PSNAV2.0-TNFα重组质粒的构建及其在体外的表达

目的:在前期微囊化基因工程细胞制备平台的基础上,构建分泌型人肿瘤坏死因子α的真核表达载体PSNAV2.0-TNFα重组质粒,并鉴定其蛋白的体外瞬时表达,为进一步利用该基因进行微囊化细胞移植治疗和改善疾病奠定基础。方法:实验于2006-06/2007-05在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学实验室完成。①以含有人肿瘤坏死因子αcDNA序列的质粒为模板,通过PCR扩增获得人肿瘤坏死因子α基因片段;将其定向插入真核表达载体PSNAV2.0中,获得重组质粒PSNAV2.0-TNFα。采用SalⅠ和EcoRⅠ双酶切法、PCR法及插入片段序列测定法鉴定该质粒。②利用阳离子脂质体介导法,将其转染到人胚胎肾细胞HEK-293细胞中,构建可持续分泌人肿瘤坏死因子α的基因工程细胞,采用RT-PCR法和Western blot法检测转染细胞培养上清液中人肿瘤坏死因子蛋白的体外瞬时表达。结果:①通过SalⅠ和EcoRⅠ双酶切、PCR及测序鉴定证明:在HEK-293中插入片段正确。②采用RT-PCR和Western blot法检测表明HEK-293细胞培养上清中有人肿瘤坏死因子α蛋白,Mr17000。结论:成功构建了重组质粒PSNAV2.0-TNFα真核表达载体,转染HEK-293细胞后可有效分泌人肿瘤坏死因子α蛋白,并能分泌到细胞外。     

白细胞介素-12在结核病发生发展中的作用

在全球范围内,结核病仍然是危害人类健康的主要疾病之一,是因感染导致死亡的第二大原因[1]。并且,随着耐多药结核病和广泛耐药结核病的出现,及HIV感染合并结核菌感染病例增加,使结核病的控制和治疗变得更加复杂[2]。机体感染结核分枝杆菌(MTB)后,抗原提呈细胞(APC)在加工、处理、提呈抗原及启动适应性免疫应答的同时,分泌IL-12、IFN-γ、TNF-α等促炎性细胞因子和抑炎性细胞因子IL-10[3]。这些     

星状神经节阻滞对严重烧伤小鼠巨噬细胞糖皮质激素受体表达及细胞因子分泌的影响

目的:探讨星状神经节阻滞(stellate ganglion block,SGB)在严重烧伤小鼠腹腔巨噬细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达及炎性细胞因子分泌中的作用,明确SGB可否成为改善严重创伤后的GR功能、抑制炎性反应过度的手段。方法:20%TBSAⅢ度烧伤小鼠分为单纯严重烧伤组(烧伤组)、严重烧伤后单侧颈部SGB治疗组(单侧SGB组)、严重烧伤后双侧颈部SGB治疗组(双侧SGB组),另设正常对照组,比较各组巨噬细胞GR水平及巨噬细胞分泌炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1"(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的差异。结果:单侧及双侧SGB组腹腔巨噬细胞GR蛋白水平均显著高于烧伤组,单侧及双侧SGB组腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6的作用均显著低于烧伤组。严重烧伤后单侧SGB组及双侧SGB组间巨噬细胞GR蛋白水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的表达释放无明显差异。结论:单侧或双侧颈部SGB均可成为改善严重烧伤巨噬细胞GR功能、抑制其过度分泌炎性细胞因子的手段。     

肿瘤坏死因子-α在炎症与肿瘤中的作用

肿瘤坏死因子-α（TNF-α）主要是由脂多糖刺激巨噬细胞而分泌的一种蛋白质,具有多种生物活性的炎性细胞因子,与其他细胞因子共同作用参与激活免疫反应,介导全身炎症,诱发肿瘤的发生,并可致肿瘤坏死。TNF-α被认为与调节致病性休克、组织损伤和内毒素血症等相关;是所发现的抗肿瘤活性较强的炎性细胞因子,在炎症与肿瘤的发生发展中具有重要作用。     

钙拮抗剂对重症急性胰腺炎肾损害保护作用的实验研究

目的:探讨钙拮抗剂对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾损害的影响。方法:Wistar大鼠45只,随机分为假手术组、SAP组和钙拮抗剂治疗组,观察各组动物肾功能、炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α和肾脏组织病理学改变。结果:SAP时血清中炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α升高,肾功能下降,肾组织损害严重。钙拮抗剂治疗组炎性因子水平降低,肾组织损害减轻,肾功能明显改善。结论:钙拮抗剂可抑制SAP某些细胞因子的产生和释放,对肾损害具有保护作用。     

细胞因子在CIK细胞抗肿瘤治疗中的作用

细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)免疫治疗是目前临床应用较为广泛且有效的肿瘤免疫治疗手段之一。在体外诱导过程中,细胞因子对CIK的分化和功能起着决定作用。在体内杀伤肿瘤过程中,CIK能分泌大量IL-2、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等细胞因子,不仅能直接发挥抗肿瘤作用,而且能调控网络调节机体免疫系统,刺激细胞增殖与分化,进一步增强免疫效应细胞的细胞毒活性。细胞因子需与靶细胞膜特异性受体结合才能发挥广泛的生物学效应,某些因素导致一些细胞因子的基因表达异常,可能引起肿瘤的发生与发展。因此,研究CIK分泌的细胞因子作用及其参与机体抗肿瘤免疫的机制,为CIK治疗恶性肿瘤提供理论依据。     

结核病与肿瘤坏死因子和白细胞介素的相关性研究

目的研究3种白细胞介素IL-12I、L-18I、L-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)在结核病免疫发病机制中的作用,为开发新的疫苗和发展免疫疗法提供依据。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)及素化酶复化物(生物素-亲和素双抗夹心)ABC-ELISA试剂盒检测39例结核性胸膜炎患者胸腔积液和血清中以上5种细胞因子的水平,并进行相关性分析。对治疗过程中10例结核病Ⅲ型和5例Ⅳ型患者X线胸片提示进展期到好转期上述细胞因子在胸腔积液中的变化进行观测。结果对每组、每型的分析发现,从总体来看,除IL-18外,IL-12、TNF-αI、L-10胸腔积液中含量均远远超过血清中含量,而值得注意的是转化生长因子β1血清中含量远远超过胸腔积液中含量,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 IL-18可以作为加强疫苗保护性的一种辅助因子;各组、各型患者胸腔积液中上述细胞因子的相关性分析结果可为结核病免疫发病机制的研究提供参考;开展对治疗好转结核病的免疫治疗时应综合考虑机体的免疫状态,某种细胞因子的作用不是对所有患者都有效,与体内细胞因子间的平衡有关。     

多器官功能障碍综合征患者细胞因子释放规律及CVVH干预治疗对其预后的影响

目的 观察多器官功能障碍综合征(MODS)患者3种细胞因子的释放规律及连续性静脉静脉血液滤过(CVVH)干预治疗对其预后的影响。方法 选择50例符合MODS诊断标准的住院患者，随机分为两组，治疗组常规治疗加CVVH。两组患者均于入院时、12、24、48、72、96和168h分别留取血样，治疗组于CVVH前后分别留取血样、滤液样数份置零下40℃冰冻待验。结果 治疗组TNF—α、IL—1β分泌高峰在病程初中期，对照组在病程后期，CVVH，可使其分泌高峰提前，但对3种细胞因子(ck)血浆浓度无明显影响。所有滤液中可检出3种细胞因子，治疗组血流动力学及氧合功能改变明显优于对照组，病死率及预计死亡率较对照组低。结论 在MODS患者病程早期做CVVH治疗，可以减轻或部分阻断细胞因子的过度释放，改善了患者赖以生存的内环境和预后。     

补肾益气法治疗同种免疫型复发性流产30例临床观察

目的:探讨中药对同种免疫型复发性流产的治疗机制。方法:采用自拟方桑芪汤治疗同种免疫型复发性流产30例,另设健康已育女性30例对照。测定中药治疗前后细胞因子、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10),并与健康对照组作对照。结果:治疗组治疗前TNF-α、IL-2较健康对照组高,IL-10较对照组低(P<0.05),治疗后TNF-α、IL-2降低,IL-10升高,与对照组比较,P>0.05。结论:补肾益气中药通过加强Th2型细胞因子的分泌能力,减少Th1型细胞因子的分泌,降低CD4+,增加CD8+,使CD4+/CD8+比值降低,诱导母胎界面免疫耐受,从而起到保胎的作用。     

多发性硬化树突状细胞分泌细胞因子的检测与意义

目的:检测多发性硬化(MS)患者树突状细胞(DC)分泌的细胞因子,探讨DC及其分泌的细胞因子在MS发病机制中的作用。方法:利用MS患者外周血单核细胞培养诱导成为成熟DC,用人IL-12、IL-23、IL-27和人TNF-α的ELISA试剂盒检测DC分泌的细胞因子,并与正常对照组比较。结果:MS来源的DC分泌的IL-12、IL-23和TNF-α较对照组增多,差异有统计学意义;IL-27在两组DC分泌的量无明显差异。结论:IL-12、IL-23和TNF-α与MS的发病有关,未发现IL-27与MS发病的关系。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

恶性血液病患者配偶生活质量评估

目的了解恶性血液病患者配偶的生活质量,提高其生活质量,以更好地配合患者治疗。方法应用生活质量综合评定问卷(GQOLI)对83例恶性血液病患者配偶及正常对照组人群进行生活质量评估。结果恶性血液病患者配偶的GQOLI总分及躯体功能、心理功能、社会功能和物质生活维度得分均较正常对照组显著降低(P<0.01或P<0.05),其中女性配偶GQOLI总分及心理功能和社会功能维度得分较男性配偶显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论恶性血液病患者配偶的生活质量较正常人群下降,其中女性配偶生活质量下降更明显,需要积极进行心理干预。