云南产青叶胆及其习用品药材中5种成分的HPLC含量测定

目的:建立1种用于测定青叶胆及习用品药材中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和红白金花内酯含量的HPLC方法,并研究5种成分在青叶胆及习用品药材中的分布.方法:Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相0.1％磷酸溶液-甲醇,梯度洗脱,流速0.7～ 1.0 mL·min-1,柱温32℃,检测波长为250,260,225 nm.结果:5种成分的分离度良好,标准曲线在检测范围内均呈良好线性,r=0.999 7 ～ 0.999 9,平均回收率97.03％ ～ 102.7％,RSD为1.8％ ～6.2％.对8种30份青叶胆测定结果显示8个青叶胆品种中5种成分的有无及含量存在差异;弥勒獐牙菜、丽江獐牙菜等獐牙菜苦苷含量高达34.47～118.05 mg·g-1;西南獐牙菜中龙胆苦苷含量最高,紫红獐牙菜中獐牙菜苷的含量较高;根据獐牙菜苦苷及龙胆苦苷与獐牙菜苷含量之和的比较可以鉴别小青叶胆和大青叶胆;根据龙胆苦苷与5成分总和的比值可以区别西南獐牙菜.结论:本研究建立的方法操作简单、结果准确,具有较好的重复性和稳定性,可用于青叶胆类药材的鉴定及质量评价.     

云南民间常用青叶胆类药材中环烯醚萜苷类成分的含量测定

目的:比较云南民间常用青叶胆类药材中环烯醚萜苷类成分的含量,为青叶胆基原植物药用合理性及资源利用提供依据。方法:采用HPLC法测定青叶胆类药材中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的含量。结果:9种共30批青叶胆类药材成分差异显著。结论:几种药材化学成分因种类和产地不同而差异较大,不宜作为替代药物使用,将獐牙菜苦苷和獐牙菜苷作为质量控制指标,是鉴别和控制青叶胆类药材质量的有效手段。     

大籽獐牙菜甙保肝作用的药理研究——对体外培养大鼠肝细胞的影响

前两文我们已分别报导了大籽獐牙莱(Swertiamacrosperma)全草水提取物对化学毒物损伤动物的保护作用及对大白鼠的利胆作用。大籽獐牙菜甙(Desacetylcentapicin)是该植物中含量较高的一个成分。本文着重研究大籽獐牙菜甙(以下简称Des.)体外给药对化学毒物损伤大鼠肝细胞的影响,并与同属植物青叶胆(Swertiamilleensis)中的獐牙菜甙(Swerosid,以下简称So.)、金沙青叶胆(SwertiapatensBurk)中的獐牙菜苦味甙(Swertiamarin,以下简称St.)作了作用比较,     

超声提取-高压液相色谱法制备高纯度獐牙菜苦苷

目的:建立一种从青叶胆(Swertia mileensis)中快速、高效分离制备獐牙菜苦苷的方法。方法 :首先对青叶胆原料进行前处理,然后采用超声波提取法制备青叶胆提取物,再使用高压制备液相色谱法(HPPLC)对所得的青叶胆提取物进行分离纯化,将所得富含獐牙菜苦苷的流分冷冻干燥后,用高效液相色谱法(HPLC)进行纯度分析。结果:前处理方式为去根茎取花叶;最佳超声提取工艺:20倍量75%乙醇,超声提取3次,每次10 min;高压制备液相色谱纯化工艺:反相C18填料,压力10 MPa,以30%甲醇-水为流动相洗脱,所得獐牙菜苦苷纯度经HPLC法分析质量分数为98.17%(峰面积归一化法)。结论:该方法制备獐牙菜苦苷简便、快捷,所得产物的纯度高,适合青叶胆中獐牙菜苦苷的快速制备,同时工艺放大验证其也适用于工业生产。     

弥勒獐牙菜药材不同部位獐牙菜苦苷与齐墩果酸的含量测定

弥勒獐牙菜SwertiamileensisT .N .HoetW .L .Shih是龙胆科Gentianaceae獐牙菜属Swertia植物,又名青叶胆、金鱼胆、小苦草。獐牙菜苦苷(swertiamarin)和齐墩果酸(oleanolicacid)是其有效成分[1] 。关于弥勒獐牙菜有效成分含量测定,文献报道了分光光度法、薄层色谱 分光光度法测定獐牙菜苦苷[2 ,3 ] ,未见用高效液相色谱法测定獐牙菜苦苷和齐墩果酸方面的文献报道。本研究采用高效液相色谱法对弥勒獐牙菜药材不同部位獐牙菜苦苷     

川东獐牙菜苦甙类成分的提取及其体外抗肿瘤作用研究

提取川东獐牙菜中的苦甙成分并观察其体外抗肿瘤作用。利用高效液相色谱分析证明川东獐牙菜中含有獐牙菜苦甙。MTT实验结果说明獐牙菜苦甙对肝癌细胞有明显的抑制作用,苦甙浓度在35~50μg/m l的时候,对肝癌细胞的抑制率可达到50%。     

3种獐牙菜属民族药UPLC指纹图谱研究

目的采用UPLC技术结合定量分析、系统聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),评价、鉴别3种民族药用植物川东獐牙菜Swertia davidii、狭叶獐牙菜S.angustifolia和紫红獐牙菜S.punicea Hemsl.。方法采集3种獐牙菜共27株样品色谱图,将色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件,确定样品保留时间和峰面积数据,对3组样品进行相似度分析。峰面积数据导入SPSS和SIMCA-P~+软件进行HCA和PCA,从树状图和主成分得分图中判断聚类效果。结果该方法线性关系良好(R~20.999 3,仪器精密度高(RSD为0.19%~2.45%),方法重现性好(RSD为0~1.77%),加样回收率在95.8%~102.3%,RSD为0.45%~2.81%。不同物种獐牙菜植物中指示化合物的量差异大,同一物种不同个体中指示化合物量差异明显。獐牙菜苦苷在川东獐牙菜中为0.54~10.05 mg/g,狭叶獐牙菜中未检出,紫红獐牙菜中为1.76~15.62 mg/g;龙胆苦苷在川东獐牙菜中为4.27~11.18 mg/g,狭叶獐牙菜中为0.26~3.58 mg/g,紫红獐牙菜中为1.13~16.11 mg/g;当药苷在川东獐牙菜中为0.02~0.28 mg/g,狭叶獐牙菜中为0.02~0.14 mg/g,紫红獐牙菜中为0.11~44.52 mg/g;芒果苷在川东獐牙菜中为0.14~0.55 mg/g,狭叶獐牙菜中为0.03~0.04 mg/g,紫红獐牙菜中为0.01~13.49 mg/g。HCA树状图分类准确率为85.2%,误判的紫红獐牙菜样品中化合物量较低。PCA得分图可以区分3种獐牙菜,紫红獐牙菜聚类效果分散,个体之间差异较大。结论采用UPLC技术分析指示化合物的量,结合化学计量学能够评价和鉴别3种獐牙菜属药用植物。在本研究中,紫红獐牙菜表现出更高的药用价值。     

大籽獐牙菜保肝作用的研究(Ⅰ)——对化学毒物损伤动物的影响

龙胆科獐牙菜属多种植物,如川西獐牙菜、青叶胆、日本当药、瘤毛獐牙菜等均具有保肝作用,有的已应用于临床。在我省资源最为丰富的大籽獐牙菜(Swestia macrospesma)民间亦用于治疗肝炎。为此,我们用该药的全草水提取物作了部分药理研究,发现其具有明显的保肝作用。现将实验结果报告如下:     

TRAIL联合川东獐牙菜诱导人肝癌细胞的凋亡

目的:探讨重组人TRAIL蛋白联合川东獐牙菜正丁醇部位提取物对HepG2人肝癌细胞的凋亡诱导效应。方法:用MTT法和流式细胞仪检测人重组TRAIL蛋白及川东獐牙菜正丁醇部位提取物单独或者联合作用于HepG2人肝癌细胞后的细胞生长抑制率和凋亡发生率,TUNEL法观察细胞凋亡发生情况。结果:MTT和流式细胞仪检测显示:200μl浓度50μg/ml川东獐牙菜正丁醇部位提取物组肿瘤细胞抑制率为89.48%、凋亡率48.66%。100μl浓度100ng/ml TRAIL联合100μl浓度50μg/ml川东獐牙菜正丁醇部位提取物组抑制率和凋亡率均明显提高,分别为96.98%和65.71%,具有显著性差异。TUNEL显示:TRAIL联合川东獐牙菜正丁醇部位提取物组细胞核棕黄色深染,且阳性染色细胞数目明显增多,表明TRAIL与川东獐牙菜正丁醇部位提取物联合作用凋亡细胞明显增加。结论:TRAIL与川东獐牙菜正丁醇部位提取物具有协同杀灭HepG2人肝癌细胞作用。     

獐牙菜甙对实验性肝损伤大鼠血浆cAMP含量的影响

本文所用獐牙菜甙(Sweroslde)系从龙胆科獐牙菜属植物青叶胆(Swertia mileensis T.N.Heet W.L.Shi)中提取的苦味甙。药理研究认为,獐牙菜甙(简称獐甙)具有保肝、解毒、降酶等作用。为进一步弄清獐甙保肝作用的机制,我们利用大鼠复制D-氨基半乳糖性肝炎模型,观察了不同剂量的獐甙对血浆中cAMP含量的影响。     

毛獐牙菜化学成分的研究

从毛獐牙菜中分得４种成分，根据光谱数据和理化性质测定，鉴定为异红草甙、龙胆苦甙、葡萄糖和齐墩果酸，均为首次从本植物中分离鉴定。     

贵州獐牙菜化学成分研究

从贵州獐牙菜Swerlia kauitchensis中分离鉴定出齐墩果酸、胡萝卜苷、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮等10个化合物.均为首次从该植物中分得.     

青叶胆与小儿腹痛草的比较鉴别

目的为正确识别中药饮片青叶胆与混淆品小儿腹痛草提供参考依据。方法对二者的性状及显微结构予以比较鉴别。结果与结论对青叶胆和小儿腹痛草的性状、显微结构进行比较,其性状、显微结构均具代表性,并有明显区别。     

高效液相法同时测定獐牙菜属植物中四种活性成分

目的：同时测定獐牙菜属植物中四种抗肝炎活性成分的含量。方法：用高效液相色谱法对獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和雏菊叶龙胆酮四种抗肝炎活性成分进行了分析。结果：在选定的色谱条件下四种成分分离良好,在检测浓度范围内线性良好。日内和日间精密度分别小于2%和4.6%,加样回收率为97.94%～99.84%。建立了獐牙菜属植物中四种不同化学结构类型抗肝炎活性成分的含量测定方法。结论：本方法简单、准确,能成功的的运用于同时测定獐牙菜属植物不同部位中獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和雏菊叶龙胆酮四种抗肝炎活性成分的含量以及獐牙菜属植物的鉴定。     

Anti-diabetic activity of Swertia corymbosa (Griseb.) Wight ex C.B. Clarke aerial parts extract in streptozotocin induced diabetic rats

Ethnopharmacologicals relevance

Swertia corymbosa locally called as Shirattakuchi have a long history of use in Ayurveda herbal preparations in Indian traditional system of medicine. It has been used in folklore medicine for the treatment of diabetes.

Aim of the study

The present study aimed to investigate the effect of the methanolic extract of Swertia corymbosa (SC) in diabetic and to analyze its chemical composition by HPLC–ESI/MS that may correlate with their pharmacological activities.

Materials and methods

The in vitro anti-diabetic activity of the extracts was measured by using α-glucosidase and α-amylase enzyme inhibitory activity. The methanolic extract of Swertia corymbosa were administered orally (125, 250 and 500 mg/kg, for 28 days) to streptozotocin-induced diabetic rats. Hypoglycemic effects, oral glucose tolerance test, change in body weight and lipid profile, biochemical analysis and histopathological examination were assessed. High-performance liquid chromatography–electrospray ionization/mass spectrometry (HPLC–ESI/MS) method was also developed to analyze the chemical composition.

Results

In vitro anti-dabetic study, the methanol extract of SC is found to be a potent inhibitor of α-glucosidase and α-amylase activity. Oral administration of SC and standard drug for 28 days caused a significant decrease in the concentrations of blood glucose level, total cholesterol (TC), serum triglycerides (TGs), low-density lipoprotein-cholesterol (LDL-C), malondialdehyde (MDA) and significant increase in the concentrations of high density lipoprotein-cholesterol (HDL-C), serum insulin and body weight. Furthermore, activities of antioxidative enzymes, including SOD, GPx, GSH and CAT were enhanced dosed dependently with SC. Histopathological studies of the pancreas showed the regeneration of the β-cells by extract which were earlier necrosed by streptozotocin. Ten major compounds such as loganic acid (1), swertiamarin (2), sweroside (3), gentiopicroside (4), isovitexin (5), amoroswertin (6), amarogentin (7), gentiacaulein (8), decussatin (9) and swertianin (10) were analyzed by HPLC–ESI/MS system.

Conclusions

These results demonstrate that SC aerial parts of methanolic extract is an effective anti-diabetic and antioxidant activities which provides the scientific proof for the folklore medicine.     

珍稀濒危药用植物川西獐牙菜的资源调查

采取文献调查、走访调查、样方调查及市场调查等方法,对西藏、青海、四川等省自治区珍稀濒危药用植物川西獐牙菜进行相关调查,结果表明,川西獐牙菜主要分布在西藏的左贡、芒康,青海的玉树,四川的石渠、道孚、康定、马尔康、金川、小金。从分布海拔来看,可以从2 300 m（四川康定）一直到3 900 m（西藏芒康）,在相对高度为2 600 m 的变化范围内都有分布。光照、水分、土壤、温度、海拔等因素从不同的角度对川西獐牙菜的分布和生长、资源蕴藏量都有着明显的影响。近年来,作为藏药“藏茵陈”的川西獐牙菜市场需求增长迅速,滥采滥挖是导致近年川西獐牙菜资源急剧减少的主要原因。建议一方面应加强对川西獐牙菜的合理限量采挖管理,同时应开展川西獐牙菜资源利用价值的评价,并加快发展川西獐牙菜的栽培生产。     

A New Secoiridoid Glycoside from Swertia cincta

Objective To study the chemical constituents of Swertia cincta.Methods Preparative liquid chromatography was employed.The structures of the compounds were elucidated by spectroscopic analysis.Results Three secoiridoid glycosides were isolated from S.cincta and identified as 8-methoxyl-eustomorusside(1),secoiridoids eustomorusside(2),and eustomoside(3).Conclusion Compound 1 is a new secoiridoid glycoside.Compounds 2 and 3 are isolated from this plant for the first time.     

观赏獐牙菜中新(左)口(右)山酮的化学研究

 目的研究我国民族药观赏獐牙菜(Swertia decora Franch)的化学成分。方法用常规的硅胶柱层析和薄层色谱法进行分离,根据化合物的理化性质及一维、二维波谱解析鉴定其结构。结果从观赏獐牙菜脂溶性部分得到6个化合物,分别鉴定为1-羟基-4,5,6,7-四甲氧基酮(swertiadecoraxanthoneⅠ)(Ⅰ);1,3,8-三羟基-2,5-二甲氧基(左)口(右)山酮(Ⅱ);1,8-二羟基-3,7-二甲氧基(左)口(右)山酮(methylswertianin,Ⅲ);1-羟基-3,7,8-三氧甲基(左)口(右)山酮(decussatin,Ⅳ);1,7,8-三羟基-3-甲氧基(左)口(右)山酮(swertianin,Ⅴ)及二十四烷酸(tetracosanoic acid Ⅵ)。结论 化合物Ⅱ为新化合物,定名为观赏獐牙菜(左)口(右)山酮 Ⅱ(swertiadecoraxanthoneⅡ),其他均为首次从该植物中分离到。     

宾川獐牙菜化学成分研究

目的研究宾川獐牙菜(Swertia binchuanensis)的化学成分,寻找生物活性物质。方法分别用石油醚,醋酸乙酯,氯仿和正丁醇依次萃取宾川獐牙菜乙醇提取物,再经MCI、硅胶和D101等柱层析进行分离纯化。根据化合物的理化性质和UV、MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱手段鉴定其结构。结果从宾川獐牙菜的脂溶性部分分离得到4个化合物,分别鉴定为1-羟基-3,5-二甲氧基酮(1-hydroxy-3,5-dimethoxyxanthone,Ⅰ),1,5,8-三羟基-3-甲氧基酮(bel-lidifodin,Ⅱ),齐墩果酸(oleanolic acid,Ⅲ),獐牙菜苦苷(swertamarin,Ⅳ)。结论 4个化合物皆为首次从宾川獐牙菜中分离得到。