胆汁性肝硬化大鼠肾细胞凋亡及其机制

目的:探讨胆汁性肝硬化大鼠肾脏病理组织学改变、肾脏细胞凋亡及其机制.方法:应用胆总管结扎(CBDL)技术制备大鼠胆汁性肝硬化模型.将SD大鼠随机分为:假手术组(SO)、CBDL 2 wk组与5 wk组.显微镜下观察肝脏和肾脏组织学改变;生化法测定内生肌酐清除率(Ccr),比色法测定肾组织丙二醛(MDA)含量,TUNEL法检测肾组织细胞凋亡,免疫组化测定Bcl-2,Bax蛋白的表达.结果:CBDL大鼠2 wk发生肝纤维化,5 wk则形成肝硬化;5 wk时肾小管上皮细胞有脱落、坏死;电镜下基底膜不规则增厚,系膜增宽,上皮细胞足突融合.模型大鼠5 wk组Ccr明显降低,较2 wk组与SO组有显著性差异(1.10±0.03vs 1.40±0.03,1.80±0.02,P＜0.05或0.01),肾组织丙二醛5 wk组较2 wk组与SO组显著性增高(4.07±0.51vs 2.32±0.85,0.79±0.37,均P＜0.01);模型大鼠5 wk组肾组织凋亡指数显著性高于2 wk组和SO组(68.36%±8.71%vs 24.08%±2.59%,11.43%±2.77%;均P＜0.01). SO组、2 wk组及5 wrk组Bcl-2逐渐下降,Bax表达则逐渐升高,各组间有显著差异(p＜0.05).结论:胆汁性肝硬化大鼠存在肾病理组织学改变与细胞凋亡:凋亡抑制蛋白Bcl-2低表达和凋亡诱导蛋白Bax高表达在肾损害中起作用.     

血管加压素对大鼠肾脏水孔蛋白2表达的影响

背景和目的 水孔蛋白2(AQP2)是调节机体水平衡的通道蛋白,与多种具水盐代谢异常疾病的病理发生发展密切相关,本文观察血管加压素(AVP)对wKY大鼠肾脏AQP2表达的影响.方法 WKY大鼠16只,随机分成2组,一组AVP[2.5 U/(kg·d)]腹腔注射,等量的生理盐水腹腔注射为对照.7天后处死大鼠,RT-PCR法检测两组大鼠肾脏AQP2的mRNA表达,免疫组化法检测AQP2蛋白表达水平,放射免疫法检测大鼠血浆AVP浓度.结果 AVP注射组大鼠血浆AVP浓度明显升高[(65.7±7.9)vs对照组(51.2±7.9)pg/mL,P<0.05],肾脏AQP2 mRNA(0.68±O.14 vs O.39±O.11,P<0.05)和AQP2蛋白表达水平(O.71±O.09 vs O.42±O.12,P<0.05)均显著高于对照组.结论 AVP可刺激肾脏AQP2的表达,AQP2可能是AVP调节肾脏水代谢的机制之一.提示水通道蛋白2表达的调节可能成为干预某些心血管疾病,如充血性心力衰竭、高血压的靶点.     

血管加压素对大鼠肾脏水孔蛋白2表达的影响

背景和目的水孔蛋白2(AQP2)是调节机体水平衡的通道蛋白,与多种具水盐代谢异常疾病的病理发生发展密切相关,本文观察血管加压素(AVP)对 WKY 大鼠肾脏 AQP2表达的影响。方法 WKY 大鼠16只,随机分成2组,一组 AVP[2.5 U/(kg·d)]腹腔注射,等量的生理盐水腹腔注射为对照。7天后处死大鼠,RT-PCR法检测两组大鼠。肾脏 AQP2的 mRNA 表达,免疫组化法检测 AQP2蛋白表达水平,放射免疫法检测大鼠血浆 AVP浓度。结果 AVP 注射组大鼠血浆 AVP 浓度明显升高[(65.7±7.9)vs 对照组(51.2±7.9)pg/mL,P<0.05],肾脏 AQP2 mRNA(0.68±0.14 vs 0.39±0.11,P<0.05)和 AQP2蛋白表达水平(0.71±0.09 vs 0.42±0.12,P<0.05)均显著高于对照组。结论 AVP 可刺激肾脏 AQP2的表达,AQP2可能是 AVP 调节肾脏水代谢的机制之一。提示水通道蛋白2表达的调节可能成为干预某些心血管疾病,如充血性心力衰竭、高血压的靶点。     

肝硬化肝性脑病大鼠脑水通道蛋白-4的表达与脑水肿的关系

目的:探讨肝硬化肝性脑病脑水肿的发生机制,为治疗脑水肿新方法的发现提供理论依据.方法:实验大鼠随机分为正常组(n=10)、正常氨负荷组(n=10)、肝硬化组(n=20)和肝硬化氨负荷组(n=20).后2组给予400 g/L CCl4橄榄油,按0.2 mL/kg腹腔注射.2次/wk,共12wk.前两组给与橄榄油.注射剂量、部位、频次、时间同后两组.正常氨负荷组、肝硬化氨负荷组分别在最后1次给药2d后,给与乙酸胺盲肠注射.4组大鼠通过尾静脉注射伊文恩蓝(EB)应用干式生化法测量动脉血氨,比色法测量EB含量,干-湿重法测量脑含水量,免疫组化法染色并通过图像分析系统分析脑组织中AQP4的表达.结果:肝硬化组动脉血氨与正常组、正常氨负荷组比较有差异性(97.20±29.66 μmol/Lvs 42.62±10.11,59.33±15.06 μmol/L,均P＜0.05),肝硬化氨负荷组的动脉血氨(420.18±75.91 μmol/L)与其他各组比较有明显的差异性(P＜0.01).肝硬化组EB和脑含水量与正常组、正常氨负荷组比较没有差异性.而肝硬化氨负荷组与其他各组比较有差异性(1.96±0.55 μg/g vs 1.41±0.46,1.19±0.38,1.05±0.18 μg/g;75.14±5.68 vs 65.58±4.14,62.14±2.29,66.27±4.57,均P＜0.05).肝硬化大鼠AQP4表达部位与正常大鼠一致,但肝硬化大鼠给与氨负荷后,无论是平均吸光度还是显色阳性面积均较正常组增高(P＜0.05).结论:AQP4可能在肝硬化肝性脑病大鼠脑水肿形成中起一定的作用.     

阿托伐他汀对糖尿病大鼠肾皮质肾上腺髓质素受体表达的影响

目的探讨肾上腺髓质素受体(ADMR)在糖尿病(DM)大鼠肾脏病变时的变化及阿托伐他汀对ADMR表达的影响。方法将SD大鼠分为3组:正常对照组、DM对照组和阿托伐他汀干预组。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备DM动物模型,阿托伐他汀15mg·kg-1·d-1灌胃。通过RT-PCR方法检测肾皮质中ADMR mRNA的表达,运用Western印迹方法检测肾皮质中ADMR蛋白的表达。结果(1)阿托伐他汀干预组大鼠体重、糖化血红蛋白(HbA1C)及血糖与DM组比较差异无统计学意义,24h尿白蛋白排泄率显著降低[(35.9±1.7)μg/24hvs(19.8±1.5)μg/24h,P<0.01];(2)阿托伐他汀干预组大鼠肾皮质中ADMR mRNA及蛋白的表达均显著高于DM组(均P<0.05)。结论阿托伐他汀可上调DM大鼠肾皮质中ADMR基因和蛋白的表达,ADMR可能参与了阿托伐他汀对肾脏的保护作用。     

法舒地尔抑制大鼠肝纤维化组织ROCK-Ⅰ、α-SMA、p-MBS Thr-697表达

目的 探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(Rho-associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK)-Ⅰ选择性阻断剂法舒地尔对大鼠肝纤维化组织ROCK-Ⅰ、α-SMA和p-MBS Thr-697表达及细胞骨架变化的影响.方法 应用Western blot方法测定肝组织ROCK-Ⅰ、α-SMA和p-MBSThr-697表达,RT-PCR方法测定肝组织ROCK-Ⅰ和α-SMA mRNA表达,特异性免疫荧光方法检测细胞骨架变化.结果 ①Western blot结果显示,胆总管结扎(bile ductligation,BDL)+法舒地尔腹腔注射组造模第4周ROCK-Ⅰ蛋白、p-MBSThr-697蛋白和α-SMA蛋白与BDL组相比分别降低了38.68%、30.69%和20.50%.②RT-PCR结果显示,BDL+法舒地尔腹腔注射组造模第4周ROCK-Ⅰ mRNA和α-SMA mRNA与BDL组相比分别降低了32.39%和34.46%.③FITC标记的鬼笔毒环肽荧光染色结果显示,BDL+法舒地尔腹腔注射组与BDL组相比,可见大鼠肝组织细胞间网状结构稍规则,周边肌动蛋白丝带连续,荧光信号减弱.结论 ROCK-Ⅰ选择性阻断剂法舒地尔可抑制BDL大鼠模型肝组织ROCK-Ⅰ、p-MBS Thr-697和α-SMA转录及翻译水平表达,可部分抑制BDL大鼠肝组织F-actin重构.     

雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的 观察雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocinmRNA和蛋白表达的影响.方法 将体重200 ～ 260 g的50只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和4个模型组（n=10）,后者分别应用链脲佐菌素造模成功后分为糖尿病肾病组（DN组）、厄贝沙坦组、雷公藤多甙组和雷公藤多甙联合厄贝沙坦组.给予相应干预8周后,检测血尿指标,HE染色观察肾组织病理变化,逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法检测各组大鼠肾皮质中nephrin和podocinmRNA和蛋白表达.结果 （1）与DN组大鼠比较,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾皮质nephrin mRNA （0.507±0.024比0.276 ±0.015,P ＜0.01）和podocin mRNA （0.533±0.024比0.463±0.022,P＜0.01）表达上调.（2）与DN组大鼠比较,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾皮质nephrin蛋白（0.738±0.029比0.199±0.012,P＜0.01）和podocin蛋白（0.811 ±0.032比0.227±0.014,P＜0.01）表达上调.（3） HE染色和Masson染色显示,糖尿病组大鼠肾脏肾小球体积增大,系膜基质弥漫增多,系膜细胞明显增多,基底膜弥漫增厚,间质可见灶性淋巴细胞及单核细胞浸润,厄贝沙坦组和雷公藤多甙组病变较糖尿病组减轻,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾脏组织病变较厄贝沙坦组和雷公藤多甙组进一步减轻.结论 雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病大鼠的肾脏足细胞具有保护作用,这种保护作用可能是通过上调足细胞nephrin和podocin mRNA和蛋白表达有关.     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响

目的 观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响.方法 SD大鼠30只,10只分至正常对照组,20只腹腔注射小剂量链脲佐菌素结合高能量饲料制备2型糖尿病大鼠模型,然后分至糖尿病组(n=10)及罗格列酮干预组(n=10).运用流动注射分析法测定血清糖基化终产物-肽(advanced glycosylation end products-peptide,AGE-P),应用半定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法分别检测肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达.选用单因素方差分析进行数据统计分析.结果 糖尿病组大鼠血清AGE-P[(2.87±0.21)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.41±0.03)及fractalkine蛋白表达(0.79±0.04)均明显高于对照组[分别为(0.90±0.13)U/ml、0.85±0.04及0.46±0.03,P<0.01];罗格列酮干预组大鼠血清AGE-P[(1.45±0.15)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.00±0.05)及fractalkine蛋白表达(0.67±0.03)则明显低于糖尿病组(P<0.01).结论 罗格列酮可能通过抑制肾皮质fractalkine表达发挥其肾脏保护作用.     

CCl4诱导大鼠肝硬化形成过程中Caspase-12蛋白表达与肝细胞凋亡的相关性

目的:探讨CCl4大鼠肝硬化形成过程中Caspase-12蛋白表达与肝细胞凋亡的相关性.方法:首次CCl4 3 mL/kg sc,以后500 mL/LCCl4橄榄油溶液2 mL/kg sc,2次/wk,共计12wk制备大鼠肝硬化模型.设4 wk、8 wk、12wk 3个时间点,动态观察肝细胞凋亡指数、肝组织Caspase-12免疫组织化学及蛋白表达.结果:模型大鼠4 wk时呈典型的急性肝损伤改变,8 wk时大鼠呈典型的慢性肝损伤肝纤维化的病理改变,12 wk时已形成肝硬化;随着肝损伤加重和肝硬化形成,肝细胞凋亡指数显著增加,模型对照4 wk与正常组、模型对照8wk比较有显著差异(70.4±11.59 vs 9.6±1.14,95.8±10.94,P＜0.01),模型对照12 wk与模型对照8 wk比较有统计学意义(122.8±17.51 vs 95.8±10.94,P＜0.05).Caspase-12蛋白表达亦显著增加,模型对照4 wk与正常组、模型对照8 wk比较有显著差异(0.071±0.014 vs 0.014±0.007,1.172±0.028,P＜0.01),模型对照12wk与模型对照8 wk比较亦有显著差异(1.84±0.083 vs 1.172±0.028,P＜0.01);且肝细胞凋亡指数和Caspase-12蛋白表达量之间呈正相关(r=0.89,t=9.125,P＜0.01).结论:内质网凋亡通路参与CCl4大鼠肝硬化形成过程中肝细胞凋亡事件,其关键的凋亡酶Caspase-12蛋白表达量基本能够反映肝细胞的凋亡程度.     

多巴胺调控实验性梗阻性黄疸围手术期肾髓质水通道蛋白2表达

目的:探讨梗阻性黄疸围手术期应用小剂量多巴胺对肾髓质水通道蛋白2(aquaporin 2)蛋白表达影响.方法:♂wistar大鼠70只随机分为4组,分别为对照组(n=10)、梗阻性黄疸组(n=20)、多巴胺5μg组(n=20)和多巴胺10μg组(n=20).梗阻性黄疸组及多巴胺组大鼠全身麻醉后建立梗阻性黄疸动物模型;对照组大鼠行假手术.7d后全麻下解除胆管梗阻,对照组再次行假手术.多巴胺组于胆管再通手术之前于股静脉套管针穿刺泵入多巴胺,剂量分别为5μg/(kg·min)和10μg/(kg·min);而假手术组及梗阻性黄疸组大鼠泵入9g/L生理盐水,泵注持续2h,并将各组动物随机均分为立即取材组和24h后取材组.腔静脉血离心后收集血清冻存检测胆红素、肌酐和尿素氮;分离肾脏髓质冻存,免疫印迹法(Western blotting)法检测aquaporin 2的表达.结果:解除梗阻早期鼠血清胆红素水平下降.血尿素氮及肌酐未见明显改变.通过Western blotting对肾髓质aqp2表达测定发现,梗阻性黄疸组解除梗阻0h取材组aqp2表达较对照组明显下降(15 665±1181 vs 21 966±1544,P<0.01),而解除梗阻24h后aqp2表达出现明显上升(36 490±1822 vs 21 917±2661,P<0.01).多巴胺5μg组0与24h aqp2表达更接近CO组(16 010±646,22 715±575 vs 21 966±1544,21 917±2661);10μg组各时间点aqp2表达与梗黄组接近(13 581±1662,32 313±1453 vs 15 665±1181,36 490±1822),未见多巴胺有明显调节aqp2表达作用.结论:胆管梗阻损伤肾脏集合管上皮细胞结构并抑制水重吸收功能;低浓度多巴胺可调控集合管水通道蛋白2表达.     

The Role of Nitric Oxide in the Expression of Renal Aquaporin 2 in a Cirrhotic Rat Model: Does an AVP-Independent Mechanism Exist for the Regulation of AQP2 Expression?

The aquaporin (AQP) water channel is expected to play a decisive role of hyponatremia and water retention in cirrhotic patients. Despite the importance of the water channel, however, previous findings vary widely when it concerns AQP2 of the kidneys in subjects with cirrhosis. The purpose of this study was to investigate the expression of AQP2 in the distal renal tubule in cirrhosis, and the presence of the nitric oxide-AQP2 signaling pathway as a possible vasopressin-aquaporin-independent pathway. Sixty male Wister rats were assigned to six groups: (1) control; (2) TAA (thioacetamide); (3) TAA with nitric oxide donor; (4) TAA with nitric oxide inhibitor; (5) TAA with HMG CoA reductase inhibitor; (6) TAA with tetrahydrobiopterin. Immunohistochemical staining for AQP2, real-time polymerase chain reaction (PCR) for AQP2 and 3, citrulline assay, and renal cGMP concentration were measured. The AQP2-positivity of cirrhotic rats were higher than the controls (P < 0.05). The AQP2-positivity decreased in the nitric oxide donor group, but the proportion rose back up when the subjects were injected with the nitric oxide inhibitor (P < 0.05). The expression of AQP2 and AQP3 mRNA was also found to show an increase in the cirrhotic group as compared with the normal controls (P < 0.05). The cirrhotic group administered with nitric oxide donor showed a significant decline in the expression of the mRNA. The control group’s cGMP concentration was lower than that of the cirrhotic group (P < 0.05), but a comparison of the two groups injected with nitric oxide modulators, such as statin and BH4, did not show significant differences in the cGMP concentration level. The expression of AQP2 of the kidneys increased in the cirrhotic rats. AQP2 had relations to the activity changes of nitric oxide synthetase.     

实验性肝硬化大鼠肺脏血红素氧合酶的表达与定位

目的 观察肝硬化大鼠肺脏中血红素氧合酶(HO)的表达与定位,探讨血红素氧合酶-内源性一氧化碳在肝硬化时肺脏病变的作用。方法 建立四氯化碳肝硬化模型,应用免疫组织化学法和免疫印迹法对肝硬化大鼠和正常对照大鼠肺脏中血红素氧合酶的表达与定位进行比较。 结果 肝硬化模型制备成功。正常对照组大鼠HO-1在肺组织的表达较低,而肝硬化组大鼠的肺组织中HO-1蛋白表达明显增高(0.062±0.021与0.185±0.044,t=11.24,P<0.01 ;0与5 294.92±46.02,t=11.45,P<0.01),主要在血管和支气管的平滑肌细胞,内皮细胞及气道上皮细胞的胞浆内,而HO-2在两组大鼠的肺组织中表达差异无显著性(0.218±0.048与0.238±0.079,t=0.99,P>0.05; 5984.17±35.64与6040.75±42.43,t=0.02,P>0.05)。 结论 血红素氧合酶-内源性一氧化碳途径可能在肝硬化肺脏病变的发生机制中起一定的作用。     

Effect of Oxymatrine on the TGFbeta-Smad signaling pathway in rats with CCU-induced hepatic fibrosis

AIM: To explore the anti-fibrotic effect of Oxymatrine on CCU-induced liver fibrosis in rats and its modulation on the TGFbeta-Smad signaling pathway.METHODS: One hundred healthy male SD rats were randomly divided into three groups: normal group (/7 = 20), treatment group of Oxymatrine (n = 40) and CCU-induced fibrosis group {n = 40). Experimental hepatic fibrosis was induced by subcutaneous injection of carbon tetrachloride (CCU soluted in liquid paraffin with the concentration of 300 g/L, the dosage of injection was 3 mL/kg, twice per week for 8 wk). The treated rats received Oxymatrine via celiac injection at a dosage of 10 mg/kg twice a week at the same time. The deposition of collagen was observed with H&E and Masson staining. The concentration of serum TGF-pi was assayed with ELISA. The gene expression of Smads and CBP (CREB binding protein) was detected with in situ hybridization (ISH) and immunohistochemistry (IH), respectively. All the experimental figures were scanned and analyzed with special figure-analysis software.RESULTS: A significant reduction of collagen deposition and rearrangement of the parenchyma was noted in the liver tissue of Oxymatrine-treated rats. The semi-quantitative histological scores (2.43 ± 0.47 um2 vs 3.76 ± 0.68, P < 0.05) and average area of collagen in those rats were significantly decreased when compared with hepatic cirrhosis model rats (94.41 ± 37.26 urn2 vs 290.86 ± 89.37 um2, P < 0.05). The gene expression of Smad 3 mRNA was considerably decreased in the treated animals. The A value of Smad 3 mRNA was lower in the treated rats than the model rats (0.034 ± 0.090 us 0.167 ± 0.092, P < 0.05). Contrarily, the A value of Smad 7 mRNA was increased considerably in the treated animals (0.175 ± 0.065 vs 0.074 ± 0.012, P < 0.05). There was an obvious decrease in the expression of CBP mRNA in treated rats as illuminated by a reduction of its A value when compared with model rats (0.065 ± 0.049 us 0.235 ± 0.025, P < 0.001).CONCLUSION: Oxymatrine is effective in reducing the production and deposition of collagen in the liver tissue of experimental rats. Oxymatrine could promote the expression of Smad 7 and inhibit the expression of Smad 3 and CBP in CCU-induced hepatic fibrosis in SD rats, could modulate the fibrogenic signal transduction of TGFp-Smad pathway.     

Aquaporin-2 Urinary Excretion in Cirrhosis: Relationship to Vasopressin and Nitric Oxide

The aquaporin (AQP) water channel plays an important role in the regulation of water. AQP2 is expressed in the collection duct of the kidney, serving as the final channel that helps to regulate water excretion in the kidneys and affecting the regulation of water and hyponatremia in cirrhotic patients. So far, research on aquaporin expression in cirrhosis has had various results. The purpose of this study is to investigate the factors that affect the regulation of expression of AQP in patients with cirrhosis. The study comprised 81 cirrhosis patients and 18 control subjects. In each group, 24-h urine was collected and nitric oxide and vasopressin levels were measured in the blood. The amount of urinary AQP was measured by Western blot. In this study, the positivity rate and amount of expression of AQP was higher in the cirrhotic group than that of the control group. AQP expression in urine was also compared between the groups with use of diuretics and the groups with no use of diuretics. A 57.4% positivity was observed with the former, whereas a 51.5% was seen in the latter. No significance was found between the groups (P = 0.581). Expression of AQP in compensated cirrhotic patients is significantly higher than decompensated cirrhotic patients and is especially higher in cirrhotic patients with ascites than with no ascites. There is no relationship between the concentration of vasopressin and expression of AQP. Concentration of serum NOx is higher in cirrhotic patients than the control group and there is a positive association between the concentration of serum nitric oxide and AQP in urine. In conclusion, expression of AQP is increased in cirrhotic patients and is significantly higher in patients with ascites. There is a positive association between the expression of AQP and concentration of serum nitric oxide.     

茵陈蒿汤及其变方对ConA诱导慢性免疫性肝损伤小鼠IP-10、CXCR3的影响

目的:观察茵陈蒿汤及其变方对刀豆蛋白(concanavalin A,ConA)诱导小鼠慢性免疫性肝损伤的保护作用.方法:选用Balb/c小鼠70只,雌雄各半,随机分为正常对照组、模型组、茵陈蒿汤组、茵陈蒿汤加丹参组、茵陈蒿汤加黄芪组、荣肝合剂组和荣肝小方组.正常组小鼠尾静脉注射PBS溶液0.3 mL,其他各组按ConA 6 g/g体质量尾静脉注射造模,1次/wk,连续8 wk,制备慢性肝损伤模型.造模成功后,模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃.各治疗组灌胃给药,每日1次,连续4 wk,末次给药后24 h,检测血清中IP-10、CXCR-3和TNF-活性;肝组织光镜下观察其病理变化.结果:与模型组比较,各用药组(茵陈蒿组、茵陈蒿汤加丹参组、茵陈蒿汤加黄芪组、荣肝合剂组和小方组)血清IP-10、CXCR-3、TNF-的水平(ng/mL)均降低(IP-10:44.56±0.30、42.18±0.54、32.18±0.37、36.46±0.47、35.98±0.65 vs 52.73±0.46;CXCR-3:64.86±0.63、37.88±0.63、40.18±0.57、38.58±0.62、36.94±0.26 vs 64.86±0.63;T N T-:43.45±0.65、32.78±0.27、42.18±0.37、28.69±0.85、24.46±0.57 vs 93.32±0.81,均P<0.05),各组间无统计学差异(P>0.05);与模型组比较,中药组肝细胞坏死减轻、变性减少、炎细胞浸润和肝纤维化减轻(均P<0.05);茵陈蒿汤加丹参组、荣肝合剂组和小方组肝组织纤维增生程度较小(均P<0.05).结论:清利湿热,健脾活血的荣肝合剂及荣肝小方组对ConA所致小鼠肝损伤具有较好的综合保护作用.     

丹参川芎嗪治疗慢性肺源性心脏病急性发作的疗效

目的：观察丹参川芎嗪注射液对慢性肺源性心脏病急性发作患者肺动脉压（PAP）、动脉氧分压（PaO。）、C反应蛋白（CRP）和内皮素-1（ET-1）的影响。方法：40例慢性肺源性心脏病肺动脉高压患者被随机分为两组,常规治疗组：20例,接受常规治疗;观察组：20例,在常规治疗基础上加用丹参川芎嗪。另选20例健康查体者作为健康对照组。观察治疗后各组PAP、PaO：、CRP、ET-1水平和左室射血分数（LVEF）变化,并进行分析。结果：治疗后与常规治疗组比较,观察组总有效率明显提高（75％比90％）,PaOz[（83．87±14．53）mmHg比（92．95±13．54）mmHg]显著升高,平均肺动脉压（mPAP）[（55．43±9．65）mmHg比（45．52±8．89）mm-Hg]显著下降,CRP[（6．37±2．12）mg／L比（3．29±0．84）mg／L]和ET-1[（52．37±20．79）ng／L比（40．29±16．04）ng／L]水平明显下降（P〈0．05～〈0．01）。两组治疗后LVEF升高幅度无显著差异（P〉0．05）。结论：对于慢性肺心病急性发作患者丹参JIJ芎嗪注射液能显著提高临床疗效,改善右心功能,降低平均肺动脉压,改善内皮功能,抑制炎症反应。     

抑郁对自发性高血压大鼠水通道蛋白-2的影响

目的探讨抑郁对自发性高血压大鼠水通道蛋白2（aquaporin2,AQP2）的影响,并探讨AQP2在高血压中的病理生理作用。方法60只SHR大鼠分为对照组（n=30）和抑郁组（n=30）,两组又各分为两个亚组：对照组非药物治疗亚组（n=15）、对照组贝那普利治疗亚组（n=15）;抑郁组非药物治疗亚组（n=15）、抑郁组贝那普利治疗亚组（n=15）。另外,选取Wistar Kyoto（WKY）大鼠20只作为正常组大鼠。药物治疗亚组大鼠予贝那普利10 mg.d-1.kg-1灌胃。抑郁组大鼠采用慢性不可预计温和应激（CUMS）结合行为学指标建立自发性高血压大鼠并抑郁动物模型。对照组、正常组大鼠动物正常饲养。检测并比较各组大鼠间血压的变化及血管加压素和肾脏AQP2表达的差异。结果 （1）抑郁组非药物治疗亚组血压（175±14）mm Hg高于对照组非药物治疗亚组（160±11）mm Hg及正常组（112±9）mm Hg,差异有统计学意义（P〈0.05）;贝那普利治疗后,抑郁组治疗亚组血压（136±15）mm Hg、对照组治疗亚组（113±12）mm Hg均低于各自非药物治疗组（P〈0.05）。（2）抑郁组非药物治疗亚组与正常组、对照组非药物治疗亚组及对照组贝那普利治疗亚组比较,糖水偏爱性均减低（P〈0.05）,体质量和旷场实验评分均明显下降（P〈0.05）,血浆血管加压素浓度升高[（9.31±0.42）pg/mL vs.（1.6±0.67）pg/mL、（3.04±0.97）pg/mL、（2.34±0.91）pg/mL,P〈0.05],AQP2蛋白表达增加（0.95±0.12 vs.0.12±0.07、0.44±0.06、0.24±0.06,P〈0.05）。（3）抑郁组贝那普利治疗亚组与对照组非药物治疗亚组、对照组贝那普利治疗亚组比较,糖水偏爱性均减低（P〈0.05）,体质量和旷场实验评分均明显下降（P〈0.05）,血浆血管加压素浓度升高[（4.55±0.69）pg/mL vs.（3.04±0.97）pg/mL、（2.34±0.91）pg/mL,P〈0.05],AQP2蛋白表达增加（0.62±0.17 vs.0.12±0.07、0.44±0.06,P〈0.05）。（4）对照组贝那普利治疗亚组与抑郁组非药物治疗亚组比较,糖水偏爱性亦增加（P〈0.05）,体质量和旷场实验评分升高（P〈0.05）,血浆AVP浓度下降[（4.55±0.69）pg/mL vs.（9.31±0.42）pg/mL,P〈0.05],AQP2蛋白表达减少（0.62±0.17 vs.0.95±0.12,P〈0.05）。结论抑郁可以促进自发性高血压大鼠血管加压素的分泌及肾脏AQP2的表达。抑郁可能通过促进血管加压素的分泌及肾脏AQP2的表达影响高血压的发展。     

环氧合酶-2在四氯化碳诱导肝硬化大鼠肝窦毛细血管化形成中的作用

目的 观察环氧合酶-2(COX-2)在实验性肝硬化大鼠肝窦毛细血管化形成中的作用.方法 腹腔注射CCl4每周2次共8周诱导雄性SD大鼠肝硬化模型.将SD大鼠分成3组:正常对照组(n=10)、模型对照组(n=15)和罗非昔布治疗组(10 mg·kg-1·d-1,n=15).光镜下观察肝组织标本,电镜观察肝窦超微结构改变.用Western印迹和免疫组化法检测基底膜蛋白主要成分层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原,同时通过Ⅷ因子相关抗原(vWF)免疫组化标记微血管牛成密度.结果 与模型对照组相比,罗非昔布干预治疗能减少肝纤维化面积(分别为30.7±8.9和23.5±6.5,P<0.05).光镜及电镜提示,在模型对照组可见肝窦内皮细胞窗孔减少、缩小,有完整的基底膜形成,Disse腔隙内有大量的胶原纤维沉积,罗非昔布组上述病变有所减轻.随着肝硬化的形成,肝组织微血管密度明显升高,罗非昔布组肝组织微血管密度(6.4±0.7)较模型对照组(11.3±1.6)明显降低(P<0.01).肝硬化时肝组织表达Ⅳ型胶原和LN蛋白明显增加(分别为3.8±0.4和3.7±0.5),罗非昔布能降低Ⅳ犁胶原和LN的表达(分别为3.0±0.5和3.0±0.5;与模型对照组相比两者均为P相似文献   

凝血酶和血红蛋白对大鼠水通道蛋白的影响及与脑积水的相关性研究

目的探讨凝血酶和血红蛋白对水通道蛋白(AQP)的影响及AQP与脑积水的相关性。方法取清洁级健康雄性SD大鼠84只,采用随机数字表法分为对照组、凝血酶组及血红蛋白组,分别通过枕大池注射等渗盐水(0.3 ml)、凝血酶[0.3 ml(10 U/ml)]及血红蛋白[0.3 ml(150 mg/ml)]制作脑积水模型,按照缺失补足的方式,保持各组大鼠24只。观察造模后1、3、7、14 d时的相对侧脑室面积、AQP1和AQP4的表达及AQP与相对侧脑室面积的相关性。结果 (1)相对于对照组,凝血酶组与血红蛋白组在1、3、7、14 d均显示脑积水,且在1 d时最明显,分别为[(6.94±0.19)%和(6.58±0.15)%比(3.40±0.13)%、(6.06±0.12)%和(5.79±0.09)%比(3.55±0.15)%、(5.80±0.13)%和(5.58±0.08)%比(3.78±0.18)%、(5.66±0.14)%和(5.47±0.13)%比(3.52±0.18)%],差异均有统计学意义(P0.01)。(2)AQP1的增加主要在脑室脉络丛上皮细胞基底膜与顶膜,AQP4的增加主要在脑室室管膜细胞。1、3、7、14 d时AQP1与AQP4的相对表达量,对照组分别为1.09±0.07和1.30±0.15、0.91±0.06和1.18±0.12、1.33±0.17和1.16±0.08、1.22±0.11和1.00±0.10,凝血酶组分别为4.40±0.14和3.69±0.11、3.88±0.11和3.17±0.07、3.55±0.07和2.86±0.13、3.36±0.07和2.70±0.07,血红蛋白组分别为4.24±0.07和3.55±0.10、3.77±0.08和3.04±0.09、3.46±0.07和2.76±0.08、3.31±0.10和2.62±0.08;凝血酶组与血红蛋白组在各时点的AQP1与AQP4的相对表达量均明显高于对照组,组间差异均有统计学意义(均P0.01);血红蛋白组各时点的AQP1与AQP4 mRNAs的相对表达量与凝血酶组的差异均无统计学意义(均P0.05);在凝血酶组和血红蛋白组中,相对于1 d时,AQP1与AQP4的表达在3、7、14 d有明显下降(均P0.01);相对于3 d时,AQP1在7、14 d均有明显下降(均P0.05),AQP4在14 d时下降,差异均有统计学意义(均P0.05)。(3)凝血酶组各时点AQP1(r=0.983,P0.01)及AQP4(r=0.987,P0.01)相对表达量与相对侧脑室面积呈正相关;血红蛋白组各时点AQP1(r=0.9 6 4,P0.0 1)及AQP4(r=0.9 6 2,P0.0 1)相对表达量与相对侧脑室面积呈正相关。结论蛛网膜下腔注射凝血酶与血红蛋白后可引起脑室及其周围区域AQP1与AQP4的表达增加,凝血酶与血红蛋白可能是蛛网膜下腔出血后脑积水的重要介导因素。     

丹参川芎嗪注射液对肺栓塞大鼠P-选择素及组织因子的影响

目的:通过观察肺栓塞大鼠用药后血中P-选择素(CD62P)及组织因子(TF)的变化,研究丹参川芎嗪注射液、低分子肝素及两者联合应用对肺栓塞大鼠的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠80只,随机分为7 h组及1周组,每组又分为对照组、栓塞组、丹参川芎嗪组、低分子肝素组、联合用药组,每小组8只大鼠。将大鼠分离右侧颈静脉,对照组注射生理盐水,其余各组注入自制栓子(25±3)个(约0.5 mm/个)。各组在第7小时及第7天采血,检测TF及CD62P浓度,并观察肺组织。结果:栓塞后大鼠可见喘憋、发绀、心率加快等,肺组织可见表面凹凸不平,膨胀不均,散在灰白色梗死区域。栓塞组与对照组相比,血浆中TF、CD62P浓度均显著增高( P值均<0.05);3个用药组与栓塞组相比,TF、CD62P的浓度均有不同程度的降低,其中治疗1周的联合用药组与栓塞组比降低最为明显。 结论:使用颈静脉注入异体血栓法可成功制备理想的肺栓塞大鼠模型;丹参川芎嗪与低分子肝素联合应用可显著降低肺栓塞大鼠CD62P及TF的水平。