大麻素受体1和细胞外信号调节激酶在肝纤维化小鼠肝组织中的表达及意义

目的研究大麻素受体1(CB1)mRNA在肝纤维化形成过程中表达的变化,从基因转录水平探讨其与细胞外信号调节激酶(ERK)的关系。方法采用10%四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型,分别于造模第2、4、6、8周留取小鼠的肝组织及血清。通过病理对肝组织进行形态学观察,荧光定量RT-PCR检测CB1 mRNA和ERK mRNA水平,生化法检测血清中ALT和AST的含量,放射免疫法检测血清中透明质酸(HA)的含量。结果与正常对照组相比,各模型组小鼠肝组织中CB1 mRNA和ERK mRNA含量显著升高(P<0.05),而且随造模时间的延长,CB1 mRNA和ERK mRNA含量亦逐渐增高,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。各模型组小鼠血清中ALT、AST及HA的水平随造模时间延长而不断升高,各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。CB1 mRNA的含量不但与血清中ALT、AST、HA的含量呈显著正相关(r=0.741、0.763、0.769,P均<0.01),而且与肝组织中ERK mRNA含量也呈显著正相关(r=0.789,P均<0.01)。结论CB1可能通过激活ERK,以ERK通路诱导肝星状细胞(HSC)增殖,促进肝纤维化的形成。     

血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织中内源性大麻素1受体的表达

研究发现，内源性大麻素及其相应受体在肝纤维化、肝硬化的发生发展中起重要作用。本实验旨在研究血吸虫性肝纤维化时肝组织中内源性大麻素1（CB1）受体表达的变化情况，进一步阐明血吸虫性肝纤维化发病机制，为疾病治疗开辟新的途径。     

黏着斑激酶相关非激酶对肝星状细胞活化及迁移功能的影响

目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对肝星状细胞（HSCs）活化及迁移功能的影响。方法:2019年3—9月,收集贵州医科大学附属医院肝胆外科9例肝纤维化患者肝组织标本。人体肝组织分为健康对照组与纤维化组。C57BL/6实验小鼠分为野生型（WT）、FRNK基因敲除型（FRNK -/-）两组,以四氯化碳（...     

大麻素受体1在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

目的动态观察内源性大麻素受体l（CB1）在大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）中的表达,初步探讨CB1在NAFLD发病中的作用。方法雄性SD大鼠48只,随机分3组：对照组（普通饲料）、模型组（高糖高脂饲料）、干预组（高糖高脂饲料＋利莫那班）,分别于实验第4、8周末每组各取8只处死,测体重、计算肝指数,检测血清ALT、AST、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）;ELISA法检测血清瘦素（Leptin）、肿瘤坏死因子（TNF）α含量,肝组织HE染色,观察其病理形态变化,免疫组化染色法观察NAFLD不同阶段肝组织CB1表达。采用单因素方差分析对各组间进行比较,组间两两比较采用SNK-q检验,组内比较采用两独立样本t检验,两指标间的相关性采用Pearson直线相关分析法。结果 （1）模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、Leptin及TNFα水平均较对照组及利莫那班组高（P〈0.05）;（2）肝组织学改变：模型组第4周呈单纯性脂肪肝改变,第8周呈弥漫性肝脂肪变伴炎细胞浸润,干预组较同期模型组肝病变减轻;（3）肝脏CB1免疫组织化学检测：对照组表达阴性;模型组和干预组表达呈阳性。通过积分光密度值比较,模型组高于同期干预组（P〈0.05）。结论 CB1在NAFLD患者中表达增强,并可能与TNFα和Leptin共同作用促进NAFLD进展。     

大麻素受体1在慢性乙型肝炎肝纤维化发生和发展中的作用

Sato等[1]和Teixeira Clerc等[2]先后发现大麻素受体1(CB1R)在慢性肝病发展过程中起着独特作用.为深入研究CB1R在慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化发生、发展过程中的作用,我们用免疫组织化学染色法检测肝组织中CB1R表达情况,分析CB1R半定量评分与纤维化分期、血清转化生长因子(TGF)β1、ALT以及HBV DNA水平等指标的相关性,为今后以CB1R为靶点进行抗肝纤维化治疗提供依据.     

内源性大麻素受体1在大鼠胰腺组织中的表达及意义

目的观察大麻素受体1（CB1）在胰腺组织内的表达情况,为进一步研究2型糖尿病发病机制提供依据。方法 摘取成年大鼠的胰腺,制备冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,通过激光扫描共聚焦显微镜观察胰腺组织中CBl表达情况。结果 CBl在胰腺组织中有表达,且主要表达于B细胞。结论 CBl在大鼠胰腺主要表达于B细胞,其可能通过影响B细胞功能参与2型糖尿病的发生、发展。     

大麻素受体在心血管疾病中作用的研究进展

大麻素受体（CBR）是内源性大麻素系统的重要组成部分,介导了内源性大麻素或外源性大麻类似物的胞内信号转导,广泛参与心血管疾病的发生发展过程。CBR主要包括经典的1型及2型大麻素受体,以及新型的瞬时受体电位香草酸亚型1、过氧化物酶体增殖物激活受体和其他G蛋白耦联受体。该文综述了CBR的结构及组织分布特点,以及CBR在高血...     

慢性胃食管反流大鼠背根神经节中辣椒素受体1和大麻素受体的表达

背景：食管痛觉高敏参与胃食管反流病（GERD）的发病,而辣椒素受体1（TRPV1）和大麻素系统的激活在疼痛调控中发挥双向作用。目的：检测慢性胃食管反流大鼠相应节段背根神经节（DRG）中TRPV1和大麻素受体（CB1、CB2）的表达情况,探讨两者在GERD中的作用。方法：雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为反流组（R组）、对照组（S组）。采用胃底结扎联合幽门限制法构建慢性胃食管反流模型。采用免疫荧光法和蛋白质印迹法检测大鼠DRG中TRPV1和CB1、CB2的表达,并分析TRPV1蛋白表达与CB1、CB2蛋白表达的相关性。结果：免疫荧光法示R组DRG中TRPV1表达较S组显著上调（905.24±134.82对648.43±135.13,P=0.000）;而CB1（677.06±123.75对836.89±101.00,P=0.013）、CB2（513.99±79.80对709.63±43.25,P=0.000）表达显著下调。蛋白质印迹法亦显示,R组TRPV1蛋白表达显著高于S组（0.98±0.01对0.64±0.09,P=0.001）,CB1（0.86±0.05对0.96±0.06,P=0.013）、CB2（0.75±0.03对0.81±0.05,P=0.019）蛋白表达显著低于S组。TRPV1蛋白表达与 CB1蛋白表达呈负相关（r=－0.836,P=0.001）,而与CB2蛋白表达无关（r=－0.351,P=0.263）。结论：慢性胃食管反流大鼠中TRPV1蛋白表达上调与CB1蛋白表达下调密切相关,酸在调节受体分子中起关键作用。     

Paxillin、FAK和PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

背景：研究表明Paxillin、黏着斑激酶（FAK）和PTEN在许多肿瘤的发生、发展、侵袭、转移中发挥重要作用,但联合检测三者在胃癌中表达的报道罕见。目的：研究正常胃黏膜和胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN的表达及其临床意义。方法：以免疫组化SP法分别检测40例正常胃黏膜组织和88例胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN表达,并分析其与胃腺癌临床病理特征的关系以及Paxillin与PTEN表达之间的相关性。结果：与正常胃黏膜组织相比,胃腺癌组织Paxillin（65．9％对32．5％,P〈0．05）、FAK（56．8％对17．5％,P〈0．05）阳性表达率显著增高,PTEN阳性表达率显著降低（47．7％对100％,P〈0．05）。Paxillin、FAK和PTEN表达与胃腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关（P〈0．05）．与性别和年龄无关。胃腺癌组织中Paxillin表达与PTEN表达呈显著负相关（r=-0．369,P〈0．05）。结论：Paxillin、FAK高表达和PTEN低表达可能与胃腺癌的浸润、淋巴结转移等恶性生物学行为相关,联合检测三者可能有助于判断胃腺癌恶性程度和患者预后。     

大麻素受体在海马CA1区锥体神经元的功能表达

目的观察大麻素受体在孤立的海马CA1区锥体神经元的功能表达。方法将出生15~20d的Wistar大鼠取脑,急性分离出单个CA1区锥体神经元,用膜片钳技术记录神经元电活动,观察非选择性大麻素受体激动剂Win55212-2(5μmol/L)对神经元静息电位、动作电位、自发发放频率的影响。根据Win55212-2对膜电位的影响分为超极化组(n=7)和去极化组(n=6)。组织切片活性用MTT染色法检测。结果与给药前比较,超极化组神经元给药中动作电位频率和膜电压显著降低[0Hz vs(4.3±3.2)Hz,P0.05;(-57.0±4.6)mVvs(-54.1±3.8)mV,P0.01];与给药中比较,给药后动作电位频率及膜电压显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。与给药前比较,去极化组神经元给药中动作电位频率显著降低,膜电压显著升高(P0.01);与给药中比较,给药后动作电位频率显著升高,膜电压显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CA1区锥体神经元可能存在大麻素受体功能表达且不限于大麻素受体1;激活大麻素受体可能通过不同的机制起到抑制CA1区锥体神经元的作用。     

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织JAK2和STAT3表达的影响

目的观察中药肝复康对肝纤维化大鼠肝组织Janus激酶2（JAK2）及信号转导子和转录激活子3（STAT3）表达的影响,并对其在JAK2/STAT3信号通路上治疗肝纤维化的作用机制进行初步探讨。方法采用10%四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型,于造模第9周给予肝复康治疗12周。通过测定血清中ALT、AST活性及白蛋白和总蛋白的含量来反映肝脏功能,HE染色法观察肝组织病理学变化,RT-PCR观察JAK2和STAT3 mR-NA的表达。结果经肝复康治疗后,中剂量治疗组与模型组相比较,肝脏的组织学和血清学指标均明显改善,肝组织JAK2、STAT3 mRNA的表达显著减少（P〈0.01）。结论 （1）JAK2/STAT3信号通路在肝纤维化的形成过程中起重要作用;（2）肝复康对肝纤维化有疗效,其作用机制可能与降低肝组织JAK2和STAT3的表达,阻断JAK2/STAT3信号通路有关。     

实验性肝纤维化组织中细胞间黏附分子-1表达的研究

目的 探讨细胞间黏附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达及其在实验性肝纤维化发生中的作用。方法 分别建立高脂饮食、低脂酒精饮食、高脂酒精饮食、四氯化碳大鼠实验性肝纤维化模型,用免疫组织化学方法观察造模肝组织中ＩＣＡＭ－１的表达。结果 ＩＣＡＭ－１表达于肝细胞膜上,其阳性细胞多分布于汇管区周围、肝小叶内炎性细胞浸润区和坏死灶内,其阳性强度及分布与肝脏炎症、肝纤维化程度和分布相一致;在不同模型组中,ＩＣＡＭ     

Changes of gonadal CB1 cannabinoid receptor mRNA in the gilthead seabream, Sparus aurata, during sex reversal

Two cannabinoid receptor-like genes (CB1-like), named CB1A and CB1B, have been isolated in teleost fish, specifically in the puffer fish, Fugu rubripes. However, information on the physiological roles, such as the control of reproduction and development in fish is still scarce. Therefore, the aim of the present study was to investigate the presence of CB1-like mRNA in the gonads of a marine teleost species, the gilthead seabream, Sparus aurata, a hermaphrodite species in which the gonadal tissues first develop as testes, and then as functional ovary. We isolated an 890 bp fragment (GenBank accession number ); that corresponded to the open reading frame of the teleost CB1 receptor gene, encoding for the central portion of the protein, which was aligned with the other bony fish sequence. Using "in situ" hybridization, CB1-like mRNA was localized in both mature and sex-reversing gonads, and relative changes in CB1-like expression levels were detected through semi-quantitative RT-PCR. In the mature testis and in the testicular part of the sex-reversing gonad, CB1 expression levels were found to be much higher compared to the ovarian portion. This suggests that the CB1 signaling is likely involved in the process of testicular regression of the S. aurata, but its actual role has yet to be determined.     

糖皮质激素对大鼠胫骨近端干骺端破骨细胞中大麻素受体1表达的作用

目的 探讨糖皮质激素(GC)性骨质疏松症(GIOP)发病的分子机制.方法 32只雌性SD大鼠按体重随机分为3组:基线组(10只)、GC治疗组(11只)和对照组(11只).干预9周.双能X射线吸收法测量骨密度(BMD);显微CT定量分析右侧胫骨的松质骨BMD和结构;原位杂交和免疫组化检测左侧胫骨近端干骺端大麻素受体1(CB1R)的表达.结果 实验结束时,对照组活体全身BMD[(0.156±0.008)g/cm2]较基线组[(0.147±0.006)g/cm2]显著升高,GC治疗组活体全身BMD[(0.147±0.006)g/cm2]和离体股骨整体BMD[(0.220±0.011)g/cm2]较对照组[(0.156±0.008)g/cm2和(0.240±0.024)g/cm2]明显降低.与基线组和对照组比较,GC治疗组骨小梁体积BMD和组织BMD以及骨小梁的数目和连接度明显下降(P<0.05),而骨小梁的分离度显著增大(P<0.05),骨小梁厚度也增加;GC治疗组破骨细胞中CB1R mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05),且与部分微结构参数密切相关(P<0.05).结论 GC可使大鼠BMD降低,骨微结构衰败.GC上调破骨细胞中CB1R的表达水平,可能是GIOP发病的分子机制之一.     

Associations of CB1 cannabinoid receptor (CNR1) gene polymorphisms with risk for alcohol dependence: Evidence from meta-analyses of genetic and genome-wide association studies

Objectives:Reported associations of the cannabinoid receptor 1 (CNR1) single nucleotide polymorphisms (SNPs) with alcohol dependence (AD) have been inconsistent, prompting a meta-analysis to obtain more precise estimates.Methods:A Boolean search of 4 databases (PubMed, Scopus, Google Scholar, and Mednar) sought articles that evaluated the association between CNR1 polymorphisms and risk of AD. We selected the articles with sufficient genotype frequency data to enable calculation of odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (CIs). Using the Population Intervention Comparators Outcome elements, AD patients (P) were compared by genotype data between AD-participants (I) and non-AD-participants (C) in order to determine the risk of AD (O) attributed to the CNR1 SNPs. Analyzing 4 SNPs (rs1049353, rs1535255, rs2023239, and rs806379) using standard genetic models, we examined associations where multiple comparisons were Holm–Bonferroni corrected. The pooled ORs were assessed for aggregate statistical power and robustness (sensitivity analysis). Subgroups were Caucasians and African-Americans.Results:From 32 comparisons, 14 were significant indicating increased risk, from which 5 outcomes (P-value for association [P^a] = .003 to <.001) survived the Holm–Bonferroni-correction, which were deemed robust. In the rs1535255 outcomes, the codominant effect (OR = 1.43, 95% CIs = 1.24–1.65, P^a < .001) had greater statistical power than the dominant effect (OR = 1.30, 95% CI = 1.08–1.57, P^a = .006). In contrast, the rs2023239 codominant outcome was underpowered. Significance of both rs806379 Caucasian outcomes (ORs = 1.20–1.43, 95% CIs = 1.07–1.57, P^a = .003) contrasted with the null effects in African-Americans (ORs = 0.98–1.08, 95% CIs = 0.70–1.53).Conclusions:Three CNR1 SNPs (rs1535255, rs2023239, and rs806379) were implicated in their associations with development of AD: based on aggregate statistical power, rs1535255 presented greater evidence for associations than rs2023239; rs806379 implicated the Caucasian subgroup. Multiple statistical and meta-analytical features (consistency, robustness, and high significance) underpinned the strengths of these outcomes. Our findings could render the CNR1 polymorphisms useful in the clinical genetics of AD.     

Peg10基因在黏着斑激酶介导的肝癌细胞耐药中的作用

目的初步探讨Peg10基因与黏着斑激酶(FAK)介导的肝癌细胞耐药(CAM-DR)的关系及分子机制。方法采用MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)、阿霉素(ADR)对LO2细胞、ADR耐药的人肝癌细胞BEL-7404/ADR(7404/ADR)和Peg10基因沉默的siRNA-BEL-7404/ADR(siRNA-7404/ADR)细胞增殖的影响;建立7404/ADR和siRNA-7404/ADR裸鼠荷瘤模型,48只裸鼠随机分为6组,每组8只,A、C、D组注射7404/ADR细胞,B、E、F组注射siRNA-7404/ADR细胞;A、B组尾静脉注射生理盐水,C、E组给予5-Fu,D、F组给予尾静脉注射ADR,测量瘤块体积,RT-PCR检测Peg10基因的表达,Western Blot法检测PEG10、p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 ADR和5-Fu对siRNA-7404/ADR 24 h的IC50值均较7404/ADR的降低,差异均具有统计学意义(t值分别为7.641,7.560,P值均<0.01)。B、C、D组肿瘤体积较A组小,差异均有统计学意义(P值均<0.05),E、F组肿瘤体积较B组小,差异均具有统计学意义(P值均<0.01);E组与C组比较,F组与D组的肿瘤体积差异亦均有统计学意义(P值均<0.05)。B、E、F组Peg10的mRNA极少表达,C、D组Peg10的mRNA表达较A组有所降低。B组PEG10蛋白极少表达,与A组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),其pFAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白表达与A组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。C、D组PEG10、p-FAK、pJNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达较A组均降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。E、F组p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白表达与B组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.01),而C组与E组、D组与F组相比,PEG10、p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达差异亦均有统计学意义(P值均<0.01)。结论 Peg10基因失活后可增加ADR耐药的BEL-7404细胞株对5-Fu和ADR的敏感性,其作用机制可能与其下调p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达有关。     

蓝莓对肝纤维化大鼠血红素加氧酶-1表达的影响

目的 观察蓝莓对大鼠肝纤维化的预防作用及对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响.方法 45只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(A组)、模型组(B组)、蓝莓汁预防组(C组)、丹芍化纤胶囊预防组(D组)及蓝莓汁加丹芍化纤胶囊预防组(E组),每组9只.CCl4复合因素制备大鼠肝纤维化模型,各预防组给予蓝莓汁或(和)丹芍化纤胶囊灌胃,共饲养8周.测定各组大鼠血清ALT水平及肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的表达,并进行肝组织病理学检查.采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫组织化学法和Western blot分析大鼠肝组织HO 1的mRNA及蛋白质表达.多组间数据比较用单因素方差分析,等级资料用秩和检验.结果 B组大鼠血清ALT水平高于A组[(203.25±31.62)U/L比(57.25±6.88)U/L,F=92.498,P＜0.05)],各预防组较B组明显减少[C、D和E组分别为(149.44±16.51)U/L、(136.88±10.07)U/L和(127.38±11.03)U/L,F=92.498,P＜0.05)].C、D、E组大鼠肝组织匀浆SOD水平分别为(1.36±0.09)U/mg、(1.42±0.13)U/mg、(1.50±0.15)U/mg,高于B组的(1.08±0.19)U/mg(F=13.671,P＜0.05);MDA水平分别为(0.294±0.026)nmol/mg、(0.285±0.025)nmol/mg、(0.284±0.028)nmol/mg,低于B组的(0.335±0.056)nmol/mg(F=20.809,P＜0.05).各预防组肝纤维化程度较B组也有所减轻(x2-24.956,P＜0.05).B组大鼠肝组织HO-1的mRNA和蛋白质表达高于A组(F值分别为4.549和22.926,P值均＜0.05),各预防组大鼠肝组织HO-1的mRNA和蛋白质表达均高于B组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 蓝莓对CCl4所致大鼠肝纤维化有一定的预防作用;在慢性肝损伤时,蓝莓对HO-1的表达无明显影响.