镁对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

为探讨镁对内皮细胞的保护作用 ,用一次性密度梯度超速离心法制备人低密度脂蛋白 (LDL) ,以共轭二烯法和改良八木法检测Mg2 +(0 3、0 6、1 2和 2 4mmol L)对Cu2 +介导LDL氧化反应潜伏期和氧化修饰程度的影响。另将传至 2～ 3代的人脐静脉内皮细胞分为正常对照组、ox LDL对照组、补镁组和ox LDL +Mg2 +组 ,改良八木法测定细胞脂质过氧化物水平 ,黄嘌呤氧化法测定细胞外SOD活性 ,DTNB法测定含硒和不含硒GSH Px活性。结果显示 ,(1)Mg2 +各剂量组明显延长Cu2 +介导LDL氧化反应潜伏期 ,0 3和 0 6mmol LMg2 +显著降低TBARS的生成 ;(2 )与ox LDL组相比 ,ox LDL +Mg2 +各剂量组TBARS生成量显著下降 ,SOD活性显著升高 ,含硒GSH Px酶活力显著升高 ,不含硒GSH Px活力显著升高。提示镁抑制LDL的氧化修饰 ,补镁能降低细胞脂质过氧化物水平 ,增强抗氧化酶的的活性     

镁对内皮细胞脂质过氧化和抗氧化酶的影响

目的 :　研究了 Mg2 + 对氢过氧化物 ( H2 O2 和 t-丁基氢过氧化物 )诱导的人脐静脉内皮细胞脂质过氧化和抗氧化酶超氧化物歧化酶 ( EC- SOD)及含硒和不含硒两类谷胱甘肽过氧化物酶 ( Se- GSH- Px和 non- Se- GSH- Px)活性的影响。方法 :　用培养的人脐带内皮细胞以硫代巴比妥酸反应物 ( TBARS)法检测细胞脂质过氧化水平 ,邻苯三酚自氧化法测定 EC- SOD活性 ,DTNB直接法测定内皮细胞 Se- GSH- Px和 non- Se- GSH- Px活性。结果 :　 1 .与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 +各剂量组 TBARS显著下降 ,P<0 .0 5 ;t-丁基氢过氧化物 + Mg2 + 各剂量组与 t-丁基氢过氧化物组相比 TBARS无显著性差异。 2 .与空白对照组相比 ,0 .6mmol/L、1 .2 mmol/L、2 .4mmol/L补Mg2 + 组 SOD活性升高 ,具有显著性意义 ( P<0 .0 5 )。 3.与空白对照组相比 ,补 Mg2 + 各剂量组 Se-GSH- Px活性升高 ,P<0 .0 5 ;与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 + 各剂量组 Se- GSH- Px和 non- Se- GSH-Px活性升高 ,具有显著性意义 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。结论 :　Mg2 +能对抗内皮细胞脂质过氧化反应 ,并增强抗氧化酶的活性。     

镁对内皮细胞氧化还原相关基因表达的影响

目的 :　研究 Mg2 + 对人脐静脉内皮细胞中氧化还原相关基因 c- fos、c- jun、p5 3和ref- 1表达的影响。方法 :　免疫组织化学染色 ,并用图象分析系统对染色切片进行半定量分析。结果 :　与正常对照组相比 ,H2 O2 组 c- fos、c- jun、p5 3和 ref- 1的表达增强 ,具有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ;Mg2 + 各剂量组 ref- 1表达增强 ( P<0 .0 1 ) ;与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 + 各剂量组 c- fos、c-jun和 p5 3表达减弱 ,ref- 1表达增强 ( P<0 .0 1 ) ;H2 O2 + 0 .3mmol/L Mg2 +组 p5 3表达强于 0 .3mmol/L Mg2 + 组 ,具有显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ,H2 O2 + 0 .3mmol/L Mg2 + 、H2 O2 + 0 .6mmol/LMg2 +组和 H2 O2 + 1 .2 mmol/L Mg2 +组 ref- 1表达强于相应的 Mg2 +剂量组 ,具有显著性差异 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。结论 :　 Mg2 + 通过影响与细胞氧化还原状态有关的 c- fos、c- jun、p5 3和 ref- 1基因表达来影响氧化还原信号转导通路 ,可能与其抗氧化作用有关。     

山楂对人血管内皮细胞的作用

目的 :　探讨山楂对人血管内皮细胞的保护作用及其机制。方法 :　通过原代培养人脐静脉内皮细胞 (EC) ,从细胞形态学、细胞生长状态、细胞内乳酸脱氢酶 (LDH)释放、内皮细胞对单核细胞 (MC- EC)的粘附作用、以及低密度脂蛋白脂质过氧化 (TBARS)值测定方面 ,观察不同剂量山楂对氧化修饰的低密度脂蛋白 (Ox LDL)引起的 EC损伤的影响和对 EC的直接作用。结果 :　Ox LDL对 EC具有明显的损伤作用 ,Ox LDL组的细胞存活率低于正常对照组 (P<0 .0 5) ,细胞内 LDH释放率和 MC- EC粘附率均高于正常对照组 (P<0 .0 5) ;山楂可以有效地抑制 Ox LDL对 EC的损伤作用 ,三个剂量的山楂 +Ox LDL各组的细胞存活率均显著高于 Ox LDL 组 (P<0 .0 5) ,LDH释放率、MC- EC粘附率及 TBARS值均显著低于 Ox LDL组 (P<0 .0 5) ,呈剂量效应关系。单纯山楂组的中、高剂量组 MC- EC粘附率均显著低于正常对照组 (P<0 .0 5)。结论 :　山楂可以有效地保护人内皮细胞免受 Ox LDL的损伤 ,其机制与山楂的抗氧化作用和对 EC的直接作用有关     

维生素E和β胡萝卜素对巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白的影响

目的 :　研究维生素 E(VE)、β胡萝卜素 (βC)对巨噬细胞 (MΦ )介导的低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰能力的影响。方法 :　于培养成熟的 MΦ中分别加入不同剂量的 VE(40、1 0 0、2 0 0 μmol/L)和 βC(0 .5、1 .0、2 .0 μmol/L) 37℃孵育 2 4 h,通过测定培养物上清液中硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)、荧光物质 (Lipofusin)、LDL电泳迁移率 (Rf)及共轭二烯 (Dienes)的形成 ,反映LDL的氧化修饰程度。结果 :　体外补充 VE可以显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,随剂量增大作用加强 ;βC低剂量组 (0 .5μmol/L)可显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,其余各组无明显影响。结论 :　 VE、βC均可抑制 MΦ介导 LDL氧化修饰的能力 ,并具一定的量效关系 ,提示在 MΦ氧化修饰 LDL的可调节因子中 ,抗氧化营养素是一种有效措施     

维生素E对体外氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

为探讨维生素E(VE)对体外氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所致血管内皮细胞 (VEC)氧化损伤的保护作用。利用体外培养人脐静脉血管内皮细胞 ,建立了氧化损伤模型。将细胞分为 5组 :对照组、ox LDL组、VE L +ox LDL组 ,VE M +ox LDL组和VE H +ox LDL组。各剂量组首先在含有不同浓度的VE培养液中孵育 ,2 4小时后加入ox LDL进行氧化损伤 ,继续培养 2 4小时后收集细胞 ,进行有关指标测定。结果显示 ,ox LDL组MDA含量高于对照组和各VE组 (P <0 0 5) ;ox LDL组SOD活性低于对照组和各VE组 (P <0 0 5) ;ox LDL组、VE L +ox LDL组GSH Px活性低于其它各组 (P <0 0 5)。提示维生素E对ox LDL诱导的血管内皮细胞损伤有一定的保护作用     

维生素C在低密度脂蛋白氧化修饰中作用的体外实验

目的：研究维生素C（VC）在预防低密度脂蛋白（LDL）氧化修饰中的作用。方法：在Cu^2 介导的无细胞体系中分别加入VC10,50,100,200μmol/L,巨噬细胞体中分别加入VC50,100,200μmol/L,以维生素（200μmol/L）为阳性对照,不添加维生素C组（VC0）为阴性对照,测定荧光物质（lipofusin),硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）,LDL电泳迁移率（Rf),氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL),LDL氧化过程中的停滞时间等LDL的氧化修饰情况。结果：Cu^2 介导的无细胞体系中,高剂量VC（100,200μmol/L）在3,6,9h均能发挥其抗氧化作用,抑制TBARS,Ox-LDL生成,而VC低剂量（10,50μmol/L）则无此作用,相反在3h表现出促Ox-LDL生成作用,在巨噬细胞体系中,高剂量组（100,200μmol/L)能显著降低荧光物质,TBARS和LDL电泳迁移率（Rf),延长LDL氧化过程中的停滞时间,并存在剂量反应关系。结论：VC在LDL氧化修饰中具有双重作用,低剂量时能促进LDL氧化,高剂量时表现出抗氧化作用。     

大豆异黄酮对低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用

为探讨大豆异黄酮 (SI)在体外及体内对低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的作用特点及其与α 生育酚的异同 ,采用密度梯度超速离心法分离制备血清LDL后 ,建立了Cu2 + 诱导LDL氧化修饰反应模型 ,体外向模型中直接加入SI和α 生育酚后 ,通过监测反应体系中硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)和共轭双烯生成量的变化观察它们的作用。体内实验通过先补加SI于高脂饲料喂饲大鼠 ,再测定血中LDL对Cu2 + 诱导氧化的敏感性以反映SI的效果。结果表明 ,体外无论在启动LDL氧化反应前还是反应后加入SI,均显著降低体系中TBARS和共轭双烯的生成 ,并呈现剂量相关关系 ;仅在启动LDL氧化反应前加入α 生育酚显示良好的抑制效果 ,当启动LDL氧化反应后加入α 生育酚则未表现任何防护作用。在大鼠喂饲实验中 ,高脂饲料导致动物LDL对氧化修饰的敏感性增加 ,补加SI对此有明显的拮抗作用。可见 ,在体外SI是与α 生育酚作用有所区别的一类天然抗氧化剂 ,它在体外和体内均能显著抑制LDL的氧化修饰     

低水平大豆异黄酮对血清脂蛋白氧化修饰的影响

目的 :　评价低水平 (0 .5～ 1 0μmol/L)大豆异黄酮组分 (染料木素、大豆素和染料木甙 )对血清脂蛋白氧化修饰过程作用的效果及其特点。方法 :　采用 Cu2 +诱导全血清脂蛋白氧化修饰模型 ,通过检测体系中共轭双烯和硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)生成量变化反映异黄酮组分对脂蛋白氧化修饰过程和结局的影响。结果 :　启动氧化前向血清脂蛋白体系中加入 0 .5～1 0 μmol/L的染料木素、大豆素或染料木甙和 α-生育酚均显著减少共轭双烯和 TBARS的生成 ,并存在剂量相关关系。当血清脂蛋白氧化启动后 ,加入 1 0μmol/L异黄酮组分仍显示有较强的抑制作用 ,只是作用强度比启动前加入时减弱 ;而相同浓度的α-生育酚仅对共轭双烯生成显示有一定抑制作用 ,对 TBARS生成甚至呈现促进趋势。结论 :　低水平异黄酮组分即能对血清脂蛋白氧化修饰产生抑制作用 ,且在氧化启动后的效果优于 α-生育酚     

不同水平维生素E和β-胡萝卜素对Cu~(2 )氧化修饰低密度脂蛋白的影响

研究不同浓度的维生素 E(VE)和β-胡萝卜素 (βC)对 Cu2 诱导的氧化修饰低密度脂蛋白 (L DL )作用的影响 ,通过测定硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)、L DL 的电泳迁移率 (Rf)以及荧光物质 (L ipofusin)扫描 ,反映 L DL的氧化修饰程度。结果表明 :VE、βC均可减少 TBARS的产生、减小 L DL的 Rf,并且具有剂量 -效应关系 ,随浓度增加 ,VE抑制作用加强而 βC抑制作用减弱 ,而且 VE对 TBARS的影响比 βC小 ,对 Rf的影响比βC大。二者对荧光物质均有降低作用 ,但无剂量 -效应关系。提示 VE、βC均可不同程度的抑制Cu2 氧化修饰 L DL 的作用 ,在降低机体脂质过氧化反应、减少氧化修饰型 L DL(OX- L DL)的形成方面具有重要作用 ,但二者作用机理可能并不相同     

镁对人脐静脉内皮细胞增殖活力的影响

目的：探讨镁对人脐静脉内皮细胞增殖活力的影响及对心血管系统的保护作用。方法：在改进人脐静脉内皮细胞培养方法的基础上,用MTT法检测Mg^2对传统2－3代人脐静脉曲皮细胞增殖活力的影响,实验分为空白对照组LH2O2组;补镁组;H2O2 Mg^2组,结果：补镁各剂量组OD值高于空白对照组,H2O2＋Mg^2各剂量组OD值高于H2O2组,均具有显著性差异。结论：提示镁对内皮细胞增殖有明显的促进作用。     

不同水平维生素E和β—胡萝卜素对Cu^2＋氧化修饰低密度脂蛋白的影响

研究不同浓度的维生素Ｅ（ＶＥ）和β－胡萝卜素（βＣ）对Ｃｕ＾２＋诱导的氧化修饰低密度脂蛋白（ＬＤＬ）作用的影响,通过测定硫代巴比妥酸反应物质（ＴＢＡＲＳ）、ＬＤＬ的电泳迁移率（Ｒｆ?以及荧光物质（Ｌｉｐｏｆｕｓｉｎ）扫描,反映ＬＤＬ的氧化修饰程度。结果表明：ＶＥ、βＣ均可减少ＴＢＡＲＳ的产生、减小ＬＤＬ的Ｒｆ,并且具有剂量－效应关系,随浓度增加,ＶＥ抑制作用加强而βＣ抑制作用减弱,而且ＶＥ对ＴＢＡ     

Vitamin C inhibits lipid oxidation in human HDL

HDL are susceptible to oxidation, which affects their cardioprotective properties. Although several studies have reported inhibition of HDL oxidation by vitamin E, none has determined the potential protective effect of vitamin C, another important blood antioxidant. We investigated whether vitamin C protects HDL from oxidation by incubating HDL (0.2 g of protein/L) at 37 degrees C with cupric (Cu2+) ions (10 micromol/L) in the absence (control) or presence of vitamin C (20-200 micromol/L). In the absence of vitamin C, lipid oxidation in HDL began immediately and proceeded rapidly. Cholesteryl linoleate declined to a minimum, whereas lipid oxidation products (lipid dienes and TBARS) increased to near-maximal levels within 1 h. Vitamin C (50-200 micromol/L) retarded initiation of lipid oxidation for at least 4 h under the same conditions. The ability of vitamin C to preserve the cardioprotective antioxidant function of HDL was also assessed. HDL (0.5 g of protein/L) preincubated with Cu2+ (10 micromol/L) for 2 h in the absence of vitamin C lost antioxidant activity (45.4 +/- 6.2% inhibition of LDL oxidation compared with 93.2 +/- 3.6% for native HDL, P < 0.05). The addition of vitamin C (50-200 micromol/L) during preincubation of HDL with Cu2+, however, resulted in no significant loss of HDL antioxidant activity (77.3 +/- 0.3 to 89.8 +/- 5.4% inhibition of LDL oxidation, P > 0.05 compared with native HDL). Our results demonstrate that vitamin C inhibits lipid oxidation in HDL and preserves the antioxidant activity associated with this lipoprotein fraction.     

Consumption of a Diet Rich in Cottonseed Oil (CSO) Lowers Total and LDL Cholesterol in Normo-Cholesterolemic Subjects

Animal data indicates that dietary cottonseed oil (CSO) may lower cholesterol; however, the effects of a CSO-rich diet have not been evaluated in humans. Thirty-eight healthy adults (aged 18%#x2013;40; 12 males, 26 females) consumed a CSO rich diet (95 g CSO daily) for one week. Anthropometric measurements were obtained, and blood was drawn pre- and post-intervention. Serum lipids (total cholesterol (TC), high density lipoprotein (HDL), low density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), and free fatty acids (FFA)) were assayed. There was no change in weight or waist circumference among participants. There was no change in HDL (Pre: 1.27 ± 0.4 mmol/L; Post: 1.21 ± 0.3 mmol/L) or TG (Pre: 0.91 ± 0.6 mmol/L; Post: 1.06 ± 1.0 mmol/L). Total cholesterol and LDL were reduced (TC Pre: 4.39 ± 0.9 mmol/L; Post: 4.16 ± 0.8 mmol/L; LDL Pre: 2.70 ± 0.8 mmol/L; Post: 2.47 ± 0.6 mmol/L). When data were grouped by sex, total cholesterol was reduced in female participants (Pre: 4.34 ± 0.9 mmol/L; Post: 4.09 ± 0.8 mmol/L). Consumption of a high fat, CSO-rich diet for one week reduced total cholesterol in female participants without reducing HDL.     

银杏叶对低密度脂蛋白氧化修饰抑制作用的时效研究

目的　探讨银杏叶不同有效成分 [总提取物EGB76 1 ;银杏叶总黄酮 (GF) ;银杏叶总内酯 (GT) ]对Fe2 + 或Cu2 + 诱导的人血浆低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的抑制作用与时间的变化关系。方法　使用荧光分光光度法测定了LDL在Fe2 + 或Cu2 + 诱导下 ,分别加入上述三种有效成分 ,作用 1、2、4、6h后自身荧光物质(LF)、丙二醛 (MDA)和维生素E(VitE)含量。结果　三种有效成分对LF和MDA的生成及VitE的消耗有抑制作用 ,抑制作用在 4h内随作用时间延长逐渐明显 ,6h时抑制作用明显减弱。结论　银杏叶对低密度脂蛋白氧化修饰抑制作用具有一定的时效关系