补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠始基卵泡募集因子GDF-9、AMH表达的影响

目的:研究补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢功能的调节,探讨补肾调冲方通过调控卵巢始基卵泡募集因子GDF-9及AMH调节卵巢功能及治疗POF的机制。方法:建立半乳糖致POF大鼠模型,将造模成功的POF大鼠随机分为模型组与治疗组,每组各20只,另设正常对照组。于PND80开始,治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液,模型组及空白组大鼠每日灌服等体积生理盐水,共4周。实验结束后光镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目,ELISA法检测各组大鼠血清FSH、LH及E2水平,Real-time PCR法检测各组大鼠卵巢内GDF-9及AMH mRNA表达水平。结果:①补肾调冲方可使POF大鼠动情周期趋于正常,并能明显降低血清FSH、LH水平(P<0.05),提高E2水平(P<0.05),从而改善POF大鼠血清高促性腺激素低雌激素状态;组织形态学检测结果显示治疗组大鼠卵巢体积较POF模型组增大,各级卵泡生长较好,颗粒细胞层次多,黄体数目明显增多;始基卵泡、窦前卵泡及窦状卵泡数目均较模型组增多,闭锁卵泡数目则明显减少。②与正常组比较,POF大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平均明显降低(P<0.01),而治疗组大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:补肾调冲方治疗POF的作用机制之一可能是通过上调卵巢局部始基卵泡募集因子GDF-9及AMH的表达,促进卵泡的生长发育,抑制卵泡的过度耗竭与闭锁,恢复始基卵泡的正常募集状态,从而抑制卵巢功能的过早衰竭。     

补肾调冲方对半乳糖致卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响

目的：研究补肾调冲方对半乳糖致卵巢早衰（POF）大鼠卵巢功能的影响,探讨补肾调冲方调节卵巢功能的作用机理。方法：将POF模型大鼠随机分为模型组与补肾调冲方治疗组,另设正常组,分别给相应药物或生理盐水灌胃4周。实验结束前10d,各组大鼠逐日阴道涂片,观察动情周期变化;光镜下观察各级卵泡和黄体形态;实验结束后,酶免法检测大鼠血清E2、P、FSH、LH含量。结果：造模后大鼠动情周期紊乱,治疗组大鼠动情周期渐趋于正常,接近正常组;治疗组大鼠卵巢组织中的生长期卵泡、黄体、闭锁细胞的情况优于模型组,接近正常组。治疗组大鼠血清中的FSH,LH水平明显低于模型组,而E2水平则明显高于模型组。结论：补肾调冲方能够使POF大鼠恢复规则的动情周期及正常的卵巢生理结构,调整大鼠血清激素水平。     

补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢储备力及其相关因子INHB、AMH表达的影响

目的 研究补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢储备力及其相关因子INHB、AMH蛋白表达的影响,为临床防治卵巢储备力降低提供理论依据.方法 建立半乳糖致POF大鼠模型,将造模成功的POF大鼠随机分为模型组与治疗组,每组各20只;另设正常对照组.于PND80开始,治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液,模型组及空白组大鼠每日灌服等体积生理盐水,共4周.实验结束后光镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目,ELISA法检测各组大鼠血清FSH、LH及E2水平,Western blot法检测各组大鼠卵巢内INHB及AMH蛋白表达水平.结果 ①补肾调冲方可使POF大鼠动情周期趋于正常,并能明显降低血清FSH、LH水平(P＜0.05),提高E2水平(P＜0.05),从而改善POF大鼠血清高促性腺激素低雌激素状态;组织形态学结果显示治疗组大鼠始基卵泡及窦状卵泡数目均较模型组增多,闭锁卵泡数目则明显减少.②与正常组比较,POF大鼠卵巢INHB及AMH蛋白表达水平均明显降低(P＜0.01),而治疗组大鼠卵巢INHB及AMH表达水平较模型组明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 补肾调冲方可明显改善POF大鼠血清高促性素低雌激素状态,促进卵泡发育,抑制卵泡过度闭锁,从而调节卵巢功能,提高卵巢储备力,其机制可能是通过上调卵巢局部因子INHB及AMH的表达而实现的.     

养精种玉汤对卵巢储备功能减退模型大鼠RNA-m6A修饰的影响

目的 观察养精种玉汤对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠RNA-m⁶A修饰的影响,探讨其改善卵巢储备功能的机制。方法 选取60只动情周期正常的SD雌性大鼠,采用雷公藤甲素诱导DOR模型,将大鼠分为空白组、模型组、脱氢表雄酮(DHEA)组和养精种玉汤低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组),每组10只,给药组分别灌胃相应药液,连续2周。HE染色观察卵巢组织形态,ELISA检测血清雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗米勒管激素(AMH)含量,Western blot、qPCR测定卵巢组织METTL3、FTO、YTHDC2蛋白和基因表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织皮质区损伤,颗粒细胞脱落,各级卵泡数量明显减少,闭锁卵泡及黄体数量增加(P<0.05);血清E2、AMH含量减少,FSH、LH含量增加(P<0.05),卵巢组织METTL3、FTO、YTHDC2蛋白及m RNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,中药高剂量组大鼠卵巢组织损伤明显改善,各级卵泡数量增加,闭锁卵泡及黄体数量减少(P<0.05);血清E2...     

补肾疏肝针药结合对卵巢早衰大鼠卵巢储备力的影响研究

目的:观察补肾疏肝针药结合对卵巢早衰(POF)模型大鼠卵巢储备力的影响。方法:将60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、中药组、针药组、西药组,除空白组外其余各组大鼠采用雷公藤多苷片50mg/kg灌胃联合束缚建立卵巢早衰动物模型。造模成功后,中药组予具有补肾疏肝作用的中药复方灌胃,电针组予电针三阴交、关元、太冲穴,针药组同时予中药灌胃及电针治疗,西药组予戊酸雌二醇溶液灌胃,疗程均为30d。造模前与治疗后称重大鼠计算体质量增量,处死后摘取卵巢称湿重,计算卵巢指数,酶联免疫吸附法测定大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒氏激素(AMH)水平,HE染色观察卵巢组织形态学变化,光镜下计数各级卵泡数目。结果:模型组大鼠体质量增量、卵巢质量和卵巢指数均明显低于空白组(P0.01),西药组、中药组和针药组大鼠治疗后上述指标均明显高于模型组(P0.05,P0.01),电针组大鼠卵巢质量明显高于模型组(P0.05),电针组体质量增量、卵巢质量明显低于针药组(P0.05,P0.01)。模型组大鼠卵巢体积缩小,生长卵泡数减少,还可见大量闭锁卵泡和间质腺,黄体纤维化;各治疗组大鼠卵巢情况明显改善。模型组大鼠卵巢生长卵泡、成熟卵泡、黄体数目均明显低于空白组(P0.01),闭锁卵泡数目明显高于空白组(P0.01);各治疗组上述指标均较模型组有不同程度的改善;针药组较其他治疗组改善程度更有优势,其中生长卵泡、成熟卵泡数目明显高于西药组(P0.05),闭锁卵泡与黄体数目与西药组相当。模型组大鼠血清E2、AMH含量显著低于空白组(P0.01),FSH含量显著高于空白组(P0.01);与模型组相比,各治疗组大鼠性激素水平均有不同程度的改善,针药组FSH、AMH含量与西药组相当。结论:补肾疏肝针药结合治疗POF模型大鼠疗效显著,可改善大鼠低雌激素高促性腺激素状态,促进卵泡生长发育及成熟,抑制卵泡过度闭锁,提高卵巢储备力。     

菟丝子总黄酮对大鼠卵巢储备功能减退的改善作用

【目的】 探讨菟丝子总黄酮通过卵泡刺激素（FSH）-环磷酸腺苷（cAMP）信号轴对大鼠卵巢储备功能减退的改善作用。 【方法】 从68只雌性SD大鼠中抽取10只为正常组,其余构建卵巢储备功能减退模型。将成功建模的48只大鼠随机分为抑制剂组、模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组,每组12只。抑制剂组灌胃H-89 0.1 mg/kg,抑制剂+菟丝子总黄酮组灌胃H-89 0.1 mg/kg+菟丝子总黄酮 530.1 mg/kg,菟丝子总黄酮组灌胃菟丝子总黄酮530.1 mg/kg,模型组、正常组灌胃等体积生理盐水,均连续4周,每周休息1 d。给药4周后,称取各组大鼠卵巢湿质量,计算卵巢指数,酶联免疫吸附分析（ELISA）检测大鼠血清性激素水平,苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢组织形态学变化,ELISA 法检测卵巢组织中 cAMP 含 量,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测卵巢组织卵泡刺激素受体（FSHR）、蛋白激酶A（PKA）及磷酸化PKA（p-PKA）表达。 【结果】 模型组大鼠进食、二便、毛色、动情周期出现异常,卵巢萎缩明显,卵泡数量、黄体减少;与模型组比较,抑制剂组大鼠进食、二便、毛色、动情周期异常情况更严重,卵巢萎缩更明显,卵泡与黄体数量更少,而抑制剂组+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组大鼠进食、二便、毛色、动情周期,卵巢、卵泡与黄体数量明显改善。与正常组比较,抑制剂组、模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数降低,FSH、FSH/LH、E2水平升高,卵巢组织中cAMP含量降低,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量降低（P＜0.05）;与抑制剂组比较,模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E2水平降低,卵巢组织中cAMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高（P＜0.05）;与模型组比较,抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E2水平降低,卵巢组织中cAMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高（P＜0.05）;与抑制剂+菟丝子总黄酮组比较,菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E2水平降低,卵巢组织中cAMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高（P＜0.05）。【结论】 菟丝子总黄酮可能通过FSH-cAMP信号轴改善大鼠卵巢储备功能减退。     

雷公藤多苷通过PI3K/AKT信号通路影响大鼠卵泡发育的实验研究

目的:基于PI3K/AKT信号通路探索雷公藤多苷片致大鼠卵泡发育障碍的分子机制。方法:将动情周期正常的7⁸周、体重2008周、体重200²20g的雌性SD大鼠18只,随机分为对照组和模型组,每组9只,模型组以雷公藤多苷40mg/kg剂量灌胃,对照组以等量的蒸馏水灌胃,灌胃第8周始行阴道脱落细胞检查观察大鼠性周期变化,当模型组所有大鼠出现动情周期延长甚至紊乱时,称重、采血后处死大鼠,摘取双侧卵巢。观察大鼠体重、卵巢湿重、卵巢指数、动情周期、血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平、大鼠卵巢组织形态学以及大鼠卵巢组织p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K表达的变化。结果:模型组大鼠动情周期较对照组明显延长,体重,卵巢湿重,卵巢指数,血清E2、P水平均明显低于对照组;模型组次级卵泡、窦状卵泡占总卵泡百分比均明显低于对照组,闭锁卵泡占总卵泡百分比明显高于对照组,始基卵泡占总卵泡百分比无明显变化;模型组大鼠卵巢组织p-AKT、p-mTOR、pp70S6K表达水平明显低于对照组。结论:雷公藤多苷可能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制大鼠卵泡发育。     

补肾调冲方对半乳糖致卵巢早衰大鼠性激素水平和卵巢组织形态学的影响

目的观察补肾调冲方对半乳糖致卵巢早衰(POF)大鼠性激素水平和卵巢组织形态学的影响。方法将20只成年雌性SD大鼠与15只同品系雄性大鼠合笼,运用半乳糖毒性法制造POF大鼠动物模型。雌性幼鼠产后第70 d(PND 70),选取标准饲料组动情周期为4～5 d的大鼠20只,设为空白对照组;选取半乳糖饲料组动情周期>7 d的大鼠40只,并将40只POF大鼠随机分为模型对照组与补肾调冲方治疗组,各20只。于PND 80开始,补肾调冲方治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液6.26 g/kg,模型对照组及空白对照组大鼠每日分别灌服等容积0.9%氯化钠注射液,各组大鼠均连续灌胃4周。记录各组大鼠体质量增长情况及动情周期,检测血清性激素水平,同时进行卵巢组织形态学变化比较,光镜下计数各级卵泡数目。结果补肾调冲方可缩短补肾调冲方治疗组POF大鼠的动情周期;使增高的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)水平下降,促进雌二醇(E2)分泌增加;对补肾调冲方治疗组POF大鼠卵巢组织有恢复作用;增加始基卵泡、窦前卵泡及窦状卵泡和黄体,减少闭锁卵泡。结论补肾调冲方对性激素的分泌有调节作用,可恢复卵巢功能,促进卵泡的发育和排卵。     

育肾助孕方对雷公藤多苷致卵巢储备下降大鼠卵巢形态和性激素的影响

目的观察育肾助孕方对雷公藤多苷致卵巢储备功能下降大鼠卵巢组织形态和性激素的影响,探讨其作用机制。方法采用雷公藤多苷药液灌胃制作卵巢储备功能下降大鼠模型。48只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组及育肾助孕方低、中、高剂量组,育肾助孕方各剂组分别给予低、中、高浓度育肾助孕方药液灌胃,阳性药组给予戊酸雌二醇药液灌胃,模型组和空白组给予等量生理盐水灌胃,2次/d,连续14 d。观察大鼠一般情况,取卵巢称重并计算脏器指数,HE染色观察卵巢组织形态,放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)水平,酶联免疫吸附法检测抑制素B(INHB)、抗苗勒管激素(AMH)水平。结果与空白组比较,模型组卵巢组织萎缩,各级卵泡数目减少,卵巢指数和E2、INHB、AMH水平降低,FSH、LH水平升高(P0.01);与模型组比较,育肾助孕方高剂量组卵巢组织形态明显改善,各级卵泡和黄体增加,闭锁卵泡减少;卵巢指数和E2、INHB、AMH水平升高,FSH、LH水平降低(P0.01),且INHB与AMH具有显著相关性(P0.01)。结论育肾助孕方可调节性激素水平,促进卵泡生长和分泌,抑制卵泡闭锁,从而改善卵巢储备功能。     

滋肾育胎丸对DOR大鼠内分泌的影响

目的研究滋肾育胎丸(党参、续断、巴戟天等)对卵巢储备功能低下(DOR)大鼠内分泌的影响。方法灌胃55 mg/(kg·d)雷公藤多苷诱导正常动情周期雌性SD大鼠14 d以建立DOR模型,再分为滋肾育胎丸高、低剂量组,补佳乐组,模型对照组,阴性对照组。给药35 d后,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)水平,免疫组化法检测卵巢组织雌激素受体(ER)、卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)表达。结果与阴性对照组比较,模型对照组E2、FSH、LH、P水平,ER、FSHR、LHR表达有显著变化(P0.05),但两组体质量、卵巢指数、子宫指数、血清FSH/LH水平无显著性差异(P0.05)。与模型对照组比较,滋肾育胎丸高、低剂量组,补佳乐组E2水平升高,FSH、LH水平降低,并且它们也促进ER表达,抑制FSHR、LHR过度表达,差异有统计学意义(P0.05)。不同剂量组P水平显著升高(P0.05),高剂量组FSH/LH显著下降(P0.05),各干预组体质量、卵巢指数和子宫指数无显著性差异(P0.05)。结论滋肾育胎丸可通过影响卵巢组织激素受体表达、调节内分泌功能来改善DOR大鼠卵巢储备功能。     

补肾健脾方对卵巢早衰大鼠下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响

目的观察补肾健脾方对卵巢早衰(POF)大鼠下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴)功能的影响机制。方法筛选具有正常动情周期的雌性SD大鼠34只,按随机数字表法分为正常组10只和造模组24只,正常组不予处理,造模组采用环磷酰胺法成功建立POF大鼠模型19只。将造模组随机分为模型组10只和补肾健脾组9只。补肾健脾组予补肾健脾方10 mL/(kg·d)灌胃,正常组和模型组予等体积生理盐水灌胃,每日1次,共4周。监测3组大鼠动情周期变化,计算体质量增量及卵巢指数,观察卵巢组织形态变化,检测促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)、促性腺激素释放激素(GnRH)、抗苗勒管激素(AMH)水平以及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA相对表达量。结果与正常组比较,模型组体质量增量、卵巢指数、Akt和mTOR mRNA表达量下降(P均0.05),血清FSH、GnRH水平显著提高(P均0.05),E_2、AMH水平显著降低(P均0.01),动情周期延长、紊乱,卵巢组织病理显示闭锁卵泡数量增多,生长卵泡数量少,未见成熟卵泡;与模型组比较,补肾健脾组体质量增量升高不明显(P0.05),卵巢指数、Akt和mTOR mRNA表达量增加(P均0.05),血清FSH、GnRH水平显著下降(P均0.05),E_2、AMH水平显著升高(P均0.01),动情周期缩短、趋向规律,卵巢组织病理可见少量闭锁卵泡,生长卵泡与成熟卵泡数量增加,且卵泡液含量增多。结论补肾健脾方能在一定程度上促进卵泡发育并排卵,提高卵巢储备功能,其机制可能与上调PI3K/Akt/mTOR信号通路中的Akt、mTOR mRNA分子表达从而调控下丘脑-垂体-性腺轴功能,影响激素分泌有关。     

针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠血清炎性因子及卵巢组织Nrf2/HO-1/NLRP3信号通路的影响

目的探讨针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠动情周期的影响及可能作用机制。方法将40只动情周期正常的SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、激素组,每组10只。除空白组外,其余3组大鼠予雷公藤多苷片混悬液按50mg/(kg·d)连续灌胃14天建立卵巢储备功能减退大鼠模型。针刺组在每日雷公藤多苷灌胃1h后进行针刺干预,选取"肾俞""关元""中脘"穴,每次行针10s,共留针10min。同时激素组进行雌激素、孕激素序贯疗法。实验第8天起观察大鼠动情周期,第15天采用HE染色法观察各组大鼠卵巢中卵泡、黄体发育情况;检测大鼠血清激素[包括抗苗勒管激素(AMH)、雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)]及炎性因子[包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素21(IL-21)、白细胞介素10(IL-10)]水平;检测卵巢组织中转录因子核因子E_2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达及Nrf2、HO-1、核苷酸结合寡聚化结构域受体3(NLRP3)mRNA相对表达量。结果与空白组比较,模型组大鼠的动情周期延长或紊乱,生长卵泡颗粒细胞层减少,黄体萎缩,闭锁卵泡和炎性浸润增多;血清AMH、E_2、IL-10水平降低,FSH、TNF-α、IL-21水平升高,卵巢组织中Nrf2、HO-1蛋白和mRNA表达降低,NLRP3 mRNA升高(P0.01)。与模型组比较,针刺组及激素组生长卵泡颗粒细胞层增多,闭锁卵泡和炎性浸润减少;血清AMH、E_2、IL-10升高,FSH、IL-21下降;卵巢组织中Nrf2、HO-1蛋白和mRNA增高,NLRP3 mRNA降低(P0.05或P0.01)。针刺组和激素组各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论针刺能够恢复卵巢储备功能减退模型大鼠的动情周期,有效调节大鼠性激素水平,可能通过Nrf2/HO-1信号通路抑制NLRP3 mRNA表达,从而抑制炎症反应。     

加减益经汤对卵巢功能减退大鼠性激素与卵巢组织形态学的影响

目的:研究加减益经汤对环磷酰胺(CTX)所致卵巢功能减退(DOR)大鼠性激素与卵巢组织形态学的影响。方法:成年雌性SD大鼠随机选出10只作为空白对照组,其余大鼠采用CTX 75 mg/kg腹腔单次注射造模,造模成功后将大鼠分为模型对照组、补佳乐组和加减益经汤高、中、低剂量组,每组10只。加减益经汤高、中、低组予加减益经汤,生药剂量分别为23.58、11.79、5.895 g/kg;补佳乐组予补佳乐,0.09 mg/kg;模型对照组与空白对照组灌胃10 mL/kg蒸馏水。造模当日开始予灌胃给药,1次/d,连续28 d。模型对照组在造模后2周,其余各组在给药结束后,于动情间期处死。观察大鼠的一般情况、动情周期、卵巢指数、卵巢组织形态变化,检测血清FSH、LH、E2值。结果:与模型对照组比较,加减益经汤与补佳乐可恢复DOR大鼠动情周期,升高卵巢指数(P<0.01),降低血清FSH、LH(P<0.05或P<0.01),升高血清E2(P<0.01),改善卵巢组织形态,增加原始、成熟卵泡数(P<0.05或P<0.01),降低初级、次级、闭锁卵泡数(P<0.01)。结论:加减益经汤可明显改善CTX所致DOR大鼠的性激素与卵巢组织形态学,其中中剂量是最适宜剂量。     

育麟方对卵巢储备功能降低大鼠颗粒细胞分泌功能的影响

目的: 研究育麟方影响环磷酰胺致卵巢储备功能降低大鼠模型卵巢颗粒细胞的分泌功能的机制。 方法: 性成熟雌性SD大鼠参考文献制备卵巢储备功能降低大鼠模型,分为育麟方高、中、低剂量组,补佳乐组,模型组,正常组。正常组,模型组予蒸馏水20 mL ·kg^-1,补佳乐组予戊酸雌二醇片0.21 mg ·kg^-1,育麟方低、中、高组分别予育麟方生药15.2,30.4,60.8 g ·kg^-1 ig 21 d后,予动情前期处死,放射免疫法测定大鼠血清卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH)水平及抗苗勒管激素(AMH)表达水平,光镜下观察卵巢组织形态学变化,卵泡数目及黄体数目。 结果: 与正常组比较,模型组FSH,LH含量明显升高(P<0.05),AMH含量明显降低(P<0.05),各级卵泡数目,黄体数目明显减少(P<0.05);与模型组比较,育麟方治疗组大鼠血清FSH,LH水平明显减少(P<0.05),育麟方中剂量组及补佳乐组血清AMH水平明显增高(P<0.05),育麟方中、高剂量组的各级卵泡及黄体数量明显增多(P<0.05)。 结论: 育麟方可能通过影响卵巢储备功能降低模型鼠的颗粒细胞内分泌功能而改善其卵巢储备功能。     

温针结合电针对卵巢早衰大鼠血清性激素及炎症因子的影响

目的观察温针"关元"结合电针"三阴交"对卵巢早衰(POF)模型大鼠血清性激素及炎症因子的影响。方法将动情周期规律SPF级雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组和药物组,雷公藤多苷灌胃制备POF模型,并给予相应干预。HE染色观察大鼠卵巢形态,ELISA测定血清雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)及抗苗勒氏管激素(AMH)的含量,免疫组化检测卵巢组织干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清E_2、AMH含量明显减少,FSH含量明显增加(P0.05,P0.01),卵巢组织IFN-γ蛋白表达显著升高,IL-4蛋白表达明显降低(P0.01,P0.05);与模型组比较,针刺组、药物组大鼠血清E_2、AMH含量明显增加,FSH含量明显减少(P0.05,P0.01),卵巢组织IFN-γ蛋白表达显著降低,IL-4蛋白表达显著升高(P0.01,P0.05)。结论温针"关元"结合电针"三阴交"可调节POF大鼠血清性激素水平,改善生殖内分泌环境,降低卵巢炎性反应。     

定坤丹对雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下小鼠性激素和卵泡计数的影响

目的:建立雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下(DOR)小鼠模型,探讨定坤丹对DOR的治疗作用,为其临床应用提供科学依据。方法:将60只动情周期规律的雌性小鼠随机分为空白组、模型组、定坤丹低、中、高剂量组和戊酸雌二醇组,每组10只。除空白组外,其余各组予40 mg·kg~(-1)雷公藤多苷混悬液灌胃;同时定坤丹低、中、高剂量组分别予1. 64,3. 28,6. 56 g·kg~(-1)定坤丹混悬液灌胃,戊酸雌二醇组予0. 15 mg·kg~(-1)戊酸雌二醇混悬液灌胃,1次/d,连续30 d。观察小鼠的一般状况、体质量、性腺指数和动情周期变化,采用放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH)和雌激素(E_2)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢形态和卵泡计数。结果:与空白组比较,模型组小鼠动情周期处于紊乱状态,子宫和卵巢指数明显下降(P0. 05),血清FSH水平明显上升(P0. 05),LH呈上升趋势,E_2呈下降趋势,各级生长卵泡和黄体数减少、闭锁卵泡明显增加(P0. 05)。与模型组比较,定坤丹组半数小鼠恢复规律动情周期,戊酸雌二醇组小鼠动情周期停滞在动情期;定坤丹中、高剂量组和戊酸雌二醇组小鼠子宫和卵巢指数增加,血清FSH值明显下降(P0. 05),LH呈下降趋势;定坤丹高剂量组和戊酸雌二醇组血清E_2值明显上升(P0. 05);定坤丹能增加各级生长卵泡和黄体数、减少闭锁卵泡数,其中以中剂量效果更佳(P0. 05),戊酸雌二醇组能明显增加原始卵泡、窦状卵泡和黄体数(P0. 05),但不能减少闭锁卵泡数。结论:定坤丹能够通过改善血清性激素,促进卵泡发育、减少卵泡闭锁从而对DOR起到治疗作用。     

二至丸对卵巢早衰大鼠治疗作用及机制的实验研究

目的 探究二至丸对卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)大鼠卵巢功能的恢复及其作用机制。方法 将42只雌性SPF级大鼠随机分成6组,除空白组外,其余各组连续14 d给予雷公藤多苷50 mg·kg^-1·d^-1灌胃,建立POF模型。设置二至丸高、中、低剂量组进行治疗,阳性药物选择戊酸雌二醇。观察记录大鼠动情周期,测量大鼠体质量及子宫、卵巢指数;HE染色法观察大鼠子宫及卵巢细胞组织形态学的改变,ELISA法检测各组血清血孕酮(P)、雌激素(E₂)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)的水平,Western blot法检测卵巢及子宫中的ERβ表达水平、ImageJ软件处理分析ERβ蛋白的灰度值。结果 与空白组相比,模型组大鼠卵巢指数、子宫指数均较为下降(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组及二至丸各剂量组大鼠卵巢指数、子宫指数较模型组升高(P<0.05),各组体质量较模型组呈上升趋势。除模型组外,各组大鼠生长卵泡、子宫腺体数增多,闭锁卵泡数减少,肌层增厚,血运丰富;其中,中、...     

坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠的影响

目的探讨坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠的影响。方法雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、坤泰胶囊组(0.5 g/kg)、西药组[戊酸雌二醇片(0.12 mg/kg)、黄体酮胶囊(18 mg/kg)]、中西药组,雷公藤多苷片(50 mg/kg)灌胃14 d建立卵巢储备功能下降模型。ELISA法检测抗苗勒氏管激素(AMH)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)水平,HE染色观察卵巢变化,Western blot、实时荧光定量PCR检测大鼠卵巢组织Smad2、Smad3、Smad7表达。结果与模型组比较,坤泰胶囊组、中西药组、西药组能显著提高E2、AMH水平及Smad2、Smad3表达,且显著降低Smad7表达(P<0.05);中西药组、西药组能显著降低FSH、LH水平(P<0.05)。药物干预后,各级卵泡发育,卵泡结构完整,卵泡外围包绕的颗粒细胞层数、黄体数量多于模型组,排列规则,发育尚可。结论坤泰胶囊可能通过调控卵巢组织Smad2/3/7表达,促进及维持卵泡发育,从而改善卵巢储备功能下降大鼠卵巢功能。     

针药联合对卵巢储备功能不足大鼠卵巢细胞凋亡因子和生殖激素的影响

目的:观察针药结合对卵巢储备功能不足(decreased ovarian reserve,DOR)大鼠卵巢细胞凋亡因子和生殖激素的影响,探讨其作用机理。方法:将72只SD大鼠随机分为对照组、中药组、针刺组、模型组、西药组和针药组,每组12只。除对照组采用等量生理盐水灌胃外,其余五组均采用雷公藤多苷药液灌胃,建立符合实验要求的DOR大鼠模型。针药组、中药组予护卵汤灌胃,针刺组和模型组采用等量生理盐水灌胃,西药组采用克龄蒙药液灌胃,同时对针药组、针刺组进行针刺,以上操作持续16 d。采用ElISA法检测血清雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及抗缪勒氏管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH)水平,PCR检测卵巢组织中细胞凋亡因子Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达。结果:与对照组比较,模型组FSH、LH、Bax、Caspase-3表达明显升高,E2、AMH、Bcl-2明显降低(P 0. 05);与模型组比较,针刺组、中药组、针药组及西药组FSH、Bax、Caspase-3明显降低,E2、AMH、Bcl-2明显升高(P 0. 05)。结论:针刺联合护卵汤可调节性激素和凋亡因子,促进卵泡生长,抑制卵泡闭锁,从而改善卵巢功能。     

坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠卵巢GDF-9、Egr-1的影响

目的:观察预防性应用坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠血清性激素FSH、LH、E2、AMH水平的影响以及对卵巢GDF-9(生长分化因子9)、Egr-1(早期生长反应基因)基因及蛋白表达的影响,探讨坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠的治疗作用及作用机制。方法:将60只12周龄SD雌性大鼠随机分为空白组、环磷酰胺模型组(模型组)、坤泰胶囊组(分设高中低剂量)、结合雌激素组。空白组正常喂养;模型组用环磷酰胺腹腔注射法建立卵巢储备功能低下大鼠模型~([1]);各给药组于造模同时分别给予不同剂量的坤泰胶囊及结合雌激素片灌胃。实验期间观察大鼠行为学改变,行阴道涂片观察大鼠动情周期的变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清性激素AMH及FSH、LH、E2水平变化;光镜下观察卵巢形态与卵泡数;实时荧光定量(RT-PCR)检测大鼠卵巢GDF-9、Egr-1m RNA表达水平的变化;免疫组化法检测大鼠卵巢GDF-9、Egr-1蛋白表达水平的变化。结果:坤泰胶囊能够降低模型大鼠体内性激素FSH、LH的水平,升高E2及AMH水平,并且能够增加大鼠卵巢中GDF-9、EGR-1蛋白及m RNA表达,修复大鼠受损的卵巢组织结构,改善卵巢血供,减少卵泡闭锁,提高成熟卵泡存在数量,改善大鼠动情周期及行为学变化。结论:预防性应用坤泰胶囊,可有效提升卵巢敏感性,治疗效果与西药结合雌激素片无明显差异。