辛伐他汀抑制肾间质纤维化的实验研究

目的观察辛伐他汀在体内对细胞增殖、肾间质肿瘤坏死因子(TGF)-β1表达的影响。方法36只Wistar大鼠随机分为假手术组(SOR组,12只),模型对照组(UUO组,12只),辛伐他汀治疗组(SIM组,12只),SIM组术前1 d开始给予辛伐他汀20 mg.kg-1.d-1灌胃,其余两组以等量蒸馏水灌胃,术后14 d处死大鼠,留取血标本实验室检查血清胆固醇和甘油三酯,取术侧肾脏行HE、Masson染色比较各组肾组织病变,免疫组织化学SP法检测肾小管间质增殖细胞核抗原(PCNA)、TGF-β1的表达。结果SIM组肾组织纤维化病变减轻,肾小管间质细胞增殖受抑,TGF-β1表达下调。结论辛伐他汀能够抑制肾小管间质纤维化早期细胞的增殖,减少间质中炎性细胞的浸润,并通过下调TGF-β1的表达,削弱细胞增殖与细胞因子间相互促进的恶性循环来抑制肾小管间质纤维化的进展。     

肾上腺髓质素基因敲除小鼠单侧输尿管结扎肾脏α-SMA表达特点及缬沙坦的作用

目的观察肾上腺髓质素基因缺失状态下小鼠肾脏α-SMA的表达特点及缬沙坦的作用。方法结扎单侧输尿管方法制备肾间质纤维化实验动物模型,采用免疫组化、RT-PCR方法检测α-SMA的定位与mRNA表达。结果单侧输尿管结扎小鼠肾脏α-SMA表达明显高于假手术组(P<0.01),其中肾上腺髓质素基因敲除小鼠高于野生小鼠,缬沙坦可下调其表达。结论单侧输尿管结扎可诱导肾小管上皮细胞表型转化,肾上腺髓质素基因缺失状态下其表达增强,血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦可部分抑制其转化。     

肾上腺髓质素与肾上腺紧张素在维持性血透中的变化

应用放免法测定３２例维持性血透患者透析前后血浆肾上腺髓质素（ＡＤＭ１３－５２）及前体肾上腺紧张素（ＡＤＭ１５３－１８５）水平。发现ＡＤＭ１３－５２较正常人明显升高（Ｐ〈０．０１），而ＡＤＭ１５３－１８５则明显下降（Ｐ〈０．０１）。前者与ＭＡＰ、血浆ＢＵＮ、ＥＴ有明显相关性，ｒ值分别为０．４９２、０．７４３、０．４９２，而后者与ＭＡＰ、ＢＵＮ、ＥＴ无相关。血液透析后ＡＤＭ１３－５２与ＡＤＭ１５３－１     

CGRP对UUO小鼠肾组织间质纤维化与炎性因子表达的干预作用

目的 探讨CGRP对小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化的影响.方法 选择雄性小鼠36只,建立小鼠UUO模型,前2 d治疗组和模型组分别每天给予CGRP 1 R.0 nmol·kg-1·d-1和同等量0.9%氯化钠溶液静脉注射.观察模型第14天肾小管损害百分比、肾间质纤维化程度、肾间质α-SMA平滑肌肌动蛋白、肾间质巨噬细胞数,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)以及F4/80 mRNA的表达.结果 CGRP显著减轻肾小管损害和肾间质纤维化(P<0.05);治疗组肾间质巨噬细胞数F4/80和肾间质α-SMA表达显著低于模型组(P<0.05);CGRP显著抑制MCP-1以及F4/80 mRNA的表达(P<0.05).结论 CGRP减少小鼠UUO模型肾间质巨噬细胞浸润、降低MCP-1以及F4/80 mRNA表达、抑制α-SMA的表达,从而减轻肾间质纤维化.     

肾上腺髓质素在充血性心力衰竭中的价值分析

目的:观察充血性心力衰竭患者肾上腺髓质素(ADM)的水平变化以及在CHF中的诊断价值及其灵敏度和特异度。方法:CHF组共80例,(CHF)根据NYHA心功能分级标准将CHF组又分为心功能Ⅱ级组24例、Ⅲ级组26例、Ⅳ级组30例。又按射血分数(EF)将CHF组分为EF<40%组42例和≥40%组38例。对照组50例,为非心力衰竭患者,用放射免疫法测定ADM的浓度,用心脏彩色多普勒超声心动图测定左室射血分数(LVEF)和左室舒张末内径(LVED)。结果:CHF组总体ADM水平与非心力衰竭组比较差异无显著性。ADM在NYHA心功能Ⅲ级组较Ⅱ级组显著升高(P<0.05)。结论:ADM有助于不同心功能级别的诊断。     

肾上腺髓质素在缺氧性肺动态高压演进过程中的作用

目的：研究肾上腺髓质素（ＡＭ）在缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨＴ）演进过程中含量的变化规律及其与ＥＴ－１的关系。方法：应用常压间断缺氧法建立大鼠ＨＰＨＴ模型,用放免法测定对照组不同缺氧时间组血浆和肺组织ＡＭ浓度以及血浆ＥＴ－１浓度,并用免疫组化方法观察不同组大鼠肺ＡＭ的分布和含量变化。结果：缺氧３ｄ起血浆ＡＭ浓度增高,１４ｄ进起一步增高;ＥＴ－１／ＡＭ值自缺氧第１天起增高,７～１０ｄ达到高峰;肺组织ＡＭ     

肾上腺髓质素及其在眼科应用的研究进展

１９９３年，日本学者Kitamura等人从人肾上腺嗜铬细胞瘤组织中分离得到一种新的肽类物质，因为它在正常肾上腺髓质及起源于肾上腺髓质的肾上腺嗜铬细胞瘤中含量丰富，故被命名为“肾上腺髓质素”（adrenomedullin，ADM）犤１犦。研究表明，ADM是一种具有多种生物学作用的内源性活性肽，参与机体多种生理活动的调节和疾病的发生发展，与眼部关系也很密切。本文即对其生物学特性及与各种眼病的关系作一综述。１ADM的分子生物学特征人ADM由５２个氨基酸残基组成，其中第１６位和第２１位的半胱氨酸残基由一个二硫键连接，构成一个环状结…     

生长激素和肾上腺髓质素在心力衰竭中的变化及其临床意义

目的:观察不同病因不同心功能级别充血性心力衰竭(心衰,CHF)患者血清生长激素(GH)和血浆肾上腺髓质素(ADM)的水平变化,并比较二者在CHF中的诊断价值及其灵敏度。方法:将受试对象分为非心衰组30例和心衰组72例。心衰组中冠心病31例,高血压病12例,风湿性心脏病16例,扩张型心肌病13例。其中NYHA心功能分级第Ⅱ级组22例,第Ⅲ级组20例,第Ⅳ级组30例。分别用放射免疫法和酶联免疫法测定血浆ADM、血清BNP和GH的浓度,同时行心脏彩色多普勒超声测定左室舒张末内径(LVED)和左室射血分数(LVEF)。结果:心衰组GH水平较非心衰组升高(P<0.05);ADM两组间比较差异无显著性。不同病因组间比较,ADM在各病因组高于其他病因组(P<0.05),而其他病因组间比较无统计学差异;GH在各病因组比较无统计学意义,GH和ADM在心功能第Ⅱ级和第Ⅲ级依次升高,Ⅳ级组低于第Ⅲ级、高于第Ⅱ级,各组间比较均P<0.05,GH和ADM诊断心衰的曲线下面积为0.792和0.585,灵敏度和特异度HG均明显优于ADM(P<0.05),GH和ADM均与心功能级别呈正相关,P值分别为<0.001和<0.05。结论:GH有助于CHF的诊断,ADM对CHF的诊断价值不大;GH诊断CHF的灵敏度和特异度均优于ADM。     

肾上腺髓质素在缺氧性肺动脉高压演进过程中的作用

目的 :研究肾上腺髓质素 (AM)在缺氧性肺动脉高压 (HPHT)演进过程中含量的变化规律及其与ET 1的关系。方法 :应用常压间断缺氧法建立大鼠HPHT模型 ,用放免法测定对照组和不同缺氧时间组血浆和肺组织AM浓度以及血浆ET 1浓度 ,并用免疫组化方法观察不同组大鼠肺AM的分布和含量变化。结果 :缺氧 3d起血浆AM浓度增高 ,1 4d起进一步增高 ;ET 1 /AM值自缺氧第 1天起增高 ,7～ 1 0d达到高峰 ;肺组织AM浓度缺氧 1 4起升高 ;免疫组化示AM样物质主要沉积于血管 ,缺氧 1 4～ 2 1d组染色颗粒明显增多。结论 :AM可能在HPHT演进过程中起重要作用。     

肾上腺髓质素在缺氧性肺动脉高压演进过程中的作用

目的:研究肾上腺髓质素(AM)在缺氧性肺动脉高压(HPHT)演进过程中含量的变化规律及其与ET-1的关系。方法:应用常压间断缺氧法建立大鼠HPHT模型,用放免法测定对照组和不同缺氧时间组血浆和肺组织AM浓度以及血浆ET-1浓度,并用免疫组化方法观察不同组大鼠肺AM的分布和含量变化。结果:缺氧3d起血浆AM浓度增高,1 4d起进一步增高;ET-1 /AM值自缺氧第1天起增高,7～1 0d达到高峰;肺组织AM浓度缺氧1 4起升高;免疫组化示AM样物质主要沉积于血管,缺氧1 4～2 1d组染色颗粒明显增多。结论:AM可能在HPHT演进过程中起重要作用。     

缬沙坦及红花对单侧输尿管结扎大鼠肾脏细胞增殖的影响

目的观察肾间质纤维化实验大鼠肾脏细胞增殖的特点及缬沙坦、红花对其的抑制作用。方法结扎大鼠单侧输尿管(UUO)复制肾间质纤维化实验动物模型,分别给以缬沙坦10mg·kg-1·d-1、红花4.0g·kg-1·d-1经口灌服,14d后摘取肾脏,采用免疫组化、RT-PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、流式细胞学检测细胞增殖/凋亡及细胞周期。结果免疫组化结果显示UUO大鼠肾脏PCNA阳性细胞表达明显增多,RT-PCR显示其基因表达增强,流式细胞学显示UUO大鼠肾脏细胞增殖/凋亡比例下降,S期细胞比例增多;缬沙坦及红花治疗组均可在蛋白及基因水平下调其表达。结论单侧输尿管结扎可诱导肾脏细胞增殖,血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦及中药红花可下调其表达。     

Hirudin improves renal interstitial fibrosis by reducing renal tubule injury and inflammation in unilateral ureteral obstruction (UUO) mice

Renal interstitial fibrosis (RIF) often occurs in many chronic kidney diseases (CKD). Hirudin now is applied to treat fibrosis in some organs. In this study, we verified the treatment effects of hirudin on RIF in vivo and in vitro with the underlying mechanism. The RIF in vivo was the unilateral ureteral obstruction (UUO) model and RIF in vitro was the renal tubular epithelial cells induced by TGF-β. The renal pathological changes and renal fibrosis were observed by hematoxylin and eosin (H&E) staining and Masson staining. The α-SMA in renal tissues was detected by immunohistochemistry. The inflammatory factors were analyzed by the ELISA assay. The cell apoptosis was observed by TUNEL assay. The related proteins of fibrosis, epithelial-mesenchymal transition (EMT) and apoptosis were assessed by western blot analysis. The experimental data demonstrated that hirudin decreased fibrosis, EMT, inflammation and cell apoptosis in renal tissues of UUO rats and TGF-β-induced renal tubular epithelial cells. Furthermore, hirudin also reduced the expression of collgen-I, FN, α-SMA, N-cad, slug, E-cad, IL-1β, IL-6 and TNF-α in mice serum and TGF-β-induced renal tubular epithelial cells. The apoptosis related proteins (pro-caspase3, pro-caspase9, bcl2 and bax) expression was also down-regulated in renal tissues of UUO rats. In conclusion, hirudin depressed the fibrosis in renal tissues and renal tubular epithelial cells by inhibiting the inflammation, regulating the related proteins of fibrosis and ETM and decreasing the apoptosis of renal tubular epithelial cells. These findings may offer an effective treatment method for RIF.     

特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用

目的探讨特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及其可能机制。方法应用特异性NF-κB抑制剂PDTC治疗单侧输尿管梗阻大鼠模型,常规HE、PASM染色观察肾间质病理变化,电泳迁移率变动分析法检测肾组织中NF-κB的活性,免疫组化法检测TGF-β1、MCP-1的表达,并采用图像分析系统进行半定量分析。结果治疗组较模型组大鼠梗阻侧肾脏病理变化明显减轻,肾皮质NF-κB活性及小管间质TGF-β1、MCP-1表达明显降低(P<0·01)。结论特异性NF-κB抑制剂通过抑制NF-κB激活并进一步减少下游炎症和致纤维化细胞因子的表达以达到治疗肾间质纤维化的作用。     

罗格列酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用及其机制

目的 :探讨罗格列酮 (RSG)对单侧输尿管梗阻 (UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用及其机制。方法 :将大鼠随机分成UUO组和UUO +RSG组 ,另设假手术组 (SHAM)为对照。用药组于术前 3d给予RSG 3 0mg·kg-1·d-1,ig ,直至术后 14d处死动物 ,对照组给予等量的灭菌去离子水同样处理。观察左侧肾脏病理学改变 ,比较肾间质基质含量和肾间质纤维化程度 ;以α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的免疫组化结果观察肾小管上皮细胞转型情况。结果 :与UUO组相比 ,RSG +UUO组左侧肾脏的病理改变及肾间质纤维化程度明显减轻 (P <0 0 5 ) ,肾小管上皮细胞α SMA的表达显著减少 (P <0 0 5 ) ;而SHAM组对左侧肾脏病理学无显著影响。结论 :RSG对UUO所致的大鼠肾间质纤维化具有保护作用 ,其机制可能部分是通过减少肾小管上皮细胞向肌纤维细胞的转型 ,从而改善肾间质纤维化     

梗阻性肾病大鼠肾脏肾上腺髓质素的表达及缬沙坦、红花对其的影响

目的观察肾上腺髓质素在梗阻性肾病中的表达及缬沙坦、红花对其的影响。方法结扎SD大鼠单侧输尿管制备肾间质纤维化实验动物模型,同时给以缬沙坦及红花灌胃治疗,14d后摘取肾脏,免疫组化及原位杂交方法测定肾上腺髓质素的表达。结果梗阻性肾病实验动物肾脏肾上腺髓质素表达强度及面积均明显减弱,缬沙坦及红花可促进其表达。结论缬沙坦及红花拮抗肾间质纤维化可能与调控肾上腺髓质素的表达有关。     

VEGF ameliorates tubulointerstitial fibrosis in unilateral ureteral obstruction mice via inhibition of epithelial-mesenchymal transition

Aim:

Vascular endothelial growth factor (VEGF) has been shown to be a survival factor for renal tubular epithelial cells. In the present study, we investigated whether administration of VEGF ameliorates tubulointerstitial fibrosis in a mouse model of unilateral ureteral obstruction (UUO).

Methods:

Thirty-six male CD-1 mice were randomly divided into three groups: sham-operation, UUO and UUO+VEGF group. VEGF (50 μg/kg) was subcutaneously injected twice daily from d 1 to d 14. Mice in each group were killed at d 3, 7, or 14 after the operation, and the tubulointerstitial fibrosis was histopathologically evaluated. Human proximal tubular epithelial cells (HK-2) were used for in vitro study. The expression levels of α-SMA, E-cadherin, TGF-β1, CTGF, and BMP-7 in the kidney were determined using Western blot and RT-PCR.

Results:

In the UUO mice, the degree of interstitial fibrosis was dramatically increased in a time-dependent manner. At d 3, 7, and 14, both the mRNA and protein expression levels for α-SMA, TGF-β1, and CTGF were significantly upregulated, whereas those for E-cadherin and BMP-7 were significantly downregulated. At d 3 and 7, VEGF treatment significantly reduced interstitial fibrosis and the expression levels for α-SMA, TGF-β1, and CTGF, while significantly increased the expression of E-cadherin and BMP-7, as compared with the UUO mice. At d 14 after operation, no significant differences were observed in the expression of the examined markers between VEGF-treated mice and UUO mice, with the exception of CTGF. In HK-2 cells, VEGF blocked TGF-β1-induced α-SMA and vimentin expression and restored E-cadherin expression in a dose-dependent manner.

Conclusion:

VEGF may ameliorate renal tubulointerstitial fibrosis at the early stage in UUO mice. This effect may be related to inhibition of VEGF on renal tubular epithelial-mesenchymal transition (EMT).     

单侧输尿管结扎幼鼠肾间质纤维化中周细胞转分化趋势及意义

目的本实验旨在通过观察单侧输尿管结扎(UUO)幼鼠模型中周细胞标志物胶原Ⅰ型蛋白(coll1α1)、血小板源性生长因子β(PDGFRβ)、神经生长因子2(NG2)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平的变化,进而探讨周细胞转分化趋势,以及用雷公藤多苷治疗后的干预效果。方法采用UUO模型,将5⁶周龄90只雄性幼年SD大鼠,按随机数表法平均分为3组,即假手术组(行手术分离但不结扎左侧输尿管)、模型组(手术结扎左侧输尿管近肾盂段)和雷公藤多苷干预组。分别在术后1、2、3、7、14 d每组各取6只小鼠处死,留取左肾,采用免疫组织化学法检测周细胞标志物coll1α1、PDGFRβ、NG2、α-SMA在肾间质纤维化过程中的表达水平的变化,同时利用Masson染色观测绿染面积(胶原纤维)的大小变化。结果 UUO模型组中coll1α1、PDGFRβ、NG2、α-SMA的表达水平显著高于假手术组(P<0.01),随着梗阻时间的延长,其表达水平均呈增高的趋势,纤维化程度逐渐加重;UUO模型组中Masson染色蓝染面积随着实验时间的增加而增大;雷公藤多苷干预组各时间点coll1α1、PDGFRβ、NG2、α-SMA的表达水平均低于模型组(P<0.01),纤维化程度较其减轻,但仍高于假手术组(P<0.01)。结论肾间质纤维化过程中,周细胞发生了转分化,治疗组雷公藤多苷可能有一定的抑制周细胞转分化作用,从而延缓纤维化的进程。     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的保护作用

目的观察阿托伐他汀对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的调节作用。方法采用单侧输尿管结扎术致肾间质纤维化大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、治疗组。术后第3、7、14天处死,采取空腹静脉血监测总胆固醇,经HE、Masson染色及免疫组化观察肾间质损伤及肝细胞生长因子（HGF）的表达。结果 3组胆固醇浓度差异无统计学意义（P〉0.05）,模型组肾间质损伤明显高于假手术组（P〈0.05）,而治疗组HGF表达高于模型组（P〈0.05）,肾间质损伤低于模型组（P〈0.05）。结论阿托伐他汀通过非降脂途径延缓单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）所致大鼠肾间质纤维化程度,部分依赖于增强HGF表达。