低氧诱导肺血管平滑肌细胞诱生型一氧化氮合酶基因表达

本研究采用原位杂交、免疫组织化学、酶组织化学染色方法从三个层次分别证明低氧诱导大鼠肺血管中膜平滑肌细胞一氧化氮合酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）的基因和蛋白表达，并使中膜平滑肌细胞具有ＮＯＳ活性；离体培养的肺动脉平滑肌细胞实验也证明低氧使肺动脉平滑肌细胞ＮＯＳ活性增加，ＮＯ生成增多。提示诱生型ＮＯＳ基因可能是一种低氧诱导基因，低氧诱导ＮＯＳ表达可能是细胞感受低氧的一种重要机制。     

一氧化氮合酶在胃肠道的分布规律及意义

一氧化氮合酶（ＮＯＳ）是合成一氧化氮（ＮＯ）的关键酶，它存在于体内多种细胞中，可分为ｃＮＯＳ和ｉＮＯＳ两大类，研究表明，ｃＮＯＳ广泛分布于胃肠道，其活性及分布异常可能与某些胃肠疾病的发生、发展有关。     

一氧化氮合酶基因家族研究进展

哺乳动物细胞存有一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）基因家族，其编码的蛋白为ＮＯＳ蛋白家族。本文介绍了ＮＯＳ家族的基因结构、基因表达调控及蛋白结构与功能的研究进展。     

自发性高血压大鼠视网膜内含一氧化氮合酶神经元的研究

本实验用ＮＡＤＰＨ－黄递酶组织化学染色法观察了自发性高血压大鼠和京都种大鼠（ＷＫＹ，正常对照）视网膜内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化。结果显示，ＮＯＳ阳性神经元位于内核层和视网膜节细胞层。ＳＨＲ组视网膜ＮＯＳ阳性细胞属无长突细胞和移位无长突细胞。偶见最怀的节细胞。ＮＯＳ阳性无长突细胞和节细胞胸质显强阳性反应，可较长而清晰的突起，ＮＯＳ阳性神经元的分布密度长，且在视网膜中央区（视神经盘附近）的分布密度     

大鼠,金黄地鼠和家兔视网膜内一氧化氮合酶分布的比较

用ＮＡＤＰＨ黄递酶组织化学染色法观察了正常成年大鼠、金黄地鼠和家兔视网膜内一氧化氮合酶的分布，并比较了３种不同动物的区别。结果显示，在视网膜内ＮＯＳ阳性神经元主要为分布于内核层的无长突细胞、节细胞层的移位无长突细胞和少数节细胞，不同种类动物的视网膜内，ＮＯＳ阳性细胞的配布、密度和细胞形态均有差异。大鼠视网膜内ＮＯＳ阳性细胞多尾于内核层无长突细胞和节细胞层移位无长细胞，偶见于视网膜节细胞。金黄地鼠视     

一氧化氮及其合酶在肾脏病中的作用

在肾脏疾病中，ＮＯ及ＮＯ合酶（ＮＯＳ）的研究日益增多，ＮＯ与肾性高血压、肾血栓的形成密切相关，在抑制系膜细胞增生及肾小球肾炎、急性肾衰的致病中有重要作用。     

一氧化氮——新奇的抗寄生虫免疫分子

近年来发现，ＩＦＮ－γ可与ＩＬ－２／ＩＮＦ－α／ＴＮＦ－β／ＬＰＳ协同诱导巨噬细胞（Ｍψ）产生大量的一氧化氮（ＮＯ）。ＮＯ作为活化Ｍψ的一种细胞毒效应分子，在抑制和杀伤寄生虫的抗感染免疫中起重要作用。ＮＯ通过作用于宿主细胞的线粒体呼吸酶、ＤＮＡ合成酶及顺乌头酸酶，与这些酶的活性部位－Ｆｅ－Ｓ基结合，形成铁－亚硝酰基复合物，抑制酶的活性，从而断靶细胞的能量合成及ＤＮＡ复制，引起宿主细胞的死亡。     

细胞性一氧化氮供体的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应

目的一氧化氮（ＮＯ）供体细胞系的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应研究。方法采用３Ｈ－胍氨酸转换法进行ＮＯ合成酶（ＮＯＳ）活性测定；亚硝酸盐检测；ＤＮＡ片段的提取及凝胶电泳分析；凋亡细胞的ＤＡＰＩ染色观察；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果将ｉＮＯＳ真核表达质粒、ｐＣＭＶ／ｉＮＯＳ转染至Ｓｐ２／０骨髓瘤的变异株中，并获得能稳定表达ｉＮＯＳ和合成ＮＯ的重组细胞系（ＳＰｍｔ／ｉＮＯＳ），表达ｉＮＯＳ的效率为每升培养物含４００μｇ蛋白。利用该细胞作ＮＯ细胞性供体，成功地证实ＮＯ能诱导Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞发生凋亡。结论所建细胞性ＮＯ供体应用于ＮＯ的生物学功能研究具有ＮＯ合成稳定；更能模拟体内细胞间ＮＯ的信息传递过程；不需任何外源刺激即可合成ＮＯ等独特优点。所建ＮＯ供体细胞可以用于肿瘤细胞凋亡的研究。     

一氧化氮合酶在人吞噬细胞的表达上调TNF—α生成

本研究用鼠巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｉＮＯＳ）ｃＤＮＡ构建质粒表达载体，由电钻孔方法导入人单核细胞样细胞Ｕ９３７，经抗性标记筛选获得ｉＮＯＳ稳定表达细胞，蛋白印迹法证实，ｉＮＯＳ基因转当细胞表达了鼠巨噬细胞一氧化氮合酶，该细胞可随培养时间延长测得一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）的稳定代谢产物硝酸盐和亚硝酸盐含量积累增加，这种积累增     

一氧化氮──新奇的抗寄生虫免疫分子

近年来发现，ＩＦＮ－Ｙ可与ＩＬ－２／ＩＮＦ－ａ／ＴＮＦ－Ｂ／ＬＰ协同诱导巨噬细胞（Ｍ）产生大量的一氧化氦（ＮＯ）。ＮＯ作为活化Ｍ的一种细胞毒效应分子，在抑制和杀伤寄生虫的杭感染免疫中起重要作用。ＮＯ通过作用于宿主细胞的线粒体呼吸酶、ＤＮＡ合成酶及顺乌头酸酶，与这些酶的活性部位一Ｆｅ－Ｓ基结合，形成铁－亚硝酰基复合物，抑制酶的活性，从而阻断靶细胞的能量合成及ＤＮＡ复制，引起宿主细胞的死亡。     

NO───种新发现的免疫调节分子

一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）是新发现的体内多种组织或细胞产生的一种多功能的气态生物信使。Ｌ－精氨酸在两种ＮＯ合成酶（ｉＮＯＳ和ｃＮＯＳ）的催化下能产生ＮＯ。ＮＯ既是肿瘤免疫、微生物免疫的效应分子，又是多种免疫细胞的调节分子。ＮＯ既可以抑制Ｔ淋巴细胞增生、抑制抗体应答反应、抑制肥大细胞反应性，又能促进ＮＫ细胞活性、激活外周血单核细胞，调节Ｔ淋巴细胞和Ｍφ分泌细胞因子，还介导Ｍφ的细胞凋亡。ＮＯ是一种新发现的奇特的免疫调节分子     

NO的生物代谢及检测方法

一氧化氮（ＮＯ）在机体内通过一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的作用而生成，ＮＯ生物合成的调节可通过对底物、辅助因子、产物、催化反应的酶进行选择性干预。组织细胞ＮＯ含量的检测方法有：电化学方法的Ｃｌａｒｋ电极法和聚合卟啉微感器法、ＥＳＲ法、ｃＧＭＰ检测、瓜氨酸量的测定、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量的测定、形态学方法、血红蛋白测定法、化学发光法、分子生物学技术     

脑梗塞患者血内皮素和一氧化氮/一氧化氮酶联检的临床意义

ＥＴ是由血管内皮分泌的一种血管活性多肽 ,具有强大的收缩血管的作用[1 ] 。ＮＯ是一种具有多种生物学活性的物质 ,它具有松驰血管平滑肌 ,舒张血管 ,抑制血小板聚集以及抑制内皮细胞增殖的作用[2 ] 。ＮＯＳ是催化Ｌ -精氨酸 (Ｌ -Ａｒｇ)氧化生成ＮＯ的酶 ,根据其激活机制和功能不同可以分结构型ＮＯＳ(ｃＮＯＳ)和诱导型ＮＯＳ(ｉＮＯＳ)。国内尚少见有ＥＴ、ＮＯ/ＮＯＳ联检在脑梗塞中的报告 ,为此 ,我们进行了探讨 ,现将结果报告如下。材料和方法一、对象 :(一 )病例来源 :4 1例 (男 2 5 ,女 1 6 )脑梗塞患者均为我院临床上明确诊断的…     

一氧化氮在培养的大鼠心肌细胞缺氧—复氧损伤中的作用

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对心肌细胞缺氧－复氧损伤（ＨＲＩ）的作用。方法：培养的大鼠心肌细胞，培养液中分别预先加入ＮＯ前体Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）、ＮＯ供体ＳＩＮ－１或硝普钠（ＳＮＰ）、ＮＯＳ抑制剂Ｌ－ＮＮＡ或ＮＯＳ诱导剂脂多糖（ＬＰＳ），经缺氧１２０ｍｉｎ，复氧６０ｍｉｎ处理后，检测细胞存活率，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出量，亚硝酸盐（ＮＯ２）含量及细胞诱导型ＮＯ合酶（ｉＮＯＳ）活性等指标的改变。结果：①与常氧组比较，缺氧－复氧ＨＲ降低细胞存活率（２３％，Ｐ＜０．０１），增加ＬＤＨ漏出（６２倍，Ｐ＜０．０１），ｉＮＯＳ活性（７７％，Ｐ＜０．０１），ＮＯ２含量（６１７％，Ｐ＜０．０１）。②ＨＲ前预先加入ＳＩＮ－１、ＳＮＰ或Ｌ－Ａｒｇ，均引起ＬＤＨ漏出进一步增高（Ｐ＜０．０１），细胞存活率进一步降低（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。③Ｌ－ＮＮＡ２ｍｍｏｌ／Ｌ，单独应用对细胞损伤的影响无统计学意义，与Ｌ－Ａｒｇ联合应用，则减弱Ｌ－Ａｒｇ的细胞损伤作用。④ＬＰＳ１μｇ／ｍＬ，增加ｉＮＯＳ活性（２６倍，Ｐ＜０．０１）和ＬＤＨ漏出（５６％，Ｐ＜０．０１）。结论：ＮＯ加重心肌细胞ＨＲＩ，是心肌细胞ＨＲＩ的损伤因子     

听源性惊厥点燃诱导一氧化氮合酶表达增加

为探讨一氧化氮在听源性惊厥点燃中的可能作用，用ＮＡＤＰＨ－黄递酶组织化学方法和Ｆｏｓ免疫细胞化学方法，研究了听源性惊厥易感大鼠惊厥和点燃后听觉核团和前脑结构内ＮＯＳ－Ｆｏｓ双重阳性神经元的分布及差异。结果显示：一次惊厥后，正丘内双重阳性神经元较较多，近７０％－８０％的ＮＯＳ阳性神经元呈Ｆｏｓ阳性，其他听觉核团和内仅见少星ＮＯＳ－Ｆｏｓ双重阳性神经元。点燃后，听觉核团和前脑结构内ＮＯＳ－Ｆｏｓ双得阳     

一氧化氮与一氧化氮合酶（NO,NOS）在胎盘和脐带中的存在及其与妊娠？…

本文概述了近年来有关一氧化氮（ＮＯ）及其合成酶（ＮＯｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）在子宫、胎盘、脐带内的存在及与妊娠生理、病理关系的研究进展。用ＮＡＤＰＨｄ酶组化法和免疫组化法、分子生物学技术等方法发现，正常子宫内膜、肌层、血管、神经束、脐动脉、脐静脉、胎盘绒毛血管及合体滋养层细胞均可见ＮＯＳ的表达。认为这些组织内ＮＯＳ产生的ＮＯ对于保持妊娠期子宫静息状态、降低母体血管及胎盘循环的阻力、维持母体正常妊     

抗氧化剂和NFκB对大鼠肺微血管内皮细胞iNOS表达的影响

目的：探讨ＮＦкＢ在大鼠肺微血管内皮细胞ｉＮＯＳ基因诱导表达中的作用及抗氧化睦内皮细胞ｉＮＯＳ诱导表达的影响及其机制。方法：Ｇｒｉｅｓｓ法测定细胞上清液ＮＯ２水平以反映ＮＯ的生成,Ｎｒｔｈｅｒｎ印迹分析ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平,ＥＭＳＡ法测定细胞核内ＮＦкＢ的结合活性。结果：抗氧化可阻断内皮细胞培养体系ＬＰＳ和ＴＮＦα诱导的ＮＯ生成及ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达;ＬＰＳ和ＴＮＦα可诱导大鼠肺微血管内皮细胞Ｎ     

一氧化氮合酶（NOS）在成年猫脊髓的分布

采用ＮＡＤＰＨｄ 酶组化方法,观察一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性产物在猫脊髓的分布。结果显示：ＮＯＳ的阳性反应物主要分布于脊髓Ⅱ板层的神经膨体及少数神经元内。其它部位除中央管附近及腹角见个别ＮＯＳ阳性神经元及纤维外,几乎未见ＮＯＳ阳性染色。表明在本实验条件下所显示的脊髓Ⅱ板层的神经膨体及少数神经元内的ＮＯＳ阳性产物可能主要与三种类型ＮＯＳ（神经活性ＮＯＳ,诱导性ＮＯＳ,内皮源性ＮＯＳ）中的神经活性ＮＯＳ关系密切。本文结果还提示Ⅱ板层神经膨体和神经元内的ＮＯＳ可能与Ⅱ板层的某些生理功能有关。     

一氧化氮与自央免疫病

在自身免疫损伤过程中，炎症反应细胞如Ｍφ，ＰＭＮ，ＴＨ１和受损靶细胞如胰岛β细胞在细胞因子诱导下可产生ＮＯ，ＮＯ通过毒作用或细胞凋亡造成组织损伤。ＮＯＳ抑制剂可预防和治疗某些实验性自身免疫病。     

一氧化氮与自身免疫病

在自身免疫损伤过程中，炎症反应细胞如ＭΦ，ＰＭＮ，ＴＨ１和受损靶细胞如胰岛β细胞在细胞因子诱导下可产生ＮＯ，ＮＯ通过细胞毒作用或细胞凋亡造成组织损伤。ＮＯＳ抑制剂可预防和治疗某些实验性自身免疫病。