预测非梗阻性无精子症精子获取因素的研究进展

非梗阻性无精子症(NOA)目前常通过睾丸取精技术结合卵胞浆内单精子注射技术(ICSI),使其获得生育的可能。而睾丸取精技术在不断的发展,睾丸细针穿刺抽吸术(TFNA)、睾丸切开取精术(TESE)、显微睾丸切开取精术(MD-TESE)等技术得到广泛的应用,但是目前仍然缺少可靠的术前预测因素来判断能否成功获取精子。是否可使用特定标记物或非侵入的检查方法对精子获取进行预测,从而避免不必要手术,许多学者进行了多方面的研究。目前已有的预测指标有血清与精浆激素类指标、睾丸指标、影像学和光学技术、Y染色体微缺失、分子蛋白指标、核酸指标等。本文对NOA精子获取的预测因素作一综述。     

利用基因芯片研究无精子症相关基因及RAP1 A基因初步探讨

目的 :应用基因芯片技术获取正常生育人睾丸组织与无精子症病人睾丸组织中差异表达的基因 ,并对结果进行初步分析研究。　方法 :抽提正常生育人睾丸组织与无精子症病人睾丸组织中的mRNA来制备探针 ,经过点样、杂交及洗涤后 ,通过计算机观察两者表达谱的差异情况 ,随后通过文献检索系统对其中明显上调的基因之一RAP1A进行了初步分析。　结果 :通过基因芯片筛选 ,获得 6 2 3条差异表达的基因 ,其中明显上调的基因RAP1A与人类精子调控关系密切。　结论 :基因芯片筛选正常生育人睾丸组织与无精子症病人睾丸组织差异表达的基因具有样品用量少、速度快的特性 ,可用于高通量筛选无精子症基因以及进一步的研究。     

基于生物信息学技术的非梗阻性无精子症关键microRNAs和基因的研究

目的 应用生物信息学方法研究非梗阻性无精子症(NOA)的关键微小RNA(microRNAs, miRNAs)和差异表达基因,为非梗阻性无精子症的病因分析提供新的思路。方法 在PubMed、Embase和Web of Science中筛选、提取并整合文献报道的NOA相关的miRNAs,并利用联川生物云平台预测靶基因。检索NCBIGEO数据库中的非梗阻性无精子症基因芯片数据,获得GSE145467和GSE108886数据集并进行GEO2R在线分析,得出NOA相关的差异表达基因,并与预测的靶基因取交集获得最终的差异表达基因。运用DAVID对差异表达基因进行GO富集和KEGG通路分析,应用STRING构建差异表达基因相关的蛋白质互作网络。结果 共检索到5条差异表达miRNAs,其中上调表达1条为miR-10b-5p,下调表达4条分别为miR-34b-5p、miR-34b-3p、miR-34c-5p和miR-449a。共得出最终差异表达基因868个,其中上调基因776个,下调基因92个。GO富集结果显示,差异基因参与的生物过程(BP)主要包括纤毛组装、精子轴丝组装、纤毛依赖性细胞运动、顶体组装、...     

非梗阻性无精子症相关病因分析

目的 :探讨非梗阻性无精子症患者血清和精浆中的性激素水平、精浆表皮生长因子、α 葡萄糖苷酶、果糖水平及其变化 ,以及染色体分析的意义。　方法 :采用放射免疫法、比色法、染色体G、C显带等方法 ,对 36例已婚非梗阻性无精子症患者和 2 6例正常已婚有精子男性进行生殖内分泌、遗传学等结果比较 ,探讨导致不育的病因。　结果 :非梗阻性无精子症患者血清中FSH、LH、PRL、E2均高于正常对照男性 ,T水平两者间差异无显著性。而精浆中除FSH外 ,其余差异均无显著性。非梗阻性无精子症组性染色体异常 2例 ,大Y 2例 ,小Y 7例 ,精浆表皮生长因子、果糖两者间无相关性。　结论 :非梗阻性无精子症与血清性激素水平、α 葡萄糖苷酶、染色体异常有密切关系     

CF基因在梗阻性无精子症的研究进展

囊性纤维化（Ｃｙｓｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓ，ＣＦ）是白种人最常见的致死性常染色体隐性遗传病，发病率以北欧人群最高，约占活婴的１／２５００，致病基因携带率为１／２５。但近年来的研究发现，ＣＦ基因突变率在梗阻性无精子症患者中高达５０％～８２％。随着近几年辅助生殖技术的发展，使这类疾病的治疗有了新的突破，但致病的ＣＦ基因是否会通过此项技术而传给其下一代，一直是一个令人担扰的问题。为此现将ＣＦ病，ＣＦ基因及蛋白产物的结构特点与功能，ＣＦ基因突变与梗阻性无精子症的关系，致病的ＣＦ基因的遗传性综述如下。ＣＦ病…     

预测非梗阻性无精子症显微取精结局的相关标志物的研究现状

男性不育影响着全世界约15%的人群。非梗阻性无精子症是男性不育最棘手的问题,尚无有效药物治疗,主要依靠取精手术来获得精子,其取精结果成功与否术前无法判断。近年来随着男性不育检测技术的不断发展,陆续出现了激素、非激素类蛋白、核酸等层面的新的生物学标志物,这些生物学标志物对于男性不育都有一定的评估价值,对于显微取精结果也有一定的预测能力。本文就现有的与非梗阻性无精子症显微取精结果方面有关的生物学标志物做一综述。     

多因素分析预测来曲唑提高非梗阻性无精子症和隐匿性无精子症患者精子密度研究

探讨来曲唑对提高睾酮／雌二醇比例（T／E2）〈10的非梗阻性无精子症或隐匿性无精子症患者的精子数量的有效性。46例不育症患者,排除染色体异常后随机分为两组：第1组22例患者,包括6例无精子症患者和16例隐匿性无精子症患者,接受来曲唑治疗,每天2．5毫克,连续治疗6个月;第2组24例患者包括5例无精子症患者和19例隐匿性无精子症患者,使用安慰剂。收集以下数据：精液常规分析、临床病史、阴囊超声检查、体重指数（BMI）、Y染色体微缺失筛查、染色体核型分析、囊性纤维化筛查,以及性激素检查卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇、雄激素和催乳素。所有患者在接受来曲唑或安慰剂前后都进行精液分析和性激素评估。采用Mann—Whitney己,检验进行统计学分析,精子浓度与FSH、T／E2的比例、双侧睾丸体积~IIBMI等参数的关系使用多变量分析评估,不良作用评估使用卡方检验进行分析。结果发现第1组患者精子浓度、活力、FSH、LH和T都显著增加,平均精子浓度从400ml。增加到1．29×10^6 ml^-1（P〈0．01）,平均精子活力a级精子从2％增加至15％（P〈0．01）,而第2组则没有明显变化。第一组中的雌二醇水平有显著下降,第2组无明显变化。第1组中有8名患者有副作用,第2组中没有患者出现副作用。来曲唑治疗后精子浓度与T／E2比值,FSH水平以及体重指数呈负相关,精子浓度和睾丸体积之间有直接相关性。     

血清抗缪勒管激素在梗阻性和非梗阻性无精子症鉴别诊断中的应用价值

目的:通过测定正常生育男性、梗阻性无精子症(OA)患者、非梗阻性无精子症(NOA)患者血清抗缪勒管激素(AMH)水平,探讨其是否作为血清标志物鉴别诊断OA和NOA。方法:选择2018年9月至2019年4月男性不育门诊就诊的患者作为研究对象,采用化学发光免疫法测定正常生育组(n=43)、OA组(n=14)、NOA组(n=45)患者血清中的AMH、抑制素B、FSH水平,经阴囊B超测量睾丸体积。并对正常生育组、OA组和NOA组均进行AMH、抑制素B、FSH、睾丸体积的统计分析。结果:AMH正常生育组[(8.13±3.95) ng/ml]和OA组[(8.51±4.77) ng/ml]均明显高于NOA组[(5.65±3.13) ng/ml,P0.05],抑制素B正常生育组[(127.38±40.50) pg/ml]和OA组[(131.25±52.30) pg/ml]均明显高于NOA组[(25.98±16.29)pg/ml,P0.01],FSH正常生育组[(4.22±3.23) IU/L]和OA组[(4.54±2.09) IU/L]均明显低于NOA组[(19.87±13.09)IU/L,P0.01];正常生育组与OA组AMH、抑制素B、FSH差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关分析结果显示,抑制素B与AMH呈正相关(r=0.326,P=0.01),与FSH呈负相关(r=-0.662,P0.01);FSH与AMH呈负相关(r=-0.468,P0.01);睾丸体积与AMH呈正相关(r=0.339,P0.01),与抑制素B呈正相关(P0.01,r=0.733),与FSH呈负相关(P0.01,r=0.597);精子浓度与抑制素B呈正相关(r=0.522,P0.01),与FSH呈负相关(r=-0.421,P0.01),与睾丸体积呈正相关性(r=0.605,P0.01)。结论:AMH可作为睾丸精子发生的血清标志物之一,并单独或与抑制素B和FSH三者联合用于OA和NOA的鉴别诊断。     

抽取附睾精子作人工受精治疗梗阻性无精子症初步报告

本文从５例梗阻性无精子症不育患者输精和收集附睾精子。其中除１例为附睾先天性梗阻，作附睾－输精管吻俣术外，余均为远端输精管不通畅或缺如。第二性症发育良好，性激素，睾丸容积等均正常。抽吸附睾液放入术前精浆和精子保养液中冷冻保存，解决复苏后４例行人工授精。     

睾丸穿刺取精术对非梗阻性无精子症患者性功能的影响

<正>非梗阻性无精子症(NOA)是排除了梗阻性因素的一类生精功能低下性疾病,这类患者不能产生精子或只产生极少量精子,导致精液中找不到精子。睾丸穿刺取精术(TESA)是诊断和治疗无精子症的重要手段,符合睾丸穿刺指征的NOA患者精子获取率约60%。随着卵细胞胞质内单精子注射(IC-SI)的应用,这部分NOA患者可获取睾丸精子治疗     

无精子症患者与生育男性精浆蛋白质群的比较分析

目的:探讨无精子症患者精浆蛋白质群的改变。方法:11例正常健康自愿者和6例非梗阻性无精子症者精液标本,以99%和45%Percoll分离获取精浆。采用PBS IIC型蛋白质芯片-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS),经CM10芯片捕获蛋白质,并采用TOF-MS对蛋白质进行检测获得各样本的蛋白质指纹图谱,经过归一化处理后进行组间比较。结果:无精子症组与正常组比较有28种蛋白质表达存在差异,差异的蛋白质中有24种含量低于正常组,其中4个M/Z在7 196.058、7 630.573、7 547.610和7 709.833的蛋白质差异极显著(P<0.01)。结论:无精子症患者其精浆蛋白质群较生育男性有显著改变,改变的蛋白质主要是含量减少,这些蛋白质的减少可能与无精子症的发生有重要相关性。     

细胞色素氧化酶10在非梗阻性无精子症患者睾丸组织中的表达

目的:评价细胞色素氧化酶10(COX10)基因在非梗阻性人无精子症及正常睾丸组织中的表达及意义。方法:应用包含有人COX10及RBM、EIF1AY等基因的微矩阵芯片对人正常睾丸及无精子症睾丸组织中差异表达基因谱进行了研究:通过RT-PCR方法获得两种组织mRNA,再分别用Cy5-dUTP及Cy3-dUTP标记制备cDNA探针。两种探针混合后与包含有人4096条cDNA序列的cDNA微矩阵芯片杂交,经扫描、计算机处理分析比较杂交结果;随后利用原位杂交技术对COX10mRNA在10例正常生育及39例非梗阻性无精子症睾丸组织中的表达进行了研究。结果:获得128个可能与无精子症相关的差异表达基因,其中56个基因表达上调,72个基因表达下调,其中COX10下调明显。与cDNA微矩阵杂交结果相同,原位杂交证实COX10mRNA在正常睾丸组织生精细胞中表达强于非梗阻性无精子症睾丸组织。结论:COX10可能在无精子症的发生与进展过程中起一定的作用;cDNA微矩阵技术可以应用于筛选非梗阻性无精子症相关基因的研究中。     

Non-Therapy Related Pregnancies in the Consorts of a Group of Men with Obstructive Azoospermia

Summary:  From 17 consorts of a group of men with obstructive azoospermia, a total of 21 pregnancies were traced. Most of these pregnancies were the result of AID. However, in 4 (24%) women, 6 pregnancies (29%) occurred which were not related to any therapy.
Therapieunabhängige Schwangerschaften bei Ehefrauen einer Gruppe Männer mit Verschlußazoospermie
Zusammenfassung:  Es wurden 21 Schwangerschaften aus Ehen untersucht, in denen männlicherseits eine Verschlußazoospermie vorlag. Vierzehn Schwangerschaften sind wahrscheinlich auf heterologe Insemination, eine auf eine Epididymovasostomie und sechs Schwangerschaften auf eingestandenen außerehelichen Verkehr zurückzuführen. Bei diesem hohen Anteil wird die Anzahl der erzielten Schwangerschaften als Maß für Therapieerfolge beim Mann in Frage gestellt.     

男性不育的遗传学评估

无精子症或严重少精子症男性(5×10 6/ml)在接受治疗之前应通过遗传学检测确定其不育的真正原因。正确区分梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)与非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)至关重要,因为相比于NOA(睾丸体积小、质地柔软、FSH水平升高),OA(正常的睾丸功能、睾丸体积以及FSH水平)的遗传学检测有所不同。在NOA患者人群中,病史回顾、体格检查和实验室检测对于遗传学检测方法的选择是必须的,尤其针对原发性睾丸衰竭或先天性低促性腺激素型性腺功能低下症的NOA患者。遗传学检测包括由于先天性输精管缺如所致OA的囊性纤维化跨膜传导调节因子的检测,和针对严重少精子症或NOA患者的染色体核型分析、Y染色体微缺失等其他特殊检测方法。这些遗传学检测能够帮助判定哪些患者适合药物和/或手术治疗。最新的遗传学分析技术将有助于男性不育的诊断和掌控。     

梗阻性无精子症经直肠B超声像表现及其临床意义

目的:探讨梗阻性无精子症经直肠B超的声像表现及其在梗阻定位诊断中的应用价值。方法:对248例临床诊断为梗阻性无精子症的男性患者行经直肠B超检查,观察前列腺、双侧精囊及射精管的声像表现。结果:本组病例前列腺体积平均13.2 ml。前列腺、双侧精囊及射精管形态正常111例。双侧精囊缺如39例,双侧精囊发育不全33例,单侧精囊发育不全、对侧精囊缺如23例,双侧精囊扩张28例,单侧精囊扩张14例。这42例精囊扩张者中射精管扩张18例、前列腺中线部位囊肿17例。结论:梗阻性无精子症的病变类型多样。经直肠B超可以清楚显示前列腺、精囊及射精管的形态与病变,对于判断梗阻性无精子症的病变类型及部位有一定的参考作用。     

特发性无精子症和少精子症患者谷胱甘肽S-转移酶T1基因的遗传多态性

目的:探讨谷胱甘肽S-转移酶T1基因多态性(GSTT1)与特发性无精子症和少精子症的关系。方法:按WHO手册标准,采用WLJY-9000伟力彩色精子质量检测系统对研究对象进行精液分析,根据精液检测结果将研究对象分成特发性无精子症组(n=34)、少精子症组(n=40)和正常对照组(n=53),各组研究对象年龄、吸烟史、饮酒史无统计学差异。基因组DNA来自研究对象提供的外周血有核细胞,采用聚合酶链反应(PCR)方法对研究对象GSTT1基因进行分型。结果:特发性无精子症组、少精子症组GSTT1缺失型基因频率分别为76.5%和72.5%,明显高于正常对照组(49.1%),差异有统计学意义(无精子症组vs正常对照组,OR=3.13,95%CI为1.20～8.16,P=0.020;少精子症组vs正常对照组,OR=2.53,95%CI为1.06～6.11,P=0.038)。结论:GSTT1基因多态性与特发性无精子症、少精子症有相关性;GSTT1缺失基因型是特发性无精子症和少精子症发病的危险因素。     

Cytogenetic and molecular analysis of the Y chromosome: absence of a significant relationship between CAG repeat length in exon 1 of the androgen receptor gene and infertility in Indian men

The genetic basis of male infertility remains unclear in the majority of cases. Recent studies have indicated an association between microdeletions of the azoospermia factor a (AZFa)-AZFc regions of Yq and severe oligospermia or azoospermia. Increased (CAG)n repeat lengths in the androgen receptor (AR) gene have also been reported in infertile men. Therefore, in order to assess the prevalence of these genetic defects to male infertility, 183 men with non-obstructive azoospermia (n = 70), obstructive azoospermia (n = 33), severe oligospermia (n = 80) and 59 fertile men were examined cytogenetically and at molecular level for Yq deletions, microdeletions, and AR-CAG repeat lengths along with hormonal profiles [luteinizing hormone (LH), follicle-stimulating hormone (FSH) and testosterone (T)]. We used high resolution cytogenetics to detect chromosome deletions and multiplex polymerase chain reaction (PCR) involving 27 sequence-tagged site (STS) markers on Yq to determine the rate and extent of Yq microdeletions. PCR amplification with primers flanking exon 1 of AR gene was used to determine the AR-(CAG)n repeat lengths. Hormonal profiles (LH, FSH and T levels) were also analysed in infertile and fertile men. Testicular biopsies showed Sertoli cell only (SCO) morphology, maturation arrests (MA) and hypospermatogenesis. No chromosome aberrations were found in infertile men but there was a significant increase (p < 0.001) in the association of acrocentric chromosomes including the Y chromosome. Yq microdeletions were found in 16 non-obstructive azoospermic men (16 of 70; 22%) and seven severe oligospermic individuals (seven of 80; 8.7%) and most of them had deletions in the sY240 locus. No Yq microdeletions were detected in patients with obstructive azoospermia. No statistically significant difference in the mean length of CAG repeats in AR gene was observed between infertile and fertile men (22.2 +/- 1.5 and 21.5 +/- 1.4 respectively). No significant increase or decrease in levels of LH, FSH and T was observed in infertile and fertile men. In some infertile men, significantly elevated levels of FSH alone or in combination with LH were found to be indicative of failure of spermatogenesis and/or suggestive of testicular failure. Y-chromosome microdeletions contribute to infertility in some patients but no relationship could be established with the (CAG)n repeat lengths in exon 1 of the AR gene in infertile Indian men.     

陕西地区不明原因无精子症和少精子症患者Y染色体长臂微缺失分析

目的: 评估陕西地区不明原因无精子症和少精子症不育男性患者Y染色体长臂微缺失的频率,探讨精子密度与Y染色体微缺失发生率的相关性。　方法: 以Y染色体特异性无精子症因子区STS AZFa、AZFb、AZFc和SRY4个基因 5个片段设计引物,采用PCR方法对 64例无精子症和少精子症患者以及 20例正常生育男性进行微缺失检测,并比较不同精子密度患者Y染色体微缺失的发生率。　结果: 20例精子密度正常的生育男性未检出Y染色体微缺失,而 64例特发性无精子症 /少精子症患者AZFc区的缺失率为17. 2% (11 /64),AZFc和AZFb联合缺失 1例,未发现AZFa区缺失,SRY基因均为阳性。其中无精子症组缺失率为21. 43% ( 3 /14 );精子密度 <1×106 /ml组,缺失率为 20. 0% (2 /10);精子密度 (1 ~5)×106 /ml组缺失率为17. 9% (5 /28);精子密度 (5 ~10 )×106 /ml组缺失率为8. 3% (1 /12)。各组缺失率经卡方检验差异有显著性 (χ2 =70. 144,P<0. 005 )。　结论: 无精子症和少精子症不育患者Y染色体AZFc缺失率明显较高,PCR扩增AZF基因是诊断Y染色体微缺失的简单方法。     

Clinical analysis of patients with azoospermia factor deletions by microdissection testicular sperm extraction

Microdeletions of the azoospermia factor (AZF) locus on the Y chromosome have been implicated as a major genetic component of idiopathic male infertility, and the incidence of AZF deletions has been reported to be 15-20% in men with non-obstructive azoospermia (NOA). Numerous studies have described AZF deletion rates in patients with azoospermia; however, a clinical comparison of azoospermic patients with AZF deletion and those with no deletion has not been reported well. A new technique for testicular sperm extraction, microdissection testicular sperm extraction (TESE), has been used widely on NOA patients. Although testicular spermatozoa are reliably detected and retrieved from NOA patients by microdissection TESE, sperm retrieval rates for patients with AZF deletions are not well known. Therefore, characteristics of NOA patients with AZF deletion were investigated. Six of 60 patients (10%) who underwent microdissection TESE were found to have AZF deletions by genomic polymerase chain reaction. Testicular data, outcome of sperm retrieval and endocrinological profiles, were compared between patients with AZF deletions (n = 6) and those with no deletions (n = 54). Testicular size, varicocele rates and testicular histology were similar between the groups. Significant differences were not detected in the endocrinological profiles. Sperm retrieval rates were not significantly different between the groups. In conclusion, AZF deletions do not appear to confer specific characteristics to NOA patients.