Toll样受体3对胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌的影响

目的：通过 Toll 样受体3（TLR3）激动剂 Poly（I ∶ C）（PIC）刺激小鼠胰岛β细胞,观察 TLR3对细胞增殖,炎性因子表达及胰岛素分泌的影响。方法用小鼠胰岛β细胞株 NIT-1为研究对象,首先测定胰岛素释放以鉴定胰岛β细胞生物活性,再分别用不同浓度 PIC（0．1、1、10μg/mL）刺激 NIT-1细胞,CCK-8法检测细胞增殖;酶联免疫法（ELISA）检测炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）,IL-6及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达;葡萄糖刺激下的胰岛素释放试验（GSIS）测定 NIT-1细胞分泌胰岛素功能。结果 NIT-1细胞株呈贴壁、成簇及多边形生长;胰岛β细胞生物活性较好。与对照组相比,用不同浓度 PIC（0．1、1、10μg/mL）刺激时,NIT-1细胞增殖明显受到抑制,且呈剂量依耐性（P＜0．05）。 PIC 刺激组炎性因子（IL-1β,IL-6及 TNF-α）表达明显高于对照组（P＜0．05）。 PIC 刺激可明显抑制高糖介导下的 NIT-1细胞分泌胰岛素（P＜0．05）。结论 PIC 激活胰岛β细胞 TLR3,通过释放 IL-1β、IL-6及 TNF-α,抑制胰岛β细胞生长及胰岛素分泌。     

异种骨移植中多种免疫因子的表达及转化生长因子-β的调节作用

目的:观察异种骨移植局部白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和蛋白质的表达,探索转化生长因子β(TGF-β)对这些免疫因子的调节作用。方法:将复合了TGF-β的牛松质骨骨粒或单纯牛松质骨骨粒植入小鼠股部肌肉内,于植入后第4,7,14及21天取材检测。结果:在异种骨移植标本中多种细胞成份可表达I-L1α、IL-6及TNF-αmRNA和蛋白质。复合TGFβ的骨移植局部IL1-α、IL-6和TNF-αmRNA的表达明显低于单纯异种骨移植(P<0.01)。结论:在异种骨移植局部,多种细胞可以表达IL-1α、IL-6及TNF-αmRNA和蛋白质,且这种表达受到TGF-β的调节。     

Toll样受体4在抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达炎症因子中的作用

目的观察抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物刺激小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、IL-6的效果,探讨Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法对C3H/He N(TLR4正常)小鼠、C3H/He J(TLR4缺陷)小鼠腹腔注射非特异性兔Ig G(R-Ig G)、抗β2GPⅠ抗体,72 h后用细胞免疫荧光法检测小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平;抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物对小鼠腹腔巨噬细胞进行体外刺激,荧光定量PCR法检测细胞表达上述因子的mRNA水平,western blot法检测其蛋白质分泌水平。结果抗β2GPⅠ抗体刺激的C3H/He N小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α、IL-1β、IL-6的水平明显高于C3H/He J小鼠,并经细胞免疫荧光法验证;经体外刺激后,荧光定量PCR法结果显示抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物诱导C3H/He N小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平高于空白组或C3H/He J刺激组(P均0.01);western blot结果显示C3H/He N来源细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌均显著高于C3H/He J来源细胞(P均0.01)。结论抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物能够促进小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,TLR4为介导此过程的受体之一。     

辛伐他汀治疗酒精性股骨头坏死的效果及机制初步探讨

目的观察辛伐他汀联合阿仑膦酸钠对酒精性股骨头坏死(AIANFH)的疗效及对Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路的影响。方法将90例AIANFH患者随机分为观察组和对照组,每组45例。对照组采用阿仑膦酸钠口服治疗,观察组在对照组基础上联合应用辛伐他汀治疗,疗程均为3个月。比较2组治疗后髋关节优良率和不良反应发生情况,并比较2组治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、脂联素、骨钙素水平和外周血单个核细胞(PBMC)的TLR4 mRNA、NF-κB p65 mRNA表达差异。结果治疗后,观察组髋关节优良率91.11%高于对照组的75.56%,差异有统计学意义(P 0.05)。2组治疗后的血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平低于治疗前,血清脂联素、骨钙素水平高于治疗前,差异有统计学意义(P 0.05);观察组治疗后的血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平低于对照组,血清脂联素、骨钙素水平高于对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。治疗后,2组PBMC的TLR4 mRNA、NF-κB p65 mRNA表达均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。观察组和对照组不良反应总发生率分别为24.44%和15.56%,差异无统计学意义(P 0.05)。结论辛伐他汀联合阿仑膦酸钠治疗AIANFH可抑制TLR4/NF-κB信号通路,抑制炎症反应,上调脂联素和骨钙素水平,且安全性高。     

2型糖尿病患者炎性因子与糖脂代谢指标的相关性及其预测微血管病变的价值

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者炎性因子水平与胰岛素抵抗、糖脂代谢指标的关系及其预测微血管病变的价值。方法 选取T2DM患者1 008例为研究对象,其中发生微血管病变的405例患者设为微血管病变组,未发生微血管病变的603例患者设为非微血管病变组。比较2组患者的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、空腹血糖(FBG)、24 h平均血糖(MBG)、24 h血糖波动(BGFR)、24 h血糖标准差(SDBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平。分析IL-6、IL-1β、CRP、TNF-α与HOMA-IR、HOMA-β、FBG、MBG、BGFR、SDBG、TC、TG、HDL、LDL水平的相关性。分析IL-6、IL-1β、CRP、TNF-α联合检测对微血管病变的预测效能。结果 微血管病变组IL-6、IL-1β、CRP、TNF-α、HOMA-IR、HOMA-β、FBG、HbA1c、MBG、BGF...     

尿毒症大鼠肠道巨噬细胞向促炎型分化加重微炎症状态研究

目的探讨尿毒症大鼠肠道巨噬细胞功能及其与尿毒症微炎症状态的关系。方法 SD大鼠随机分为:5/6肾切除手术建立的尿毒症组和假手术组。检测血中内毒素、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。透射电子显微镜观察肠巨噬细胞形态;检测肠组织切片中巨噬细胞活化指标CD11a和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达;realtime-PCR、Western Blot法检测巨噬细胞表面的早期生长因子1(early growth response gene 1,EGR1)及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)mRNA和蛋白的表达;检测肠组织切片中细胞间粘附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、TGF-β的表达。结果尿毒症组与假手术组相比血中内毒素、IL-6、TNF-α和CRP明显增加水平显著增加(t值分别为-5.145,-3.776,-3.553,-10.468;P值分别为0.001,0.001,0.002,0.001)。尿毒症组的巨噬细胞突触和伪足较假手术组少。尿毒症大鼠肠组织内CD11a和iNOS染色表达多;EGR1及TLR4mRNA和蛋白表达多;ICAM-1、转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)在尿毒症组表达多。结论尿毒症状态下肠道巨噬细胞向M1型活化;巨噬细胞吞噬功能障碍;巨噬细胞炎症级联反应通过脂多糖激活EGR1及TLR4,引起iNOS、TGF-β表达增多,血中CRP、IL-6、TNF-α水平增加,加重微炎症状态。     

IL-4对脂多糖激活的小鼠小胶质细胞炎症相关因子表达的影响

目的探讨白细胞介素4（IL-4）对脂多糖（LPS）诱导激活的小鼠小胶质细胞分泌的肿瘤坏死因子仪（TNF-α）、白细胞介素1β（IL—1β）、白细胞介素6（IL-6）和基质金属蛋白酶（MMP9）表达的影响。方法用IL-4处理经LPS激活的小鼠小胶质细胞24h以酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和MMP9的浓度,同时通过RT—PCR技术检测小胶质细胞各种细胞因子mRNA水平的表达。结果LPS能够激活小胶质细胞,使TNF-α、IL—1β、IL-6和MMP9的表达量与对照组相比明显升高;IL-4能够降低LPS激活的小胶质细胞分泌TNF—α、IL-1β、IL-6和MMP9及其mRNA表达的水平。结论小鼠实验结果提示：IL-4可能通过抑制活化的小胶质细胞炎症相关因子的产生而发挥神经保护作用。     

益母草碱对糖尿病脑病海马神经元细胞损伤及炎症的影响

目的 探究益母草碱对糖尿病脑病（DE）海马神经元细胞损伤及炎症的影响。方法 利用高糖诱导的海马神经元（HT-22）细胞建立DE细胞模型,同时给予益母草碱干预,24 h后利用四氮唑盐比色法（MTT）检测海马神经元细胞损伤,利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,利用Western blot检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白表达情况。结果 益母草碱能显著抑制高糖诱导的HT-22细胞活力,并降低IL-1β、TNF-α、IL-6水平。Western blot实验结果显示,益母草碱可以降低凋亡蛋白caspase-3、Bax的表达,促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,提高高糖诱导的HT-22中BDNF的表达。结论 益母草碱能通过抑制海马神经元凋亡及炎症反应来改善DE中高糖诱导的海马神经元损伤。     

不同细胞因子和蛋白与妊娠期高血压综合征相关性的临床研究

目的探讨血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素4(IL-4)、免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM,补体C3、补体C4、C反应蛋白(CRP)在不同程度妊娠高血压综合征(简称妊高征)中的变化规律及其临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测114例妊高征患者(其中轻度子痫前期39例、重度子痫前期75例)和93例正常晚期妊娠妇女血清TNF-α、IL-12和IL-4水平,采用免疫比浊法检测IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4和CRP。结果妊高征组TNF-α、IL-12和CRP明显高于正常晚期妊娠组(P均0.001),IL-4、IgG、IgM、补体C3和补体C4明显低于正常晚期妊娠组(P均0.001)。重度子痫前期组TNF-α、IL-12和CRP明显高于轻度子痫前期组(P0.05、P0.001、P0.001),IL-4、IgG、补体C3和补体C4明显低于轻度子痫前期组(P均0.05)。妊高征组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组、正常晚期妊娠组血清CRP与IL-12、TNF-α呈正相关(P0.05),血清TNF-α与补体C3、补体C4呈负相关(P0.05)。结论妊高征患者血清TNF-α、IL-12、IL-4、IgG、IgM、补体C3、补体C4和CRP出现不同程度的异常。IL-12、IL-4、IgG、补体C3、补体C4和CRP可反映妊高征的严重程度,可作为判断病情的指标。     

手足口病患儿外周血单个核细胞中TLR4通路检测与病情、炎症反应、免疫功能的关系

目的研究手足口病(HFMD)患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中Toll样受体4(TLR4)通路与病情、炎症反应、免疫功能的关系。方法回顾性选择2016年7月至2019年4月期间在中国医科大学附属第一医院诊断为HFMD的患儿并根据病情分为轻症组和重症组,另取同期体检的健康儿童作为对照组。测定各组对象PBMCs中TLR4、核因子κB(NF-κB)的表达水平,血清中炎症细胞因子、免疫球蛋白的含量,外周血中免疫细胞的含量。分析HFMD患儿TLR4的表达水平与血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IgM、IgG、IgA、CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、CD19^+B细胞的相关性。结果重症组和轻症组患儿PBMCs中TLR4、NF-κB的mRNA相对表达水平及血清中C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、免疫球蛋白M(IgM)的含量均明显高于对照组血清中IgG、IgA的含量及外周血中CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD^8^+T细胞、CD19^+B细胞的含量均明显低于对照组(P <0.05),且重症组患者上述指标的变化较轻症组更为显著(P <0.05);TLR4与CRP、TNF-α、IL-6、IgM呈正相关,与IgG、IgA、CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、CD19^+B细胞呈负相关。结论手足口病患儿PBMCs中TLR4通路的过度激活与病情加重、炎症反应激活、免疫功能紊乱有关。     

TLR4/NF-κB通路及相关细胞因子表达水平变化与急性胰腺炎病情发展的关系

【目的】探讨Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路及相关细胞因子表达水平变化与急性胰腺炎(AP)病情发展的关系。【方法】将本院收治的127例AP患者依据病情严重程度分为AP组(75例)和重症急性胰腺炎(SAP)组(52例),并选择同一时间段在本院进行体检的80例健康志愿者作为对照组。比较三组对象的临床资料、TLR4、NF-κB表达水平及血清炎性因子水平。采用Pearson相关性分析TLR4/NF-κB通路及相关细胞因子表达水平变化与AP床旁严重度指数(BISAP)的关系。【结果】AP组和SAP组血清脂肪酶、淀粉酶均显著高于对照组(P<0.05)。AP组和SAP组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA水平均高于对照组(P<0.05),且SAP组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA均显著高AP组(P<0.05)。AP组和SAP组的白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平均显著高于对照组(P<0.05);SAP组IL-6、TNF-α及IL-1β水平均显著高于AP组(P<0.05)。TLR4 mRNA、NF-κB mRNA、TNF-α及IL-1β水平与BISAP评分均呈正相关(P<0.05),IL-6水平与BISAP评分无相关性(P>0.05)。【结论】TLR4/NF-κB通路及相关细胞因子表达水平变化与AP病情发展具有一定的相关性,可作为临床评估AP疾病进展的参考依据。     

来氟米特对糖尿病肾病大鼠炎性因子的影响研究

目的研究免疫抑制剂来氟米特对糖尿病肾病(DN)模型大鼠血清及肾组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法成年健康清洁级SD雄性大鼠45只,随机分为假手术组(15只)、模型组(15只)和来氟米特组(15只)。制作DN大鼠模型成功后,采用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,并采用RT-PCR方法检测3组大鼠肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达。结果 ELISA法检测结果显示,模型组与来氟米特组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P0.05);来氟米特组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平较模型组降低,差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR检测结果表明,与假手术组大鼠比较,模型组和来氟米特组肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达量均显著升高,差异有统计学意义(P0.05),而来氟米特组肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达则明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论来氟米特可以抑制DN大鼠肾组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达,从而延缓DN进展。     

lncRNA HOTAIR通过介导JAK2/STAT3通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制

目的探究长的非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义基因间RNA(HOTAIR)通过介导Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制。方法前瞻性分析2019年6月至2020年7月三二〇一医院收治的接受肾上腺肿瘤手术切除的60例患者,提取人原发性肿瘤和邻近的健康组织,并分别作为病理观察组和对照组。将大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株PC12分为对照组(PC12细胞系)、过表达组(lncRNA HOTAIR过表达转染)和敲低组(shRNA lncRNA HOTAIR转染)。RT-PCR检测lncRNA HOTAIR的mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞增殖能力;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测促炎因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)]水平;蛋白印迹分析JAK2/STAT3、核因子κB(NF-κB)相关通路蛋白的表达。结果病理观察组较健康对照组lncRNA HOTAIR mRNA表达升高(P<0.05)。转染24 h和48 h后,3组细胞增殖率均显著高于转染12 h(P<0.05);对照组和过表达组细胞增殖能力均随转染时间显著增强(P<0.05);转染24 h和48 h后,过表达组细胞增殖数目较对照组显著升高(P<0.05),敲低组细胞增殖数目较HOTAIR过表达组显著降低(P<0.05)。与对照组相比,过表达组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05),敲低组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05),与过表达组相比,敲低组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论lncRNA HOTAIR通过上调促炎细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)水平,激活了JAK2/STAT3通路,调节肾上腺肿瘤细胞的增殖和凋亡。     

2型糖尿病患者脂联素与炎症因子相关性研究

目的检测胰岛素抵抗2型糖尿病(T2DM)患者血清脂联素与炎症因子的水平并分析其相关性。方法选择胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)高于2.69的T2DM患者(T2DM组)和HOMA-IR为1.00的健康人(CON组)作为研究对象,检测并比较两组研究对象间血清脂联素、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-18(IL-18)的差异,分析T2DM患者血清脂联素与炎症因子的相关性。结果 T2DM患者hs-CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-18水平均显著高于CON组,而脂联素和IL-10水平显著低于CON组,差异均有统计学意义(P0.05)。将TDM组患者血清脂联素和hs-CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和IL-18进行相关性分析,表明血清脂联素和hs-CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-18均呈负相关(rs0,P0.05),与IL-10呈正相关(rs0,P0.05)。结论胰岛素抵抗T2DM患者处于炎症紊乱状态,血清脂联素显著低于健康人,其水平与炎症因子密切相关。     

关节液各检验指标与关节炎类型的相关性

目的找到关节液中各检验指标的改变与不同病因之间的相关性。方法将关节炎病例按常见类型分为6组,即骨性关节炎、反应性关节炎、痛风性关节炎、类风湿关节炎、创伤性关节炎、其他类型关节炎。每组随机选择37例患者,抽取关节液,并检测关节液中白细胞(WBC)、总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、糖(GLU)、尿酸(UA)、抗链球菌溶血素O(ASO)、类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、补体C3、补体C4、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,将检测数据进行分组统计。结果除CRP、IgG、IgA外,其余各测定指标(WBC、TP、ALB、GLU、UA、ASO、RF、IgM、C3、C4、IL-1β、IL-6、TNF-α)均存在差异。结论关节液中诸多成分的水平与病因相关。     

Toll样受体4在四氯化碳致大鼠慢性肝损伤中的作用机制研究

目的:动态观察肝Kupffer细胞(KCs)Toll样受体4(TLR4)mRNA及蛋白在四氯化碳(CCl4)致大鼠慢性肝损伤中的表达及作用.方法:以CCl4诱导慢性肝损伤大鼠模型,于0、4、6、8、10周采集标本,分离肝组织KCs并以逆转录聚合酶链反应检测TLR4mRNA的表达;用基质显色法测定大鼠血清内毒素水平:放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素1-β(IL1-β)水平;TLR4蛋白和核因子kB(NF-kB)蛋白采用免疫组化SP法检测.结果:0周组肝组织TLR4蛋白、KCs,TLR4 mRNA几乎无表达,NF-kB蛋白和炎症积分水平也处于较低水平;4、6、8、10周组肝组织TLR4蛋白、NF-kB蛋白、炎症积分和KCs TLR4 mRNA以及血清内毒素、TNF-α、IL-1β水平明显升高,同0周组比较差异有显著性(P<0.001).NF-kB蛋白、TLR4蛋白、KCs TLR4 mRNA和TNF-α在第10周时较第8周有轻度下降:肝KCs TLR4 mRNA的表达与血浆内毒素水平呈正相关(r=0.845,P<0.001).结论:CCl4诱导的慢性肝损伤中,内毒素可上调KCs TLR4的表达,而TLR4的高表达进一步造成肝脏的损伤.     

胃饥饿素在老年阿尔茨海默病患者炎症因子调控中的途径和作用探讨

目的探讨胃饥饿素(Ghrelin)在老年阿尔茨海默病(AD)患者炎症因子调控中的途径和作用。方法收集某院2013—2018年收治的老年AD患者173例作为观察组,选择同期于某院进行体检的老年健康人142例作为对照组。比较两组Ghrelin、TLR4阳性率和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)和C反应蛋白(CRP)水平,并进行亚组分析和相关性分析。结果随着AD病情加重,Ghrelin水平呈逐渐下降趋势,各亚组水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);而TLR4阳性率、TNF-α、IL-6、IL-1β和CRP呈增高趋势,各亚组水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。相关性分析显示,Ghrelin与TLR4阳性率、TNF-α、IL-6、IL-1β和CR P均呈负相关关系(P 0.05);TLR 4阳性率与TNF-α、IL-6、IL-1β和CR P均呈正相关系(P0.05)。结论老年AD患者体内,Ghrelin可能通过TLR4途径调控炎症因子,如TNF-α、IL-6、IL-1β和CRP的表达,从而影响AD自然病程进展。-     

抗β2GPI/β2GPI复合物激活THP-1细胞表达炎性相关因子

目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达,用免疫荧光染色法及western blot观察THP-1细胞表达IL-6、IL-8、TNF-α蛋白的情况。荧光定量PCR及western blot观察Toll样受体4(TLR4)途径抑制物(TAK-242)干预抗β2GPI/β2GPI复合物对THP-1细胞的刺激作用。结果抗β2GPI/β2GPI复合物(100μg/mL)刺激THP-1细胞不同时间,可使细胞表达IL-6、IL-8及TNF-αmRNA水平逐渐上升,于刺激2 h时IL-6、IL-8及TNF-α达到峰值(P<0.01),免疫荧光染色及western blot证实细胞表达IL-6、IL-8及TNF-α蛋白水平也明显增加。TAK-242(5μmol/L)可显著抑制抗β2GPI/β2GPI复合物诱导的细胞IL-6、IL-8及TNF-α表达。结论抗β2GPI/β2GPI复合物通过TLR4途径,激活THP-1细胞表达炎性细胞因子IL-6、IL-8及TNF-α,参与抗磷脂综合征的病理机制。     

丹参酮ⅡA对TLR4/NF-κB信号通路下游炎症因子的影响及其临床意义

目的探讨丹参酮ⅡA对大鼠IRI肾脏TLR4/NF-κB信号通路以及下游炎症因子的影响,分析其对肾脏保护的可能机制。方法建立大鼠肾脏缺血再灌注(IRI)模型,将60只SD大鼠随机均分为空白组、对照组、丹参酮ⅡA组、ST2825组及Bay11-7082组,行对应处理,24 h后取肾脏标本,行HE法观察组织病理学形态,以PT-PCR法、Western Blotting法检测TLR4、NF-κB mRNA及蛋白水平,行酶联免疫吸附试验检测组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果与空白组相比,对照组肾组织病理学明显改变,且TLR4、NF-κB mRNA及蛋白水平,组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平均明显上升;丹参酮ⅡA、ST2825及Bay11-7082均可有效保护肾组织,表现为细胞肿胀、坏死和脱落程度较轻,同时炎症反应更轻,表现为TLR4、NF-κB mRNA及蛋白水平,组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,与对照组相比,上述指标差异均有统计学意义(P0.05)。结论丹参酮ⅡA对缺血再灌注肾脏组织有保护作用,其机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路、减少下游炎症因子有关。     

PBMC中TLR1、TLR2、TLR6在卵巢癌微环境中的作用研究

目的观察卵巢癌患者外周血单个核细胞(PBMC)与卵巢癌细胞共生长环境中,PBMC中Toll样受体(TLR)信号通路活化情况及前炎症细胞因子表达水平,研究TLR1、TLR2及TLR6在卵巢癌发生发展中的可能机制。方法采用密度梯度离心法分离PBMC,利用PBMC和卵巢癌细胞系SK-OV-3共培养体系及抗TLR1、TLR2、TLR6抗体中和实验,RT-PCR法检测细胞中前炎症细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA表达水平;利用免疫印迹试验检测MyD88、TRAF6、TANK、核因子(NF)-κB和P-NF-κB的表达水平。结果卵巢癌患者PBMC+SK-OV-3Transwell共培养组较PBMC单独培养组,TLR信号通路蛋白MyD88、TRAF6、TANK及P-NF-κB表达上调,IL-1β、IL-6及IL-8前炎症细胞因子的mRNA表达水平明显增加(Fold=1.74,Fold=1.92,Fold=1.65,P0.05),而TNF-a mRNA表达水平无明显改变;与PBMC单独培养组比较,良性疾病患者及健康对照者IL-1βmRNA表达水平明显下调(Fold=0.71,P0.05;Fold=0.72,P0.05),TNF-α、IL-6、IL-8mRNA及TLR信号通路蛋白MyD88、TRAF6、TANK及P-NF-κB均无明显改变。抗体中和实验显示,卵巢癌患者PBMC+SK-OV-3+Anti-hTLR1-IgG Transwell共培养组、PBMC+SK-OV-3+Anti-hTLR2-IgG Transwell共培养组、PBMC+SK-OV-3+Anti-hTLR6-IgG Transwell共培养组中前炎症细胞因子IL-1β(Fold=0.16,Fold=0.31,Fold=0.29,P0.05)、IL-6(Fold=0.14,Fold=0.20,Fold=0.28,P0.05)mRNA表达水平较PBMC+SK-OV-3Transwell共培养组明显下调。结论卵巢癌生长微环境中,TLR1/TLR2/TLR6介导的信号通路活化是诱导卵巢癌患者PBMC中前炎症细胞因子表达上调的主要途径,在卵巢癌的发生、发展中发挥一定作用。