耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药分子机制研究

目的了解该院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制。方法选择对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌(KP)7株,采用K-B法对其进行药敏实验。PCR检测18种耐药基因,分析耐亚胺培南KP的耐药表型及其基因型。结果 7株KP对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、复方磺胺甲噁唑较为敏感,对其他常用抗菌药物均耐药。耐药基因KPC、ant(3′′)-Ⅰ、SHV、CTX-M、ant(2′′)-Ⅰ的阳性检出率较高。结论分离的对亚胺培南耐药的KP携带多种耐药基因,其耐药机制主要与KPC有关,在此基础上可能存在其他耐药机制。     

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药机制及同源性分析

目的了解我院临床分离碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药机制及流行病学特点。方法收集2015-2017年佳木斯大学附属第一医院临床分离CRKP 31株,采用Vitek 2 Compact检测常用抗菌药物的敏感性;PCR法扩增碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP-4、blaIMP-8、blaVIM-1、blaVIM-2、blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-48、blaOXA-51、blaOXA-58)及其他β内酰胺酶基因(blaDHA、blaACC、blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1、blaCTX-M-9);多位点序列分型(MLST)分析肺炎克雷伯菌ST分型。结果 31株CRKP中28株携带blaKPC-2基因,2株携带blaIMP-4,同时携带blaKPC-2和blaNDM-5基因1株;其中26株菌同时携带blaCTX-M-15、blaSHV和blaTEM基因。25株同时携带blaKPC-2、blaCTX-M-15、blaSHV和blaTEM基因。28株菌为ST76型,其余3株分别为ST323、ST896和ST2964型。结论产blaKPC-2是我院CRKP主要耐药机制,并存在ST76型克隆流行。     

耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌耐药基因研究

目的了解对碳青霉烯类药物耐药的肺炎克雷伯菌(CRKP)碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集本院2013年1月至2016年6月临床标本中分离的630株肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定和药敏检测以及改良Hodge试验筛选CRKP,采用聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因,采用多位点序列分型(MLST)技术对CRPK进行分子遗传学分析。结果 630株肺炎克雷伯菌中,61株对亚胺培南耐药,为CRKP,占9.7%,CRKP对多种临床常用抗菌药物均显著耐药,对替加环素具有良好的敏感性。PCR结果显示59株CRKP携带碳青霉烯酶基因,其中53株携带bla KPC-2型基因(89.8%),4株携带bla NDM-1型基因(6.8%),2株携带bla OXA-48型基因(3.4%)。MLST分型主要以ST11为主(49株,80.3%)。结论我院CRKP基因型主要为KPC-2型,另外有散在NDM-1和OXA-48型,MLST分型主要为ST11型。     

临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药机制研究

目的探究肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的分子机制。方法通过Carba NP确证试验检测碳青霉烯酶表型;PCR扩增碳青霉烯酶基因,质粒介导AmpC酶基因,超广谱β-内酰胺酶基因;采用多序列位点分型(MLST)对菌株进行遗传相关性分析。结果 50株耐破青霉烯肺炎克雷伯菌中,42株PCR扩增KPC-2阳性,1株NDM-1P阳性,其余7株未检测到碳青霉烯酶基因;产KPC-2肺炎克雷伯菌相关耐药基因的携带率为:bla CTX-M 21.5%,bla SHV 42.9%,bla TEM 69.1%和bla DHA4.8%;MLST结果显示42株KPC-2阳性菌株中,37株为ST11型。结论 KPC-2的产生是肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制,且该院存在着ST11产KPC-2肺炎克雷伯菌的暴发流行。     

耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌的耐药机制和同源性研究

目的研究肺炎克雷伯菌对耐碳青霉烯类抗生素的耐药机制和同源性。方法对卫生部中日友好医院从2006年1月至2011年2月临床标本中分离的肺炎克雷伯菌,用V1TEK-Ⅱ全自动微生物分析仪和常规方法进行菌种鉴定和药敏试验,筛选对碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌;用三维试验和改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;用PCR扩增碳青霉烯酶基因,并对扩增产物测序,确定其基因型;接合试验研究其传播机制;通过基因外重复回文(REP)-PCR分析其同源性。结果共检测得4株耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌,其中2株菌对所测试的所有抗菌药物均耐药。1株菌产IMP-4型金属酶;未检测出其他碳青霉烯酶基因。转移接合试验呈阴性;REP-PCR显示4株菌属于3个不同的克隆型。结论该院出现碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌,属于不同克隆型,耐药机制复杂,产IMP-4型金属酶是其对碳青霉烯类抗生素耐药的原因之一。     

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学研究

目的研究该院临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制。方法分析该院临床微生物实验室分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌株(CRKP),采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和全自动微生物分析仪(VITEK-2compact)鉴定细菌并进行药物敏感试验分析,采用改良Hodge试验(MHT)和碳青霉烯酶灭活试验(CIM)进行表型确证;聚合酶链式反应(PCR)法检测碳青霉烯酶基因型,并进行基因测序BLAST比对和多位点序列分析(MLST)。结果 46株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物均表现出高耐药性;耐碳青霉烯表型确证均呈阳性,PCR检测结果显示其中包括A类碳青霉烯酶(KPC-2型)和B类金属酶(NDM-1和IMP-4),MLST分型以ST11型为主。结论该院分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制主要以产KPC-2型碳青霉烯酶的ST11型为主,同时有少量其他型别的检出,加强院内感染监测强度和力度,以及进一步规范抗菌药的合理使用显得尤为重要。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药表型检测的研究

目的 研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药表型检测的价值。方法 对2018-2021年该院分离的450株肺炎克雷伯菌(KP)进行分析,统计分离情况,分析KP的耐碳青霉烯类表型,同时选取替加环素、美罗培南、亚胺培南等药物进行药敏试验;并对CRKP进行耐药表型分析,进而对比常见耐药表型的耐药及分布情况。结果 450株KP对亚胺培南、美罗培南、厄他培南的耐药率分别为6.00%、6.00%、7.78%,其中CRKP共36株。同源性分析显示,36株CRKP中出现3种主要克隆型,有11株为ST11型,7株为ST2305型,5株为ST2390型,总体以≥15岁人群感染为主,住院时间较长,痰液标本培养获得居多,主要分布于ICU、肺病科、老年病科。其中ST11型、ST2305型、ST2390型3种优势菌株对替加环素的耐药率均低于20%,对磺胺类药物的耐药率均低于65%,但ST11型菌株对喹诺酮类药物的耐药率高于90%,ST2305型对氨基糖苷类药物的耐药率高于85%。结论 耐药表型检测适合CRKP流行病学调查,结合常规药敏试验,能有效预防和控制CRKP的播散。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的临床特征及耐药机制研究

目的 调查耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CR-KP）感染的临床特征及耐药机制,并分析感染CR-KP 高毒力株（carbpenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae,CR-hvKP）的危险因素。方法 收集2016 年1 月～ 2020 年12 月从德阳市人民医院住院患者送检标本中分离的CR-KP,分析CR-KP 检出变化趋势,比较CR-KP 在不同科室及不同标本类型的分布情况,检测CR-KP 对常用抗生素的耐药性及碳青霉烯酶基因携带情况;收集CR-KP 感染患者的临床资料,比较高毒力株感染组（CR-hvKP 组）和非高毒力株感染组（CR-cKP组）的危险因素。结果 总计分离出89 株CR-KP,在肺炎克雷伯菌中占比3.47%（89/2 562）,总体上呈逐年上升趋势。CR-KP 主要来源于ICU 16 株（17.98%）、感染科13 株（14.61%）和肿瘤科13 株（14.61%）;标本类型主要为痰液45 株（50.56%）、尿液14 株（15.73%）和脓液11 株（12.36%）。CR-KP 对大部分常用抗生素耐药,但对头孢他啶-阿维巴坦和黏菌素耐药率较低。CR-KP 碳青霉烯酶基因检出率为78.65%（70/89）,主要为blaKPC,blaNDM。年龄≥ 60 岁、糖尿病、肝胆疾病、机械通气、留置导管和入住ICU 共6 个因素,在CR-hvKP 组和CR-cKP 组之间的差异均有统计学意义（χ2 或Fisher =4.973 ～ 19.377,均P＜ 0.05）。经多因素logistic 回归分析,糖尿病（OR=10.947,95%CI:1.751 ～ 68.424,P =0.010）、入住ICU（OR=16.012,95%CI:2.589 ～ 99.036,P =0.003）是CR-hvKP 感染的独立危险因素。结论 该院CR-KP 检出总体上呈逐年上升趋势,携带blaKPC,blaNDM 是CR-KP 的主要耐药机制,糖尿病、入住ICU 是CR-hvKP感染的重要危险因素。     

碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的耐药机制与同源性分析

目的分析碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的临床分布、耐药表型、耐药基因和同源性,为临床抗菌药物的合理使用及减少医院感染的暴发流行提供实验室依据。方法收集宣武医院2015年1月至2016年6月临床分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌菌株,采用Whonet5.6分析耐药情况及分布,产酶表型检测采用改良Hodge试验和碳青霉烯酶失活法(CIM)试验,PCR方法扩增耐药相关基因(KPC、OXA48、NDM、IMP、VIM、TEM、DHA),运用质谱技术分析试验菌的同源性。结果共收集耐碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌50株,占同期该院分离肺炎克雷伯菌的比例为28.1%(50/178),对常用抗菌药物均表现出高耐药性;50例中Hodge试验和耐碳青霉烯失活试验阳性者均占84.0%(42/50),二者同时阳性者占82.0%(41/50),符合率为97.6%。PCR扩增KPC基因型的阳性率为82.0%(41/50),其他耐药基因型阳性检出率分别为TEM 52.0%(26/50)、IMP 20.0%(10/50)、DHA14.0%(7/50)、VIM 12.0%(6/50)、NDM 6.0%(3/50)和OXA48 2.0%(1/50),同时存在3种耐药基因型的菌株占36.0%(18/50),同时存在2种耐药基因型的菌株占26.0%(13/50),未检测到任何耐药基因菌株占10.0%(5/50)。质谱同源性分析分为两大群,包括A1(42.0%)、A2(25.5%)和B(33.3%)型。结论该院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的临床分离率高,携带NDM、DHA、IMP、VIM、TEM、OXA-48等多种耐药基因型,以KPC-2基因型最多见;同源性以A型为主要流行株。     

产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究

目的分析产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的分子机制。方法收集福建医科大学附属协和医院2011年8月~2012年8月临床分离非重复耐碳青霉烯类抗生素的产酸克雷伯菌菌株5株,检测厄他培南(ETP)、亚胺培南(IPM)及美罗培南(MEM)的最低抑菌浓度(MIC)筛查菌株;采用改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型鉴定、琼脂稀释法测其药敏;聚合酶链反应(PCR)扩增超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、碳青霉烯酶耐药基因;对检出碳青霉烯类基因的产酸克雷伯菌进行接合试验。结果 5株产酸克雷伯菌对17种抗菌药物中耐药率≥80%的有9种,分别为头孢西丁、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、厄他培南、亚胺培南、庆大霉素、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南。对替加环素、美罗培南、多黏菌素B和哌拉西林/他唑巴坦的耐药性较低。改良Hodge试验检出4例产碳青霉烯酶。2株携带碳青霉烯类耐药基因(1株仅IMP-4阳性,1株KPC-2和IMP-8同时阳性),3株检出β-内酰胺酶基因。结论福建医科大学附属协和医院产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素耐药机制可能为携带IMP及KPC基因,并且发现了产酸克雷伯菌同时携带两种碳青霉烯类耐药基因的现象。     

中国ST11耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药分子机制研究进展

序列型11(ST11)耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)携带bla产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2已广泛分布于世界各地,在中国也频频有文献报道。因为缺乏治疗选择,这些耐多药微生物对几乎所有可用的抗菌药物均具有耐药性,并引起与高发病率和病死率相关的严重感染。在中国,CRKP的大部分传播可归因于产生肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的生物体,其中大部分是由ST11克隆产生的。了解耐药性的分子进化机制及ST11 CRKP在中国的流行情况将有助于控制和预防耐药细菌的出现和暴发。     

常熟地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药机制及同源性分析

目的分析常熟地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性和分子流行特征。方法收集2017年1月至12月常熟地区分离的34株CRKP菌株,使用Vitek 2系统进行细菌鉴定及药敏试验,PCR筛选碳青霉烯酶基因并测序,质粒接合转移实验验证耐药质粒的可转移性,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果 34株CRKP对亚胺培南、美罗培南的耐药率均为100%,有33株检测到耐药基因,其中30株携带bla_(KPC-2)基因、4株携带bla_(NDM-1)基因、1株携带bla_(IMP-4)基因(有2株同时携带bla_(KPC-2)和bla_(NDM-1)基因)。质粒接合试验成功获得25株bla_(KPC-2)阳性质粒。同源性分析显示共有11种型别,其中A型15株,B型9株,C型有2株,其余型各1株。结论常熟地区的CRKP以携带bla_(KPC-2)质粒为主,菌株克隆以A型和B型为主,存在小范围的克隆性传播。     

医院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的耐药特征分析

目的 分析碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的耐药表型和基因型等特征,为临床抗感染治疗提供实验依据.方法 收集2017年5月至2021年4月间住院患者感染性标本中分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2 compact全自动细菌鉴定/药敏分析系统对碳青霉烯耐药菌株进行鉴定和药敏试验,应用SPSS Statistics ...     

新生儿耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药性及耐药基因研究

目的研究临床分离自新生儿的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药性及碳青霉烯酶耐药基因类型。方法收集2013年12月至2015年12月南宁市2家妇幼保健院住院新生儿临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌8株。使用生物梅里埃公司的VITEK-2Compact全自动细菌鉴定仪对细菌进行鉴定以及菌株最低抑菌浓度(MIC)检测。改良Hodge试验筛选碳青霉烯酶阳性菌株,乙二胺四乙酸(EDTA)纸片增效试验筛选产金属酶菌株。PCR扩增碳青霉烯酶基因(KPC、GES、SME、NMC、IMI、IMP、NDM-1、VIM、SIM),并对PCR阳性产物测序鉴定,测序结果与GenBank数据库进行比对。结果药敏结果显示,8株耐药菌株对大部分临床常用抗菌药物高度耐药,对氟喹诺酮类抗菌药物和氨基糖苷类抗菌药物有较高的敏感性。表型确认试验显示,6株改良Hodge试验阳性,7株EDTA协同试验阳性。8株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌均携带IMP-4碳青霉烯酶基因,未检出KPC、GES、SME、NMC、IMI、NDM-1、VIM、SIM型碳青霉烯酶基因。结论本地区新生儿碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物的耐药率较高,新生儿临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌主要耐药机制是产B类碳青霉烯酶,IMP-4是其主要酶型。     

耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药基因检测及分析

目的 分析耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)耐药情况与耐药相关基因的关系,了解其耐药机制. 方法 采用PCR技术检测29株碳青霉烯类耐药KPN与产碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,β-ESBLs)、ampC酶及喹诺酮类耐药相关基因blaKPC-2、blaIMP-4、blaCTX-M、blaCTX-M-15、blaVIM-1、blaTEM、blaSHV、ampC、gyrA、parC,并对KPC-2、ampC、gyrA基因进行序列分析. 结果 用PCR技术证实了29株为产KPC、IMP型碳青霉烯酶的KPN,并且携带TEM、SHV型β-ESBLs,其中18株同时编码ampC基因;29株待测菌均检出喹诺酮类耐药相关gyrA、parC基因.KPC基因片段同源性分析显示,待测菌株之间核苷酸同源性为98％～100％,氨基酸同源性为97％～100％;与肺炎克雷伯氏菌Kpn-1504株之间的核苷酸同源性最高,为99％～100％.gyrA 、parC基因突变率分别为58.6％、62.1％.结论产KPC-2、IMP-4型碳青霉烯酶同时携带多种β-ESBLs、ampC基因及突变的喹诺酮类耐药相关gyrA、parC基因的KPN耐药情况更加严重,同时存在克隆性流行可能.     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及同源性分析

目的了解急诊重症监护病房(ICU)分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因携带情况和菌株同源性。方法收集2015年7月至2016年8月分离自徐州医科大学附属医院急诊ICU的CRKP 19株,PCR检测碳青霉烯类耐药基因、超广谱β内酰胺类相关基因及头孢菌素类耐药基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)进行菌株分子分型。结果 19株CRKP菌株中18株检出碳青霉烯类耐药基因,包括blaKPC-2型17株和blaNDM-5型1株;18株菌均携带ESBLs基因,其中blaSHV-12型8株、blaSHV-11型3株、blaSHV-2a型5株,blaTEM-1型15株、blaCTX-M-65型10株,blaCTX-M-15型3株,blaCTX-M-14及blaCTX-M-27型各1株;13株检出头孢菌素类耐药基因,且均为blaDHA-1型。PFGE分型显示19株CRKP可以分为4个型和4个亚型,包括A1型12株,A2型、A3型、A4型各1株,B型2株,C型及D型各1株。MLST显示ST11型15株,ST48型2株以及ST37型1株,1株菌未能分型。其中15株blaKPC-2阳性ST11型菌株PFGE分型为型别A。结论我院急诊ICU存在携带blaKPC-2基因ST11型CRKP菌株克隆传播,应加强急诊ICU的耐药性监测以及病房的隔离和消毒。     

重症监护室耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制和同源性分析

目的探讨安徽医科大学第一附属医院4个重症监护室(ICU)中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制和流行状况,为医院感染控制提供依据。方法收集4个ICU病房中CRKP菌株39株,采用纸片扩散法和Vitek 2 Compact仪器法测定临床常见抗菌药物的敏感性,用Carba NP试验对碳青霉烯酶进行筛选,同时对超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)、碳青霉烯酶基因进行PCR扩增和序列分析,用基质辅助激光解吸电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)技术及多位点序列分型(MLST)进行同源性分析。结果 PCR检测基因型显示36株CRKP以产KPC-2型酶为主,部分菌株同时拥有ESBL和AmpC耐药基因。MALDI-TOF MS将39株CRKP分为3大簇,MLST结果显示35株菌均为ST11型,ST379、ST751、ST307、ST490各有1株,经eBURST在线软件分析ST11与ST379、ST751的亲缘关系较近,来源于同一克隆株。结论 4个ICU病房中CRKP以产KPC-2型酶为主,是CRKP对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制。37株CRKP高度同源,提示不同ICU病房间应进一步加强感染控制。     

一例碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌耐药机制研究

目的研究1株碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500的耐药机制。方法采用浓度梯度法（E-test）测定细菌的抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）,采用接合实验、聚合酶链反应（PCR）、质粒抽提、探针杂交印迹试验（Southern blot）、等电聚焦电泳及耐药基因克隆测序分析细菌的耐药机制。结果接合实验、质粒电泳和Southern blot结果显示耐药基因位于一个50 kb的可转移质粒上;等电聚焦电泳显示3条β-内酰胺酶条带,等电点（PI）分别为9.0、6.7（KPC-2）、5.4。PCR产物克隆分析比对为blaKPC-2型。结论碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500携带由质粒介导的KPC-2酶。     

一例碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌耐药机制研究

目的研究1株碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500的耐药机制。方法采用浓度梯度法(E-test)测定细菌的抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),采用接合实验、聚合酶链反应(PCR)、质粒抽提、探针杂交印迹试验(Southern blot)、等电聚焦电泳及耐药基因克隆测序分析细菌的耐药机制。结果接合实验、质粒电泳和Southern blot结果显示耐药基因位于一个50 kb的可转移质粒上;等电聚焦电泳显示3条β-内酰胺酶条带,等电点(PI)分别为9.0、6.7(KPC-2)、5.4。PCR产物克隆分析比对为blaKPC-2型。结论碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500携带由质粒介导的KPC-2酶。