淋巴组织免疫组织化学染色方法的探讨

目的:鉴于病理淋巴组织的切片常见组织较硬、细胞脆性大,免疫组织化学染色显色模糊,甚至出现假阴性现象,探讨淋巴组织制片与免疫组化染色的新方法与新思路。方法:采用B-5固定液、软化剂的处理进行石蜡切片、免疫组织化学染色方法进行染色。结果:制出背景清晰、定位准确、反差分明、效果较好的免疫组化染色淋巴组织切片。结论:经B-5固定液固定、软化剂处理过的淋巴组织免疫组化切片能为淋巴组织疾病诊断提供定位准确、阳性明显的抗原表达信息。     

EDTA过氧化氢修复对富含黑色素肿瘤组织染色的效果

目的：探讨EDTA过氧化氢修复液高温修复同时去除黑色素的方法在富含黑色素肿瘤免疫组织化学染色中的应用。方法：富含黑色素肿瘤组织5例,在EDTA(pH 9.0)修复液中加入H₂O₂,高温修复同时也去除了黑色素,再行HE及免疫组织化学染色与未脱色素行HE及免疫组织化学染色效果进行比较。结果：未脱色素组织HE染色切片可见大量棕黄色的黑色素颗粒覆盖在肿瘤细胞上,经免疫组化化学染色后黑色素与二氨基联苯胺(DAB)染色显示的棕黄色相互混淆,无法分辨。EDTA过氧化氢修复液高温修复同时去除黑色素组黑色素可完全去除,组织结构完整,HE染色效果好,免疫组化染色阳性定位准确,背景清晰。结论：EDTA过氧化氢修复液高温修复同时去除黑色素的方法可很好地去除富含黑色素肿瘤中的黑色素,HE染色对比好,背景干净,免疫组化染色着色部位准确,强度合适,此方法优于其他富含黑色素肿瘤组织HE染色及免疫组织化学染处理方法。     

鸡胚石蜡组织切片免疫组化中的问题探讨及方法改进

目的总结鸡胚组织免疫组织化学染色中的操作经验。方法应用常规免疫组化方法对不同发育时期的鸡胚石蜡组织切片进行免疫组化染色。结果免疫组化的方法检测早期鸡胚发育中的相关抗体的表达定位准确,背景清晰。结论注意鸡胚免疫组化的操作要点,有助于提高鸡胚组织的免疫组化染色质量。     

全自动免疫组化染色仪在临床病理的应用

目的 探讨全自动免疫组化染色仪在,临床病理工作中的应用.方法 利用全自动免疫组化染色仪替代手工操作,对临床病理工作中60余种常用抗原指标进行检测.结果 切片着色均匀、定位准确、背景清晰.结论 全自动免疫组化染色仪可以避免各种手工操作误差对免疫组化染色的影响,有利于促进免疫组化的标准化,从而可以广泛地应用于临床病理.     

全自动免疫组化染色仪在抗肝纤维化中的应用研究

目的初步研究全自动免疫组化染色仪在临床病理工作中的应用。方法选取2012年1～4月使用姜黄素治疗的肝纤维化的小鼠12只,分为观察组和对照组。观察组6只小鼠肝脏组织使用全自动免疫组化染色仪进行免疫组化检测,对照组6只小鼠肝脏组织使用手工方法进行免疫组化检测,统计两组免疫组化切片着色均匀度、定位准确度、背景清晰度、单位组织面积抗体使用量、染色时间来评价两种免疫组化方法。结果观察组6只小鼠组织切片着色均匀5例,定位准确6例和背景清晰6例,均显著高于对照组(P均<0.05)。观察组抗体使用量为1.2 ng/cm2,平均染色时间15 min,均显著低于对照组(P均<0.05)。结论全自动免疫组化染色仪具有着色均匀、定位准确、背景清晰、节约抗体和节省时间等特点,是适合病理研究人员和操作人员使用的现代仪器。     

陈旧石蜡组织块的免疫组织化学染色及防脱片体会?

目的：总结陈旧石蜡组织块的免疫组织化学染色及防脱片经验。方法选取包埋时间为4年的金黄地鼠胰腺和肝脏石蜡组织块各150个,按照本课题组改进的实验方法进行切片及免疫组织化学染色。结果镜下观察显示,切片染色阳性结构清晰,无非特异性背景着色,脱片率约为10%。结论陈旧石蜡组织块在自来水里浸泡3~4 d 后再切能够提高切片质量;在免疫组织化学中烤片、抗原修复、一抗均是影响脱片的关键环节。     

2种苏木精染液在免疫组织化学中复染效果的比较

目的:比较Mayer苏木精和Harris苏木精染液在免疫组织化学复染中的效果,提高免疫组织化学染色质量.方法:采用相同的染色方法分别将两种苏木精染液用于心肌、大脑等多种石蜡切片的SP、SABC免疫组化复染,对比两种染液染色结果.结果:Mayer苏木精复染后的切片细胞核呈深蓝色,细胞浆及周围环境却没有附着色,核质对比清晰.结论:Mayer苏木精染液在免疫组化复染中效果明显优于Harris苏木精.     

微波技术在乳腺癌前哨淋巴结微转移检测中的应用

目的 探讨微波技术在乳腺癌前哨淋巴结微转移检测中的应用。方法 本研究包括30例前哨淋巴结标本，冷冻切片做细胞角蛋白19的免疫组织化学,采用不同的微波火力处理,比较不同处理方法对冷冻切片免疫组织化学的影响。结果 微波中档一抗2min,二抗1min阳性定位明确，无背景着色；微波高档易干片;微波低档信号较弱。结论 冷冻切片免疫组织化学通过微波技术后大大缩短了染色时间。     

Van-clear环保透明剂代替二甲苯制作蜡块对免疫组化结果的影响

目的：评估Van-clear环保透明剂代替二甲苯制作石蜡切片对免疫组化结果的影响。方法：用Van-clear环保透明剂代替二甲苯制备蜡块10000个、苏木精-伊红染色10000片和免疫组化染色2265片。结果：用Van-clear环保剂制作的蜡块,组织浸蜡充分,各种组织软硬适中,易于切片;制作的苏木精．伊红片,组织结构清楚,染色清晰,对比及透明度好;免疫组化染色切片,阳性定位准确,强度、对比度与常规制片一致;存档半年后蜡块切片,免疫组化染色结果与半年前结果一致。结论：用Van-clear环保透明剂代替二甲苯对病理常规制片的质量和免疫组化阳性结果无明显影响。Van-elear作为环保产品,有推广使用的价值。     

免疫组织化学染色技术的应用体会

目的 探讨免疫组织化学染色技术的应用.方法 免疫组织化学染色技术是一种多步骤、多因素决定的实验方法,有很多干扰因素,无论是组织取材、固定、制片、抗原暴露及修复、液体及抗体的配制、修复温度、显色等等因素都会影响免疫组织化学染色.结果 提高免疫组织化学染色技术,是为了制作出优良的免疫组织化学切片,提高病理诊断水平.结论 免疫组织化学染色技术特异性强、灵敏度高、定位准确等优点应得到最为广泛的推广和应用.     

纤支镜毛刷细胞块技术的应用方法和价值

目的探讨纤支镜毛刷细胞块技术的应用方法和价值。方法对32例纤支镜毛刷常规涂片后再将剩余细胞用10％中性福尔马林固定制成细胞蜡块（cellblock,CB）,先行常规HE染色,再根据需要选择酶标行免疫组化。结果CB常规HE染色细胞清晰,有一定的组织学结构,有利于明确诊断;免疫组化则阳性定位准确．着色清晰,对肿瘤分型效果较好。两种染色方法染色效果均好于常规涂片,差异有显著统计学意义（P〈0．01）,与肺活检及术后组织切片差异无统计学意义（P〉0．05）。结论用10％中性福尔马林固定的纤支镜毛刷CB的制作方法简便、经济、染色效果好,在诊断肺疾病、特别是肺肿瘤中有较高的实用价值和广阔的应用前景。值得推广。     

GS环保套液在病理技术工作中的应用

目的探讨一种新型的GS组织样本制备及染色套液(简称GS环保套液)进行组织石蜡制片的效果。方法不同类型的新鲜组织经GS环保套液的固定、脱水、透明、浸蜡、染色、封片等,进行HE染色、免疫组化染色(IHC),并对染色结果进行判读。结果本套液制作的切片经染色后,细胞形态完整,染色效果好,IHC结果显示:细胞内抗原成分保存完好,阳性结果定位准确,背景清晰。结论 GS环保套液,具有无毒、无味、无污染、省时省力、安全可靠的特点,能够替代甲醛、二甲苯在病理技术工作中应用。     

肝组织内HBsAg的标记抗生物素-生物素间接法检测及与PAP法的比较

BAS免疫酶染色是一种较新的技术,本文采用LAB间接法检测肝癌患者肝组织内HBsAg,结果表明此法特异性高,HBsAg的检出率与PAP和DPAP法相同,阳性细胞形态特点基本一致。另外,此法背景较淡,第一抗体用量较省,实验周期较短,表明此法是一种较好的免疫组织化学方法。本研究还发现,检测石蜡切片肝组织内抗原时,阻断内源性生物素并不是一个必不可少的步骤。     

癌性胸水免疫细胞化学染色方法的改进

目的：探讨癌性胸水免疫细胞化学染色方法的改进。方法：将癌性胸水制成细胞液基薄层涂片,然后采用自动免疫染色仪进行免疫细胞化学检测。结果：细胞液基薄层涂片背景清晰,细胞分布均匀;自动免疫染色仪标记结果定位准确,方法便捷。结论：相比于传统手工操作方法,采用自动免疫染色仪对胸水细胞液基薄层涂片进行免疫细胞化学检测,结果更为准确。     

Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用

目的：探讨Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用。方法收集200例骨髓活检穿刺组织,选取其中150例采用Jy-Ⅱ脱钙液脱钙,同时选取50例采用5%的硝酸脱钙液脱钙做对照观察,脱钙后分别做HE染色、特殊染色（Go-mori氏网状纤维染色）和免疫组织化学染色（MaxVisionTM法CD38染色）,观察Jy-Ⅱ脱钙液对骨髓活检组织结构的保存及染色情况。结果经Jy-Ⅱ脱钙液脱钙后骨髓活检组织结构保持完整,完整率达98.67%。镜下形态结构清晰,组织结构清晰率达100.00%,染色情况良好,脱钙时间短,为150 min。脱钙完全,效果好。经5%的硝酸脱钙液脱钙后的骨髓活检组织,结构保持不完整,完整率达60.00%,镜下形态结构欠清晰,清晰率达52.00%,染色情况欠佳,脱钙时间长,长达240 min,脱钙不完全,效果欠佳（P〈0.05）。结论 Jy-Ⅱ脱钙液效果明显优于5%的硝酸脱钙液,骨髓活检组织结构保持良好,操作简便,脱钙时间短,在脱钙过程中无需更换脱钙液,HE染色、特殊染色、免疫组化染色效果也较满意,实用性强,不失为一种良好的脱钙液,值得推广     

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。方法选择12例骨组织,随机分为3组。A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki-67和TTF-1染色。结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。     

全自动血细胞分析仪稀释模式用于脑脊液细胞计数及分类检测的可能性

目的：探讨ABX PENTRA 60血细胞分析仪在脑脊液细胞计数及分类中应用的可能性。方法：采用ABX PENTRA 60血细胞分析仪稀释模式对100份脑脊液标本进行白细胞计数、红细胞计数和白细胞分类分析,并与人工显微镜计数分类法结果进行对比。白细胞分类手工法采用瑞氏染色法,仪器法采用荧光染色和流式细胞术原理进行分类。结果：两种方法对脑脊液标本白细胞计数、红细胞计数、单个核及多个核细胞的绝对计数检测差异无统计学意义（ P>0.05）,并且两种方法具有良好的相关性（白细胞计数r=0.988、红细胞计数r=0.988、单个核细胞绝对计数r=0.953,多个核细胞绝对计数r=0.981）。结论：应用ABX PENTRA 60血细胞分析仪的稀释模式进行脑脊液细胞计数、分类快速准确。全自动血细胞分析仪稀释模式检测脑脊液常规中细胞计数及分类可在临床应用中推广。     

淋巴组织免疫组织化学染色及质量控制

目的 建立淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法，达到临床病理检验质控要求。方法 详细介绍了淋巴组织的取材、固定、脱水、透明、石蜡包埋、切片、免疫组化和TUNEL染色方法及其质量控制环节。结果 用此法制备的免疫组化切片具有阳性结果呈颗粒状的棕黄色，定位准确，对比明显，背景浅，组织结构与细胞轮廓完整、清晰，适合显微照相以及染色结果稳定可靠，特异性强、敏感性高。结论 该方法可作为淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法应用。