外燥对小鼠肺组织水通道蛋白5表达的影响及意义

目的观察外燥对小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的影响。方法40只SPF级昆明小鼠随机分为常温常湿组(A组)、常温常燥组(B组)、温燥组(C组)、凉燥组(D组),每组10只。图像分析各组第6天、12天、18天小鼠肺组织AQP5免疫组化染色结果。结果AQP5蛋白表达阳性部位多在肺泡膜缘;温燥组第12、第18天气道液黏多糖(RS)持续下降时,AQP5蛋白表达阳性率呈平行下降,凉燥组也呈同样趋势,尤以第12天为甚(P0.01),伴肺泡炎性病变并随时间延长而加重。结论外燥致肺部炎性改变同时,与肺泡液体的细胞内外转运相关的AQP5蛋白表达下降,提示与外燥伤肺、耗津的病机相关。     

乌司他丁对急性肺损伤小鼠水通道蛋白1、5表达的影响

目的 研究急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白5(AQP5)的表达变化,探讨乌司他丁(UTI)治疗ALI的机制.方法 32只昆明小鼠随机分为空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、乌司他丁疗组(UTI组)、地塞米松组(Dex组),观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RT-PCR检测AQP1、AQP5、TNF-α、IL-1β mRNA的表达变化.结果 乌司他丁及地塞米松治疗后,肺组织炎症、充血明显改善.与NS组相比,ALI组AQP1mRNA的表达显著降低(P＜0.05),与ALI组相比,UTI组、Dex组的AQP1 mRNA的表达显著升高(P＜0.05).AQP5mRNA表达的变化与AQP1mRNA的变化相似.与NS组相比,ALI组TNF-α mRNA的表达显著升高(P＜0.05),与ALI组相比,UTI组、Dex组TNF-α mRNA的表达显著降低(P＜0.05).IL-1 β mRNA表达的变化与TNF-omRNA的变化相似.结论 UTI可通过上调AQP1、AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿.可能通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现.     

前列腺素E1对急性肺损伤小鼠水通道蛋白1、5基因表达的影响

目的研究急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白5(AQP5)基因的表达变化,探讨前列腺素E(PGE1)治疗ALI的机制,为临床治疗ALI提供新的选择靶点和方法。方法 32只昆明小鼠随机分成4组(每组8只),即空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、前列腺素E1治疗组(PGE1组)、地塞米松治疗对照组(Dex组),观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RTPCR检测AQP1mRNA、AQP5 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达变化。结果 ALI组小鼠的肺部炎症反应显著,以中性粒细胞浸润为主,伴明显的肺泡充血、水肿。前列腺素E及地塞米松治疗后,肺组织炎症、充血明显改善,ALI组的W/D的比值与其他3组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);与NS组相比,ALI组AQP1mRNA的表达显著降低(P<0.05),而PGE1组、Dex组的AQP1 mRNA的表达显著高于ALI组(P<0.05)。AQP5 mRNA表达的变化与AQP1mRNA的变化相似。与NS组相比,ALI组TNF-αmRNA的表达显著升高(P<0.05),而PGE1组、Dex组的TNF-αmRNA的表达显著低于ALI组(P<0.05)。IL-1βmRNA表达的变化与TNF-αmRNA的变化相似,肺损伤炎症减轻。结论PGE1可通过上调AQP1、AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿。可能是通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现的。     

干扰素γ对哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5表达的影响

目的:观察干扰素γ(IFN-γ)对哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5(AQP5)表达的影响.方法:24只清洁级BALB/C小鼠随机分为对照组、哮喘组和IFN-γ组,每组8只,后2组制作哮喘模型,IFN-γ组用IFN-γ治疗.采用免疫组织化学法检测肺组织中AQP5蛋白的表达.结果:哮喘组肺组织AQP5蛋白相对表达量为(0.118 6±0.000 7),较对照组的(0.206 0±0.000 5)减低(P<0.01),IFN-γ治疗后AQP5蛋白相对表达量为(0.147 9±0.000 2),较哮喘组增加(P<0.01).结论:AQP5蛋白表达下调可能参与了哮喘发病时气道黏液分泌的调节,IFN-γ可上调AQP5蛋白的表达,在哮喘气道黏液分泌中起治疗作用.     

变应性鼻炎小鼠鼻黏膜水通道蛋白5的表达

目的探讨水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中的表达。方法应用qPCR和Western blot分别检测20只正常小鼠和20只变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5 mRNA和蛋白的表达。结果变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5mRNA和蛋白显著高于正常小鼠(P<0.05)。结论 AQP5在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中高表达,对AQP5的研究开发可能会成为变应性鼻炎新的基因治疗靶点。     

水通道蛋白5基因敲除纯合子小鼠的获取

水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是表达于动植物细胞膜表面的一类蛋白质,主要调控渗透压介导的水分子运动,也部分调控其他小分子如甘油、尿素等物质的跨膜运动.目前发现人类有12种AQPs的表达,主要表达于泌尿系统、消化系统、呼吸系统等部位液体流动量较大的细胞膜上.呼吸系统中主要表达AQP1、3、4、5四种分子,其中AQP1、AQP5在急性肺损伤的发病中具有重要作用[1-2],但二者的确切作用机制尚不很清楚,对其确切机制的探讨是目前研究的热点.     

胆红素对内毒素致急性肺损伤大鼠水通道蛋白1、5表达的影响

目的探讨胆红素对脂多糖所致急性肺损伤大鼠的水通道蛋白1、5是否存在调节作用,探讨其保护作用机制。方法雄性Wistar大鼠18只,随机分为生理盐水对照组（C组）、脂多糖模型组（L组）和胆红素预处理组（B组）,每组各6只。每组于造模后4h处死大鼠。测定每组肺湿／干重比值,ELISA法测血清中IL-8含量,肺组织中cAMP含量,免疫组化法测定每组水通道蛋白1、5的表达变化。观察各组肺组织病理改变。结果与模型组（L组）比较,胆红素干预组（B组）的W／D值下降,IL-8含量明显降低,cAMP含量表达上升（P〈0．05）,水通道蛋白1、5表达增强（P〈0．05）,肺水肿病理改变明显减轻。结论胆红素可能是通过cAMP信号途径调节水通道蛋白1、5表达改善水代谢,减轻肺水肿状态,从而对急性肺损伤具有保护作用。     

海风藤对急性肺损伤新生鼠水通道蛋白5的影响

目的探讨海风藤对急性肺损伤(ALI)新生大鼠水通道蛋白5(AQP5)的影响。方法 150只新生健康SD大鼠腹腔注射内毒素(LPS)5 mg/kg后随机分为对照组和海风藤低浓度组、海风藤高浓度组,对照组注射LPS后不行治疗,海风藤低浓度、高浓度组在未到处死取材时间分别按10 mg/kg和30 mg/kg海风藤提取液雾化,雾化时间为注射LPS后2、26、50、74、98、122及146 h。按处死时间分为5个亚组:8、24、48、72 h及7 d组,收集肺组织予病理学检查及测肺湿/干重比值(W/D),用免疫印迹法测肺组织AQP5的表达。结果 (1)肉眼观察予LPS 48 h后同一时间点海风藤高浓度组均明显较对照组及低浓度组水肿程度轻,出血肺叶面积小。光镜下对照组及海风藤低浓度组可见大量红细胞,海风藤高浓度组为少量红细胞渗出。(2)对照组及海风藤低、高浓度组W/D比值均升高,海风藤高浓度组在24 h～7 d亚组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)AQP5表达海风藤高浓度组与对照组在24 h至7 d各亚组差异均有统计学意义(P<0.01),海风藤低浓度组与对照组比较仅在72 h、7 d亚组差异有统计学意义(P<0.05)。结论雾化吸入海风藤可减轻ALI新生鼠的肺水肿及出血程度,海风藤抗炎作用能减少Ⅰ型肺泡上皮细胞受损,并促进水肿吸收。高浓度海风藤治疗效果优于低浓度。     

哮喘小鼠肺组织水通道蛋白5的表达及地塞米松对其的调节

目的:探讨支气管哮喘(哮喘)小鼠肺组织中水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的变化及地塞米松对其的调节作用.方法:雌性C57BL/6小鼠48只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组,每组16只.测定各组小鼠肺组织病理变化及湿/干质量比值,应用实时定量PCR法测定其肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定各组AQP5蛋白在肺组织中的分布,免疫印违法测定AQP5蛋白在肺组织中的表达.ELISA法测定各组支气管肺泡灌洗液中MUCSAC的含量.结果:哮喘组小鼠肺组织中AQP5表达较对照组明显降低[mRNA减少(42.5±3.6)%,蛋白质减少(64.3±8.2)%].而MUC5AC表达显著升高[mRNA升高(93.3±8.1)%;蛋白质水平升高(98.3±7.2)%].地塞米松分别负调节其表达(与模型组比较P＜0.05).结论:哮喘小鼠肺组织中AQP5表达明显降低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,地塞米松对其显著负调节从而改善气道黏液高分泌、炎性浸润和肺水渗出的病理生理过程.     

臭氧应激大鼠肺组织水通道蛋白5的表达及分布

目的:本研究旨在观察气道高反应大鼠肺组织AQP5的分布和表达。方法:取14只SPF级Wister大鼠随机分为2组:正常对照组;臭氧应激组;每组7只。运用Western Blot,RT-PCR和原位杂交的方法,检测大鼠肺组织AQP5的表达量,定位AQP5在肺内的分布。结果:臭氧应激组大鼠AQP5主要分布在肺泡毛细血管内皮细胞和肺泡Ⅰ型上皮细胞,其表达量明显低于正常对照组。结论:在气道高反应过程中,AQP5的表达下调可能与气道失稳态有关。     

Decreased expression of AQP1 and AQP5 in acute injured lungs in rats

Objective To determine if aquaporin1 (AQP1) and aquaporin5 (AQP5) are expressed in the alveolar capillary membrane in rats. Moreover, to investigate the alteration of AQP1 and AQP5 in acute injured lungs. Methods The distribution of AQP1 and AQP5 in alveolar capillary membrane were investigated by immunohistochemistry and immunoelectron microscopy with affinity- purified antibodies to human AQP1 and AQP5. To study the possibility that alveolar capillary membrane AQP1 and AQP5 undergo altered regulation, we established a rat model using alveolar instillation of lipopolysaccharide (LPS). Results Immunolabelling showed AQP1 was stained primarily in the microvascular endothelia of normal lungs, while AQP5 was expressed in type Ⅰ pneumocytes. Immunohistochemical analysis showed a significant decrease in the expression of AQP1 and AQP5 in injured lungs at 4h-48h after LPS instillation. AQP1 protein was resumed partly at 24h after LPS instillation and steroid administration, whereas AQP5 was unchanged. Conclusion The decreased expressions of AQP1 and AQP5 in injured lungs suggest that both of them may play a role in abnormal fluid transportation.     

地塞米松对急性过敏性哮喘小鼠肺AQP5表达的影响

目的 观察水通道蛋白5(AQP5)在急性过敏性哮喘小鼠肺组织的改变,以及地塞米松对其的影响,初步探讨AQP5在哮喘发病机制中的作用.方法 建立急性过敏性哮喘小鼠模型,并随机分为急性哮喘组、对照组和地塞米松治疗组,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中自细胞总数及分类计数、ELISA法测定IL-5和IFN-γ水平,RT-PCR和免疫组化法检测AQP5在肺组织的表达以及观察肺组织形态学的改变.结果 (1)哮喘组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均高于对照组(P＜0.01),IFN-γ水平低于对照组(P＜0.01),治疗后白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均明显下降(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),IFN-γ水平明显上升(P＜0.01);(2)哮喘组AQP5 mRNA水平明显高于对照组(P＜0.01),治疗后表达明显下降(P＜0.01);(3)哮喘组肺组织可见较弥漫的炎性改变,黏液分泌增多,血管壁水肿明显,血管周围有大量的炎症细胞渗出物,治疗组形态学改变明显减轻:AQP5表达于正常对照组的肺泡上皮细胞、呼吸道的表层柱状上皮细胞和黏膜下腺腺泡细胞的顶膜,哮喘组表达呈强阳性,地塞米松治疗后表达明显减弱.结论 AQP5在急性哮喘小鼠肺组织内过度表达,可能与黏液高分泌有关,地塞米松可以下调AQP5的表达,可明显减轻小鼠肺部的炎性、水肿和黏液高分泌的病理生理表现.     

水通道蛋白-5与多药耐药因子在结肠癌组织中的表达及其关系

目的：检测不同分化程度结肠癌组织中水通道蛋白（AQP）‐5与耐药因子的表达及相互关系。方法对45例结肠癌组织、36例癌旁组织采用实时荧光定量PCR（RT‐PCR）、蛋白免疫印迹法（Westernblot）、免疫组织化学染色检测AQP‐5及耐药因子P‐糖蛋白（P‐gp）、谷胱甘肽转移酶（GST‐π）、拓扑异构酶（TopoⅡ）、胸苷酸的限速酶（TS）的表达情况。结果免疫组织化学染色结果表明,AQP‐5主要分布于细胞膜和细胞质;RT‐PCR和Westernblot检测结果显示,结肠癌组织中AQP‐5的表达显著高于癌旁对照组（P＜0．05）,且表达量随分化程度降低而升高（P＜0．05）。免疫组织化学染色发现,P‐gp主要分布于细胞膜和细胞质,GST‐π主要分布于细胞核和细胞质,TopoⅡ主要分布于细胞核,TS主要分布于细胞质。RT‐PCR和Westernblot检测结果显示,结肠癌组织中耐药因子表达量显著高于癌旁组织（P＜0．05）,其中P‐gp、GST‐π、TopoⅡ随着分化程度降低表达增加,TS在不同分化程度结肠癌组织中表达变化不明显（P＞0．05）。AQP‐5与P‐gp、GST‐π、TopoⅡ的表达呈正相关（P＜0．05）,与TS表达无相关性（P＞0．05）。结论AQP‐5与耐药因子P‐gp、GST‐π、TopoⅡ、TS蛋白在结肠癌组织中高度表达,可能促进了结肠癌的转移和进展。     

人腺病毒A41对昆明乳鼠肠道水通道蛋白1、4、8表达的影响

目的探讨人腺病毒A41攻击对昆明乳鼠肠道水通道蛋白(aquaporin,AQP)1、4、8 mRNA表达的影响。方法从腹泻病婴幼儿粪便中分离出腺病毒A41毒株,用A293细胞进行接种增殖,予腺病毒A41病毒液灌注5日龄昆明乳鼠,于接毒后24 h开始每天处死3只乳鼠,连续4 d。采用实时荧光定量PCR方法对乳鼠的空肠、回肠和近端结肠黏膜细胞的AQP 1、4、8 mRNA进行相对定量分析。结果腺病毒A41攻击昆明乳鼠后,乳鼠空肠、回肠和近端结肠黏膜AQP 1、4、8 mRNA表达量与空白对照乳鼠差异无统计学意义。结论腺病毒A41与昆明乳鼠肠道水通道蛋白AQP 1、4、8 mRNA的表达无关,腺病毒肠炎与AQP间可能存在的其他机制需进一步探讨。     

ANP对急性肺损伤大鼠AQP1表达的影响

目的 :研究急性肺损伤 (ALI)大鼠肺组织中水通道蛋白 1 (AQP1 )的表达变化 ,探讨心房利钠尿肽 (ANP)治疗急性肺损伤的可能机制 .方法 :复制ALI大鼠模型 ,将实验动物随机分为对照组 ,ALI模型组 ,ANP治疗组 .采用免疫组化方法检测各组大鼠肺组织中AQP1的表达变化 ,并测定各组大鼠动脉血气 ,肺湿 /干 (W/D)比值 ,同时进行肺组织病理染色 .结果 :与对照组相比ALI模型组AQP1的表达显著降低 (P <0 .0 5 ) ,而ANP治疗组AQP1的表达显著高于ALI模型组 (P <0 .0 5 ) ,同时ANP治疗组能使血气改善 (P <0 .0 5 ) ,W/D比值下降 (P<0 .0 5 ) ,肺组织损伤减轻 .结论 :ANP对急性肺损伤大鼠AQP1的表达调节可能是其治疗急性肺损伤的有效途径之一 .     

氨溴索对脂多糖-烟雾诱导大鼠水通道蛋白5表达的影响

目的研究脂多糖-香烟烟雾诱导大鼠水通道蛋白5(AQP5)的表达,以及氨溴索(AMB)对其表达的影响。方法21只SD大鼠随机分为AMB干预组、模型组(脂多糖-香烟烟雾诱导组)与对照组。应用ELISA法检测肺组织匀浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中的TNF-α,原位杂交、免疫组化及图像分析法观察并测定各组AQP5的表达水平。结果模型组肺组织匀浆和BALF中的TNF-α显著高于AMB干预组和对照组(P<0.01);模型组支气管上皮AQP5 mRNA与AQP5蛋白的表达水平低于AMB干预组和对照组(P<0.01);BALF中的TNF-α与AQP5 mRNA和AQP5蛋白的表达呈负相关。结论脂多糖-香烟烟雾可降低支气管上皮AQP5的表达;AMB可能通过抑制BALF中的TNF-α释放而上调AQP5的表达。