血管内皮细胞生长因子与缺血性脑血管病

血管内皮细胞生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)是迄今为止已知的最强的促血管生长因子,其由多种正常细胞产生和分泌,特异性作用于存在 VEGF受体即 flt-l(VEGFR-1)或 KDR(VEGFR-2)的血管内皮细胞( VEC)而实现其生物学效应.除人们所熟知的可以增加血管通透性,促进血管生成,维持血管功能,修复损伤后血管的功能外,更有研究表明其对神经细胞有直接保护作用并可促进神经元的生成.缺氧为 VEGF/VEGFR表达的最强调节因素.许多实验都证实了脑缺血过程中均伴有 VEGF及其受体的表达,与缺血性脑血管病的发生发展密切相关.目前 VEGF作为一种功能强大且能产生多种效应的细胞因子因其潜在的治疗前景引起国内外的广泛关注.     

血管内皮细胞生长因子及其基因治疗缺血性脑血管病的最新研究

脑梗死缺血中心区的神经细胞产生不可逆损伤，而缺血边缘区脑组织的损伤是可逆的，尽快恢复该区域的血流，保护神经细胞是治疗脑梗死的关键。血管内皮细胞生长因子(vascular endothelal growth factor，VEGF)是新近发现的一种促进血管生长因子，具有促进血管生长和侧支循环的建立的作用。VEGF具有促进新生血管形成及侧支循环的建立．通过改善脑血流及直接保护神经元，达到减轻缺血性损伤，提示可将其用于治疗缺血性脑血管疾病。     

胎盘源性生长因子在缺血性脑血管病血管再生中的作用

背景:关于胎盘源性生长因子在促血管生长方面的作用还没完全被理解.在胎盘源性生长因子缺陷的模型研究中,胎盘源性生长因子被认为在诱导血管新生中起到关键性的作用.目的:总结胎盘源性生长因子及其受体在血管再生和缺血性脑血管病中的作用的研究进展.方法:计算机检索Pubmed和中国知网1990/2009相关文献.中文关键词为胎盘源性生长因子;英文关键词为PLGF,angiogensis.纳入胎盘源性生长因子的生物特性和在血管再生中的作用相关文献,以及脑缺血后血管再生和脑缺血后胎盘源性生长因子表达的相关文献.排除重复性研究.结果与结论:文章从胎盘源性生长因子及其受体一般生物学特性,其在血管再生中的作用,胎盘源性生长因子及受体促进血管生成的机制,以及血管内皮生长因子A、胎盘源性生长因子及其受体在脑缺血后的表达和意义等方面进行了叙述.胎盘源性生长因子具有促进病理性血管新生、动脉生成及侧支生成、造血祖细胞动员的功能.胎盘源性生长因子及受体在脑缺血血管再生中有重要的作用,其治疗缺血性脑血管病町能具有很好的临床应用前景.其具体作用和机制还需进一步的研究.     

血管内皮生长因子与缺血性脑血管病

本文旨在通过对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)与缺血性脑血管病的综述，阐明VEGF对缺血性脑血管的保护作用及应用前景。     

血管内皮细胞生长因子与缺血性脑血管病

血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是迄今为止已知的最强的促血管生长因子，其由多种正常细胞产生和分泌，特异性作用于存在VEGF受体即flt—l(VEGFR—1)或KDR(VEGFR-2)的血管内皮细胞(VEC)而实现其生物学效应。除人们所熟知的可以增加血管通透性，促进血管生成，维持血管功能，修复损伤后血管的功能外，更有研究表明其对神经细胞有直接保护作用并可促进神经元的生成。缺氧为VEGF／VEGFR表达的最强调节因素。许多实验都证实了脑缺血过程中均伴有VEGF及其受体的表达，与缺血性脑血管病的发生发展密切相关。目前VEGF作为一种功能强大且能产生多种效应的细胞因子因其潜在的治疗前景引起国内外的广泛关注。     

急性缺血性脑卒中后的血管保护策略

目的：在研究缺血后血管损伤的病理生理过程的基础上，探讨血管保护的治疗措施，为缺血性脑卒中病探索治疗的新方向。 资料来源：应用计算机检索Medline1997—01／2004—08的与急性脑卒中后血管保护策略相关文献，检索词“ischemic stroke，vasculature，vascular endothelial growth factor，apoptosis”，并限定文献语种为“English”。 资料选择：就检索到的300余篇文献进行筛选，选择以促进内皮的功能以及阻抑血管平滑肌细胞增殖、炎症反应、血栓形成和内皮凋亡的措施（即血管保护措施）为主要研究内容的文献，无论研究对象为动物还是患者全部纳入，其中研究内容相似的，以近期且发表在较权威杂志者优先。排除综述类文献。 资料提炼：共筛选到符合标准的文献29条，将其按血管保护的概念、缺血性脑卒中血管保护措施中急性期的主要靶点、亚急性期主要靶点和慢性期主要靶点进行分类。 资料综合：血管保护的靶点应在缺血性脑卒中病理生理机制的背景环境下来评价，且可以分急性（数小时）、亚急性（数小时至数天）以及慢性阶段（数天至数月）来描述。急性期血管病理生理包括血流动力学和代谢的改变，导致血脑屏障的破坏以及血管紧张度的失调，其主要靶点为血管活性因子；炎症是亚急性期血管损伤的重要机制，故多环节炎性因子构成亚急性期主要靶点；而慢性期着重于凋亡过程。 结论：在缺血性脑卒中后对脑血管系统的保护似乎是预防水肿和出血、促进康复的合理方法。提高内皮型一氧化氮合酶来源的NO生成量、血管生成素1，抑制血管内皮生长因子、血管生成素2、血管紧张素Ⅱ、内皮素1、基质金属蛋白酶、自由基以及炎症递质都是血管保护的可能的药物学靶点。     

血管内皮生长因子治疗性血管生成作用与缺血性脑血管病

血管内皮生长因子是血管特异性生长因子,能特异性地作用于血管内皮细胞,诱导血管生成,在血管发生和血管形成过程中起重要作用.传统观念认为,成年脑部血管内皮细胞是不能增殖的,但近期的动物实验发现局灶性脑缺血后可诱导缺血半暗带区的新生血管形成.这种脑血管生成是通过血管生长因了与内皮细胞上表达的酪氨酸受体结合而调控的.但是这种血管形成数量有限,并不足以挽救血液灌注不足引起的损害.新近的研究已经证实,外源性给予血管牛长因子能刺激侧枝循环形成和增加局部血流,并且已在外周动脉闭塞性疾病和心肌缺血中成功应用,这种新的刺激和诱导新生血管形成新颖方法一治疗性血管生成,为治疗缺血件脑血管病提供了一条全新的思路.     

血管内皮生长因子与缺血性脑损伤

血管内皮生长因子 (vascularendothelial growthfactor ,VEGF)由Ferrara等在牛垂体滤泡星状细胞体外培养液中首先纯化出来[1] ,又称血管通透因子 (vascularpermeabilityfactor ,VPF) ,是一种内皮细胞特异的有丝分裂原 ,通过与其受体结合而发挥促进内皮细胞增殖 ,加速新生血管形成 ,提高血管通透性等生物学特性。本文就VEGF及其受体的生物学特点 ,在缺血性脑损伤中的表达及作用的研究作简要介绍。1VEGF及其受体1.1生物学特性　VEGF是热稳定的分子 ,相对分子量为 ( 3 4-4 6)× 10 3 ( 3 4-4 6KD) ,序列高度保守 ,具有生物活性的是糖…     

急性缺血性脑卒中后的血管保护策略

目的:在研究缺血后血管损伤的病理生理过程的基础上,探讨血管保护的治疗措施,为缺血性脑卒中病探索治疗的新方向。资料来源:应用计算机检索Medline1997-01/2004-08的与急性脑卒中后血管保护策略相关文献,检索词“ischemicstroke,vasculature,vascularendothelialgrowthfactor,apoptosis”,并限定文献语种为“English”。资料选择:就检索到的300余篇文献进行筛选,选择以促进内皮的功能以及阻抑血管平滑肌细胞增殖、炎症反应、血栓形成和内皮凋亡的措施(即血管保护措施)为主要研究内容的文献,无论研究对象为动物还是患者全部纳入,其中研究内容相似的,以近期且发表在较权威杂志者优先,排除综述类文献。资料提炼:共筛选到符合标准的文献29条,将其按血管保护的概念、缺血性脑卒中血管保护措施中急性期的主要靶点、亚急性期主要靶点和慢性期主要靶点进行分类。资料综合:血管保护的靶点应在缺血性脑卒中病理生理机制的背景环境下来评价,且可以分急性(数小时)、亚急性(数小时至数天)以及慢性阶段(数天至数月)来描述。急性期血管病理生理包括血流动力学和代谢的改变,导致血脑屏障的破坏以及血管紧张度的失调,其主要靶点为血管活性因子;炎症是亚急性期血管损伤的重要机制,故多环节炎性因子构成亚急性期主要靶点;而慢性期着重于凋亡过程。结论:在缺血性脑卒中后对脑血管系统的保护似乎是预防水肿和出血、促进康复的合理方法。提高内皮型一氧化氮合酶来源的NO生成量、血管生成素1,抑制血管内皮生长因子、血管生成素2、血管紧张素II、内皮素1、基质金属蛋白酶、自由基以及炎症递质都是血管保护的可能的药物学靶点。     

急性局灶性脑缺血早期血管内皮生长因子及其受体mRNA表达的时空特征

背景：血管内皮生长因子可加速新生血管形成，作为多功能细胞因子与其受体的相互作用在血管形成的过程中发挥关键作用。目的：检测血管内皮生长因子及其受体FLT-1及FLK-1mRNA在急性局灶性脑缺血中的表达，并探讨其表达的时间与部位的相互关系。设计：随机对照实验。单位：吉林大学第一医院神经内科、吉林大学白求恩医学部病理教研室。材料：实验于2001-06／2002-04在吉林大学白求恩医学部病理实验室完成。选择成年SD大鼠130只，雌雄各半，随机分为正常对照组10只,假手术组10只，脑缺血组110只。脑缺血组又随机分为0，1，2，3，6，24，48h，1，2，3，4周共11个时间点，每个时间点10只。方法：应用左侧颈总动脉结扎加缺氧诱导的方法，建立SD大鼠永久大脑中动脉闭塞模型，假手术组不进行动脉结扎和缺氧处理，其余步骤同脑缺血组。正常对照组不做任何处理。检测血管内皮生长因子及其受体基因在局灶性脑缺血后不同时间点的表达应用原位杂交技术。同时观察局灶性脑缺血后血管形成情况。主要观察指标：①血管内皮生长因子及其受体基因在急性局灶性脑缺血后不同时间点的表达。②急性局灶性脑缺血后不同时间点血管形成情况。结果：130只大鼠全部进入结果分析。①不同时间点血管内皮生长因子mRNA的表达：缺血3，6，24，48h时缺血周边区高于缺血中心区[（31．13&;#177;2．21）个／视野，（13．32&;#177;1．31）个／视野；（43．11&;#177;2．43）个／视野，（19．40&;#177;3．22）个／视野；（85．41&;#177;2．75）个／视野，（47．63&;#177;2．45）个／视野；（98．66&;#177;1．76）个／视野，（57．32&;#177;3．35）个／视野，（P〈0．05）]。48h后血管内皮生长因子mRNA逐渐下降，至2周恢复到对照水平。②不同时间点血管内皮生长因子受体FLT-1，FLK-1mRNA的表达：缺血3，6，24，48h时缺血周边区高于缺血中心区，血管内皮生长因子受体FLT-1及FLK-1mRNA表达在3周时达对照水平（P〈0．05）。②血管形成平均数：48h，1周时缺血周边区高于缺血中心区[（47．2&;#177;2．11）个／视野，（29．4&;#177;2．37）个／视野；（199．2&;#177;3．45）个／视野，（76．6&;#177;4．62）个／视野，（P〈0．05）]。结论：急性局灶性脑缺血早期血管内皮生长因子mRNA及血管内皮生长因子受体FLT-1及FLK-1mRNA在神经细胞、胶质细胞、血管内皮细胞均有表达，在缺氧情况下，脑内血管内皮生长因子及受体的表达明显增强，表达具有时空特性。     

Gene therapy with vascular endothelial growth factor reduces angina

A placebo-controlled, double-blind, randomized study found that subjects randomized to the vascular endothelial growth factor (VEGF) gene-receiving treatment group showed a greater level of angina reduction in comparison to control subjects who received saline as a placebo. These data provide hope for a new treatment option for those who are not candidates for invasive therapeutic procedures and are refractory to medical therapy for angina. Furthermore, the findings are important to the areas of therapeutic angiogenesis and gene therapy as a whole. This article discusses VEGF and its brief history as a form of gene therapy in the context of the VEGF gene therapy trial that the American Heart Association has recognized as one of the top 10 scientific advances of 2001.     

血管内皮生长因子基因诱导脑梗死大鼠热休克蛋白70变化与其梗死体积的关系

目的:观察血管内皮生长因子165基因治疗大鼠脑梗死前后热休克蛋白70表达的变化,进一步研究热休克蛋白70在脑梗死中的神经保护作用。方法:实验于2003-03/2004-03在郧阳医学院附属太和医院神经科学研究所完成。选择雌性Wistar大鼠40只,常规饲养观察1周后,随机分为正常对照组5只,不造模,余35只造模后分为假手术组5只,单纯梗死组10只,空载质粒对照组10只,血管内皮生长因子基因治疗组10只。采用改进的线栓法制成Wistar大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型,空载质粒对照组和血管内皮生长因子基因治疗组用50μL微量进样器进针约3.5mm,分别注入5μL空载质粒和质粒载体与血管内皮生长因子165基因构成的重组DNA到梗死区,7d后断头取脑。用热休克蛋白70免疫组化染色的方法显示脑中的热休克蛋白70的表达情况;用苏木精-伊红染色显示梗死区,用图像分析仪测定梗死面积。结果:40只大鼠全部进入结果分析。①热休克蛋白70的着色部位在神经细胞的细胞浆和细胞膜,黄褐色细胞即为阳性细胞。②热休克蛋白70的表达:正常对照组与假手术组基本相似犤(3.00±0.89)个/高倍视野,(6.31±0.63)个/高倍视野,(P>0.05)犦,单纯梗死组与空载质粒对照组基本相似犤(23.98±3.25)个/高倍视野,(23.31±2.77)个/高倍视野,(P>0.05)犦,单纯梗死组比正常对     

肌苷对大鼠脑缺血再灌注后血管内皮生长因子表达的影响

背景肌苷参与机体多方面的代谢过程,对缺血性脑损伤具有一定的保护作用,但其机制还没有彻底阐明.目的研究肌苷对大鼠脑缺血再灌注后血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)表达的影响,探讨肌苷的神经保护作用机制.设计随机对照的实验研究.地点和材料本实验在青岛大学医学院脑血管病研究所和山东省脑血管病防治重点实验室完成.成年健康雌性SD大鼠68只,体质量230～270 g,清洁级,由中国科学院上海实验动物中心提供.干预措施成年健康雌性SD大鼠68只,应用线栓法建立SD大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,随机分为治疗组32只和对照组32只,每组再随机分为缺血1.5 h再灌流2,6,12,24 h,2,3,7,14 d组(n=4),另外4只作假手术组.应用免疫组织化学方法检测脑缺血再灌流后脑组织VEGF的表达.结果假手术组脑组织未见VEGF阳性表达.对照组在皮层区和纹状体区VEGF在脑缺血再灌注2 h开始表达,12 h达高峰,持续24 h,随即迅速降低.VEGF阳性细胞主要位于Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ层神经元和血管内皮细胞,尤其神经细胞核周细胞浆和树突染色最深.肌苷治疗组VEGF表达于缺血再灌注2 h～2 d较对照组显著增高,经统计学处理,差异有非常显著性意义(t=3.78～22.62,P＜0.01).结论肌苷可上调脑缺血再灌注后VEGF的表达,可能是其缺血后神经保护作用的机制之一.     

反转录病毒载体介导人血管内皮生长因子基因治疗实验性兔脑缺血

目的：探索人血管内皮生长因子基因治疗脑缺血的可行性。方法：实验于2005—03／12在上海交通大学医学院附属瑞金医院神经病学研究所完成。实验动物选择新西兰大白兔30只，随机分为反转录病毒-血管内皮生长因子实验组和对照组，每组15只．建立兔脑缺血模型．构建含人血管内皮生长因子基因的逆转录病毒表达载体，对兔脑缺血模型进行基因治疗。术后12h和24h取实验动物脑组织．免疫组化方法检测人血管内皮生长因子蛋白的表达，原位杂交检测人血管内皮生长因子mRNA的表达．碱性磷酸酶法（X—P染色）检测毛细血管密度．并通过新生血管计数观察其促血管生成作用。运用反转录-聚合酶链反应检测反转录病毒在脑缺血兔各脏器的分布及人血管内皮生长因子的表达。结果：注射反转录病毒后。实验组有效表达人血管内皮生长因子，琼脂糖凝胶电泳结果显示人血管内皮生长因子165片段大小约560bp。经过ECORⅠ和HindⅢ双酶切后产生2个片段分别为5．4bp和560bp．经测序证实无突变。实验组脑组织表达血管内皮生长因子蛋白。Western blot结果也显示注射部位的脑组织中血管内皮生长因子蛋白含量明显高于对照组。60个G418抗性细胞集落，培养最高为3．2cfu／L，在32℃的条件下培养48h获得3&;#215;10cfu／L的滴度。实验组半暗带区脑组织中毛细血管密度显著增加。在肺、肝、脾、肾、睾丸组织中均未检测到人血管内皮生长因子基因的表达。结论：反转录病毒介导人血管内皮生长因子基因治疗脑缺血，能有效表达人血管内皮生长因子，促进半暗带区毛细血管增生。     

反转录病毒载体介导人血管内皮生长因子基因治疗实验性兔脑缺血

目的:探索人血管内皮生长因子基因治疗脑缺血的可行性。方法:实验于2005-03/12在上海交通大学医学院附属瑞金医院神经病学研究所完成。实验动物选择新西兰大白兔30只,随机分为反转录病毒-血管内皮生长因子实验组和对照组,每组15只,建立兔脑缺血模型,构建含人血管内皮生长因子基因的逆转录病毒表达载体,对兔脑缺血模型进行基因治疗。术后12h和24h取实验动物脑组织,免疫组化方法检测人血管内皮生长因子蛋白的表达,原位杂交检测人血管内皮生长因子mRNA的表达,碱性磷酸酶法(X-p染色)检测毛细血管密度,并通过新生血管计数观察其促血管生成作用。运用反转录-聚合酶链反应检测反转录病毒在脑缺血兔各脏器的分布及人血管内皮生长因子的表达。结果:注射反转录病毒后,实验组有效表达人血管内皮生长因子,琼脂糖凝胶电泳结果显示人血管内皮生长因子165片段大小约560bp,经过ECORI和HindⅢ双酶切后产生2个片段分别为5.4bp和560bp,经测序证实无突变。实验组脑组织表达血管内皮生长因子蛋白。Westernblot结果也显示注射部位的脑组织中血管内皮生长因子蛋白含量明显高于对照组。60个G418抗性细胞集落,培养最高为3.2cfu/L,在32℃的条件下培养48h获得3×10cfu/L的滴度。实验组半暗带区脑组织中毛细血管密度显著增加。在肺、肝、脾、肾、睾丸组织中均未检测到人血管内皮生长因子基因的表达。结论:反转录病毒介导人血管内皮生长因子基因治疗脑缺血,能有效表达人血管内皮生长因子,促进半暗带区毛细血管增生。     

慢性脑灌注不足大鼠血管内皮生长因子的表达及其意义

目的:研究大鼠慢性前脑缺血后血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的动态变化,探讨VEGF在缺血性脑血管病中的保护作用。方法:实验于2004-01/2004-09在解放军第三军医大学西南医院综合实验研究中心进行。选择无菌级老龄Wister大鼠24只,随机分为对照组、缺血1周组、缺血2周组和缺血4周组各6只。采用双侧颈总动脉结扎制作大鼠慢性脑灌注不足模型,用免疫组织化学方法观察大鼠缺血后1,2,4周时,VEGF表达的情况。结果:大鼠慢性前脑缺血后1周VEGF表达最高,2周开始减少,4周继续减少,但已明显少于2周。各时间点VEGF的表达主要集中于大脑皮质和海马。结论:VEGF可能参与慢性脑灌注不足脑损伤的病理发展及修复过程。     

Gene therapy with adenoviral plasmids or naked DNA of vascular endothelial growth factor and platelet-derived growth factor accelerates healing of duodenal ulcer in rats

After we demonstrated that daily intragastric administration of angiogenic growth factors like basic fibroblast growth factor (bFGF), platelet-derived growth factor (PDGF), or vascular endothelial growth factor (VEGF) accelerated the healing of chronic duodenal ulcers in rats, we hypothesized that a single dose of gene therapy related to these growth factors may be enough to accelerate the healing of duodenal ulcers through enhancement of synthesis of endogenous angiogenic growth factors. Thus, we compared the effects of intraduodenal or intravenous adenoviral vectors and naked DNA transducing the genes for either VEGF or PDGF in experimental duodenal ulcers induced by cysteamine in rats. Sprague-Dawley female rats with confirmed duodenal ulcers were randomly divided into control and treatment groups. The controls received either intraduodenal injection of buffer or the beta-galactosidase-transducing adenoviral vector. Rats treated with a single or double dose of adenoviral vector or naked DNA of VEGF or PDGF had significantly smaller ulcers than the controls. Histologic analysis demonstrated that reepithelized granulation tissue with prominent angiogenesis replaced the ulcers. Western blotting, immunohistochemistry, and enzyme-linked immunosorbent assay of duodenal mucosa confirmed that the expression of VEGF or PDGF proteins was enhanced by the transgenes, whereas beta-galactosidase staining in multiple organs identified that the transgenes, especially after local administration were only localized in the duodenum, stomach, and jejunum. These results suggest that gene therapy with either VEGF or PDGF may be a rapid approach to achieve duodenal ulcer healing.     

血管内皮生长因子及血管内皮生长因子受体-2在肾脏疾病中的研究新进展

血管内皮生长因子(VEGF)是一种内皮细胞的特殊生长因子,可以促进内皮细胞的增生、分化和生存,还可以提高血管的通透性,促进血管的形成。血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2),是VEGF的特异性受体,VEGF/VEGFR-2信号系统的激活是刺激血管内皮细胞的主要机制。本文首先对VEGF及VEGFR进行概述,其次介绍VEGF/VEGFR-2肾脏的旁分泌和自分泌机制。最后,对VEGF/VEGFR-2在各种肾脏疾病中的表达及其作用以及靶向VEGF/VEGFR-2信号通路对新药的研发和临床应用进行综述。