糖尿病结肠动力障碍时Cajal间质细胞和干细胞因子的变化以及胰岛素的干预效应

Cajal间质细胞（ICC）异常可能是糖尿病胃肠动力障碍的重要原因之一。目的：观察糖尿病结肠慢传输型动力障碍大鼠ICC及其Kit受体配体干细胞因子（SCF）的变化，以及胰岛素干预对结肠动力障碍和ICC的影响。方法：雄性Sprague—Dawley大鼠分为正常对照组、糖尿病模型组和不同剂量胰岛素（每天8、12、16U／kg）干预组。于成模第6、8、10周时分批处死各组大鼠，以免疫组化染色、蛋白质印迹法和电子显微镜观察近端结肠组织ICC的变化．以酶联免疫吸附测定（ELISA）和荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测血清和结肠组织SCF的表达。结果：糖尿病模型大鼠胃肠推进率显著降低，近端结肠组织ICC数量减少，超微结构破坏，结肠组织可溶型SCF（S-SCF）mRNA表达和血清S-SCF、胰岛素水平降低。小剂量胰岛素干预可显著改善糖尿病大鼠的胃肠推进率，增加ICC数量，逆转其超微结构改变：中、大剂量胰岛素干预则无明显作用。结论：糖尿病大鼠胰岛素分泌减少，使S-SCF表达降低，引起结肠组织ICC数量减少．结构破坏，可能是结肠慢传输型动力障碍的发生基础之一。小剂量胰岛素可改善糖尿病大鼠的ICC病变和结肠动力障碍。     

干细胞因子在骨髓干细胞心肌内移植治疗中的作用研究

目的探讨干细胞因子（SCF）在骨髓干细胞心肌内移植中的作用机制及对移植治疗的影响。方法对急性心肌梗死（AMI）大鼠进行骨髓干细胞心肌内移植治疗,RT—PCR方法检测骨髓中SCF表达水平的变化,并用SCF表达水平不同的骨髓干细胞进行心肌内移植治疗,超声心动图检测心脏结构、功能的变化;ELISA方法检测心肌组织、血和骨髓中SCF蛋白水平的变化。结果AMI1周时骨髓中SCF mRNA表达明显降低（P〈0．01）,接受移植治疗大鼠骨髓中SCF mRNA表达未出现降低。不同SCF表达水平的骨髓干细胞进行心肌内移植治疗均能使心脏射血分数达到70％,各组之间差异无统计学意义。移植治疗后1周血清中SCF蛋白的表达水平明显低于正常对照（P〈0．05）。结论骨髓干细胞心肌内移植可能通过SCF产生骨髓动员作用;心肌梗死或曾接受移植治疗个体的骨髓干细胞同样可用于心肌内移植治疗,不影响心功能的改善。     

肝硬化患者骨髓促红细胞生成素水平的检测

本文采用放射免疫方法检测肝硬化患者的血清和骨髓中的红细胞生成素（EPO）含量。研究结果显示,患者血清中EPO水平与健康人相比,显著升高（P＜0．001）,普遍存在EPO应答障碍,致使贫持续存在。与此相反,患者骨髓EPO水平低于正常健康人（P＜0．001）。提示,肝硬化患者存在骨髓造血机能障碍。     

骨髓造血功能衰竭者尿液红细胞生成素水平变化

应用酶联免疫法（ELISA）检测了23例骨髓造血功能衰竭患者治疗前尿液红细胞生成素（EPO）水平，并对其中5例患者治疗后3，6，9个月及12个月尿液EPO水平的变化进行了动态观察。结果治疗前各种骨髓造血功能衰竭患者尿液EPO水平均明显增高，此变化与患者贫血程度及治疗前病程相关；治疗后3～6个月患者尿液EPO水平仍呈上升趋势，此后有所下降。     

TLR4在糖尿病大鼠肺组织表达的变化及对脂多糖反应性的研究

复制糖尿病大鼠模型，饲养4周，正常组及糖尿病组分别给予腹腔注射脂多糖5mg／kg，12h后免疫组化及免疫印记分析方法检测Toll样受体4（TLR4）在大鼠肺组织中含量的变化。观察到糖尿病组大鼠肺组织TLR4表达较对照组增高（P=0．000）；糖尿病组大鼠腹腔注射脂多糖后肺组织TLR4表达无明显变化（P=0．941），正常组大鼠腹腔注射脂多糖后TLR4表达明显增高（P=0．000）。提示糖尿病机体处于促炎症状态，但在免疫应激条件下糖尿病机体的TLR4不能正常发挥免疫识别功能，将可能导致糖尿病机体的免疫防御能力降低。     

胃癌患者血清,组织和血细胞锌,铜,硒的含量变化

本文应用原子吸收检测技术对３２例胃癌患者的血清、胃癌组织、红细胞、白细胞和血小板锌、铜、硒的含量进行检测，与胃炎组比较，结果：胃癌组血清锌含量降低（Ｐ＜０．０１），而血清铜含量和血清Ｃｕ／Ｚｎ比值升高（Ｐ＜０．０１），血清硒含量降低（Ｐ＜０．０１）；白细胞锌含量降低（Ｐ＜０．０１），白细胞铜无显著变化；红细胞、血小板锌、铜、硒含无显著变化；胃癌组织中锌、硒含量增加（Ｐ＜０．０５），而铜含量无显著变化；锌、铜、硒及血清Ｃｕ／Ｚｎ比值与胃癌细胞分化程度以及有无肿转移无相关性。测定胃癌患者血清、组织、白细胞锌、铜、硒含量，可以估价体内这些元素的总体状态，为观察病情、估计预后提供依据。     

马来酸罗格列酮抑制糖基化终产物诱导的人肾系膜细胞RANTES高表达

目的探讨马来酸罗格列酮对糖基化终产物（AGEs）诱导的人肾系膜细胞（HRMC）趋化因子RANTES高表达的影响,及其对糖尿病大鼠血清糖基化终产物-肽（AGE-P）及肾脏RANTES表达的影响。方法运用糖基化修饰的牛血清白蛋白（AGE-BSA）与马来酸罗格列酮干预体外培养的HRMC,EusA法检测细胞培养上清中RANTEs蛋白水平,实时定量RT-PCR检测细胞中RANTES mRNA水平,Western blot检测RANTES蛋白表达。制备2型糖尿病大鼠模型,马来酸罗格列酮治疗10周。流动注射分析法测定血清AGEP,免疫组织化学检测肾皮质RANTES表达。结果马来酸罗格列酮干预组HRMC RANTES的mRNA和蛋白表达以及蛋白分泌明显低于AGE-BSA组;马来酸罗格列酮治疗组糖尿病大鼠血清AGE-P明显下降,肾皮质RANTES表达明显低于糖尿病非治疗组。结论马来酸罗格列酮可以抑制AGE-BSA诱导的HRMC RANTES的表达和分泌,还可降低糖尿病大鼠血清AGE-P及肾脏RANTES表达。     

胰岛素样生长因子-1对糖尿病大鼠结肠平滑肌细胞表达干细胞因子的影响

背景：糖尿病胃肠动力障碍与Cajal间质细胞（ICC）数量和超微结构异常有关。前期实验发现胰岛素样生长因子-1（IGF-1）可诱导正常大鼠胃肠平滑肌细胞（SMC）表达干细胞因子（SCF）,从而有利于ICC的生存。目的：探讨IGF-1对糖尿病大鼠结肠SMC表达SCF的影响及其信号转导通路。方法：以链脲霉素建立糖尿病大鼠模型。分离、培养正常和糖尿病大鼠结肠SMC,设不同浓度（0、50、100、150μg/L）、不同时间（0、8、16、24、48h）IGF-1十预组和MEK抑制剂PD98059＋IGF-1、P13K抑制剂LY294002＋IGF-1干预组．以RT—PCR和蛋白质印迹法检测SMC中的SCF表达。结果：糖尿病大鼠结肠SMC的生长速度较正常大鼠减慢。无血清培养条件下．正常和糖尿病结肠SMC中SCFmRNA和蛋白表达较低,IGF-1可诱导SCF表达增加,最大有效浓度为100μg／L,诱导高峰时间正常对照组为16h,糖尿病组为24h。经PD98059预处理的SMC,IGF-1诱导的SCF表达部分受抑．IN294002预处理对IGF-1的作用无明显影响。结论：0～100μg／L IGF-1在24h内能以剂量和时间依赖性方式诱导糖尿病大鼠结肠SMC表达SCF．但效应弱于其对正常大鼠结肠SMC的作用,该作用的发挥可能部分依赖于ERKMAPK信号通路。     

支气管哮喘急性发作期患者血清干细胞因子水平测定及意义

目的探讨哮喘急性发作期患者血清干细胞因子（SCF）水平变化及意义。方法将40例支气管哮喘急性发作患者按病情严重程度分为轻、中、重、危重组,采用ELISA法检测各组治疗前后血清SCF水平,同时与10例正常人血清SCF水平作对照。结果中度、重度及危重组治疗前血清SCF水平明显高于对照组（P均〈0．001）,治疗后均有明显下降;重度及危重组治疗后血清SCF明显高于中度及轻度组（P均〈0．01）。结论血清SCF的水平可能与哮喘急性发作的严重程度有关;其在哮喘发病及病情判断中可能起重要作用。     

糖尿病大鼠小肠Cajal间质细胞及干细胞因子的变化及半夏泻心汤的干预作用

[目的]观察糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠小肠Cajal间质细胞（ICC）及干细胞因子（stem cell faetor,SCF）表达的变化及半夏泻心汤的干预作用。[方法]除10只大鼠作为正常组外,其他大鼠采用腹腔注射STZ复制DM模型后随机分为DM组、半夏泻心汤组及西药组。半固体营养糊灌胃测定各组大鼠小肠推进率,免疫组化检测c-Kit及SCF在小肠组织中的表达;Western blot检测小肠组织c-Kit蛋白、SCF蛋白表达。[结果]半夏泻心汤组与西药组大鼠的体质量、小肠推进率、c-Kit及SCF阳性细胞数、c-Kit蛋白及SCF蛋白的表达均较DM组明显增加（均P〈o．05）;半夏泻心汤组与西药组大鼠的血糖值较DM组明显降低（P〈0．05）。半夏泻心汤组与西药组之间差异无统计学意义（均P〉0．05）。[结论]半夏泻心汤可以促进DM大鼠小肠肌间神经丛c-Kit、SCF的表达,提示对受损的DM大鼠小肠ICC、SCF有部分恢复作用,从而对DM大鼠的小肠动力障碍有一定的改善作用。     

特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液及血清中白细胞介素4、12水平变化的意义

目的探讨特发性肺纤维化（IPF）患者肺泡灌洗液及血清中自细胞介素4、12（IL-4、IL-12）水平变化的意义。方法用酶联免疫吸附法，检测30例IPF患者（IPF组）血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IL-12的水平；健康非吸烟的自愿献血者30名，为血清对照组，检测其血清IL4、IL-12的水平；以胸痛为主诉进行BALF检查证实为健康者9名，作为BALF对照组，检测其BALF中IL-4、IL-12的水平。结果IPF组患者BALF中IL-4为（84．87±26．10）pg／ml、IL-12为（12．33±6．89）pg／ml，对照组BALF中IL-4、IL-12分别为（55．78±22．88）、（46．674-24．67）pg／ml，两组相比差异有显著意义（P值均〈0．01）；IPF组患者血清IL-4水平的变化与BLAF一致，但血清IL-12为（45．70±25．65）pg／ml，与血清对照组（46．80±23．73）pg／ml相比差异无显著性（P〉0．05）。结论IPF时Th1型细胞因子IL-12水平下降主要发生在肺组织局部，而Th2型细胞因子IL-4水平增高的变化是一种全身性行为，TH1／Th2型细胞因子平衡失调，在IPF的发生、发展过程中起着重要的作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ2活化与大鼠增龄骨丢失关系的研究

目的 观察自然增龄大鼠骨髓过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）表达与氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）及骨量的关系，探讨其在大鼠自然增龄骨丢失发生过程中可能的作用机制。方法 选择不同月龄（6、12及18月龄）大鼠作为研究对象，逆转录PCR（RT—PCR）检测骨髓PPARγ2、核因子-κB活化受体配体（RNAKL）、骨保护素（OPG）、核因子-κB活化受体（RANK）mRNA表达水平；ELISA法检测骨髓上清Ox-LDL、脂肪酸结合蛋白（aP2）水平，图像分析仪测定骨髓脂肪组织含量并检测股骨骨密度。结果 骨密度随增龄进行性减低，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；骨组织HE染色，6月龄大鼠骨髓腔中脂肪极少，而在18月龄约占40％骨髓腔空间，组间比较差异有统计学意义（P〈0．01），脂肪髓的发生与年龄呈正相关（r=0．762），与骨密度呈负相关（r=0．626）；骨髓中aP2及Ox-LDL浓度随增龄明显增高，组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）；PPARγ2表达随增龄明显升高，3组差异有统计学意义（P〈0．05或P〈O．01）；RANKL表达随增龄呈进行性升高，而OPG在18月龄组明显下降，组间比较差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05），RANK随增龄无明显变化。结论 随增龄Ox-LDL水平升高可激活骨髓PPARγ2转录活性，引起骨髓脂肪生成增多并参与骨量减低的发生，是Ⅱ型原发性骨质疏松发生的可能机制之一。     

无创正压通气对中重度OSAHS患者血清促红细胞生成素水平的影响

目的 观察中重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者应用无创正压通气（NPPV）治疗后血清促红细胞生成素（EPO）水平变化.方法 选择38例中重度OSAHS患者（OSAHS组）及50例健康查体者（对照组）,OSAHS组行NPPV治疗1个月;检测对照组及OSAHS组治疗前后血清EPO、血常规,监测睡眠呼吸暂停低通气指数（AHI）、夜间平均最低血氧饱和度（LSaO2）.结果 OSAHS组治疗后血清EPO及红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞比积（HCT）、平均红细胞蛋白含量（MCH）、平均红细胞体积（MCV）、AHI较治疗前降低（P均＜0.05）,而LSaO2升高（P＜0.05）;治疗后AHI、LSaO2与对照组比较,P均＜0.05;其余指标与对照组比较,P均＞0.05.OSAHS组血清EPO与Hb、RBC呈正相关（rs=0.971、0.628,P均＜0.01）,AHI与血清EPO呈正相关（rs=0.835,P＜0.01）,夜间LSaO2与血清EPO呈负相关（rs=-0.629,P＜0.01）.结论 NPPV治疗可明显降低中重度OSAHS患者血清EPO水平,从而改善AHI、LSaO2、血液黏稠度.     

急性心肌梗死患者血清促红细胞生成素变化及其临床意义

目的探讨急性心肌梗死（AMI）患者血清中促红细胞生成素（EPO）的变化与临床意义。方法选取AMI患者40例,不稳定性心绞痛（UA）患者22例进行血清EPO含量、血清心肌型肌酸激酶同工酶（CK—MB）和外周血中血液成分变化检测,另选20例健康个体作对照。结果AMI组与UA组的血清EPO均显著高于对照组,且AMI组明显高于UA组;AMI组血清CK-MB水平显著高于UA组和对照组;AMI组血清EPO水平和CK-MB峰值水平呈负相关（r=-0．35,P〈0．05）。结论AMI患者EPO存在应激反应性升高,而且与梗死面积呈负相关。     

细胞因子对骨髓间充质干细胞增殖及其向心肌细胞分化的影响

目的探讨干细胞因子（SCF）和粒细胞集落刺激因子（G-CSF）预处理对骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖分化的作用。方法将sD大鼠随机分成对照组、SCF组、G—CSF组和SCF＋G—CSF联合处理组。流式细胞仪检测第4代MsCs细胞周期。用DAPI（25mg／m1）标记的P4MSCs与心肌细胞共培养。在共培养的第1天至第5天用免疫荧光技术分别检测心肌特异性肌节肌球蛋白重链（MHC）、肌钙蛋白T（TnT）的表达，统计向心肌样细胞分化的MSCs百分率。结果（1）SCF和G—CSF联合应用能明显诱导MSCs进入S期，单因子SCF组和G-CSF组与对照组相比，也明显的促进MSCs由G0／G1期进入S期（P〈0．01）。（2）MSCs与心肌细胞共培养后，SCF和G—CSF联合组MSCs表达心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性百分率均显著增高，单细胞因子组MSCs的心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性表达亦较对照组高。结论SCF和G—CSF对MSCs具有促增殖、促分化的作用。     

促红细胞生成素在急性肾功能衰竭治疗中的应用及机制

既往认为促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）主要促进骨髓祖红细胞存活、增生和分化，重组人EPO主要应用于肾性贫血的治疗。近年研究表明除红细胞外，在脑、心血管和肾组织等多种脏器的内皮细胞、上皮细胞及其它细胞表面均有EPO及其受体表达。动物实验显示外源性EPO对多种神经系统损伤有保护作用，可以预防甚至逆转糖尿病大鼠神经病变，临床已成功应用于脑卒中的治疗。     

低氧环境对大鼠骨髓间充质干细胞交感神经重构相关因子表达的影响

目的观察低氧环境对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)三种交感神经重构相关因子内皮素-1(ET-1)、促红细胞生成素(EPO)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)表达的影响。方法体外分离培养大鼠BMSCs至第三代,应用Western Blot技术检测BMSCs各代细胞中ET-1、EPO和G-CSF蛋白表达水平。BMSCs培养至第三代后,更换无血清无糖培养基,将细胞培养皿置入缺氧培养箱分别培养2h、6h、12h及24h,分别检测上述四组细胞ET-1、EPO、G-CSF蛋白表达水平。结果大鼠BMSCs在常氧状态下具有分泌神经重构相关因子ET-1、EPO、G-CSF的功能。低氧环境可诱导大鼠BMSCs细胞ET-1、EPO、G-CSF蛋白表达水平上调,ET-1、EPO表达水平随缺氧时间延长而进行性升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论低氧环境能显著上调大鼠BMSCs交感神经重构相关因子的表达水平,促进心肌交感神经重构,可能与BMSCs移植治疗后心律失常副反应的发生密切相关。     

2型糖尿病患者高同型半胱氨酸血症与慢性血管并发症的关系

目的探讨2型糖尿病血管病变患者血清同型半胱氨酸（Hcy）的变化及可能机制。方法用双抗体夹心酶免（ELISA）法、放免法检测182例2型糖尿病患者血清Hcy、一氧化氮、内皮素水平，同时以45例健康人作为对照组。结果（1）血清Hcy水平：糖尿病各组均高于对照组，大血管并发症组高于微血管并发症组及无并发症组。（2）血清一氧化氮水平：糖尿病组大血管并发症组、微血管并发症组、无并发症组高于对照组，大血管合并微血管并发症组低于对照组;血清内皮素水平：糖尿病各组均高于对照组，各并发症组高于无并发症组，大血管并发症组高于微血管并发症组。（3）高Hcy组血清一氧化氮水平显著升高，血清内皮素增高但无统计学意义。结论糖尿病慢性血管并发症与高Hcy水平有关。     

恶性血液病患者血清红细胞生成素、血小板生成素变化及其临床意义

采用夹心酶联免疫法测定40例恶性血液病患者（观察组）及18例健康人（对照组）血清红细胞生成素（EPO）、血小板生成素（TPO）、血红蛋白（Hb）、红细胞（RBC）及血小板（PLT）水平。结果观察组血清EPO水平明显高于对照组（P〈0．05），且与Hb及RBC计数呈负相关（P均〈0．05）；血清TPO水平白血病患者（20例）均显著高于对照组，其他恶性血液病患者（20例）则低于对照组，除慢性白血病患者血清TPO水平与PLT计数不相关外，其他恶性血液病患者均与PLT计数呈负相关。提示除白血病外，其他恶性血液病患者伴发的贫血均可应用重组人促红细胞生成素（rhEPO）治疗，伴PLT减少时，应用重组人促血小板生成亲（rhTPO）治疗有益。     

红细胞生成素对大鼠心肌缺血-再灌注后抗氧化酶及NO等的影响

目的：探讨红细胞生成素（erythropoietin，EPO）对大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌组织中超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、过氧化氢酶（CAT）、一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法：以左冠脉穿线结扎法制备心肌缺血再灌注模型，造模前24h开始给药。在大鼠心肌缺血30min再灌注24h后分别检测心肌组织的MDA，GSHpx，SOD，CAT，NO及NOS。结果：EPO干预组的SOD活力有明显增高，MDA含量明显下降（P均〈0．05），GSHpx及CAT含量均显著提高（P〈0．05）。同时，EPO的预处理也降低了NO和NOS的含量（P〈0．01）。结论：对于大鼠心肌缺血再灌注损伤，EPO干预可以提高多种抗氧化酶活性，同时对NO产生增多有一定的抑制作用。