金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌（SA）的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec（SCCmec）基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应（PCR）进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素（PVL）基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%（39/102）。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系.方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因 mecA 和致病毒素基因中毒休克综合征毒素‐1(TSST‐1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做 D‐试验.结果74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%. MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05). PVL 基因阳性的 MRSA 耐药性与 PVL 基因阴性的 MRSA 比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05). PVL 基因阳性的 MSSA 耐药性比不携带 PVL 基因的 MSSA 强,两者间差异有统计学意义(P<0.05).携带 TSST‐1基因的 MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药. D‐试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%.只有1株 PVL 基因阳性的 MRSA D‐试验阳性.结论MRSA 的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL 和 TSST‐1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及 MSSA 的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度.     

146例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率及诱导耐药基因。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散法,用头孢西丁纸片检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)并以红霉素、克林霉素双纸片法(D试验)分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果 146株SA中MRSA占57.5%。SA对红霉素及克林霉素同时耐药的有82株,占56.2%,红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的有34株,其中D试验阳性26株,红霉素诱导克林霉素耐药率76.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)中D试验阳性分别为80.0%和71.4%。克林霉素耐药菌株主要由erm基因决定,结构型耐药菌株主要耐药基因为ermA,诱导型耐药菌株的主要耐药基因为ermC。结论临床微生物实验室应加强对SA中克林霉素诱导耐药的检测,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及SCCmec基因分型研究

目的了解大连地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其葡萄球菌盒染色体SCCmec的基因型特点。方法采用纸片扩散法检测MRSA对抗菌药物的耐药性;聚合酶链反应(PCR)对SCCmec进行基因分型。结果分离出的38株MRSA菌株均具有多重耐药性,但对万古霉素和氯霉素较为敏感。SCCmec基因型以Ⅱ型最为常见,占86.84%;其次为Ⅲ型,占10.53%;未定型的占2.6%。结论大连地区分离出的MRSA具有多重耐药的特征,SCCmec基因型以Ⅱ型为主。     

沧州地区金黄色葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药分析

目的 了解沧州地区金黄色葡萄球菌(SA)耐药表型,指导临床医生合理用药.方法 常规方法分离、鉴定SA菌株,采用纸片扩散法对254株SA进行红霉素和克林霉素耐药性检测,以D-试验测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型.结果 254株SA临床菌株中,甲氧西林金耐药黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为63.4%;红霉素耐药、克林霉素敏感的54株SA中,克林霉素诱导耐药(D-试验阳性)39株,占72.2%;MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)D-试验阳性率分别为83.3%和50.0%.结论 MRSA检出率较高,克林霉素诱导耐药较为严重;在进行常规药敏试验的同时,应通过D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型及耐药性分析

目的探讨临床分离的346株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株的临床分布、SCCmec分型及其对常用抗菌药物的耐药情况。方法选择2014年1月至2015年1月该院分离的784例金黄色葡萄球菌(SA),采用PCR方法对其进行MRSA及MRSA SCCmec基因分型鉴定,并对其检出分布及耐药性进行分析。结果 784株SA中MRSA 346株(占44.13%),MRSA中来自痰液占43.06%,伤口分泌物占48.55%;MRSA对青霉素、左氧氟沙星、红霉素耐药性较高,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。MRSA经SCCmec分型,共发现SCCmecⅡ型130株,SCCmecⅢ型196株,SCCmecⅣ型11株,SCCmecV型9株。结论该院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主,MRSA对多种抗菌药物具有耐药作用,但对万古霉素、替考拉宁等敏感。     

金黄色葡萄球菌基因检测及耐药性分析

目的 了解清远地区金黄色葡萄球菌(SA)的耐药性及耐药基因的分布情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集2018年7月至2019年7月清远市人民医院检验科微生物室分离的80株SA,采用BD PhoenixTM100全自动微生物鉴定和药敏试验系统以及纸片扩散法进行细菌鉴定与药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因.结果 80株SA中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)各40株.在抗菌药物中,SA对青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸的耐药率较高,分别为95.00％、55.00％、55.00％,其中MRSA对这三种抗菌药物的耐药率均为100.00％,未发现SA对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁和替加环素耐药.80株SA中均未检测到mecC与sasX基因;MSSA中mecA基因的阳性率为20.00％(8/40),PVL基因的阳性率为7.50％(3/40);MRSA中mecA基因的阳性率为100.00％(40/40),PVL基因的阳性率为20.00％(8/40).结论 该院耐药基因mecA、PVL检出率较高,可能是产生耐药的重要原因,临床上应予以足够重视.     

124株金黄色葡萄球菌的耐药性分析及PVL基因检测

目的：调查了解我院临床分离的124株金黄色葡萄球菌的耐药谱特征及PVL基因携带状况,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法采用Vitek2 Compact全自动微生物鉴定仪进行菌株鉴定及药物敏感试验,PCR法检测mecA基因、mecC基因和PVL基因。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为56.45%(70/124),MRSA主要分离自烧伤病区,其次是神经外科ICU。 MRSA菌株对青霉素G均耐药;对左氧氟沙星、庆大霉素、红霉素、四环素、复方新诺明和利福平的耐药率分别为57.1%、67.1%、85.7%、80.07%、28.6%、37.1%;MRSA对多种常用抗菌药物的耐药率普遍高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),差异有统计学意义(P<0.05);MRSA和MSSA对呋喃妥因、喹奴普汀／达福普汀、利奈唑胺的耐药率分别为2.9%、11.4%、2.9%;0.0%、5.6%、5.6%,差异无统计学意义(P>0.05)。检出6株PVL阳性,其中MRSA和MSSA各占3株。结论我院分离的金黄色葡萄球菌对抗菌药物呈多重耐药性,MRSA菌株耐药率明显高于MSSA,应加强对MRSA的监测,指导临床合理使用抗菌药物,加强对呋喃妥因、喹奴普汀／达福普汀、利奈唑胺耐药菌株的检测及PVL基因的检测,防止此类菌株的播散。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性，SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MBSA的SCCmec基因型、PVL、TSST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主（47．2％）,PVL基因均为阴性,12株（22％）MRSA TSST-1阳性。结论53株MILSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。     

金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素诱导耐药分析

目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率。方法采用美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的纸片扩散法,检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）以及金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,并以双纸片法（即D试验）分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型。结果金黄色葡萄球菌中MRSA占77.2%。金黄色葡萄球菌对红霉素及克林霉素同时耐药菌株占62.4%,红霉素耐药而克林霉素敏感菌株占21.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）中D试验阳性分别为72.0%和57.1%。D试验阳性占红霉素耐药而克林霉素敏感金黄色葡萄球菌的68.8%。结论临床微生物实验室应常规开展D试验,检测金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。     

62株临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型及耐药性分析

目的 了解医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的SCCmec基因型别及耐药特征.方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术检测MRSA菌株的mecA基因并对其进行分型,应用E-test法测试MRSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、左氧氟沙星和利福平5种药物的MIC值.结果 62株MRSA的mecA基因全部阳性,SCCmecⅢ型60株,SCCmecⅣa型1株,还有1株用本实验方法未能分型.药敏试验显示所检菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感,对左氧氟沙星和利福平的耐药率分别为96.8%和82.3%.结论 该院以SCCmecⅢ型为主要流行类型,治疗MRSA仍首选万古霉素等糖肽类抗菌药物.     

252株金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)的临床分布及耐药性特征。方法收集该院2009年1月至2010年12月临床分离的SA,采用WHONET5.4软件进行分析。结果共分离SA252株,其分离出的SA标本以痰为主,占47.62%,其次为分泌物和脓液。检出率前3位的科室为ICU、骨外科和呼吸内科。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)78株,占30.95%,其中ICU的MRSA检出52株,检出率高于非ICU。除万古霉素、利奈唑胺、利福平及氯霉素对其保持较低耐药率外,对其他抗菌药物耐药率均较高。ICU内SA耐药率高于非ICU。结论通过分析SA的临床分布及耐药性特征,有利于采取措施控制NRSA的流行和指导临床用药。     

Novel type of staphylococcal cassette chromosome mec identified in community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains

We identified a new type of staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) from two community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains. The novel element, designated type IV SCCmec, had a unique combination of the class B mec gene complex and the type 2 ccr gene complex and was much smaller in size (21 to 24 kb) than previously identified SCCmec elements of hospital-acquired MRSA. Consistent with the strains' susceptibilities to various non-beta-lactam antibiotics, the type IV SCCmec was devoid of any antibiotic resistance genes other than the mecA gene.     

Novel characteristics of community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains belonging to multilocus sequence type 59 in Taiwan

Community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus (CA-MRSA) strains, which often produce Panton-Valentine leucocidin (PVL), are increasingly noted worldwide. In this study, we examined 42 MRSA strains (25 PVL-positive [PVL+] strains and 17 PVL-negative [PVL(-)] strains) isolated in Taiwan for their molecular characteristics. The PVL+ MRSA strains included CA-MRSA strains with multilocus sequence type (ST) 59 (major PVL+ MRSA in Taiwan), its variants, and worldwide CA-MRSA ST30 strains. The PVL(-) MRSA strains included the pandemic Hungarian MRSA ST239 strain, the Hungarian MRSA ST239 variant, MRSA ST59 (largely hospital-acquired MRSA strains) and its variants, the pandemic New York/Japan MRSA ST5 strain (Japanese type), and the MRSA ST8 strain. The major PVL+ CA-MRSA ST59 strain possessed a tetracycline resistance-conferring (tetK positive) penicillinase plasmid and a drug resistance gene cluster (a possible composite transposon) for multidrug resistance. Moreover, it carried a novel staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) with two distinct ccrC genes (ccrC2-C8). This SCCmec (previously named SCCmec type V(T)) was tentatively designated SCCmec type VII. Sequencing of the PVL genes revealed the polymorphisms, and the PVL+ CA-MRSA ST59 strain possessed the ST59-specific PVL gene sequence. The data suggest that a significant amount of clonal spread is occurring in Taiwan and that the major PVL+ CA-MRSA ST59 Taiwan strain exhibits unique genetic characteristics, such as a novel SCCmec type and an ST59-specific PVL gene sequence.     

Molecular and epidemiological evidence for spread of multiresistant methicillin-susceptible Staphylococcus aureus strains in hospitals

The excision of the staphylococcal chromosomal cassette mec (SCCmec) from methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains results in methicillin-susceptible S. aureus (MSSA) strains. In order to determine the proportion and diversity of multidrug-resistant MSSA (MR-MSSA) strains derived from MRSA strains, 247 mecA-negative isolates recovered in 60 French hospitals between 2002 and 2004 were characterized. The spa types of all strains were determined, and a subset of the strains (n = 30) was further genotyped by multilocus sequence typing. The IDI-MRSA assay was used to test the isolates for the presence of the SCCmec element, which was detected in 68% of all isolates analyzed. Molecular analysis of the samples suggested that 92% of the MR-MSSA isolates were derived from MRSA clones of diverse genetic backgrounds, of which the clone of sequence type 8 and SCCmec type IV(A) accounted for most of the samples. High variations in incidence data and differences in the molecular characteristics of the isolates from one hospital to another indicate that the emergence of MR-MSSA resulted from independent SCCmec excisions from epidemic MRSA isolates, as well as the diffusion of methicillin-susceptible strains after the loss of SCCmec. MR-MSSA could constitute a useful model for the study of the respective genetic and environmental factors involved in the dissemination of S. aureus in hospitals.     

浙江省富阳区临床分离甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的流行现状及耐药性分析

目的 分析浙江省富阳区临床分离的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率、基因分型及药敏特征等流行现状。方法 收集2013年11月至2014年10月两家医院临床标本中分离的金黄色葡萄球菌,对其中经头孢西丁纸片表型筛选确认的44株MRSA进行应用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、spa、SCCmec基因分型,筛查pvl基因,应用脉冲场凝胶电泳的分型图谱进行菌株间的同源性分析。同时应用16种抗菌药物进行药敏实验。结果 44株MRSA,占金黄色葡萄球菌的16.4%(44/268)。两家医院流行的主要克隆不同,富阳中医骨伤医院以ST59-t437-SCCmecⅣ型为主,菌株间同源程度低;人民医院以ST5-t311-SCCmecⅡ型为主,部分菌株间同源程度高。检出3株pvl阳性菌株,占6.8%。药敏结果表示MRSA对内酰胺类普遍耐药,红霉素、克林霉素的耐药率高(85.0%),未发现万古霉素、利奈唑胺、替加环素的耐药株。结论 富阳地区MRSA的检出率相对较低,流行以ST5-t311-SCCmecⅡ型为主,两家医院MRSA流行的主要克隆有较大差异。MRSA的耐药情况不容乐观,多重耐药现象严重,不同基因型别的菌株其药敏结果有差异。     

金黄色葡萄球菌随机扩增多态性DNA分型及其应用

目的 利用随机扩增多态性DNA（random amplified polymorpohic DNA,RAPD）分析技术，对金黄色葡萄球菌进行基因分型，并观察临床耐药型与其基因型之间的关系。方法 利用自己合成的随机引物，建立RAPD检测分析方法，并利用这一方法对5株金黄色葡萄球菌进行基因分型的研究。结果 5株金黄色葡萄球菌中，2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为同一基因型，另外3株为两种基因型，均是敏感菌株。结论 从RAPD分析的初步结果可以看出，金黄色葡萄球菌的临床表现型与基因型存在一定的关系，本法有望且于临床金黄色葡萄球菌耐药的快速检测。