DON 对胃癌细胞HGC-27 细胞周期和凋亡的影响

 目的 探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）对体外培养胃癌细胞HGC-27细胞周期和凋亡的影响。方法 体外培养的胃癌细胞HGC-27经50、100、1000、2000μg／L DON处理12h、24h、48h，应用流式细胞术（FCM）进行细胞周期分析，检测凋亡情况及其量效关系，Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达情况。结果 FCM检测结果表明，较高浓度（1000和2000μg／L）DON处理对细胞周期分布的影响随处理时间不同有明显差异。DON处理12h，可明显降低G0／G1细胞百分率、增加S期细胞百分率。处理时间延长至24h和48h，则表现为G0／G1细胞百分率增加，S期细胞百分率降低（P〈0．05）。DON处理24h和48h，各DON实验组HGC-27细胞凋亡率均高于对照组，在50～2000ug／L浓度范围内，凋亡率随着DON处理浓度的升高而升高。Western blot检测凋亡相关蛋白结果显示，DoN处理12、24和48h，Bax和Caspase-3蛋白表达均明显升高，而Bcl-2蛋白表达降低。结论 DON处理可影响体外培养的胃癌细胞象HGC-27细胞的细胞周期分布，其作用依DON浓度和作用时间的不同而有差异。同时DON可诱导HGC-27细胞凋亡，上调Bax和Caspase-3蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对体外培养胃癌细胞SNU凋亡的影响

目的探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）对胃癌细胞SNU凋亡的影响。方法体外培养的胃癌细胞株SNU经不同浓度（50、100、1000、2000μg／L）DON处理12h,以流式细胞术（FCM）和免疫蛋白印记（Western blotting）法检测细胞凋亡和凋亡相关蛋白bax、bcl-2、Caspase-3的表达情况。结果FCM榆测结果表明,DON处理12h后,各处理组SNU细胞凋亡率均高于对照组。在50～2000μg／L浓度范同内随着DON浓度升高凋亡率亦相应升高,两者呈明显剂量依赖关系（r=0．940,P〈0．01）。FCM和Westrn blotting法检测结果显示,DON作用12h后,SNU细胞bax和Caspase-3表达升高,bcl-2表达降低．结论DON可剂量依赖地诱导体外培养的胃癌细胞SNU凋亡,上调bax蛋白的表达,下调bcl-2蛋白的表达,进而激活Caspase-3,可能在SUN细胞凋亡过程中发挥作用。     

山东食管癌高发区脱氧雪腐烯醇和硒元素含量检测研究

[目的]探讨山东省农村居民粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和硒元素(Se)的含量与食管癌高发的关系。[方法]粮食样品中DON毒素含量的检测采用酶联免疫吸附法(ELISA);硒元素的检测采用2,3-二氨基萘(DAN)荧光分光光度法。[结果]东平、肥城两个食管癌高发区粮食DON含量为70.1～302.8μg/kg,对照组(泰山区、长清区)粮食DON检测结果为低于27.3μg/kg,食管癌高发区与对照区粮食DON含量差异有统计学意义(P<0.05);东平、肥城两个食管癌高发区粮食Se含量均数分别为76.5μg/kg、85.6μg/kg,对照组泰山区、长清区粮食Se含量均数分别为83.1μg/kg、90.7μg/kg,对照地区高于食管癌高发区(P<0.05);东平、肥城、泰山区、长清区居民头发Se含量均数分别为0.926mg/kg、1.015mg/kg、0.937mg/kg、0.941mg/kg,高发区组和对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]食管癌发病可能与DON有关,Se的缺乏可能不是食管癌发病的主要病因。     

DON与NOC对肝脏致病作用的实验研究

目的:观察脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、N-亚硝基化合物(NOC)对昆明小鼠肝脏组织损伤及潜在致癌作用.方法:128只小鼠随机分成4组,每组32只,利用隔日灌胃法,给小鼠染毒DON、NOC.DON组染毒剂量为每次0.5 mg/kg,NOC组染毒剂量为每次0.25 mg/kg,DON+NOC组染毒剂量为每次DON 0.5 mg/kg+NOC 0.25 mg/kg,时照组给予等体积生理盐水.60 d后处死小鼠,取肝脏组织制作HE病理切片,观察肝脏组织病理改变.结果:实验组动物肝脏大片坏死、大片脂肪变性、小灶区异型、双核肝细胞阳性率与对照组比较有统计学意义(P值依次分剐为0.001 8、0.000 7、0.009 3和0.022 3).DON+NOC组出现的大片脂肪变性分别与DON组、NOC组进行四格表X2检验,差异有统计学意义,P=0.005 8.结论:DON、NOC对肝脏有明显损伤,两者联合可加重肝脏损伤,且具有潜在的致癌效应.     

DON与NOC对胃组织致癌作用的实验研究

目的:观察脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、N-亚硝基化合物(NOC)对昆明小鼠胃组织的潜在致癌作用.方法:通过隔日灌胃,给小鼠染毒DON和NOC,60 d后处死小鼠,取胃组织制作HE病理切片,观察胃组织病理改变.结果:实验组胃组织息肉形成趋势、腺体轻度异形、深层上皮轻度异形阳性率分别与对照组进行X2检验,差异均有统计学意义(X2值分别为19.324 1、12.217 6和29.811 7,P均<0.01);DON+NOC组与DON组的深层上皮轻度异形出现率进行X2检验,差异有统计学意义,X2=8.586 3,P=0.003 4.结论:DON和NOC具有潜在的致癌作用,且两者联合可使肿瘤发病风险升高.     

杂色曲霉素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠致癌作用的研究

目的探讨杂色曲霉素(ST)对NIH小鼠的致癌作用,同时研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对ST致癌作用的影响。方法将180只NIH小鼠随机分为ST 3μg/kg组、ST30μg／kg组、STμg/kg DON1．5pμg／kg组、ST30μg／kg DON1．5μg／kg组、DON1．5μg/kg组和对照组等6组,每组30只。各实验组按要求分别灌喂不同剂量的真菌毒素,对照组灌喂同等容量的生理盐水,3次／周,共24周。实验第58周和第74周处死小鼠,观察各器官组织病变。结果对照组小鼠各器官组织均未见明显病理改变。ST和DON处理组均有部分小鼠发生肺腺癌和腺胃黏膜上皮异型增生。ST3μg／kg组、ST30μg/kg组、ST3μg／kg DON1．5μg／kg组、ST30μg/kg DON1．5μg/kg组和DON1．5μg／kg组肺癌的发生率分别为25．0％、41．7％、62．5％、69．2％和37．5％,腺胃黏膜上皮异型增生发生率分别为50．0％、58．3％、37．5％、53.8％和25．0％。结论经口灌喂ST和DON可诱发NIH小鼠肺癌和腺胃黏膜异型增生。ST加DON可明显提高肺癌的发生率。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇致小鼠畸形骨骼组织差异表达基因及相关通路分析

目的： 筛选脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)致小鼠胚胎畸形骨骼组织的差异表达基因及相关信号传导通路,从基因水平上阐明DON致小鼠骨骼畸形的分子基础。方法：取孕期小鼠30只,随机分成3个不同浓度DON染毒组、溶剂对照组和空白对照组,每组6只,将DON染毒组孕鼠于孕期第7～10天连续腹腔注射DON,染毒后第18天麻醉剖腹取出胎鼠骨骼组织,提取椎骨骨骼组织总RNA,通过反转录法获取畸形骨骼组织和正常对照组骨骼组织的cDNA,并对其分别进行荧光标记,采用全基因组芯片技术对小鼠胚胎畸形骨骼组织与正常对照组织的差异基因表达谱进行分析,采用基因本体学分析软件对差异表达基因进行功能分析,DAVID database数据库筛选差异表达基因涉及的信号通路,并利用荧光定量PCR(qPCR)技术对基因芯片结果进行验证。结果：在DON染毒组小鼠全基因组芯片上筛选出差异基因282个,其中下调148个,上调134个;在差异表达基因分析的基础上,发现差异表达基因涉及到的通路有153个。qPCR结果表明,上调基因Fbn1、Co19a2、Papss2、Pax1F和下调基因Runx2、Pthlh等6个差异表达基因的相对定量结果与基因芯片检验结果表达趋势一致。结论：应用基因表达谱芯片初步筛选出DON所致胎鼠畸形骨骼与正常胎鼠骨骼组织中的差异表达基因,并通过通路分析发现,上述差异表达基因涉及多条信号传导通路。     

树突状细胞研究进展与肿瘤免疫

树突状细胞(Dendritic Cell，DC)包括淋巴树突状细胞(LDC)、指状树突状细胞(IDC)、隐蔽细胞(veiled cells)，郎格罕氏细胞(LC)、间质树突状细胞和滤泡树突状细胞(FDC)。这类广泛分布于体内不同部位的多突起细胞，虽然其表型可能有所不同但均能在诱发免疫反应中起关键作用，被认为是一个独立的细胞系统——树突状细胞系统。     

CIK治疗晚期原发性肝癌

细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer，CIK细胞)是一种新型免疫活性细胞。其主要效应细胞表面既有T细胞表面标志(CD3)，也有NK细胞表面标志(CD56)，因而兼有T细胞抗瘤活性和NK细胞非MHC限性性杀瘤的特点。与淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)     

伏马毒素B1时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制

目的： 为快速检测食品中的伏马毒素B1 (fumonisin B1,FB1),制备抗FB1的单克隆抗体并利用该抗体研制基于时间分辨免疫荧光分析方法的检测试剂盒。方法：在建立抗伏马毒素B1单克隆杂交瘤细胞株的基础上,采用小鼠腹腔注射法生产大量腹水,经Protein A亲和层析柱分离纯化、透析后得到单克隆抗体,利用所得抗体建立间接竞争性时间分辨免疫荧光分析试剂盒并优化各参数：线性范围、检出限及与黄曲霉毒素 (aflatoxins,AFB1)、呕吐毒素 (deoxynivalenol,DON)和载体蛋白BSA等的交叉反应性;对试剂盒稳定性采用37 ℃破坏实验;采用3个浓度的加标回收试验确定回收率;对19份样品及FB1玉米盲样进行检测,并同时用市售ELISA试剂盒进行验证。结果：所研制试剂盒的最低检出浓度为2 ng/mL,检测线性范围为2～512 ng/mL,线性方程为Y=-0.644X+12.872 (R2=0.998),50%抑制浓度为10.07 ng/mL,加标提取后,玉米样品3个加标水平的回收率在78.32%～116.76%之间,与AFB1、DON和BSA均无交叉反应性,试剂盒常温下可保存315 d以上。结论：本研究建立了快速、敏感检测FB1的时间分辨免疫荧光检测试剂盒。     

广州某茶叶市场普洱茶中多种生物毒素污染现状调查

目的：为了解广州某茶叶市场湿仓储存普洱茶中真菌毒素的污染情况,对所抽取的70份普洱茶样本中黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）、伏马毒素（fumonisin B1,FB1）、呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇,deoxynivalenol,DON）和T-2毒素的浓度水平进行检测,旨在为制定有关普洱茶叶安全卫生管理规范和相关的卫生标准提供数据资料。方法：随机抽取广州某茶叶市场湿仓储存普洱茶70份,破碎、浸提、过滤后采用免疫亲和层析净化-高效液相色谱法检测AFB1,ELISA试剂盒检测FB1、DON和T-2毒素的污染情况。结果：本次调查所采70份普洱茶样品中,AFB1污染水平超出标准规定限值（5μg/kg）的有8例（11.43%）,DON污染水平超出标准规定限值（1 mg/kg）的有63例（90%）,FB1和T-2毒素污染水平均未超出标准规定限值（分别为1 mg/kg和100μg/kg）。结论：本调查结果提示广州市该茶叶市场中的湿仓储存普洱茶存在不同程度的AFB1及DON污染情况,而FB1及T-2毒素虽未超出标准规定的限值,但在样品中均可检出,应引起广泛重视。     

白细胞介素-18基因转染的肺癌细胞与树突状细胞融合体的抗肿瘤作用

目的研究白细胞介素-18(IL-18)基因转染的肺癌细胞与树突状细胞(DC)融合体的抗肿瘤作用。方法(1)从人外周血单核细胞诱导培养DC,与IL-18基因转染的NCI-H460肺癌细胞融合,经免疫磁珠筛选。(2)设转染组(GT组)、空载体转染组(PT组)、未转染组(NT组)和对照组(BC组),分别以IL-18转染的融合细胞、pcDNA3.1~ 转染的融合细胞、未转染的融合细胞活化的T细胞为效应细胞,BC组不含效应细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)法测定效应细胞对NCI-H460细胞的杀伤作用。(3)荷瘤裸鼠皮下注射上述3种效应细胞,以BC组为空白对照,比较4组裸鼠肿瘤体积和重量。结果3组效应细胞在体外对NCI-H460细胞的杀伤率分别为53.1%,30.1%和31.5%;3组裸鼠肿瘤体积及肿瘤重量明显低于BC组,以GT组最低。结论IL-18基因转染的融合细胞可有效诱导抗肿瘤免疫。     

鼻咽癌干细胞的生物学行为特征及CD44对Ras信号通路的调控作用

目的探讨鼻咽癌干细胞的生物学行为和Ras信号通路特征,以及CD44与Ras信号通路活化之间的调控关系。方法采用无血清悬浮培养法获得鼻咽癌CNE2和5-8F细胞的干细胞CNE2-SC和5-8F-SC。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖,细胞平板克隆形成实验观察细胞克隆形成情况,Transwell细胞迁移实验检测细胞的迁移能力,细胞黏附实验观察细胞贴壁情况,Western blot法检测细胞中Ras信号通路相关蛋白的表达水平,采用RNA干扰技术明确CD44对Ras信号通路的调控作用。结果接种后24、48和72 h,鼻咽癌干细胞CNE2-SC和5-8F-SC的增殖能力分别低于其来源鼻咽癌细胞(均P<0.05)。细胞种植14 d后,CNE2-SC细胞的克隆形成率为(44.5±1.9)%,高于其来源细胞CNE2[(34.9±1.5)%,P<0.01];5-8F-SC细胞的克隆形成率为(47.4±1.8)%,亦高于其来源细胞5-8F[(37.2±1.7)%,P<0.01]。CNE2-SC细胞的迁移细胞数为(87.6±7.8)个/视野,是CNE2细胞的3.97倍(P<0.01)。5-8F-SC细胞的迁移细胞数为(67.2±5.7)个/视野,是5-8F细胞的3.07倍(P<0.01)。接种后3 h,CNE2-SC和CNE2细胞的黏附贴壁率分别为(42.1±7.6)%和(8.9±2.0)%;接种后6 h,分别为(82.4±5.0)%和(12.1±2.2)%。CNE2-SC细胞的黏附贴壁率均高于CNE2细胞(均P<0.01)。接种后3 h,5-8F-SC和5-8F细胞的黏附贴壁率分别为(53.6±6.1)%和(7.3±1.5)%;接种后6 h,分别为(90.7±3.6)%和(11.0±1.2)%。5-8F-SC细胞的黏附贴壁率均高于5-8F细胞(均P<0.01)。与普通鼻咽癌细胞相比,鼻咽癌干细胞中CD44、Ras和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达水平升高(均P<0.01),E-钙黏蛋白(E-cadherin)、10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)表达水平降低(均P<0.01),磷酸化丝裂原细胞外激酶1/2(p-MEK1/2)、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)磷酸化水平升高(均P<0.01)。相关分析显示,CNE2细胞与CNE2-SC细胞中,5-8F细胞与5-8F-SC细胞中,CD44与Ras蛋白表达水平均呈高度正相关(r=0.985,P=0.002;r=0.962,P=0.038)。沉默CNE2-SC细胞中CD44的表达后,人表皮生长因子受体2(HER-2)和Ras的蛋白表达水平显著降低,p-ERK1/2、p-Akt和p-PKCδ磷酸化水平下降(均P<0.01)。结论相对于来源鼻咽癌细胞,鼻咽癌干细胞增殖能力降低,但其克隆形成能力、迁移能力、黏附能力增强,可能与其CD44调控的Ras信号通路异常激活有关。     

PM2.5混悬液对3种癌细胞侵袭和迁移能力的影响

目的：探讨PM_2.5混悬液对人肺癌A549细胞、人肝癌HepG2细胞和人肾癌A498细胞迁移和侵袭能力的影响。方法：采用10、50μg/mL的PM_2.5混悬液分别对A549、HepG2和A498细胞染毒24 h,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果：迁移实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_2.5染毒组A549细胞穿膜细胞数分别为(356.33±30.92)、(476.33±28.50)和(563.33±74.00)个;HepG2细胞分别为(86.42±4.75)、(140.00±16.15)和(234.17±9.06)个;A498细胞分别为(42.33±6.43)、(80.00±6.08)和(174.67±25.01)个。侵袭实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_2.5染毒组A549细胞的穿膜细胞数分别为(188.33±9.45)、(313.00±7.94)和(404.00±57.66)个;HepG2细胞分别为(48.33±3.26)、(97.75±6...     

紫杉醇序贯吉非替尼对三维培养非小细胞肺癌细胞的抑制作用及其机制

目的:探讨序贯或联合吉非替尼(gefitinib,G)和紫杉醇(paclitaxel,P)对三维细胞模型中非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)的抑制作用及其机制。方法:采用超低黏附表面细胞培养板培养人NSCLC细胞株A427、Calu-3,使其形成三维细胞模型;分别采用磺酸罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)、Cell Titer-Blue法检测紫杉醇序贯吉非替尼(P-G)、吉非替尼序贯紫杉醇(G-P)及紫杉醇联合吉非替尼(P+G)处理对贴壁和三维培养细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期,Western blotting检测细胞中EGFR和Akt总蛋白及其磷酸化的水平。结果:单层细胞培养时,P-G、G-P和P+G处理后,A427细胞的存活率分别为(39.5±0.07)%、(57.7±0.03)%和(53.7±0.05)%,Calu-3细胞的存活率分别为(23.9±0.02)%、(58.2±0.05)%和(48.8±0.07)%,以P-G的抑制作用最强(P<0.05);三维细胞模型中,P-G、G-P和P+G处理后,A427细胞的存活率分别为(19.9±2.89)%、(43.2±8.64)%和(36.6±9.79)%,Calu-3细胞的存活率分别为(10.2±0.76)%、(50.0±3.45)%和(31.4±6.15)%,也以P-G的抑制作用最强(P<0.05);而且,P-G对这两细胞的抑制作用,三维培养细胞显著强于单层培养细胞(P<0.05)。P-G治疗可提高subG1期细胞比例,并诱导细胞阻滞在G1期;P-G治疗可明显下调三维培养细胞中磷酸化Akt和磷酸化EGFR的水平。结论:三维细胞模型中,P-G较P+G或G-P对NSCLC细胞的增殖有更强的抑制作用,可能与细胞周期阻滞和磷酸化Akt、EGFR水平下调有关。     

嵌合抗原受体T细胞治疗相关细胞因子释放综合征小鼠模型的建立

目的建立嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗相关细胞因子释放综合征(CRS)的小鼠模型。方法通过分子克隆及慢病毒转染技术, 构建靶向人CD19分子的CAR-T细胞, 采用流式细胞术检测CAR-T细胞转染效率, 酶联免疫吸附试验(ELISA)法及流式细胞术检测CAR-T细胞特异性杀伤靶细胞的能力。通过尾静脉注射CAR-T细胞至荷瘤重症联合免疫缺陷裸鼠体内, 小鼠分为磷酸缓冲液组、低负荷组(注射1×105个人淋巴瘤细胞Raji-Luc2细胞)和高负荷组(注射5×105个Raji-Luc2细胞)。采用动物活体成像法检测肿瘤治疗效果, ELISA法检测小鼠血清中细胞因子人白细胞介素2(IL-2)、人γ-干扰素(IFN-γ)、鼠IL-6、鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的水平。结果经尾静脉注射人T细胞和T细胞+OKT-3抗体后, T细胞组和T细胞+OKT-3组小鼠的健康得分分别为(1.15±0.08)分和(2.90±0.15)分, 差异有统计学意义(P<0.001)。T细胞+OKT-3组小鼠血清中人IL-2、人IFN-γ、人IL-15、鼠IL-6、鼠GM-CSF水平分别为(1...     

bcl-2反义寡核苷酸增强足叶乙苷诱导原代白血病细胞凋亡的研究

目的：研究bcl-2的反义寡核苷酸对足叶乙苷(VP(16)诱导原代培养的急性白血病(AL)细胞凋亡的影响。方法：用细胞计数法观察细胞的生存情况；用免疫荧光标记法通过流式细胞仪观测细胞bcl-2蛋白水平；用形态学观察及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：靶向bcl-2 mRNA翻译起始区与靶向蛋白编码区的两个反义寡核苷酸分别与VP(16)联合作用AL细胞48 h，细胞的生存受到明显的抑制，分别同无关寡核苷酸(NS-ODN)联合VP(16)组、单用VP(16)组进行比较，差异有显著性(P＜0.05)。这两个不同靶点的反义寡核苷酸分别与VP(16)联用，均能明显下调AL细胞bcl-2蛋白的表达，并且联合作用AL细胞48 h的凋亡细胞百分率分别与NS-ODN联合VP(16)组、单用VP(16)组进行比较，差异有显著性(P＜0.05)。结论：针对bcl-2 mRNA翻译起始区和蛋白编码区两个靶点的反义寡核苷酸能增强VP(16)诱导急性白血病细胞的凋亡。     

紫檀芪诱导人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的细胞凋亡及其机制研究

背景与目的：紫檀芪是一种天然抗氧化剂,其抗视网膜母细胞瘤的效果仍不明确。拟探讨紫檀芪对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的细胞增殖、细胞凋亡及细胞自噬的作用,并初步阐明其作用机制。方法：采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法测定细胞的增殖活力,Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡,吖啶橙染色观察细胞内自噬囊泡的变化,蛋白［质］印迹法(Western blot)检测LC3B及P62蛋白的表达。结果：紫檀芪显著抑制WERI-Rb-1细胞的增殖活力(P<0.01),以25、50和100 μmol/L的药物浓度作用细胞24 h时,细胞增殖活力分别为(93.02±0.47)%、(55.10±2.04)%和(30.33±1.45)%;50 μmol/L紫檀芪处理细胞12、24和48 h时,细胞增殖活力分别为(88.38±3.70)%、(53.37±1.17)%和(29.60±1.05)%。紫檀芪显著诱导细胞凋亡(P<0.01),对照组、24和48 h细胞的凋亡率分别为(4.08±0.79)%、(13.44±2.12)%和(23.49±2.01)%。紫檀芪能够激活WERI-Rb-1细胞发生细胞自噬,上调LC3蛋白的表达,下调P62蛋白的表达,增加细胞内自噬囊泡的数量(P<0.01)。3-MA及Beclin1 siRNA抑制细胞自噬后能够部分逆转紫檀芪的抗肿瘤作用(P<0.01)。3-MA抑制细胞自噬后,紫檀芪处理组的细胞凋亡率为(12.97±2.09)%,3-MA+紫檀芪组为(8.35±1.11)%。siRNA敲低Beclin1后,紫檀芪处理组和siRNA+紫檀芪组的细胞凋亡率分别为(13.80±2.19)%和(9.62±0.52)%。结论：紫檀芪可以显著抑制WERI-Rb-1细胞的细胞增殖并激活细胞自噬促进细胞凋亡。     

急性白血病患者外周血Treg细胞与Th17细胞的相关性

目的:检测急性白血病患者外周血中Treg细胞与Th17细胞的比例以及相关细胞因子如IL-17、IL-6、TGF-β的变化,分析其相关性。方法:选取兰州大学第二医院血液科急性白血病初诊患者15例,另取15名健康志愿者为对照。流式细胞术检测外周血中CD3+CD4+TIL-17+辅助性T细胞(Th17细胞)、CD4+TCD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)占CD4+T细胞的比例,ELISA法检测血清中细胞因子IL-17、TGF-β、IL-6的水平。结果:急性白血病患者外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的(1.39±0.24)%,高于对照组的(0.26±0.11)%(P<0.05);急性白血病患者外周血Treg细胞占CD4+T细胞的(11.58±2.17)%,高于对照组的(2.47±0.72)%(P<0.05);且Treg细胞与Th17细胞呈正相关(γ=0.37)。急性白血病患者血清中TGF-β、IL-6、IL-17的水平分别为(26.06±2.43)、(14.66±2.47)、(18.63±2.38)pg/ml,高于对照组的(13.41±1.92)、(1.44±0.29)、(10.34±1.71)pg/ml(均P<0.05)。结论:急性白血病患者外周血中Treg、Th17细胞比例升高,且两者呈正相关;急性白血病患者血清中TGF-β、IL-6、IL-17水平升高,可能影响Treg与Th17细胞的平衡。     

白细胞介素-8沉默对喉鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的探讨白细胞介素-8(IL-8)沉默对喉鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法将IL-8小干扰RNA(siRNA)和Lipofectamine 2000转染试剂转染至喉鳞状细胞癌Hep-2细胞作为实验组和NC组仅转染Lipofectamine 2000转染试剂的细胞作为,未做处理的细胞作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测IL-8、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、cleaved caspase 3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(B AX)的相对表达量。结果实验组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中IL-8蛋白的相对表达量明显低于NC组和空白组细胞,OD值明显低于NC组和空白组细胞(P<0.01)。实验组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的凋亡率明显高于空白组和NC组细胞(P<0.01)。实验组Hep-2细胞中p-AKT和抑制凋亡蛋白Bcl-2的相对表达量均低于空白组和NC组细胞,而促凋亡蛋白B AX和cleaved caspase 3的相对表达量均高于空白组和NC组细胞(P<0.05)。3组Hep-2细胞AKT蛋白的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论IL-8可通过对磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/AKT相关信号通路的调控,抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的增殖能力,并促进其凋亡,为喉鳞状细胞癌的诊断和治疗提供了新的靶点及可能的治疗策略。