意义

目的:探讨重型乙型肝炎患者外周血单核细胞功能变化的特点及其意义.方法:应用流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法对重型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子的表达及外周血中白细胞介素.10(IL-10)的水平进行检测,并结合临床资料加以分析.结果:与正常对照组比较,慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎患者外周血单核细胞HLA-DR的表达水平逐渐下降,尤其以慢性重型肝炎患者下降最为明显;而慢性重型肝炎患者外周血中IL-10的水平则明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).相关分析表明,HLA-DR的表达水平与凝血酶原活动度呈正相关(rs=0.61,P＜0.01).慢性重型肝炎患者死亡与存活组比较,前者HLA-DR水平明显降低;而IL-10水平明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:外周血单核细胞HLA-DR的表达水平与慢性重型肝炎患者病情严重程度以及预后密切相关,检测外周血单核细胞HLA-DR分子水平有助于评价重型肝炎患者的免疫功能状态以及判断预后.     

转铁蛋白受体和免疫球蛋白A/M Fc受体并非人系膜细胞主要的IgA1受体

目的：探讨转铁蛋白受体(TfR)和免疫球蛋白A/M Fc受体(Fcα/μR)是否为人系膜细胞(HMC)主要的免疫球蛋白A(IgA)受体。方法： 亲和层析提取血清IgA1，热聚合并用［125I］标记，RT-PCR法检测TfR与Fcα/μR mRNA在HMC及人系膜细胞系(HMCL)中的表达，放射配基结合法检测聚合IgA1(aIgA1)与HMCL的结合动力学特征，Western blot方法观察IgAN患者aIgA1与正常人aIgA1刺激HMCL引起的细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白磷酸化水平的异同。结果： TfR和Fcα/μR mRNA在原代培养的HMC均有表达，在HMCL未见表达。aIgA1与HMCL之间的结合具有特异性和饱和性，最高结合量为(496.7±200.3)fmol/105细胞，结合位点为(3.0±1.2)×106/细胞，解离常数Kd值为(6.4±1.7)×10-7mol/L。IgAN患者aIgA1与正常人aIgA1均呈时间依赖性诱导ERK蛋白磷酸化，但IgAN患者aIgA1的作用明显强于正常人aIgA1(P＜0.01)，且持续时间更长(P＜0.05)。结论： HMCL细胞存在特异性IgA1受体，但该受体并非TfR和Fcα/μR。     

新生儿脐血淋巴细胞IL-2R的表达

白细胞介素2(IL-2)及其受体(IL-2R)系统在免疫调节中发挥着重要的作用。本研究采用间接免疫荧光技术检测了新生儿脐血淋巴细胞IL-2R表达情况及其T细胞亚类水平。结果表明健康足月新生儿脐血Tac阳性细胞百分率明显低于正常成人,且异常新生儿的减低更为明显;而健康足月新生儿脐血CD_4阳性细胞和CD_4 CD_8比值却明显高于正常成人。说明尽管新生儿具有足够数量的T细胞(CD_3阳性细胞)和辅助性T细胞(CD_4阳性细胞),且CD_4/CD_3比值还高于成人,但其活化淋巴细胞上IL-2R的表达不足,故影响IL-2作用的发挥;加之新生儿细胞表面CD抗原标志与自身功能发育的非同步性,导致其细胞免疫功能低下。     

前列腺素D2受体调节PGD2诱导的人气道黏液高分泌

目的研究前列腺素D2(PGD2)通过D类前列腺素受体2(DP2)对人气道上皮细胞黏液分泌的效应及其作用机制。方法用PGD2刺激人气道上皮16HBE细胞,以DP2拮抗剂AZD6430、DP1拮抗剂BWA868C及三磷酸肌醇蛋白激酶(PI3K)抑制剂LY294002为干预因素,将细胞分为对照组、PGD2刺激组、PGD2刺激+AZD6430组、PGD2刺激+BWA868C组、PGD2刺激+LY294002组。ELISA检测细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-4和IL-13的蛋白含量,激光共聚焦技术检测细胞内黏蛋白(MUC)5AC含量;Western blot检测DP2、DP1、PI3K和磷酸化AKT(p-AKT)表达水平;实时荧光定量PCR检测TNF-α、IL-4、IL-13和MUC5AC mRNA表达水平。结果 PGD2刺激后MUC5AC、TNF-α、IL-4、IL-13、DP2、PI3K和p-AKT表达显著高于对照组(P0.05);AZD6430拮抗组中MUC5AC、TNF-α、IL-4、IL-13、PI3K及p-AKT表达较PGD2刺激组明显减弱(P0.05);LY294002组TNF-α、IL-4、IL-13和MUC5AC表达较PGD2组亦显著减弱(P0.05)。结论 PGD2激活人气道上皮细胞的DP2受体,活化PI3K/AKT引起黏液高分泌。     

慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体4的变化及其与IL-6的关系

目的： 探讨慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体4（TLR4）的变化情况及其意义。 方法： 用流式细胞仪检测30例正常对照、31例慢性乙型肝炎患者和30例慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞表面TLR4的表达，ELISA法检测上述患者血清白细胞介素6（IL-6）的水平。 结果： 正常对照组、慢性乙型肝炎组和慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR4的平均免疫荧光强度分别为2.3±1.1、3.7±2.3 和6.9±4.1，慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR4表达显著高于正常对照组和慢性乙型肝炎组（P<0.05），慢性乙型肝炎组与正常对照组比较无统计学差异；3组外周血清IL-6水平分别为(11.5±7.2) ng/L、(40.8±31.2) ng/L和(77.6±33.3) ng/L，各组间比较均具有显著差异（P<0.05）；慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR4表达水平与血清IL-6表达水平呈显著正相关，相关系数γ=0.618，P<0.05。结论： TLR4可能与慢性乙型肝炎重型化有关。     

TLR激动剂抑制IL-27诱导的THP-1细胞HLA-DR的表达

目的研究白介素27(IL-27)对THP-1单核细胞系Ⅱ类转录活化子(classⅡtransactivator,CⅡTA)和Ⅱ类主要组织相容性复合物(major histocom patibility complex classⅡ,MHCⅡ)分子的表达的影响及Toll样受体(Toll-likereceptor,TLR)激动剂LPS和Pam3CSK4的干预作用。方法RT-PCR检测CⅡTAⅠ、Ⅲ和Ⅳ以及人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-DRA和干扰素调节因子-1(interferon regulatory factor-1,IRF-1)mRNA的表达。半定量PCR检测HLA-DRA、DRB、DPA、DPB、DQA、DQB、IRF-1、CⅡTA mRNA的表达。流式细胞术检测细胞表面HLA-DR的表达。结果IL-27刺激24h后可分别上调THP-1细胞CⅡTAⅢ、CⅡTAⅣ和IRF-1mRNA表达水平。IL-27刺激24h和48h可升高MHCⅡ类分子mRNA的表达,并能诱导HLA-DR在28%和53%的THP-1细胞表面表达。在THP-1细胞和PMA诱导的THP-1巨噬细胞,LPS和Pam3CSK4均可抑制IL-27诱导的CⅡTA和HLA-DR的表达。结论IL-27可上调THP-1细胞CⅡTA和MHCⅡ类分子的表达,这种作用可被LPS和Pam3CSK4抑制。     

白细胞介素6受体

白细胞介素6受体(IL-6R)是造血生长因子受体家族的一员。它由一个80kD的配基结合链(IL-6R)和作为信号转导子的非配基结合链gp130组成。IL-6R既能以膜受体形式存在,也能以可溶性受体形式存在。可溶性白介素6受体(sIL-6R)同样具有膜受体的功能。白介素6受体的表达及调节在某些白介素6相关疾病的发病过程中起着重要作用。     

类风湿关节炎患者外周血单核细胞亚群的变化及其意义

目的:本次研究通过检测类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞亚群比例及其分泌促炎细胞因子的功能,探讨单核细胞亚群在RA 发病过程中的作用。方法:22 例RA 患者(RA 组)和22 例健康对照者(HC 组),经知情同意后抽取3ml 静脉血,肝素钠抗凝。流式细胞术(FCM)检测单核细胞亚群比例、中间型单核细胞表面HLA-DR、Toll 样受体2(TLR2)和髓系细胞触发受体-1(TREM-1)表达,及其细胞内肿瘤坏死因子(TNF)鄄琢平均荧光强度(MFI),并分析RA 患者单核细胞亚群比例与血清细胞因子的相关性。正态数据分析采用Students’t-test 检验。结果:与HC 组相比,RA 组中间型单核细胞比例升高[(4.6±1.2)% vs (11.7±1.6)%],差异有统计学意义(P<0.05);HLA-DR 表达(MFI)与HC 组比较差异无统计学意义(26.8±8.6 vs 30.2±6.1,P>0.05)。RA 组TLR2(750.2±110.3 vs 526.8±98.6)、TREM-1(58.4±12.1 vs 40.3依10.2)表达(MFI)高于HC 组,差异均有统计学意义(P<0.05);RA 组中间型单核细胞胞内TNF鄄琢(46.3±6.4 vs 36.7±8.3)MFI 高于HC 组,差异有统计学意义(P<0.05)。RA 患者中间型单核细胞比例与DAS28 评分和血清TNF 、白细胞介素(IL)-17 呈正相关,相关系数分别为0.593(P =0.003)、0.471(P =0.027) 和0.538(P =0.009)。结论:RA 患者外周血单核细胞向中间型极化,并处于活化状态,高表达TLR2 和TREM-1,分泌较多的促炎细胞因子TNF ,参与RA 的疾病过程。因此,抑制单核细胞向中间型极化或阻断表面受体表达可能是治疗RA 的新途径。     

脑囊虫病患者粘附分子和细胞因子水平检测

本文检测了30例未经治疗的脑囊虫病患者血清中可溶性细胞粘附分子(sICAM)、白细胞介素8(IL-8)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)以及患者外周血单个核细胞(PBMC)体外诱导IL-2、IFN-γ及TNF-α的活性,同时也检测了CD11a、CD11b和CD18在患者PBMC表面的表达,以30例正常人作对照,探讨了脑囊虫病人粘附分子、细胞因子水平的变化及在免疫调节中的作用.结果显示脑囊虫病患者血清中sICAM-I水平及患者PBMC体外诱导IL-2、IFN-γ水平显著低于正常对照组,患者血清中IL-8、sIL-2R及患者PBMC体外诱导TNF-α水平明显高于正常对照组,患者组的CD11b阳性细胞百分比显著高于对照组,但是患者PBMC表面CD11a的表达量比对照组低,而CD18的表达在两组间无显著性差异.     

自身免疫性肝炎患者外周血CD16阳性单核细胞的特点及临床意义

目的 探讨自身免疫性肝炎(autoimmune hepatieis,AIH)患者外周血CD16阳性单核细胞的频率、表型特点及其临床意义.方法 选取白求恩国际和平医院全军肝病诊治中心2010年1月至2013年12月收治的初治AIH患者13例和健康对照8例作为研究对象,利用流式细胞术检测入组个体外周血CD16阳性单核细胞频率、膜分子人白细胞抗原DR(HLA-DR)、Toll样受体(toll like receptor,TLR)-2、TLR-4的表达特点及肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF)-α的分泌能力.结果 AIH组外周血CD16阳性单核细胞频率明显升高,组间比较差异有统计学意义(Z=-2.028,P<0.05).AIH患者外周血CD16阳性单核细胞频率与血浆天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平呈显著正相关(r=0.573,P<0.05).AIH患者CD16阳性单核细胞表达HLA-DR较健康对照组明显降低(Z=-2.173,P<0.05),而TLR-4表达(Z=-1.992,P<0.05)和TNF-α的分泌能力明显升高(Z=-2.607,P<0.05),组间比较差异均有统计学意义.联合治疗后CD16阳性单核细胞频率明显降低(Z=-2.197,P<0.05),HLA-DR的表达水平升高(Z=-2.366,P<0.05),而TLR-4水平则显著降低(Z=-2.197,P<0.05),均有统计学意义.结论 CD16阳性单核细胞可能参与了AIH的发病机制并与肝组织炎症和坏死有关.     

IL-1R2生物学功能及作用机制研究进展

白细胞介素1受体2(type 2 IL-1 receptor, IL-1R2)和白细胞介素1受体1(type 1 IL-1 receptor, IL-1R1)是IL-1的2种受体。IL-1R2在结构上与负责IL-1信号转导的IL-1R1相似,但其较短的胞质结构域和Toll/IL-1受体(Toll/IL-1 receptor, TIR)结构域的缺乏使得IL-1R2仅能作为IL-1的诱饵受体而不能跨膜转导信号。本文就IL-1R2基因与蛋白、生物学功能与负调控机制、生理和病理条件下的表达与在炎症中的作用及其临床意义作一综述。     

成年人不同年龄组人白细胞抗原-DR_α单核细胞百分率参考值探讨

目的:探讨武汉地区成人不同年龄组人白细胞抗原-DRα(HLA-DRα)单核细胞百分率正常参考值。方法:选取637例成年人不同年龄组的血标本,用贴壁法分离出单核细胞,用流式细胞仪进行HLA-DRα检测,得出不同性别及不同年龄组的单核细胞表达HLA-DRα百分率的值,并根据不同性别、不同年龄组分别进行比较分析。结果:单核细胞表达HLA-DRα百分率正常参考值在不同性别及年龄组之间差异无显著性,为10.12%。结论:武汉地区正常成人单核细胞表达HLA-DRα百分率可作为诊断单核细胞免疫功能的参考标准。